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血小板抗原抗体检测培训讲义课件.ppt

1、血小板抗原抗体检测(优选)血小板抗原抗体检测血小板抗原v 血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体,并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子.v 血小板相关抗原血小板相关抗原:v 红细胞血型抗原红细胞血型抗原ABOABO、LewisLewis和和P P系统抗原等,无系统抗原等,无RHRH抗原抗原v 白细胞抗原白细胞抗原HLAHLA抗原抗原v 血小板特异性抗原(血小板特异性抗原(human platelet antigenhuman platelet antigen,HPAHPA)血小板抗原血型抗原血型抗

2、原ABOABO、LewisLewis和和P P系统抗原等,无系统抗原等,无RHRH抗原抗原来源血小板表面的来源血小板表面的A A、B B抗原来源主要有两个大部分是血小板本身所固有(抗原来源主要有两个大部分是血小板本身所固有(从巨核细胞分化而来);小部分是从血浆吸附而来。如体外将从巨核细胞分化而来);小部分是从血浆吸附而来。如体外将O O型血小型血小板和板和A A或或B B型血清温育,血小板就会带上型血清温育,血小板就会带上A A或或B B抗原。抗原。不同个体间血小板膜不同个体间血小板膜ABHABH抗原量存在差异抗原量存在差异;同一个体的每一个血小板抗原量差别非常大,由此可以解释有些人输入同一个

3、体的每一个血小板抗原量差别非常大,由此可以解释有些人输入ABHABH不相容血液后不相容血液后,一部分输入的血小板迅速被破坏一部分输入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其而另外的血小板其生命力不受影响生命力不受影响.血小板抗原v白细胞抗原白细胞抗原HLAHLA抗原抗原v血小板存具有血小板存具有HLAHLA类抗原类抗原,主要是类抗原类抗原,主要是HLAAHLAA和和HLABHLAB位点的抗原(少量表达的位点的抗原(少量表达的HLACHLAC抗原)。抗原)。vHLAHLA类分子为血小板的固有蛋白,少量从血浆中类分子为血小板的固有蛋白,少量从血浆中吸附。血小板吸附。血小板HLAHLA抗原的免疫原性比白

4、细胞弱。抗原的免疫原性比白细胞弱。血小板抗原v血小板特异性抗原(血小板特异性抗原(human platelet antigenhuman platelet antigen,HPAHPA)v主要位于人血小板膜的一大类抗原主要位于人血小板膜的一大类抗原,称之为血小板称之为血小板特异性抗原特异性抗原v高频率抗原以高频率抗原以“a”“a”表示,低频率抗原以表示,低频率抗原以“b”“b”表示表示v人血小板同种抗原(人血小板同种抗原(HPAHPA)自)自19591959年被发现以来,年被发现以来,迄今已经检出迄今已经检出2424个抗原,其中个抗原,其中HPA1HPA1,2 2,3 3,4 4,5 5,6,

5、156,15被血小板命名委员会(被血小板命名委员会(PNCPNC)列入抗原系统,)列入抗原系统,包含包含1414个对偶抗原,而个对偶抗原,而HPA714HPA714,16,1716,17因为对偶抗因为对偶抗原未检出而未达到系统命名标准。原未检出而未达到系统命名标准。血小板抗原Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反

6、应底物后显色,定量测定血小板抗体。Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.由HLA抗体引起PTR约占80%,其次为HPA或ABO抗体。一旦发现献血员血浆、血清中含有血小板特异性抗体应立即停止献血,这类献血员多为有妊娠史。HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36(优选)血小板抗原抗体检测(人IgG致敏红细胞)带有抗体的血小板接触到单核巨噬细胞表面的FC受体,易被吞噬破坏。特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic th

7、rombocytopenia purpura,I T P)ITPGPIb/IX/V,少数位于血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36小部分是从血浆吸附而来。固相血小板免疫血清学试验(SPISA)抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。人血清中血小板抗体通常为多特异性血小板抗原血小板抗原v 24个抗原主要分布在糖蛋白GPb,GPa,GPb,GPa以及CD109上;v GPa(CD61)携带9种HPA抗原,分别为HPA-1,HPA-4,HPA-6bw,HPA-7bw,HPA-8bw,HPA-10bw,HPA-

8、11bw,HPA-14bw,HPA-16bw v GPb(CD41)是跨膜蛋白,细胞外116 kD的重链,通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。GPb上携带 HPA-3和HPA-9bw;治疗前交叉配血以母亲血清与供者血小板进行交叉配合试验;抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示自身免疫性血小板减少症200g,5min离心HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36ELISA法(酶联免疫试验)血小板存具有HLA类抗原类抗原,主要是HLAA和HLAB位点的抗原(少量表达的HLAC抗原)。由HLA抗体引起

9、PTR约占80%,其次为HPA或ABO抗体。抗原位于GPb/a和GPIb/IX质量控制阴阳性对照连续3次,可判断为血小板无效输注自身免疫性血小板减少症a b a b a b a b a b a b不同个体间血小板膜ABH抗原量存在差异;抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。GPb(CD41)是跨膜蛋白,细胞外116 kD的重链,通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。ELISA法(酶联免疫试验)由HLA抗体引起PTR约占80%,其次为HPA或ABO抗体。GPb上携带 HPA-3和HPA-9bw;简易致敏红细胞血小板血清学试验(SEPSA)HLA/HPA 抗 体被动免疫血小板减少

10、症(PAT)交叉配血试验 选择配合的血小板供体1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aa主要治疗措施为血浆置换或换血,换血浆优于换全血。GPb/a,GPb/抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。血小板存具有HLA类抗原类抗原,主要是HLAA和HLAB位点的抗原(少量表达的HLAC抗原)。急性型儿童多见,初起有上感,主要为病毒细菌所致。血小板恢复(回收率)百分率(PR%)Transplantationassociated alloimmune thrombocytopenia,TAT:药物引起的血小板减少症主要治疗措施为血浆置换或换血,换血浆优于换全血。来源血小板表面的A

11、、B抗原来源主要有两个大部分是血小板本身所固有(从巨核细胞分化而来);血小板抗体抗 体分 类疾 病HLA/HPA 抗抗 体体其其 它它 抗抗 体体同同 种种抗抗 体体格兰茨曼血小板功格兰茨曼血小板功能不全病能不全病抗抗GPb/aPb/a抗体抗体同同 种种 异异体体 抗抗 体体新生儿同种异体免新生儿同种异体免疫性血小板减少症疫性血小板减少症HPA1b(78%),HPA5b(19%)HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36血小板输注无效症血小板输注无效症HLA-I抗体抗体5080%1725%(日本人为日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-CD36极少数

12、为极少数为ABO抗体抗体血小板输血后紫癜血小板输血后紫癜HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,anti-CD36少数为抗少数为抗GPIa/IIa抗抗体体被动同种异体免疫被动同种异体免疫性血小板减少症性血小板减少症HPA-1a,HPA-5b移植相关同种异体移植相关同种异体免疫性血小板减少免疫性血小板减少症症HPA-1a,HPA-3,HPA-5b自自 身身抗抗 体体自发性血小板减少自发性血小板减少症症多数位于多数位于GPb/ab/aGPIb/IX/VIb/IX/V,少数位,少数位于于GPIV/V IV/V 和和 GPIa/IIaGPIa/IIa继发于母

13、体自发性继发于母体自发性血小板减少症血小板减少症同上同上药物依药物依赖性抗赖性抗体体奎宁奎宁/奎尼丁抗体奎尼丁抗体所致疾病所致疾病抗原位于抗原位于GPb/ab/a和和GPIb/IXIb/IX抗体检测及交叉配血采取预防和治疗措施避免流产、出血等血小板相容性检测抗原定型抗体检测建立血小板供者库筛选基因型相容的供者避免血小板抗体的产生诊断血小板免疫性疾病交叉配型筛查血小板相容性供者减少血小板输注无效避免紫癜、出血和死亡血小板抗原定型u 血清学定型u 即用已知特异性抗体检测血小板血型抗原u 缺点特异性抗体来源困难u 人血清中血小板抗体通常为多特异性u 单克隆抗体匮乏,目前国际上仅有HPA1a单抗,u

14、无其它HPA单抗。u 基因定型u 限制性片段长度多态性分析(RFLP)u 序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCRSSO)u 序列特异性引物聚合酶链反应(PCRSSP)HPA-1 HPA-2 HPA-3 HPA-4 HPA-5 HPA-15 a b a b a b a b a b a b阳性对照条带等位基因条带 1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aa连续3次,可判断为血小板无效输注新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT)HLA-I,HPA,ABHGPIb/IX/V,少数位于GPb/a,GPb/HLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-

15、CD36ELISA法(酶联免疫试验)特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenia purpura,I T P)ITPGPIV/V 和 GPIa/IIa药物引起的血小板减少症现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病,发病率已经大为下降高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示改良抗原俘获(ELISA)被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免疫血小板减少症Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.抗原位于GPb/a和GPIb/IXHPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3

16、b,HPA-15,anti-CD36连续3次,可判断为血小板无效输注另外,抗血小板抗体对巨核细胞分化也有抑制作用。自身免疫性血小板减少症1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aa被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免疫血小板减少症血小板抗体检测 血清学血小板谱细胞(三人份O型混合血小板)反应板(已包被血小板单抗)血小板单层阳性反应阴性反应患者血清/血浆抗人IgG指示红细胞(人IgG致敏红细胞)50g,5min50g,5min离心洗涤3 3次50l/孔洗涤5 5次水浴30min30min阳性阴性50l/孔各50l/孔200g,5min200g,5min离心200g,5min200g,5mi

17、n离心单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。血小板相关疾病 临床上由于血小板血型抗原引起的血小板减少症主要有5种血小板输注无效(PTR)输血后紫癜(PTP)新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT)被动免疫血小板减少症(PAT)移植相关的同种免疫血小板减少症(TAT)血小板相关疾病血小板免疫性疾病p血小板输注无效症p新生儿血小板减少症p输血后紫癜p自身免疫性血小板减少症p药物

18、引起的血小板减少症p移植相关的血小板减少症血小板抗原p 同种异体抗原 HLA-I,HPA,ABHp 同种抗原 GPb/a,CD36p 自身抗原 GPb/a,GPb/p 药物依赖性抗原 肝素、奎宁等p 非特异性抗原临床病症p 淤点p 淤斑p 流产p(颅内)出血 p 死亡血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)1.若输注后1小时 CCI 7500/L 12小时 CCI 6000/L 24小时 CCI 4500/L 连续3次,可判断为血小板无效输注2.血小板恢复(回收率)百分率(PR%)若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注由HLA抗体引起PTR约占80%,其次为HPA或ABO抗

19、体。现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病,发病率已经大为下降血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)非免疫学原因(67.3%)发热脾功能亢进感染药物作用DIC血小板的质量问题免疫学原因(17.5%)HLA抗体HPA抗体ABO血型不合血小板自身抗体药物预防1.白细胞过滤2.辐照3.HLA和HPA配型输注血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)1.若输注后1小时 CCI 7500/L 12小时 CCI 6000/L 24小时 CCI 4500/L 连续3次,可判断为血小板无效输注2.血小板恢复(回收率)百分率(PR%)若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注由HLA抗体引起

20、PTR约占80%,其次为HPA或ABO抗体。现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病,发病率已经大为下降血小板相关疾病 输血后紫癜v输血后血小板减少性紫癜(posttransfusion thrombocytopenic purpura,PTTP),又称“输血后紫癜”,Posttransfusion purpura,PTP:由于血小板输注后发生同种免疫反应所致,一般发病率低。v患者被输入不相容的血小板/全血或多次妊娠而产生血小板抗体,破坏输入的和自身血小板而导致急性和暂时性血小板减少。患者多见于(95%)有多次妊娠或输血史的老年女性。血小板相关疾病输血后紫癜v HPA1a是引起该病的主要抗

21、原。我国绝大部分人为HPA1a抗原阳性。v 实验室检查血小板计数降低、骨髓巨核细胞增生活跃、血清学检查血小板抗体存在但效价和病情无关。v 本病输血小板无效,甚至有加重病情的危险,肾上腺皮质激素不能缩短病程,但是,有可能改善出血症状。v 主要治疗措施为血浆置换或换血,换血浆优于换全血。在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时,应立刻做血浆置换,一次交换65%85%的血浆量,平均在15天后出血症状减退,血小板数目上升。v 尽可能避免或减少输注血小板及含血小板的血液制品。血小板相关疾病 新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT)血小板相关疾病 新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAI

22、T)v第一胎即可发病;v病死率约13%;v治疗输入相合的血小板以提高患儿的血小板数,如找不到相合的血小板,可以输注经洗涤和辐射的母亲血小板,也可给患儿做放血治疗;v治疗前交叉配血以母亲血清与供者血小板进行交叉配合试验;v预防母亲在孕期可进行血浆置换 Passive alloimmune thrombocytopenia,PAT:患者输入含有血小板特异性抗体的血浆,在数个小时之内出现血小板减少症,约一周后缓解。一旦发现献血员血浆、血清中含有血小板特异性抗体应立即停止献血,这类献血员多为有妊娠史。Transplantationassociated alloimmune thrombocytopen

23、ia,TAT:器官接受者的淋巴细胞产生抗外来移植物(血小板)的特异性抗体;或供体器官中残留的淋巴细胞产生抗宿主血小板的抗体发病机制一、抗血小板抗体 约75%ITP患者可测到血小板相关自身抗体(PAIg),后者多为IgG、IgA也可是IgM。抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。带有抗体的血小板接触到单核巨噬细胞表面的FC受体,易被吞噬破坏。另外,抗血小板抗体对巨核细胞分化也有抑制作用。二、血小板生成时间缩短 ITP血小板生存可缩短至23天或更短,ITP患者血小板易在脾脏被扣留。脾脏可产生抗血小板抗体,脾内的巨噬细胞参与破坏血小板过程,切脾对相当部分的患者有效。v急性型儿童多见

24、,初起有上感,主要为病毒细菌所致。可有寒热,全身皮肤粘膜出血(瘢点,紫癜或血肿)、内脏出血。1%患者颅内出血,危及生命,但大多数呈自限性,一般46周可自行缓解。v慢性型主要见于40岁以下女青年,症状多在偶然中发现,也有皮肤粘膜的出血,内脏出血较少见,月经过多者可引起贫血。胎儿血小板刺激母体产生抗体Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.同一个体的每一个血小板抗原量差别非常大,由此可以解释有些人输入ABH不相容血液后,一部分输

25、入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其生命力不受影响.单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注固相血小板免疫血清学试验(SPISA)连续3次,可判断为血小板无效输注药物引起的血小板减少症急性型儿童多见,初起有上感,主要为病毒细菌所致。若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注交叉配血试验 选择配合的血小板供体

26、小部分是从血浆吸附而来。抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。被动免疫血小板减少症(PAT)高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示抗原位于GPb/a和GPIb/IX小部分是从血浆吸附而来。连续3次,可判断为血小板无效输注血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)连续3次,可判断为血小板无效输注HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示a b a b a b a b a b a b1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aaHLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-

27、15,anti-CD36质量控制阴阳性对照HLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-CD36固相血小板免疫血清学试验(SPISA)药物引起的血小板减少症血小板恢复(回收率)百分率(PR%)急性型儿童多见,初起有上感,主要为病毒细菌所致。一般临床上认为至少有2次及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。血小板相关疾病血小板输注无效(PTR)现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病,发病率已经大为下降24小时 CCI 4500/LHPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36被动免疫血小板减少症(PAT)自身免疫性血小板

28、减少症在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时,应立刻做血浆置换,一次交换65%85%的血浆量,平均在15天后出血症状减退,血小板数目上升。急性型儿童多见,初起有上感,主要为病毒细菌所致。改良抗原俘获(ELISA)单克隆抗体匮乏,目前国际上仅有HPA1a单抗,实验室检查血小板计数降低、骨髓巨核细胞增生活跃、血清学检查血小板抗体存在但效价和病情无关。200g,5min离心a b a b a b a b a b a b小部分是从血浆吸附而来。Passive alloimmune thrombocytopenia,PAT:患者输入含有血小板特异性抗体的血浆,在数个小时之内出现血小板减少症,约一周后

29、缓解。不同个体间血小板膜ABH抗原量存在差异;Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.血小板相关疾病输血后紫癜高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示带有抗体的血小板接触到单核巨噬细胞表面的FC受体,易被吞噬破坏。尽可能避免或减少输注血小板及含血小板的血液制品。在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时,应立刻做血浆置换,一次交换65%85%的血浆量,平均在15天后出血症状减退,血小板数目上升。一般临床上认为至少有2次

30、及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。胎儿血小板刺激母体产生抗体24个抗原主要分布在糖蛋白GPb,GPa,GPb,GPa以及CD109上;连续3次,可判断为血小板无效输注血小板破坏增加血小板特异性抗原(human platelet antigen,HPA)一般临床上认为至少有2次及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示药物引起的血小板减少症血小板相关疾病 新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT)连续3次,可判断为血小板无效输注小部分是从血浆吸附而来。HLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-15,ant

31、i-CD36GPIV/V 和 GPIa/IIa单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免疫血小板减少症HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36连续3次,可判断为血小板无效输注HLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-CD36血小板存具有HLA类抗原类抗原,主要是HLAA和H

32、LAB位点的抗原(少量表达的HLAC抗原)。Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.12小时 CCI 6000/L12小时 CCI 6000/L抗原位于GPb/a和GPIb/IX血小板相关疾病 输血后紫癜输血后血小板减少性紫癜(posttransfusion thrombocytopenic purpura,PTTP),又称“输血后紫癜”,Posttransfusion purpura,PTP:由于血小板输注后发生同种免疫反应所致,一般发病率低。高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示连续3次,可判断为血小板无效输注单克隆

33、抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免疫血小板减少症母亲IgG抗体通过胎盘进入胎儿体内使胎儿血小板致敏(人IgG致敏红细胞)药物引起的血小板减少症交叉配血试验 选择配合的血小板供体单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔

34、板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时,应立刻做血浆置换,一次交换65%85%的血浆量,平均在15天后出血症状减退,血小板数目上升。GPb(CD41)是跨膜蛋白,细胞外116 kD的重链,通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.ELISA法(酶联免疫试验)GPa(CD61)携带9种HPA抗原,分别为HPA-1,HPA-4,HPA-6bw,HPA-7bw

35、,HPA-8bw,HPA-10bw,HPA-11bw,HPA-14bw,HPA-16bw血小板特异性抗原(human platelet antigen,HPA)连续3次,可判断为血小板无效输注高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36抗原位于GPb/a和GPIb/IXHPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,anti-CD36固相血小板免疫血清学试验(SPISA)高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示200g,5min离心ELISA法(酶联免疫试验)被动免疫血小板减

36、少症(PAT)若输注后1小时 CCI 7500/L慢性型主要见于40岁以下女青年,症状多在偶然中发现,也有皮肤粘膜的出血,内脏出血较少见,月经过多者可引起贫血。药物引起的血小板减少症主要治疗措施为血浆置换或换血,换血浆优于换全血。1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aaa b a b a b a b a b a b(人IgG致敏红细胞)ITP血小板生存可缩短至23天或更短,ITP患者血小板易在脾脏被扣留。5x1011个/次)的血小板输注后,血液循环中血小板计数未见有效提高,临床出血表现未见明显改善,处于血小板治疗不应状态。血小板相关疾病 输血后紫癜高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“

37、b”表示GPIb/IX/V,少数位于单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(MAIPA):该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板,另外,将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育,再将孵育后的复合物加入多孔板,孵育,洗涤,最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色,定量测定血小板抗体。ELISA法(酶联免疫试验)血小板输注无效(PTR)连续3次,可判断为血小板无效输注Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.胎儿血小板抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。ELISA法(酶联免疫试验)若输注血小板24小时后,PR

38、%20%,可判断为血小板无效输注胎儿血小板刺激母体产生抗体血小板恢复(回收率)百分率(PR%)Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.小部分是从血浆吸附而来。质量控制阴阳性对照怀孕或生产时进入母体循环固相血小板免疫血清学试验(SPISA)(人IgG致敏红细胞)输血后血小板减少性紫癜(posttransfusion thrombocytopenic purpura,PTTP),又称“输血后紫癜”,Posttransfusion purpura,PTP:由于血小板输注后发生同种免疫反应所致,一般发病率低。连续3次,可判断为血小板无效

39、输注HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,anti-CD36(优选)血小板抗原抗体检测连续3次,可判断为血小板无效输注预防母亲在孕期可进行血浆置换ELISA法(酶联免疫试验)12小时 CCI 6000/L血小板相关疾病 输血后紫癜抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(Gpb/a等)结合。固相血小板免疫血清学试验(SPISA)Transplantationassociated alloimmune thrombocytopenia,TAT:(三人份O型混合血小板)高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15

40、aaHLA-I抗体5080%1725%(日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-CD36GPb(CD41)是跨膜蛋白,细胞外116 kD的重链,通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体,并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子.少数为抗GPIa/IIa抗体高频率抗原以“a”表示,低频率抗原以“b”表示连续3次,可判断为血小板无效输注连续3次,可判断为血小板无效输注HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,anti-CD36一般临床上认为至少有2次及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。自身免疫性血

41、小板减少症同一个体的每一个血小板抗原量差别非常大,由此可以解释有些人输入ABH不相容血液后,一部分输入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其生命力不受影响.被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免疫血小板减少症HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36无其它HPA单抗。连续3次,可判断为血小板无效输注治疗前交叉配血以母亲血清与供者血小板进行交叉配合试验;慢性型主要见于40岁以下女青年,症状多在偶然中发现,也有皮肤粘膜的出血,内脏出血较少见,月经过多者可引起贫血。Transplantationassociated alloimmune thrombocytopenia,TAT:若输注后1小时 CCI 7500/L抗原位于GPb/a和GPIb/IX质量控制阴阳性对照Platelet transfusion refractoriness,PTR:患者接受充足治疗剂量(2.若输注血小板24小时后,PR%20%,可判断为血小板无效输注固相血小板免疫血清学试验(SPISA)v检测LIFECODES PAKAUTO试剂盒

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