细胞游离亚铁原卟啉检测技术课件.ppt

1、 细胞游离亚铁原卟啉细胞游离亚铁原卟啉 检测技术检测技术 作者：温鑫作者：温鑫 细胞游离亚铁原卟啉（Cells Free Ferrous Protoporphyrin FH）是恶性肿瘤发生过程中产生的因果性生物标志因子。FH是是含含亚铁原卟啉蛋白的分解产物。亚铁原卟啉蛋白的分解产物。FH具有强氧化作用，导致细胞自稳调节功能紊乱。FH含量具有连续可测量性，且与细胞癌变程度呈密切正相关。采用直接生物学介质（组织渗液）进行靶向定位检测，即可显示细胞恶变过程。细胞游离亚铁原卟啉细胞游离亚铁原卟啉 （FHFH）主要来源主要来源 线粒体线粒体膜间腔膜间腔嵴间腔嵴间腔DNA基粒基粒 外膜外膜内膜内膜核糖体核

2、糖体嵴嵴基质基质基质基质颗粒颗粒线粒体的超微结构线粒体的超微结构膜间腔膜间腔嵴内腔嵴内腔嵴间腔嵴间腔基粒基粒 抑制剂抑制剂 可溶性的可溶性的 ATP 酶酶寡酶素敏感蛋寡酶素敏感蛋白（白（OSCP）HP蛋白蛋白 线粒体内含线粒体内含亚铁原卟啉的蛋白主要包括：亚铁原卟啉的蛋白主要包括：铁硫蛋白、辅酶铁硫蛋白、辅酶Q Q、细胞色素等；、细胞色素等；ATPATP合酶、合酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、单胺氧化酶、单胺氧化酶、血红素加氧酶血红素加氧酶 、NADNAD（P P）H H氧化酶、鸟氨酸氧化酶、一氧化氮合成酶、氧化酶、鸟氨酸氧化酶、一氧化氮合成酶、腺苷酸激酶、细胞色素氧化酶、

3、苹果酸还原腺苷酸激酶、细胞色素氧化酶、苹果酸还原酶等酶等120120余种酶类。余种酶类。在病理情况下，亚铁原卟啉从在病理情况下，亚铁原卟啉从细胞蛋白析出，成为细胞游离亚细胞蛋白析出，成为细胞游离亚铁原卟啉，不仅没有生物学功能，铁原卟啉，不仅没有生物学功能，反而能引起细胞和组织器官的氧反而能引起细胞和组织器官的氧化损伤。化损伤。细胞游离亚铁原卟啉细胞游离亚铁原卟啉 （FHFH）生成机制生成机制 【细胞能量代谢重编程】【细胞能量代谢重编程】ATP ADP 肌酸肌酸 磷酸磷酸肌酸肌酸 P P 机械能机械能(肌肉收缩肌肉收缩)渗透能渗透能(物质主动物质主动转运转运)化学能化学能(合成代谢合成代谢)电能

4、电能(生物电生物电)热能热能(维持体温维持体温)生物体内能量的储存和利用都以生物体内能量的储存和利用都以ATP为中心。为中心。糖糖 脂肪脂肪 蛋白质蛋白质 葡萄糖葡萄糖 脂酸脂酸+甘油甘油 氨基酸氨基酸 乙酰乙酰CoA TAC 2H 呼吸链呼吸链 H2O ADP+Pi ATP CO2 ：分解：分解 ：氧化分解：氧化分解 ：氧化磷酸化：氧化磷酸化 诺贝尔奖获得者德国生物化学家奥托诺贝尔奖获得者德国生物化学家奥托.海因里希海因里希.瓦博格（瓦博格（Otto Heinnich Warburg Otto Heinnich Warburg）发现肿瘤细）发现肿瘤细胞的耗糖速度是正常细胞的胞的耗糖速度是正常

5、细胞的1010倍，却仅产生倍，却仅产生1/101/10的能量。肿瘤细胞主要通过的能量。肿瘤细胞主要通过磷酸戊糖途径磷酸戊糖途径产能，产能，使即便在有氧情况下有氧氧化过程也不能对糖酵使即便在有氧情况下有氧氧化过程也不能对糖酵解产生抑制，这称为瓦博格氏效应（解产生抑制，这称为瓦博格氏效应（Warburg Warburg effecteffect）。）。x 反应部位：胞浆反应部位：胞浆x 重要反应产物：重要反应产物：NADPHNADPH、5-5-磷酸核糖磷酸核糖x 限速酶（启动因子）：限速酶（启动因子）：6-6-磷酸葡萄糖脱氢酶磷酸葡萄糖脱氢酶 6-6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性磷酸葡萄糖脱氢酶的活性与

6、抑癌基与抑癌基因因p53p53有关。有关。p53p53基因因编码一种分子基因因编码一种分子质量为质量为53kDa53kDa的蛋白质而得名，是一种的蛋白质而得名，是一种抑癌基因。一旦抑癌基因。一旦p53p53基因发生突变，基因发生突变，P53P53蛋白失活，细胞分裂失去节制，发蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变。生癌变。在正常情况下在正常情况下,p53,p53与葡萄糖与葡萄糖-6-6-磷酸脱氢酶相结合磷酸脱氢酶相结合,抑制它的活性，抑制它的活性，阻止磷酸戊糖途径进行阻止磷酸戊糖途径进行,细胞中的细胞中的葡萄糖主要通过三羧酸循环产生葡萄糖主要通过三羧酸循环产生能量。能量。在在p53p53发生突变

7、或缺失的肿瘤细胞中发生突变或缺失的肿瘤细胞中,失失去了对葡萄糖去了对葡萄糖-6-6-磷酸脱氢酶的抑制磷酸脱氢酶的抑制,该酶该酶作为戊糖磷酸途径的启动因子，使葡萄糖作为戊糖磷酸途径的启动因子，使葡萄糖通过戊糖磷酸途径代谢。通过戊糖磷酸途径代谢。1 1、耗能；、耗能；2 2、产生大量还原型辅酶、产生大量还原型辅酶（NADPHNADPH）,进行生物合成；进行生物合成；3 3、改变细胞微环境。、改变细胞微环境。致癌因素致癌因素阻抑蛋白p53 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶P53突变突变突变的p53 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶激活启动因子启动因子葡萄糖戊糖磷酸代谢途径TACNADPH果糖-6-

8、磷酸3-磷酸甘油醛二氧化碳抑制抑制 Warburg Warburg 效应形成的细胞微环境紊乱效应形成的细胞微环境紊乱 低氧（氧稳态紊乱）低氧（氧稳态紊乱）酸性环境（酸碱平衡紊乱）酸性环境（酸碱平衡紊乱）还原性状态（氧化还原性状态（氧化-还原平衡紊乱）还原平衡紊乱）FHFH位于细胞含亚铁原卟啉蛋白的肽链靠位于细胞含亚铁原卟啉蛋白的肽链靠近表面的一个疏水核内，它主要依靠近表面的一个疏水核内，它主要依靠Fe2+Fe2+与与F8HisF8His的咪唑氮配位而挂在的咪唑氮配位而挂在PrPr链上。但是链上。但是它之所以能固定在蛋白质的固定位置上而它之所以能固定在蛋白质的固定位置上而且取向一定，主要是因为还

9、有大约且取向一定，主要是因为还有大约2121个残个残基逼近基逼近FHFH，距离在，距离在4A4A之内，这些残基中之内，这些残基中有有6060多处与多处与FHFH比较靠近，可以发生极性与比较靠近，可以发生极性与非极性的相互作用，足以保持非极性的相互作用，足以保持FHFH在细胞蛋在细胞蛋白中的位置。白中的位置。FHFH的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的表面，在生理的表面，在生理pHpH下解离成负离子，下解离成负离子，在在链中，有一个丙酸基与链中，有一个丙酸基与CD3HisCD3His相相连；在连；在链中，链中，FHFH的两个丙酸基分别的两个丙酸基分别与与CD3SerCD3S

10、er和和E10LysE10Lys相连。相连。FHFH与肽链之与肽链之间的静电引力对于维持间的静电引力对于维持FHFH在细胞在细胞含亚含亚铁原卟啉铁原卟啉蛋白中的位置有很大作用。蛋白中的位置有很大作用。谷胱甘肽过氧化物酶以还原型谷胱甘谷胱甘肽过氧化物酶以还原型谷胱甘肽肽(GSH)(GSH)作为供氢体来分解作为供氢体来分解H H2 2O O2 2，生成，生成氧化型谷胱甘肽氧化型谷胱甘肽(GSSG)(GSSG)，使细胞内，使细胞内GSH:GSSGGSH:GSSG的比率下降。的比率下降。GSHGSH生成生成GSSGGSSG过过程中形成肿瘤细胞的低氧状态，程中形成肿瘤细胞的低氧状态，激活激活氧感受器氧感

11、受器和和缺氧信号传导通路缺氧信号传导通路。FHFH的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的表面，在生理的表面，在生理pHpH下解离成负离子，下解离成负离子，在在链中，有一个丙酸基与链中，有一个丙酸基与CD3HisCD3His相相连；在连；在链中，链中，FHFH的两个丙酸基分别的两个丙酸基分别与与CD3SerCD3Ser和和E10LysE10Lys相连。相连。FHFH与肽链之与肽链之间的静电引力对于维持间的静电引力对于维持FHFH在细胞在细胞含亚含亚铁原卟啉铁原卟啉蛋白中的位置有很大作用。蛋白中的位置有很大作用。氧感受器分子氧感受器分子导致蛋白质的巯基由氧化导致蛋白质的巯基由氧

12、化型向还原型转变，型向还原型转变，促使缺氧特异性转录因促使缺氧特异性转录因子子-低低氧诱氧诱导导因子因子（hypoxia-inducible hypoxia-inducible factorfactor；HIF HIF）HIF-1aHIF-1a的磷酸化并与的磷酸化并与HIF-1bHIF-1b结合而形成一个完整的结合而形成一个完整的HIF-1HIF-1转录转录复合体，从而与相应靶基因上的缺氧反应复合体，从而与相应靶基因上的缺氧反应元件元件(HRE)(HRE)结合，促进基因的表达结合，促进基因的表达.并通过并通过第二信使第二信使-活性氧族活性氧族(ROS)(ROS)与激酶系统发生与激酶系统发生联系

13、，激活联系，激活下游下游酶系统酶系统。细胞在代谢过程中通过细胞在代谢过程中通过FentonFenton反应反应产生产生一系列活性氧族（产生产生一系列活性氧族（reactive reactive oxygen species,ROSoxygen species,ROS），包括：），包括：O O2 2-、H H2 2O O2 2 及及HOHO2 2、OHOH等。等。ROS ROS 可双向调可双向调控细胞的凋亡和增殖，机体内的自由控细胞的凋亡和增殖，机体内的自由基通过其浓度调节着机体细胞的生死基通过其浓度调节着机体细胞的生死平衡，对转录因子的激活以及对细胞平衡，对转录因子的激活以及对细胞增殖的促进。

14、增殖的促进。由于瓦格博效应，在低氧诱导因子由于瓦格博效应，在低氧诱导因子（hypoxia inducible factorhypoxia inducible factor，HIFHIF）的介导下，的介导下，血管内皮生长因子血管内皮生长因子（V V EGFEGF）mRNAmRNA转录和稳定性增加，且转录和稳定性增加，且VEGFVEGF受体表达上调，受体表达上调，VEGFVEGF的生物学的生物学效应增强。效应增强。其表达的结果是增加血管其表达的结果是增加血管分支形成分支形成,增强血流量增强血流量。HIF-1aHIF-1a、ROSROS、V EGFV EGF表达上调，表达上调，使使一种亲脂性物质（一

15、种亲脂性物质（Hydrophilic Hydrophilic fatty moleculesfatty molecules）进入细胞）进入细胞含亚铁含亚铁原卟啉原卟啉蛋白疏水核内，它所带的负电蛋白疏水核内，它所带的负电荷中和了肽链上荷中和了肽链上HisHis、LysLys所带的正电所带的正电荷，使它们不再与荷，使它们不再与FHFH丙酸基侧链保持丙酸基侧链保持静电吸引，从而使静电吸引，从而使FHFH在细胞蛋白中脱在细胞蛋白中脱落。落。瓦博格瓦博格效应效应NADPH增加增加GSH增加增加激活激活氧感受器氧感受器和和缺氧信号缺氧信号传导通路传导通路缺氧特异性转录因子缺氧特异性转录因子HIF-1a活性

16、增强活性增强激活激活第二信使第二信使-ROS与激酶系统与激酶系统EPO基因基因表达水平升高表达水平升高NADPH氧化酶氧化酶H2O2下降下降cGMP抑制抑制激活激活鸟苷酸环化酶鸟苷酸环化酶VEGFVEGF表达上调表达上调血红素氧合酶血红素氧合酶及及NOS活性抑制活性抑制内源性内源性CO及及NO下降下降FH释放释放 代谢改变代谢改变 HIF-1 V EGF 不典型增生不典型增生 癌前病变癌前病变 原位癌原位癌 浸润癌浸润癌 细胞增生细胞增生 形态学改变形态学改变低氧、还原态低氧、还原态 ROS 瓦博格瓦博格 效效 应应 链链CD3His 链链CD3Ser、E10Lys 酶蛋白酶蛋白 FH p53

17、等基因突变等基因突变 致癌因素致癌因素 Hfm 细胞高增生细胞高增生 低凋亡低凋亡 低分化低分化低氧代谢通路低氧代谢通路 还有的学者特别强调自由基的作用，还有的学者特别强调自由基的作用，认为亲脂性物质进入含亚铁原卟啉蛋白认为亲脂性物质进入含亚铁原卟啉蛋白疏水核，与蛋白中心的疏水核，与蛋白中心的FeFe2+2+通过通过FentonFenton反应产生反应产生 OHOH。OHOH具有极高的氧化具有极高的氧化还原态势，反应力极强，几乎可以和生还原态势，反应力极强，几乎可以和生物细胞内所有类型的分子以物细胞内所有类型的分子以s-1s-1化学反应化学反应0 0级（相当于几个飞秒，级（相当于几个飞秒，1

18、1飞秒只有飞秒只有1 1秒的秒的一千万亿分之一）的反应速率作用。一千万亿分之一）的反应速率作用。但是，但是，OHOH寿命短暂，因而最靠近寿命短暂，因而最靠近 OHOH的部位受到攻击的可到性也最大。位居线的部位受到攻击的可到性也最大。位居线粒体内膜基粒基片的含亚铁原卟啉蛋白由粒体内膜基粒基片的含亚铁原卟啉蛋白由于在空间位置上的态势，首先受到于在空间位置上的态势，首先受到 OHOH的攻击，共价键断裂，其结构遭到不可逆的攻击，共价键断裂，其结构遭到不可逆转的破坏，转的破坏，FHFH析出。析出。FHFH对细胞氧化损伤可能的作用靶点：对细胞氧化损伤可能的作用靶点：1 1、细胞周期各期交叉处存在的检查、细

19、胞周期各期交叉处存在的检查点（点（checkpointcheckpoint）及）及核染色体基因组核染色体基因组（nucleic genome)nucleic genome)；2 2、线粒体基因组、线粒体基因组(mitochondrial(mitochondrial genome)genome)；3 3、细胞囊泡（、细胞囊泡（VesiclesVesicles）运输调控）运输调控机制。机制。DNADNA损伤检查点损伤检查点 （DNA damage checkpointDNA damage checkpoint）DNADNA复制检查点复制检查点 （DNA replication checkpoint

20、DNA replication checkpoint）纺锤体组装检查点纺锤体组装检查点 （spindle assembly checkpointspindle assembly checkpoint）人类具有两个基因组：人类具有两个基因组：核核/染色体基因组（染色体基因组（nucleic genome)nucleic genome)线粒体基因组线粒体基因组(mitochondrial genome)(mitochondrial genome)一般认为线粒体基因组（一般认为线粒体基因组（mtDNAmtDNA）的自）的自发突变率远较核基因组（发突变率远较核基因组（n nDNADNA）高，约）高，约

21、10-2010-20倍。倍。mtDNA mtDNA在在nDNAnDNA内的整合可能通过两条途内的整合可能通过两条途径引起细胞癌变：径引起细胞癌变：1 1、通过引起核基因组的不稳定性发生、通过引起核基因组的不稳定性发生癌变；癌变；2 2、通过改变细胞能量产生，提高线粒、通过改变细胞能量产生，提高线粒体氧化压力，引起线粒体酶表达异常和体氧化压力，引起线粒体酶表达异常和/或调控凋亡等途径来影响细胞的生物学行或调控凋亡等途径来影响细胞的生物学行为，使其发生恶变。为，使其发生恶变。囊泡运输是生命活动的基本过程，细胞囊泡运输是生命活动的基本过程，细胞内的膜性细胞器之间的物质运输内的膜性细胞器之间的物质运输

22、(如蛋白质、如蛋白质、脂类脂类)，主要是通过囊泡完成的。囊泡是细，主要是通过囊泡完成的。囊泡是细胞内物流的集装箱。钙离子是囊泡释放的胞内物流的集装箱。钙离子是囊泡释放的开关。苏德霍夫发现，囊泡表面有一种结开关。苏德霍夫发现，囊泡表面有一种结合蛋白，该蛋白只有在钙离子定向流动时合蛋白，该蛋白只有在钙离子定向流动时才能与细胞膜表面的另一种蛋白结合，从才能与细胞膜表面的另一种蛋白结合，从而促进囊泡运输功能。而促进囊泡运输功能。FHFH的氧化损伤作用使线粒体出现单的氧化损伤作用使线粒体出现单价电子渗漏（价电子渗漏（univalent leakunivalent leak）；胞）；胞内内Ca2+超载，触

23、发线粒体摄取超载，触发线粒体摄取Ca2+并并使使Ca2+在线粒体内积聚。在线粒体内积聚。线粒体氧化线粒体氧化损伤使损伤使CaCa2+2+定向流动发生异常，不能定向流动发生异常，不能与细胞膜表面的特定蛋白结合，从而与细胞膜表面的特定蛋白结合，从而损害囊泡运输功能。囊泡运输功能损害囊泡运输功能。囊泡运输功能的的破坏是细胞恶变的重要通路。破坏是细胞恶变的重要通路。P53基因基因突变突变FHFH物质物质析出析出检查点功能受损检查点功能受损细胞周期稳态失调细胞周期稳态失调细胞功能细胞功能紊乱紊乱mtDNA氧化损伤氧化损伤基因组稳态失调基因组稳态失调细胞形态细胞形态紊乱紊乱细胞钙通路障碍细胞钙通路障碍囊泡

24、运输功能失调囊泡运输功能失调 关于细胞癌变关于细胞癌变(carcinogenesis)(carcinogenesis)的具体机理还的具体机理还存在争议和分歧。存在争议和分歧。1 1、体细胞突变（、体细胞突变（somatic mutationsomatic mutation）假说：）假说：主要包括基因突变主要包括基因突变(gene mutation)(gene mutation)假说和非整假说和非整倍体倍体(aneuploidy)(aneuploidy)假说；假说；2 2、表型遗传修饰（、表型遗传修饰（epigenesisepigenesis）改变假说；）改变假说；3 3、肿瘤干细胞假说；、肿瘤

25、干细胞假说；4 4、对称分裂抑制机制紊乱假说；、对称分裂抑制机制紊乱假说；5 5、干细胞不对称分裂机制紊乱假说、干细胞不对称分裂机制紊乱假说 （1 1）基因突变与干细胞不对称紊乱；）基因突变与干细胞不对称紊乱；（2 2）非整倍体与干细胞不对称分裂紊）非整倍体与干细胞不对称分裂紊乱；乱；（3 3）表型遗传改变与干细胞不对称分）表型遗传改变与干细胞不对称分裂紊乱；裂紊乱；（4 4）细胞永生化与干细胞不对称分裂）细胞永生化与干细胞不对称分裂机制紊乱。机制紊乱。成体干细胞不对称分裂紊乱成体干细胞不对称分裂紊乱成体干细胞分化DNA永生化链DNA新合成链含DNA新合成链的染色体含DNA永生化链的染色体成体

26、干细胞G1期G2期不对称分裂对称分裂成体干细胞扩增成体干细胞出现非整倍体核型逐渐变为肿瘤干细胞肿瘤干细胞扩增肿瘤干细胞扩增增殖分化凋亡分化凋亡 根据生物全息律理论，生物体的一个根据生物全息律理论，生物体的一个部分（细胞）包含全部整体信息。肿瘤部分（细胞）包含全部整体信息。肿瘤发生过程是体细胞的全能性表现过程，发生过程是体细胞的全能性表现过程，只不过是表现出结构和功能只适应特殊只不过是表现出结构和功能只适应特殊的局部环境而与整个机体不协调，的局部环境而与整个机体不协调，是一是一 种种对称破缺紊乱或影像对称（手性特征）对称破缺紊乱或影像对称（手性特征）破缺紊乱。破缺紊乱。生命的基本物质是生物大分子

27、，它包括生命的基本物质是生物大分子，它包括蛋白质、核酸、多糖和脂类。其中蛋白质蛋白质、核酸、多糖和脂类。其中蛋白质是生命功能的执行者，组成生物蛋白质的是生命功能的执行者，组成生物蛋白质的氨基酸都是氨基酸都是L L型（左旋）的；核酸是遗传信型（左旋）的；核酸是遗传信息的携带者和传递者，通常是右旋的。这息的携带者和传递者，通常是右旋的。这是生物大分子的手性特征。生物体内化合是生物大分子的手性特征。生物体内化合物的这种左右不对称性（对称破缺）正是物的这种左右不对称性（对称破缺）正是生命力的体现，人类自身都是对称性自发生命力的体现，人类自身都是对称性自发破缺的产物。对称破缺紊乱是病理的结果。破缺的产物

28、。对称破缺紊乱是病理的结果。粒子物理学中的对称破缺问题与未知的力有关。粒子物理学中的对称破缺问题与未知的力有关。粒子物理学中的许多理论粒子物理学中的许多理论,如量子色动力学如量子色动力学,爱因爱因斯坦的广义相对论斯坦的广义相对论,都是源于对称的都是源于对称的.可是我们的可是我们的世界又是不对称的世界又是不对称的.这表明除了已经知道的强力这表明除了已经知道的强力,电磁力电磁力,弱力和引力外可能存在未知的力弱力和引力外可能存在未知的力,这个力这个力是引起对称破缺的原因是引起对称破缺的原因.如果我们了解这个力如果我们了解这个力,就就有可能知道对称破缺的机制有可能知道对称破缺的机制,就能知道不对称性的

29、就能知道不对称性的起源起源,进而就有可能了解质量进而就有可能了解质量(包括暗物质包括暗物质)的来源，的来源，也就能真正明了世间万物的产生机理。也就能真正明了世间万物的产生机理。综之，机体在各种致癌因素作用下，可综之，机体在各种致癌因素作用下，可能由于细胞游离亚铁原卟啉氧化损伤作能由于细胞游离亚铁原卟啉氧化损伤作用的参与，细胞稳定性紊乱，在基因水用的参与，细胞稳定性紊乱，在基因水平上失去了正常调控，可能导致细胞平上失去了正常调控，可能导致细胞对对称分裂抑制机制紊乱，或者称分裂抑制机制紊乱，或者导致导致干细胞干细胞不对称分裂机制紊乱。表型遗传修饰改不对称分裂机制紊乱。表型遗传修饰改变的细胞变的细胞

30、克隆性增生，形成恶性肿瘤。克隆性增生，形成恶性肿瘤。致癌因素致癌因素细胞能量代谢细胞能量代谢重编程重编程细胞内环境细胞内环境紊乱紊乱细胞形态细胞形态紊乱紊乱细胞功能细胞功能紊乱紊乱氧稳态紊乱氧稳态紊乱酸碱平衡紊乱酸碱平衡紊乱氧化氧化-还原态平衡紊乱还原态平衡紊乱细胞周期功能紊乱细胞周期功能紊乱线粒体功能紊乱线粒体功能紊乱囊泡运输功能紊乱囊泡运输功能紊乱表型遗传修饰机制紊乱表型遗传修饰机制紊乱细胞细胞对称分裂抑制机制紊乱对称分裂抑制机制紊乱干细胞不对称分裂机制紊乱干细胞不对称分裂机制紊乱细胞癌变细胞癌变瓦博格氏瓦博格氏效应效应 细胞游离亚铁原卟啉检测细胞游离亚铁原卟啉检测 最适宜领域最适宜领域

31、群体性筛检群体性筛检 （mass screeningmass screening）癌前期无症状早期癌无症状早期癌中晚期死亡筛查筛查检查看病可预防可预防不改变预后不改变预后可长期存活可长期存活 筛检试验筛检试验 诊断试验诊断试验对象不同对象不同 健康人或无症状的病人健康人或无症状的病人 病人病人目的不同目的不同把病人及可疑病人与无把病人及可疑病人与无病者区分开来病者区分开来把病人与可疑有病但实际把病人与可疑有病但实际无病的人区分开来无病的人区分开来 要求不同要求不同快速、简便、高灵敏度快速、简便、高灵敏度科学性、准确性科学性、准确性费用不同费用不同简单、廉价简单、廉价一般花费较贵一般花费较贵处理

32、不同处理不同须进一步作诊断试验以须进一步作诊断试验以便确诊便确诊 结果阳性者要随之以治疗结果阳性者要随之以治疗 筛检试验技术五大要素筛检试验技术五大要素 准确、快捷、经济、易接受准确、快捷、经济、易接受 与后续的诊断能保持连续性与后续的诊断能保持连续性 细胞游离亚铁原卟啉检测基本符细胞游离亚铁原卟啉检测基本符合上述要求，是癌症筛查的适宜技合上述要求，是癌症筛查的适宜技术。术。细胞游离亚铁原卟啉细胞游离亚铁原卟啉 （FHFH）连续可测量性连续可测量性 【上皮细胞上皮细胞FHFH检测技术】检测技术】采用一种脂溶性较强的物质，使之很容采用一种脂溶性较强的物质，使之很容易进入细胞与细胞器中，其与易进入

33、细胞与细胞器中，其与FHFH物质的氧物质的氧化化-还原产物使上皮细胞内含有的内源性过还原产物使上皮细胞内含有的内源性过氧化物酶等酶染色。作为筛查手段，观察氧化物酶等酶染色。作为筛查手段，观察组织渗液上皮细胞中组织渗液上皮细胞中FHFH物质对细胞内酶的物质对细胞内酶的染色情况，即可显示上皮细胞是否存有恶染色情况，即可显示上皮细胞是否存有恶变及其程度。变及其程度。因细胞内酶的差异，同一含量因细胞内酶的差异，同一含量FHFH显色可显色可能略有不同。能略有不同。技术特色技术特色 1 1、细胞游离亚铁原卟啉是一种因果、细胞游离亚铁原卟啉是一种因果性生物标志因子，是细胞稳定性失调、性生物标志因子，是细胞稳

34、定性失调、肿瘤发生过程细胞代谢变化的必然产肿瘤发生过程细胞代谢变化的必然产物。因而用以检测恶性肿瘤敏感度高。物。因而用以检测恶性肿瘤敏感度高。2 2、本技术采用直接生物学介质进行、本技术采用直接生物学介质进行检测，是一种靶向定位检测，因而用检测，是一种靶向定位检测，因而用以检测恶性肿瘤特异度高。以检测恶性肿瘤特异度高。3 3、这种代谢改变的肿瘤细胞是全息、这种代谢改变的肿瘤细胞是全息性的，是体细胞全能性不协调的表现，性的，是体细胞全能性不协调的表现，因而用以检测恶性肿瘤具有广谱性，因而用以检测恶性肿瘤具有广谱性，适用范围广。适用范围广。4 4、简约设计；床边诊断技术，可、简约设计；床边诊断技术

35、，可自检，快速、廉价；操作简便，采样自检，快速、廉价；操作简便，采样后的检测过程只需后的检测过程只需3 3分钟内即可得出检分钟内即可得出检测结果。测结果。生物学介质和检测范围生物学介质和检测范围 宫颈渗液：宫颈癌宫颈渗液：宫颈癌 直肠渗液：直肠癌直肠渗液：直肠癌 鼻咽部渗液：鼻咽癌鼻咽部渗液：鼻咽癌 前列腺液：前列腺癌前列腺液：前列腺癌 痰液：肺癌痰液：肺癌 乳头溢液：乳腺癌乳头溢液：乳腺癌 宫腔渗液：子宫内膜癌、绒毛膜上皮癌。宫腔渗液：子宫内膜癌、绒毛膜上皮癌。体表部位增生、溃疡、糜烂等处的组织渗液：体表部位增生、溃疡、糜烂等处的组织渗液：肛管癌、阴茎癌、外阴癌、口唇癌、舌癌、牙龈肛管癌、阴

36、茎癌、外阴癌、口唇癌、舌癌、牙龈癌、乳房外湿疹样癌、鳞状上皮细胞癌、基底细癌、乳房外湿疹样癌、鳞状上皮细胞癌、基底细胞癌、恶性黑色素瘤、隆突性皮纤维肉瘤、淋巴胞癌、恶性黑色素瘤、隆突性皮纤维肉瘤、淋巴管肉瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、体表转移癌等。管肉瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、体表转移癌等。【参考文献】【1】Gatenby R A，Gilles R J Why do cancer have hagh aerobic glycolysis?.Nat Rev Cancer，2004,4（11）891-899【2】Hiroshi Kondon，Cellular life span and the War

37、burg effect【J】.Exy Cell Res，2008,314（9）1923-1928【3】Wu Mian.P53 regulates biosynthesis throuth direct inactivation of glucose-6-phosphate Nature Cell Biology 2011，（13）310-316【4】Basanta D，Simon M，Deutsch A，et al.Evolutionary game theory elucidates the role of glycolysis in gliama progresion and invasi

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