德州检验会课件.pptx

1、11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang北京东方志禾商贸有限公司北京东方志禾商贸有限公司李保昌李保昌临床检验项目的合理选择与配伍临床检验项目的合理选择与配伍011/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang1TorchTorch检测的内容包括检测的内容包括Toxoplasma gondii：弓形虫Others：梅毒，B19细小病毒Rubella virus：风疹 Cytomegalo virus：CMVHerpes Simplex virus ：单纯疱疹病毒11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang2ToRCHToRCH检测方法检测方法印迹法：印迹法：a.

2、a.蛋白印迹，蛋白印迹，westernblotwesternblot，b.b.将纯化的抗原印迹于膜上将纯化的抗原印迹于膜上Euroimmune Euroimmune）金标法金标法酶标法（酶标法（a.a.间接法间接法 b.b.捕获法）捕获法）化学发光法（化学发光法（a.a.间接法间接法 b.b.捕获法）捕获法）化学发光法酶标法（捕获法）印迹法、酶标间接法金标法化学发光法酶标法（捕获法）印迹法、酶标间接法金标法定量定性定量定性11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang3CMVCMV概述概述人类感染面最广的病毒之一人类感染面最广的病毒之一传播途径多样传播途径多样直接接触：唾液，性接触直

3、接接触：唾液，性接触,垂直传播：经胎盘母婴传播垂直传播：经胎盘母婴传播血液传播：输血（白细胞）血液传播：输血（白细胞）移植移植潜伏部位常在唾液腺潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾等乳腺、肾等影响因素影响因素-年龄年龄-种族种族-职业职业-社会经济条件社会经济条件影响后果：影响后果：健康人（机会性感染）：无临床症状，单核细胞增多症健康人（机会性感染）：无临床症状，单核细胞增多症 免疫系统受损的病人：肺，心，肝和肾的多系统损伤免疫系统受损的病人：肺，心，肝和肾的多系统损伤 胎儿：先天性胎儿：先天性CMVCMV感染感染核内包涵体呈核内包涵体呈“猫头鹰眼猫头鹰眼”状状11/19/2022Sci Dpt:Ya

4、ng Jiang4先天性先天性CMVCMV感染感染-Congenital infection-Congenital infection-孕孕妇妇初次感染初次感染 primary infection (对胎儿的影响严重）孕孕妇妇再次感染再次感染 re-infection（J Clin Virol.2009 Dec;46 Suppl 4:S6-10.Epub 2009 Oct 2.Congenital cytomegalovirus(CMV)epidemiology and awareness.）（占先天性CMV的3/4）90%无症状无症状10%出生有症状出生有症状几个月或几年后有几个月或几年后有

5、 后后遗遗症（症（10-15%）无症状无症状先天性先天性CMV感染感染（0.2-2.5%）先天性CMV感染来源于孕妇的CMV急性感染感染感染后果11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang5先天性先天性CMVCMV感染胎儿不良后果感染胎儿不良后果神经发育方面疾病为主神经发育方面疾病为主出生后有症状出生后有症状出生后无症状但以后发病出生后无症状但以后发病：neurological problemsneurological problems（unilateral or unilateral or bilateral sensory neural hearing loss bilater

6、al sensory neural hearing loss 单或双侧感觉神经性听力丧失）单或双侧感觉神经性听力丧失）Indian J Pediatr.2010 Jan;77(1):77-9.Neonatal cytomegalovirus infection:diagnostic modalities available for early disease detection.小头畸形小头畸形 (70%),(70%),智力缺陷智力缺陷 (35%),(35%),听力障碍听力障碍 (60%),(60%),肝脾肿大肝脾肿大 (70%),(70%),黄疸黄疸 (68%),(68%),血小板减少症血小

7、板减少症 (65%),(65%),低体重低体重 (65%),(65%),肺炎肺炎 (2-5%)(2-5%)先天性心脏病先天性心脏病 (5%).(5%).11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang61.IgM阳性就是近期感染吗？！-仅有IgM+是不能下结论的。2.原发感染与复发感染的临床处理不同，如何鉴别-亲和力3.该如何做：IgG/IgM/Avidity合理配伍，灵活选择应用。伴IgM由-转+则为复发感染巨细胞病毒巨细胞病毒CMVCMV感染状况的实验检测方案感染状况的实验检测方案11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang7导致孕妇导致孕妇 CMV CMV IgM I

8、gM 检测阳性结果原因众多检测阳性结果原因众多v 初次急性感染v 继发急性感染v交叉反应(疱疹病毒家族)v患者体内IgM持续阳性v免疫系统的多克隆刺激单独检测单独检测CMV IgMCMV IgM导致假阳性，一定加入导致假阳性，一定加入IgGIgG检测检测11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang8多克隆激活多克隆激活多克隆激活示意图多克隆激活示意图T T、B B细胞可通过多克隆激活剂直接被激活细胞可通过多克隆激活剂直接被激活T或B多克隆激活剂多克隆激活剂（如（如EB,EB,细胞内毒素）细胞内毒素）抗体抗体抗原抗原TH耐受耐受T TH HPreferential retrovira

9、l-mediated transduction of EBV-and CMV-specific T cells after polyclonal T-cell activation.Sauce D,Mercier P,Battini JL,Ferrand C,Certoux JM,et alGene Ther.2004 Jun;11(12):1019-22.11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang9CMV IgG avidity CMV IgG avidity 检测检测 ：引入细胞免疫，引入细胞免疫，确定感染时间确定感染时间CMV avidity 检测检测B B细胞在淋巴组织生

10、发中心会经历克隆选择，生成高亲合力抗细胞在淋巴组织生发中心会经历克隆选择，生成高亲合力抗体的浆细胞才会选择性存活，而非高亲合力的则凋亡。体的浆细胞才会选择性存活，而非高亲合力的则凋亡。11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang10卫生部临检中心卫生部临检中心CMVCMV推荐检测方案推荐检测方案11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang11Liaison CMV panelLiaison CMV panelCMV IgG:IU/mL0.4 NEGATIVE0.4IU/mL0.6 EQUIVOCALIU/mL 0.6 POSITIVECMV IgM:AU/mL 15 N

11、EGATIVE15 AU/mL 30 EQUIVOCALAU/mL 30 POSITIVE avidity recommendedCMV IgG avidity:Av 0.200 LOW AVIDITY0.200 Av 0.300 MODERATE AVIDITYAv 0.300 HIGH AVIDITY11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang12胎儿胎儿CMVCMV感染的诊断标准（北美）感染的诊断标准（北美）羊膜腔穿刺检测羊水羊膜腔穿刺检测羊水CMVCMV：CMVCMV分离培养（金标准）分离培养（金标准）&PCR&PCR检测检测注意：在孕妇注意：在孕妇CMVCMV感染后感染后

12、7 7周和孕周和孕2121周后，检测过早往往导致假阴性周后，检测过早往往导致假阴性 超声检查发现胎儿不良结果超声检查发现胎儿不良结果:J Obstet Gynaecol Can.2010 Apr;32(4):348-54.Cytomegalovirus infection in pregnancy.11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang13确认确认CMVCMV感染后的治疗感染后的治疗CMV hyperimmune globulin新生儿出生不良后果明显减少抗病毒药物：丙氧鸟苷（ganciclovir DHPG）有防止CMV扩散作用；耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠，但效果

13、比前者差。孕 妇伐昔洛韦 新生儿更昔洛韦、缬更昔洛韦终止妊娠慎重，确诊胎儿CMV感染，同时与患者及家庭充分交流，不得已而为之的最后选择CMV疫苗处于研发中？疫苗对CMV再次感染有效性等问题尚待评估？11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang14弓形虫弓形虫 ToxoplasmaToxoplasma11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang15怀孕期间弓形虫诊断怀孕期间弓形虫诊断临床上临床上常无明显症状常无明显症状：轻度发热，酸痛，淋巴结肿大，无力，皮疹，眼：轻度发热，酸痛，淋巴结肿大，无力，皮疹，眼部感染等症状部感染等症状对成人危害不大，但是，在孕妇可引起流产，早产

14、和死胎。对成人危害不大，但是，在孕妇可引起流产，早产和死胎。对于未出生的胎儿，它可以侵袭大脑和眼睛，导致严重疾病。对于未出生的胎儿，它可以侵袭大脑和眼睛，导致严重疾病。主要的传染源是猫的排泄物，进食生的或半生的肉类也有可能感染。主要的传染源是猫的排泄物，进食生的或半生的肉类也有可能感染。实验室诊断方法实验室诊断方法:血清学检测及其他血清学检测及其他 11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang16弓形虫感染来源弓形虫感染来源生食感染的肉类生食感染的肉类食入污染的蔬菜食入污染的蔬菜肉类加工肉类加工食入生鲜海产品食入生鲜海产品猫等动物猫等动物等等等等Clin Infect Dis.20

15、09 Sep 15;49(6):878-84.Risk factors for Toxoplasma gondii infection in the United States.tachyzoteftussoil cysts cystsCat litter oocyst11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang17怀孕各阶段弓型虫的垂直感染率不同怀孕各阶段弓型虫的垂直感染率不同在孕期的前三个月为约在孕期的前三个月为约15%15%，进行治疗后，只有，进行治疗后，只有7%7%的新生儿发生了感染。的新生儿发生了感染。孕中期三个月的传染率为孕中期三个月的传染率为24-30%24-30%孕

16、期的后三个月，感染的发生率高达孕期的后三个月，感染的发生率高达59%59%。早期检测和治疗具有重要意义。早期检测和治疗具有重要意义。Mem Inst Oswaldo Cruz.2009 Mar;104(2):389-92.Diagnosis of congenital toxoplasmosis:prenatal and neonatal evaluation of methods used in Toulouse University Hospital and incidence of congenital toxoplasmosis.Montoya J,Remington J.Manage

17、ment of Toxoplasma gondii infection during pregnancy.Clin Infect Dis 2008;47:55466.垂直感染率随孕周越来越高垂直感染率随孕周越来越高孕早期的感染导致的胎儿先天性不良后果较中后期更严重孕早期的感染导致的胎儿先天性不良后果较中后期更严重早期检测和治疗具有重要意义。早期检测和治疗具有重要意义。11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang弓形虫感染弓形虫感染筛查筛查流程流程1811/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang19Liaison ToxoplasmaLiaison Toxo IgG II

18、:Curve range 0-400 IU/mLIU/mL 7.2 NEGATIVE 7.2IU/mL 8.8 EQUIVOCAL IU/mL 8.8 POSITIVELiaison Toxo IgM:AU/mL 6.0 NEGATIVE6.0 AU/mL 8.0 EQUIVOCALAU/mL 8.0 POSITIVELiaison Toxo IgG Avidity IIAv 3 LOW AVIDITY3 Av 4 MODERATE AVIDITYAv 4 HIGH AVIDITY11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang20弓形虫感染确诊实验弓形虫感染确诊实验孕妇确诊，胎儿确诊

19、孕妇确诊，胎儿确诊孕妇确诊：孕妇确诊：血清学检测（确诊急性感染）血清学检测（确诊急性感染）Sabin-Feldman test Sabin-Feldman test Differential Agglutination(AC/HS)testDifferential Agglutination(AC/HS)testIgG avidity testIgG avidity testIgMIgM，IgE IgE，IgAIgA胎儿确诊：胎儿确诊：羊水检测（确诊感染）羊水检测（确诊感染）羊水穿刺羊水穿刺PCRPCR：孕：孕1818周后周后/感染感染4 4周后做周后做（PCRPCR结果阴性不能排除胎儿未被感

20、染）结果阴性不能排除胎儿未被感染）超声定期检查（确诊不良）超声定期检查（确诊不良）对于确诊感染的病例孕期每个月定期检查对于确诊感染的病例孕期每个月定期检查11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang21孕妇弓形虫急性感染的治疗孕妇弓形虫急性感染的治疗 孕孕1818周前发生垂直感染周前发生垂直感染-口服螺旋霉素口服螺旋霉素 孕孕1818周后发生垂直感染或确诊胎儿弓形虫感染周后发生垂直感染或确诊胎儿弓形虫感染-乙胺嘧啶，同时补叶酸乙胺嘧啶，同时补叶酸11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang22风疹风疹 RubellaRubella 300，00011/19/2022Sc

21、i Dpt:Yang Jiang23风疹病毒风疹病毒 孕期风疹感染会导致死胎、早产、及一系列新生儿先天性缺孕期风疹感染会导致死胎、早产、及一系列新生儿先天性缺陷陷(congenital rubella syndrome CRS).胎儿受累的严重程度与孕期胎儿受累的严重程度与孕期何时何时感染病毒有很大关联感染病毒有很大关联 50%以上风疹初次感染的患者没有临床症状以上风疹初次感染的患者没有临床症状孕前感染孕前感染:几乎没有风险几乎没有风险孕期孕期0-120-12周周:胎儿先天性感染风险胎儿先天性感染风险100%100%，导致大多数新生儿先天，导致大多数新生儿先天性异常性异常孕期孕期13-16 1

22、3-16 周周:15%15%的耳聋及的耳聋及白内障等白内障等视网膜疾病视网膜疾病孕期孕期1616周后周后:胎儿发育正常胎儿发育正常,极少数出现耳聋及视网膜疾病极少数出现耳聋及视网膜疾病11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang24天然获得性免疫天然获得性免疫&疫苗免疫疫苗免疫 天然获得性风疹免疫具有高度保护性，天然感染之后天然获得性风疹免疫具有高度保护性，天然感染之后发生再感染几率很低发生再感染几率很低 注射疫苗获得性免疫保护时限注射疫苗获得性免疫保护时限1616年左右年左右 风疹风疹IgGIgG检测检测10-15IU/ml10-15IU/ml具有保护性具有保护性Reprod T

23、oxicol.2006 May;21(4):350-82.Epub 2006 Mar 27.Laboratory assessment and diagnosis of congenital viral infections:Rubella,cytomegalovirus(CMV),varicella-zoster virus(VZV),herpes simplex virus(HSV),parvovirus B19 and human immunodeficiency virus(HIV).11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang25卫生部临检中心风疹推荐检测方案卫生部临检中

24、心风疹推荐检测方案？11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang26IgGIgG的亲和力约的亲和力约4-64-6周即可达到较高水平，周即可达到较高水平，相对快速，所以在确定感染时间上应用价相对快速，所以在确定感染时间上应用价值有限。值有限。IgG亲合力受到多种因素影响-亲合力增加迅速11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang27不建议做风疹不建议做风疹IgG IgG 亲合力检测亲合力检测-Dr Liliane Grangeot-KerosRecommendation:Do not perform Rubella IgG Avidity testing but foll

25、ow the variation of IgG and IgM antibody levels 11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang28HSVHSV11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang29HSVHSV概述概述HSVHSV感染临床症状没有特异性感染临床症状没有特异性HSV-1 HSV-1 型感染率很高，主要通过非性接触；也可通过性传播，并型感染率很高，主要通过非性接触；也可通过性传播，并且性传播的方式近年有增高的趋势且性传播的方式近年有增高的趋势HSV-2 HSV-2 型主要通过性传播途径，型主要通过性传播途径，HIVHIV易感易感女性感染率往往比男性要高

26、女性感染率往往比男性要高主要威胁在孕妇，导致胎儿和新生儿感染主要威胁在孕妇，导致胎儿和新生儿感染孕妇初次感染孕妇初次感染HSVHSV通过胎盘传给胎儿通过胎盘传给胎儿/新生儿的可能性远高于新生儿的可能性远高于HSVHSV复发的复发的Maternal and Neonatal Herpes Simplex Virus InfectionsN Engl J Med 2009;361:1376-85.11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang30先天性和新生儿感染先天性和新生儿感染HSVHSV的临床特点的临床特点先天性先天性HSVHSV(宫内感染）宫内感染）流产，宫内发育迟缓，畸形 皮肤

27、小囊泡，疤痕 眼部损伤(脉络视网膜炎，小眼畸形，白内障）神经损伤（颅内钙化，小头畸形等）新生儿新生儿 涉及皮肤，眼口部损伤，脑炎 多系统功能衰竭11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang31HSVHSV孕妇血清学检测意义孕妇血清学检测意义 孕妇的血清学表现孕妇的血清学表现 鉴别孕妇是否高风险鉴别孕妇是否高风险 亚型辨别：对临床治疗和孕期指导意义有限亚型辨别：对临床治疗和孕期指导意义有限“the type-specific test is useful but not essential”Herpes simplex virus infection in pregnancy and

28、 in neonate:status of art of epidemiology,diagnosis,therapy and prevention.Virology Journal 2009,6:4011/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang32Acyclovir 200 mg five times daily Acyclovir 400 mg three times daily from 36 weeks to deliveryAcyclovir 200 mg five times daily Acyclovir 400 mg three times daily from 3

29、6 weeks to delivery孕期初次孕期初次HSV 临床方案临床方案11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang33Acyclovir 200 mg five times dailyat 36 weeks gestation Lazzarotto Tiziana,UO di Microbiologia,Policlinico S.Orsola Malpighi,Bologna11/19/2022Sci Dpt:Yang Jiang34HSVHSV的的IgGIgG和和IgMIgM检测试剂盒检测试剂盒HSV-1/2 IgGHSV-1 IgGHSV-2 IgGHSV-1/2 IgM我该选择哪个品牌的我该选择哪个品牌的TorchTorch试剂，它们试剂，它们真的有区别吗？真的有区别吗？