母乳抗肿瘤专业知识讲座培训课件.ppt

1、母乳抗肿瘤专业知识讲座人乳对肺部癌细胞的抑制（体外）癌细胞存活率（染色法1）癌细胞存活率（染色法2）对照组92100人乳1#20人乳2#21人乳3#42牛乳10064人-乳白蛋白9280牛-乳白蛋白9382人溶菌酶8769鸡溶菌酶8675人乳铁蛋白98人MAL00摘自Apoptosis induced by a human milk protein,Proc.Natl.Acad.Sci.,1995,92:8064-8068瑞典 兰德大学；卡罗林斯卡学院MAL：用离子交换柱处理过的多聚体-乳白蛋白可见：人乳及结合了钙离子的多聚体-乳白蛋白具有明显的抑制癌细胞生长的功能母乳抗肿瘤专业知识讲座3MD

2、CK（一种肾癌细胞株）暴露于人乳中产生的凋亡（人乳1:10稀释，24小时）A 对照样 B 实验样 人乳对肺部癌细胞的抑制（体外）母乳抗肿瘤专业知识讲座4HAMLET对皮肤乳头状瘤的抑制皮肤乳头状瘤是作为研究人体环境（0.9%NaCl）中HAMLET 功效的第一个模型。摘自HAMLET Kills Tumor Cells by Apoptosis:Structure,Cellular Mechanisms,and Therapy Journal of Nutrition.2005,135:12991303 瑞典 兰德大学；挪威 Haukeland大学医院母乳抗肿瘤专业知识讲座5HAMLET对皮肤

3、乳头状瘤的抑制摘自Treatment of skin papillomas with topical alpha-lactalbumin-oleic acid，The New England journal of medicine 2004,350(26):2663-2672瑞典 兰德大学图中第1列（A、D、G）为3位患者治疗前的病灶；图中第2列（B、E、H）为3位患者接受HAMLET治疗后3周时的病灶；图中第3列（C、F、I）为3位患者接受HAMLET治疗后2年随访时的病灶。患者1的病灶基本上完全消失；患者2和3则减少了75%。母乳抗肿瘤专业知识讲座6HAMLE对膀胱癌的抑制a图：采集9个病

4、人在滴注HAMLET前的尿液和滴注后两小时的尿液，苏木紫和伊红检测肿瘤细胞数。发现进行HAMLET滴注后的病人尿液中肿瘤细胞数均显著高于滴注前。b图：分别滴注-乳白蛋白，PBS,NaCl，同样的方法对比滴注前后的尿液，滴注前后无明显差异。摘自Bladder cancers respond to intravesical instillation of(HAMLET human-lactalbumin made lethal to tumor cells)International Journal of Cancer 2007,121:1352-1359 瑞典兰德大学母乳抗肿瘤专业知识讲座7HA

5、MLE对膀胱癌的抑制c图：台盼蓝染色经HAMLET滴注后的病人尿液，镜检能发现存在有大量的死亡或凋亡细胞。母乳抗肿瘤专业知识讲座8HAMLE对膀胱癌的抑制a图：第一排是P2,P5,P9这三个人的滴注前的尿液离心后涂片，第二排是这三个人的滴注后的尿液离心后图片。都用苏木紫-伊红和TUNEL染色。TUNEL是能特异性的对凋亡细胞进行染色的试剂，在荧光显微镜下显示出荧光。从图片可以看出，滴注前病人的尿液里总细胞数量少，能被TUNEL染色的细胞更少。而滴注了HAMLET后的病人，尿液中会存在有大量的凋亡细胞。母乳抗肿瘤专业知识讲座9HAMLET对膀胱癌的抑制内镜摄影图：左边的四幅彩图是分别来自四个病人

6、的HAMLET滴注前的肿瘤，右边的四幅彩图是HAMLET滴注后的肿瘤，黑白图是肿瘤形状的示意图。金属圈直径均为5mm。可以看见滴注后肿瘤尺寸变小。母乳抗肿瘤专业知识讲座10HAMLE对膀胱癌的抑制a图：手术后对病人切除的肿瘤组织进行TUNEL染色，黑白图片为明场下的照片，荧光图为TUNEL染色后的照片。可见经过HAMLET滴注，肿瘤组织内有大量的细胞虽然没有脱落下来，但是正在被诱导凋亡。b图 上面四幅照片是对手术中切除的正常组织的组织切片进行TUNNEL染色的图，下面四幅照片为明场下的组织切片图。可见正常的组织虽然也经过了HAMLET滴注，但是几乎没有细胞凋亡现象。就证明了HAMLET复合体能

7、特异性地诱导膀胱癌细胞的凋亡，而对正常组织没有毒性。母乳抗肿瘤专业知识讲座11HAMLET对胶质母瘤细胞的抑制对实验大鼠进行TUNEL分析后显示：大鼠脑内肿瘤出现大面积凋亡，但周边组织未显示出TUNEK染色。此外，HAMLET没有侵害正常的脑组织，也没有产生任何的神经症状。HAMLET具有选择性地诱发恶性肿瘤凋亡的能力。母乳抗肿瘤专业知识讲座12HAMLET对肿瘤细胞的抑制摘自Structure and function of human-lactalbumin made lethal to tumor cells(HAMLET)-type complexes FEBS Journal 201

8、0,277:4614-4625瑞典兰德大学；爱尔兰圣三一学院；瑞典Umea大学；新加坡A*STARHAMLET侵入肿瘤细胞的过程。最初结合到膜细胞上，随后转运进细胞中。细胞的完整性维持到180分钟，最终充满了HAMLET。母乳抗肿瘤专业知识讲座13母乳抑制白血病细胞和肺炎链球菌STRPN：肺炎链球菌 Jurkat：一种白血病的细胞HAMLET对白血病细胞和肺炎链球菌的杀灭作用远远强于-乳白蛋白HAMLET或-乳白蛋白的浓度（g/ml）摘自Apoptosis-Like Death in Bacteria Induced by HAMLET,a Human Milk Lipid-Protein Complex PLoS ONE 2011,6(3):1-12美国纽约州立大学；纽约州生物信息学与生命科学卓越中心（布法罗）；瑞典兰德大学；新加坡A*STAR母乳抗肿瘤专业知识讲座14母乳抑制白血病细胞和肺炎链球菌与HAMLET分别共同培养6小时和1小时后，癌细胞和肺炎链球菌相继出现缩小和菌体解体，最终死亡母乳抗肿瘤专业知识讲座15母乳抑制流感嗜血杆菌HAMLET对流感嗜血杆菌的杀灭作用远远强于-乳白蛋白母乳抗肿瘤专业知识讲座16