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第十三章化学性食物中毒快速检验课件.ppt

1、第十三章化学性食物中毒快速检验十二章采集制备与浸泡塑料制品橡胶制品容器涂料及包装用纸搪瓷、陶瓷、不锈钢和铝制品浸泡实验综合检测项目十二章复习内容n浸泡试验n溶剂选择n综合项目十三章概述水溶性挥发性不挥发性概念、特点分类程序方法分离提取亚硝酸盐格氏法联苯胺-冰乙酸分离氰化物苦味酸普鲁士蓝对硝基苯甲醛分离巴比妥生物碱斯-奥简易提取硝酸钴TLC金属毒物雷因许氏确证实验农药有机磷化学定性对硫磷敌敌敌敌畏畏灭鼠药有毒动植物十三章第十四章第十四章 化学性食物中毒的快速检验化学性食物中毒的快速检验n14.1 概述n14.2 水溶性毒物的快速检验n14.3 挥发性毒物的快速检验n14.4 不挥发性有机毒物的快

2、速检验n14.5 有毒元素的快速检验n14.6 农药的快速检验n14.7 兽药快速检验n14.8灭鼠药的快速检验n14.9 生物毒素快速检验食物中毒是什么食物中毒是什么 凡是吃了凡是吃了“不干净不干净”的食物引起的急性中毒的食物引起的急性中毒性疾病。性疾病。一一 般般 以以 腹腹 痛、痛、恶恶 心、心、呕呕 吐、腹泻、发吐、腹泻、发 热热 等等 症症 状状 为为 主。主。n2013年5月20日晚,7名青岛理工大学琴岛学院的学生相继出现腹痛、腹泻、抽搐等症状,经城阳人民医院急诊内科检查,7名学生均为食物中毒 n2011年5月德国暴发肠出血性大肠杆菌(EHEC)疫情,已在德国各州造成1400多例确

3、诊或疑似病例,至少14人因此丧生。瑞典、丹麦、英国、法国、荷兰、瑞士和奥地利等国也发现类似病例。据了解,这些国家的患者大部分曾到过德国。德国流行病预防研究的权威机构罗伯特科赫研究所表示,目前还无法确定大肠杆菌的来源,但呼吁民众尤其是德国北部地区的居民避免生吃黄瓜、番茄和生菜。n肠出血性大肠杆菌是大肠杆菌的一种,因其能产生志贺样毒素而具有较强的致病性。感染到发病的潜伏期为3至8天,平均为3至4天。临床表现主要有:腹部绞痛和腹泻,一些病例为血便样腹泻。多数病人10天内康复,少数病人特别是幼儿和老年人,可出现严重并发症,如以急性肾功能衰竭、溶血性贫血和血小板减少为特点的溶血尿毒综合症。n目前正值夏秋

4、季肠道传染病高发季节,更要注意饮食卫生,尽量不要到卫生条件差的街头摊点就餐;易变质的食物(如吃剩的熟食)应冷藏存放;处理熟食时应洗净手或戴上一次性手套;食物煮熟后应尽快食用,剩菜剩饭食用前应彻底加热;不要食用变质的食物。广州、佛山、中山、江门、惠州广州、佛山、中山、江门、惠州等地学校、工厂食堂和酒楼相继发生等地学校、工厂食堂和酒楼相继发生10起重大食物中毒事故,中毒人数达起重大食物中毒事故,中毒人数达到到709人,死亡人,死亡2人。人。(9月月26日日10:40:10 新快报新快报)广东广东:2008年年9月月8日日9月月22日日 共共14天天709人食物中毒人食物中毒 1.8 8日,广州番禺

5、区沙圹村日,广州番禺区沙圹村6 6人自行加工进食人自行加工进食河豚鱼引河豚鱼引起的食物中毒起的食物中毒,2 2人死亡。人死亡。2.9 9日中山市嘉华电子有限公司日中山市嘉华电子有限公司8686名员工食堂进食含名员工食堂进食含冷藏鱼类,造成集体高组胺食物中毒事故冷藏鱼类,造成集体高组胺食物中毒事故。3.15 15日中山大学北校区第一学生食堂日中山大学北校区第一学生食堂常温存放熟食,常温存放熟食,造成细菌污染造成细菌污染,致,致199199名学生食物中毒。名学生食物中毒。4.18 18日惠州艺园学校日惠州艺园学校9797名学生因名学生因进食农药污染的蔬菜进食农药污染的蔬菜发生食物中毒事故。发生食物

6、中毒事故。5.20 20日河源市和平县大坝镇龙狮村日河源市和平县大坝镇龙狮村106106人进食人进食老鼠药老鼠药污染的牛肉污染的牛肉造成食物中毒。造成食物中毒。6.22 22日东莞市黄江镇裕元花园酒店日东莞市黄江镇裕元花园酒店6363人进食受人进食受污染的污染的蛋糕发生细菌性食物中毒蛋糕发生细菌性食物中毒。v重大食物中毒事件重大食物中毒事件3131起起v中毒人数近中毒人数近12001200人人v死亡死亡1616人人造成这些事故的主要原因造成这些事故的主要原因:v集体食堂供餐条件达不到要求集体食堂供餐条件达不到要求v不法分子投毒作案不法分子投毒作案v误食有毒动植物及食物原料残留有毒物质误食有毒动

7、植物及食物原料残留有毒物质 2008年年1月月1日日9月月22日日1.化学性污染:农药、有害金属、多环芳族化合物、杂环胺、化学性污染:农药、有害金属、多环芳族化合物、杂环胺、N-亚硝基化合物、食品添加剂、食品容器、包装材料中的单亚硝基化合物、食品添加剂、食品容器、包装材料中的单体、助剂、二恶英。体、助剂、二恶英。2.生物性污染:黄曲霉毒素、单端孢霉烯族化合物、伏马菌素、生物性污染:黄曲霉毒素、单端孢霉烯族化合物、伏马菌素、椰毒假单孢菌酵米面亚种食物中毒、大肠埃烯氏菌属食物中椰毒假单孢菌酵米面亚种食物中毒、大肠埃烯氏菌属食物中毒、单核细胞增多性李斯特菌;毒、单核细胞增多性李斯特菌;食源性寄生虫病

8、:食源性寄生虫病:隐孢子虫、园孢子虫隐孢子虫、园孢子虫 食源性病毒:食源性病毒:甲型肝炎甲型肝炎 疯牛病疯牛病 3.特殊食品卫生问题特殊食品卫生问题 转基因食品的安全性、转基因食品的安全性、肉乳蛋中兽药的残留问题、功能性肉乳蛋中兽药的残留问题、功能性食品的安全性。食品的安全性。污染因素污染因素 中毒原因中毒原因 报告起数报告起数 中毒人数中毒人数 死亡人数死亡人数 细菌性食物中毒细菌性食物中毒 49 7613 20化学性食物中毒化学性食物中毒 90 6121 81有毒动植物食物中毒有毒动植物食物中毒 33 1127 35 其他食物中毒其他食物中毒 13 854 10 合合 计计 185 157

9、15 146 中毒原因分类中毒原因分类控制细菌繁殖控制细菌繁殖(杀灭细菌杀灭细菌食物中毒预防食物中毒预防 三管齐下!三管齐下!防止污染防止污染n食物中毒的含义n食物中毒的分类n中毒食物14.1 概概 述述n化学性食物中毒:是指摄入了含有化学性有毒有害物质的食品或者把有毒有害物质误作食品摄入后,出现的以急性或亚急性中毒症状为主的疾病。n化学性食物中毒的特点:n季节不明显n不同有毒化学物质表现不同,临床多样化n可以由误食引起n一般有特效解毒药n病死率较高,愈后较差n化学性食物中毒的分类n化学性食物中毒快速检验的程序n化学性食物中毒检验的特点 通常采用快速定性分析和实验室确证分析。快速定性分析适合于

10、可疑目标毒物的快速筛查,通常采用试纸、液体或固体试剂、试剂盒等,通过沉淀反应、颜色反应、免疫学反应、酶抑制率等与标准物质比较定性或半定量。常用的有比色(比浊)法、免疫法以及生物芯片、生物传感器、金(荧光素)标记法等一些现场快速筛选法。目前实验室常用的确证分析方法也可以用于快速检测,如气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱法等仪器方法,尤其是与相应的质谱数据库配合使用,可以对可疑毒物的进行快速筛查和确证。化学性食物中毒的快速检验方法14.2 水溶性毒物的快速检验水溶性毒物的快速检验n亚硝酸盐的来源n大量摄入硝酸盐和亚硝酸盐可诱导高铁血红蛋白血症,临床表现为口唇、指甲发绀,皮肤出

11、现紫斑等缺氧症状,可致死亡。主要是由于人体内大量的亚硝酸盐能将血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白。美蓝n硝酸盐的摄入也能减少人体的碘的消化吸收,从而导致甲状腺肿。中毒机理及症状:检验方法检验方法(格氏法格氏法)n原理:n分光光度法测定食品中环己基氨基磺酸钠;n分光光度法测定磺胺类兽药;n分光光度法测定亚硝胺总量;n粮食中氯化苦的测定;n水产品中组胺的测定;操作方法n格氏试剂配制:n提取:510g样品捣碎,加20ml水+1ml乙酸.n检测:检验方法检验方法(联苯胺联苯胺-冰乙酸法冰乙酸法)n原理:亚硝酸盐在酸性溶液中将联苯胺重氮化,然后水解并氧化成红色的联苯醌,可在白色滴板上进行颜色反应,观

12、察有无紫红色产生,以检验亚硝酸盐存在。检验方法检验方法(联苯胺联苯胺-冰乙酸法冰乙酸法)NH3H3NAc+Ac2HNO2NAcNAcNN4H2ONAcNAcNN2H2O2HAcHOOH2N2HOOH1 2O2OOH2O再与亚硝酸作用生成重氮盐:重氮盐水解生成联苯二酚:最后脱氢,氧化成紫红色醌式化合物:14.3 挥发性毒物的快速检验挥发性毒物的快速检验n生 氰 糖 苷 的 毒 性 甚 强,对 人 的 致 死 量 为18mg/kg体重。生氰糖苷的毒性主要是氢氰酸和醛类化合物的毒性。氢氰酸被吸收后,随血液循环进入组织细胞、并透过细胞膜进入线粒体,氰化物通过与线粒体中细胞色素氧化酶的铁离子结合,导致细

13、胞的呼吸链中断。n生氰糖苷的急性中毒症状包括心智紊乱、肌肉麻痹和呼吸窘迫。氢氰酸的最小致死口服剂量为0.53.5mg/kg体重。氰化钠为0.1g,氰化钾为0.12g。n处理急性氰化物类物质中毒时,首先应立刻让病人口服亚硝酸盐或亚硝酸酯(如亚硝酸异戊酯),使病人体中的血红蛋白(Fe 2)转变为高铁血红蛋白Fe3),高铁血红蛋白的加速循环可将氰化物从细胞色素氧化酶中脱离出来,使细胞继续呼吸。其后应让病人口服硫代硫酸盐等解毒剂,使氰化物容易形成硫氰化物而随尿排出。检验方法检验方法(普鲁士蓝法普鲁士蓝法)n原理:氰化物在酸性条件下生成HCN气体,可与NaOH-FeSO4生成Na4Fe(CN)6,用盐酸

14、酸化后与部分亚铁离子氧化生成的高价铁离子作用,生成亚铁氰化高铁,即普鲁士蓝。HCN NaOH NaCN+H2OFeSO4 6NaCN Na4Fe(CN)6+Na2SO44FeCl3 3Na4Fe(CN)6 Fe4Fe(CN)63+12NaCl操作方法nNaOH-FeSO4试纸:100g/L。n步骤:取510g样品粉碎,放入100ml锥形瓶,加20ml水+10ml 100g/L酒石酸,立即在瓶口盖上NaOH-FeSO4试纸,缓慢加热,待瓶内溶液沸腾后停止加热,取下试纸浸入10盐酸。n苦味酸试纸法n硫化物、亚硫酸盐或硫代硫酸盐 红色n对硝基苯甲醛法n缩合反应 红色n气-质联用(GC-MS)法 n样

15、品在酸性条件下蒸馏出无机氰化物,将氰根离子衍生化,用气相毛细管色谱柱分离,以离子阱质谱检测器检测,为快速检验氰化物是否存在的确证方法,14.3 挥发性酚类快速检验挥发性酚类快速检验 n1溴化法 苯酚与溴水反应,能生成三溴苯酚的白色沉淀或浑浊,借以检出苯酚的存在。n2三氯化铁法 三氯化铁能与酚类物质形成蓝紫色化合物,借以检出酚类物质的存在。水杨酸n3气相色谱法 食物中毒样品经蒸馏提取挥发性酚类物质后,通过固相萃取柱净化、浓缩后进行气相色谱分离,常用的色谱柱为含硝基对苯二酸改性聚乙二醇的不锈钢色谱柱,或经溴化或酯化后注入毛细管色谱柱(5%苯基甲基硅氧烷),用火焰离子化检测器(溴化时采用ECD检测器

16、)检测,14.4 不挥发性有机毒物的快速检验不挥发性有机毒物的快速检验n不挥发性有机毒物:相对分子量较大、结构复杂、不易挥发。n酸性有机毒物n碱性有机毒物n两性有机毒物n中性有机毒物斯斯-奥氏法(乙醇奥氏法(乙醇-乙醚提取法)乙醚提取法)巴比妥类安眠药的快速检验巴比妥类安眠药的快速检验n理化性质:巴比妥酸的衍生物。白色结晶粉末,呈弱酸性。难溶于水,易溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂。加碱成盐后易溶于水。巴比妥类安眠药的快速检验巴比妥类安眠药的快速检验n硝酸钴法原理:巴比妥类药物分子结构中的环酰脲,在碱性条件下与钴盐作用生成紫堇色络合物。与米龙试剂中汞盐生成沉淀,沉淀溶于过量米龙试剂中。n米龙

17、试剂配制:取汞1ml,加硝酸9ml溶解,再以等量水稀释。操作步骤操作步骤n1.样品提取n简易提取法:取样品50g捣碎,加入浓盐酸5ml研磨,再加硫酸铵30g,研磨后加入乙醇50ml和三氯甲烷50ml,过滤,滤渣用三氯甲烷淋洗。分离有机相并水浴挥干,残渣用热水溶解过滤,取滤液备用。n2.硝酸钴反应:取样品提取液少许,于蒸发皿上挥干,加数滴10g/L硝酸钴无水乙醇溶液,在浓氨水瓶口熏片刻,阳性显紫堇色,阴性显污绿色。n3.米龙试剂反应:取残渣少许溶于少量水中,呈饱和溶液,滴加米龙试剂12滴,则产生灰白色沉淀,继续滴加米龙试剂,沉淀溶解,表示有巴比妥类药物存在。生物碱类的快速检验生物碱类的快速检验n

18、生物碱:一类含氮杂环结构的碱性有机化合物。n1.沉淀反应n2.颜色反应n3.TLC14.5 有毒元素的快速检验有毒元素的快速检验n雷因许氏预试验原理:金属铜在酸性条件下,能使砷、汞、银、锑、铋等金属还原成元素状态或生成铜的合金而沉积于铜的表面,显示出不同的颜色及光泽。操作方法操作方法n1.铜片处理:将铜片或铜丝置于试管中,加入2mol/L硝酸处理,除去酸液水洗,再用乙醇洗涤,后用乙醚洗涤。n2.取20ml样品于50ml烧杯中,加入5ml盐酸(28)和1ml氯化亚锡盐酸溶液,记录液面位置,加热微沸10min,加入2片铜片,保持20min。n3.取出铜片,用水洗涤,检查铜片颜色变化情况(大量的汞或

19、铋需要长时间加热)。可初步判断可能有何种金属毒物存在。砷的确证试验砷的确证试验n升华法:将预试验变色的铜丝放入一端封口的毛细管,小火加热使铜丝变红色。显微镜下观察,如有正四面体或八面体闪光的结晶,可确定砷化物存在。砷的确证试验砷的确证试验n砷斑法原理:又称古蔡法,在酸性条件下,五价砷化物可被碘化钾或氯化亚锡还原为三价砷化物,然后与新生态的氢反应生成砷化氢,砷化氢遇溴化汞试纸能产生黄色至棕色的斑点。汞的确证试验汞的确证试验 升华法:将预试验变色的铜丝放入一端封口的毛细管,小火加热使铜丝变红色。显微镜下观察,如呈现黑色光亮小球,表示有汞存在。汞的确证试验(碘化亚铜法)汞的确证试验(碘化亚铜法)n实

20、验原理:碘化亚铜与汞作用,生成红色碘化亚铜汞沉淀。n操作:将银白色铜片放入白瓷板凹穴中,加少许碘化亚铜粉将铜片掩盖,在3040环境中放置10min,如有红色则表示有汞存在。汞的确证试验(二苯碳酰二肼法)汞的确证试验(二苯碳酰二肼法)n实验原理:样品经破坏有机质后,在0.2mol/L硝酸条件下,汞离子与二苯碳酰二肼生成蓝紫色配合物,可以检出汞离子的存在。钡的快速检验钡的快速检验n1.玫瑰红酸钠法:在中性或酸性溶液中,钡盐与玫瑰红酸钠作用,生成红棕色至桃红色沉淀。n2.硫酸钡沉淀法:14.6 农药的快速筛检农药的快速筛检n1速测卡法(卡片法)n原理:胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚

21、(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。14.6 农药的快速筛检农药的快速筛检n2酶抑制率法(分光光度法)n原理:在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。14.6 农药的快速筛检农药的快速筛检n3酶联免疫吸附

22、法(试剂盒法)n原理:采用间接竞争ELISA方法。n方法:样品以甲醇提取有机磷农药。在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物有机磷农药与微孔条上预包被的偶联抗原竞争性结合有机磷农药的抗体,形成包被抗原-抗体复合物,再加入酶标二抗体后,用底物四甲基联苯胺(TMB)显色,样本吸光值与其所含有机磷农药的含量成负相关,根据抗原抗体的反应,确定有机磷农药的种类,与标准曲线比较可得出有机磷农药残留物的含量。测定机磷农药的线性范围0.5g/ml10g/ml;灵敏度:1g/ml。14.6 农药的快速筛检农药的快速筛检n4免疫传感器法免疫传感器法n免疫传感器(immunolsensor)是根据抗原和抗体特异性结

23、合所引发的免疫反应的原理研制成的传感器。具有稳定性强、选择性高、检测速度快等特点。以免疫生物分子作为识别元件,通过固定化技术将免疫蛋白结合到感受器表面,发生免疫识别反应后,生成的免疫复合物与产生的物理或化学信号相关联,由换能器将其转化为与待测物质浓度(或活度)有关的可定量或者可处理的物理化学信号,如电信号、光信号或者声波信号等,再通过二次仪表放大并且输出信号,从而可实现对待测分子的快速灵敏检测。1.对硫磷的检验C2H5OC2H5OPSONO2NaOHC2H5OC2H5OPSONO2OH2NaONO2Na碱性NOONaO黄色(1)硝基酚反应:氢氧化钠将对硫磷水解成对硝基苯酚的钠盐,在碱性条件下互

24、变异构生成黄色醌型化合物。1.对硫磷的检验n(2)靛酚反应:在氢氧化钠存在下对硫磷水解成对硝基苯酚的钠盐,加入锌粉,生成的氢还原对硝基苯酚钠成对氨基苯酚钠,与邻甲酚作用,并在空气中氧的氧化下生成蓝色化合物。14.6 农药的快速检验农药的快速检验n2.敌百虫和敌敌畏的检验n(1)异腈法原理:在碱性溶液中,敌百虫和敌敌畏水解成二氯乙醛,在强碱性溶液中,二氯乙醛与苯胺作用生成具有特殊臭味的异腈化苯。14.6 农药化学定性鉴定法农药化学定性鉴定法n2.敌百虫和敌敌畏的检验n(2)间苯二酚法原理:在碱性溶液中,敌百虫和敌敌畏水解成二氯乙醛,再与间苯二酚反应生成红色化合物。操作方法n提取:样品粉碎后,放入

25、锥形瓶,加入10ml苯或乙醚振摇10min,滤液备用。n反应:取12滴滤液于滤纸上,加5间苯二酚乙醇溶液和5氢氧化钠乙醇溶液各一滴,微热数分钟,若呈现红色表示存在。14.6 农药化学定性鉴定法农药化学定性鉴定法n三、仪器快速测定方法n样品中农药毒物经有机溶剂提取、固相萃取提取和净化分离提纯后,进行定量检测。主要方法有:薄层色谱扫描法、气相色谱法(GC)、气相色谱/质谱联用分析法(GC/MS)。通过已建立的农药色谱图数据库、质谱图数据库,可对已知农药或未知农药进行快速的定性和定量。定量测定方法在本书农药残留测定中有详细介绍。14.7 兽药的快速检验兽药的快速检验n1免疫胶体金试纸法 该方法运用抗

26、原抗体的特异反应、侧向层析技术和胶体金技术,对样品中盐酸克伦特罗分子进行快速定性检测。14.7 兽药的快速检验兽药的快速检验n将半抗原盐酸克伦特罗小分子与牛血清白蛋白(BSA)偶联成为结合抗原,与胶体金颗粒结合后,包被在醋酸纤维素膜(NC)上;在硝酸纤维素膜上将盐酸克伦特罗抗体和BSA抗体分别包被在检测区(T)和质控区(C)。将样本提取液加入加样孔后,样本中的盐酸克伦特罗与结合抗原一起层析泳动到检测区竞争与抗体结合,剩余的结合抗原继续泳动到质控区与BSA抗体结合。14.8 灭鼠药的快速检验灭鼠药的快速检验n磷化锌、敌鼠、毒鼠强、氟乙酰胺14.8 灭鼠药的快速检验灭鼠药的快速检验n磷化锌的检验n

27、1.硝酸银预试法n2.钼蓝法 三者合一三者合一n3.亚铁氰化钾法n敌鼠的检验 FeCl3n毒鼠强(四亚甲基二砜四氨)的检验 424、鼠没命、鼠没命、三步倒、闻到死、一扫光、三步倒、闻到死、一扫光 变色酸法:用硫酸分解为甲醛和二甲磺胺,甲醛与 变色酸在硫酸下生成紫红色化合物。二巯丙磺钠 n氟乙酰胺:采用纳氏试剂法,其原理是在碱性水溶液中氟乙酰胺水解成氟乙酸钠,同时释放出氨,氨与纳氏试剂生成红棕色沉淀。n乙酸胺n无水乙醇 5ml溶于 100ml葡萄糖液中、静脉滴入 14.9生物毒素快速检验生物毒素快速检验 人类至今已经发现的食物种类是很丰富的,人类至今已经发现的食物种类是很丰富的,这是人类在不断地

28、探索自然的过程中积累的成果,这是人类在不断地探索自然的过程中积累的成果,其中绝大多数是不含任何天然有害物质的,但也其中绝大多数是不含任何天然有害物质的,但也有少数含有天然有害物质。随着科学技术的发展,有少数含有天然有害物质。随着科学技术的发展,人们发现一些原来被认为是安全的食物事实上也人们发现一些原来被认为是安全的食物事实上也含有某种或某些天然有害的物质。含有某种或某些天然有害的物质。14.9生物毒素快速检验生物毒素快速检验n一、真菌毒素快速检验一、真菌毒素快速检验 胶体金免疫层析法(快速检测卡法)将样品提取液加入检测卡上的加样孔,检测液中的黄曲霉毒素B1(AFTB1)与金标垫上的金标抗体结合

29、形成复合物,若AFTB1在检测液中的浓度低于灵敏度值,未结合的金标抗体在检测区(T区)与固定在硝酸纤维素(NC)膜上的AFTB1-BSA偶联物结合,形成可见T线;若AFTB1在检测液中的浓度高于灵敏度值,金标抗体全部形成复合物,不会再与的AFTB1-BSA偶联物结合形成可见T线。未固定的复合物与对照区(C区)的二抗体形成对照线,表明检测卡有效。14.9生物毒素快速检验生物毒素快速检验n二、河豚毒素的快速检验 硫酸-重铬酸钾呈绿色反应、生物检验法n三、毒蕈的快速检验 TLC 1.1.动物肝脏中的毒素动物肝脏中的毒素 动物肝中主要的毒素是胆酸、牛磺胆酸和脱氧胆动物肝中主要的毒素是胆酸、牛磺胆酸和脱

30、氧胆酸。它们是中枢神经系统的抑制剂,其中牛磺胆酸的酸。它们是中枢神经系统的抑制剂,其中牛磺胆酸的毒性最强,脱氧胆酸次之。许多试验研究还发现,脱毒性最强,脱氧胆酸次之。许多试验研究还发现,脱氧胆酸对结肠癌、直肠癌的发生有促进作用。猪肝脏氧胆酸对结肠癌、直肠癌的发生有促进作用。猪肝脏中的胆酸含量较少,一般不会产生明显的毒性作用,中的胆酸含量较少,一般不会产生明显的毒性作用,但食用过多或食用时处理不当也会对人体健康产生一但食用过多或食用时处理不当也会对人体健康产生一定的危害。定的危害。一、常见的动物性天然毒素 2河豚毒素河豚毒素 河豚鱼是一种味道鲜美又含剧毒的鱼类。全球河豚鱼是一种味道鲜美又含剧毒的

31、鱼类。全球有有200种左右,我国有种左右,我国有70多种,广泛分布于各海区。多种,广泛分布于各海区。河豚鱼的肝、脾、胃、卵巢、卵子、睾丸、皮肤以河豚鱼的肝、脾、胃、卵巢、卵子、睾丸、皮肤以及血液均含有毒素,其中以卵和卵巢的毒性最大,及血液均含有毒素,其中以卵和卵巢的毒性最大,肝脏次之。一般品种的河豚鱼肌肉的毒性较低,但肝脏次之。一般品种的河豚鱼肌肉的毒性较低,但双斑圆鲸纯、虫纹圆纯、铅点圆纯肌肉的毒性较强。双斑圆鲸纯、虫纹圆纯、铅点圆纯肌肉的毒性较强。毒素含量的大小随着生长水域、品种及季节的不同毒素含量的大小随着生长水域、品种及季节的不同而不同。而不同。豚鱼中毒是世界上最严重的动物性食物中毒。

32、豚鱼中毒是世界上最严重的动物性食物中毒。河豚鱼河豚鱼 3 3螺类毒素螺类毒素 螺的种类很多,绝大多数食用安全性较高,螺的种类很多,绝大多数食用安全性较高,但少数种类如接缝香螺、间肋香螺、油螺、节棘但少数种类如接缝香螺、间肋香螺、油螺、节棘骨螺及蛎敌荔枝螺等含有四甲胺、骨螺毒素、千骨螺及蛎敌荔枝螺等含有四甲胺、骨螺毒素、千里酰胆碱、丙烯酰胆碱等有毒物质。里酰胆碱、丙烯酰胆碱等有毒物质。姓名姓名 福寿螺福寿螺(曾用名:大曾用名:大瓶螺瓶螺)物种物种 两栖淡水贝类软体生物产地产地 南美亚马逊流域罪行罪行 管圆线虫的从犯,并广泛传播广州管圆线虫病。二、常见的植物性天然毒素二、常见的植物性天然毒素 4

33、4氰苷氰苷 氰苷进人体内水解后产生氰苷进人体内水解后产生HCNHCN,从而具有较,从而具有较强的毒性。含有氰苷的食源性植物有木薯、豆类强的毒性。含有氰苷的食源性植物有木薯、豆类以及一些果树的种子如杏仁、桃仁、枇杷仁及亚以及一些果树的种子如杏仁、桃仁、枇杷仁及亚麻仁等。氰化物在酸性条件下可产生麻仁等。氰化物在酸性条件下可产生HCNHCN气体,气体,HCNHCN可使苦味酸试纸显红色,据此可对含有氰苷可使苦味酸试纸显红色,据此可对含有氰苷的物质进行定性检测。的物质进行定性检测。对人的致死量对人的致死量0.41mg/kg(体重体重)氰甙氰甙植物中的天然毒素:植物中的天然毒素:苦杏仁甙苦杏仁甙预防:预防

34、:1、勿生食、勿生食2、脱氰、脱氰 木薯、苦杏仁中毒木薯、苦杏仁中毒预防措施预防措施 去皮去皮 加水浸泡加水浸泡2天天 蒸煮蒸煮(打开锅盖(打开锅盖)毒素:氰甙毒素:氰甙 5 5红细胞凝集素红细胞凝集素 这是一类对红细胞具有凝集作用的蛋白质,这是一类对红细胞具有凝集作用的蛋白质,多为糖蛋白。含有红细胞凝集素的食源性植物有多为糖蛋白。含有红细胞凝集素的食源性植物有蓖麻、豆类及花生的种子。不同植物的红细胞凝蓖麻、豆类及花生的种子。不同植物的红细胞凝集素其毒性是不同的,以蓖麻凝集素的毒性最强,集素其毒性是不同的,以蓖麻凝集素的毒性最强,红细胞凝集素比较耐热,红细胞凝集素比较耐热,8080数小时不能使

35、之失数小时不能使之失活,活,100100需经过需经过1 h1 h可完全破坏其活性。可完全破坏其活性。凝聚素凝聚素植物中的天然毒素:植物中的天然毒素:预防:预防:烧熟煮透烧熟煮透 四季豆中毒四季豆中毒(豆角、菜豆、梅豆(豆角、菜豆、梅豆角、云豆,扁豆等)角、云豆,扁豆等)n食物:炒、煮不透的四季豆;食物:炒、煮不透的四季豆;n毒素:皂素和血球凝集素;毒素:皂素和血球凝集素;n预防措施:预防措施:n四季豆要熟透;四季豆要熟透;n凉拌四季豆,切丝煮沸凉拌四季豆,切丝煮沸1010分钟以上;分钟以上;皂皂 甙甙主要存在于菜豆、大豆中主要存在于菜豆、大豆中植物中的天然毒素:植物中的天然毒素:6.未煮熟豆浆

36、中毒未煮熟豆浆中毒n生豆浆毒素:生豆浆毒素:皂素;皂素;抗胰蛋白酶因子;抗胰蛋白酶因子;植物血球凝集素等;植物血球凝集素等;n预防措施:预防措施:文火维持煮沸文火维持煮沸5 5分钟;分钟;预防:预防:充分加热,烧熟煮透充分加热,烧熟煮透注意豆浆的注意豆浆的“假沸假沸”,“”,“假沸假沸”后持续加热不少于后持续加热不少于5min5min。7.龙葵碱龙葵碱 龙葵碱又名茄碱、马铃薯毒素、龙葵毒素,不溶于龙葵碱又名茄碱、马铃薯毒素、龙葵毒素,不溶于水,能溶于乙醇,与稀酸共热可发生分解。龙葵碱广水,能溶于乙醇,与稀酸共热可发生分解。龙葵碱广泛存在于马铃薯、番茄及茄子等中。马铃薯中龙葵碱泛存在于马铃薯、番

37、茄及茄子等中。马铃薯中龙葵碱的含量一般在的含量一般在0.01 0.1305,且随着贮存时间的,且随着贮存时间的增加而渐增,发芽的马铃薯其幼芽及芽眼部分的含量增加而渐增,发芽的马铃薯其幼芽及芽眼部分的含量可高达可高达0.30.5。人摄入。人摄入0.20.4 g龙葵碱即可引龙葵碱即可引起中毒。起中毒。(土豆,洋芋、山药蛋)(土豆,洋芋、山药蛋)茄碱茄碱植物中的天然毒素:植物中的天然毒素:症状:绿色、发芽症状:绿色、发芽预防:预防:1、龙葵素溶于水,吃前、龙葵素溶于水,吃前如把土豆削皮、挖芽、切如把土豆削皮、挖芽、切好,放在水中浸泡好,放在水中浸泡2小时小时以上;以上;2、遇醋酸易分解;、遇醋酸易分

38、解;8 8秋水仙碱秋水仙碱 秋水仙碱是鲜黄花菜秋水仙碱是鲜黄花菜(也称金针菜也称金针菜)中的一中的一种生物碱,其本身无毒,但当它进人人体后会转种生物碱,其本身无毒,但当它进人人体后会转化成一种剧毒物质:二秋水仙碱,后者对胃肠道、化成一种剧毒物质:二秋水仙碱,后者对胃肠道、泌尿系统、神经系统等具有毒性。成人一次摄人泌尿系统、神经系统等具有毒性。成人一次摄人0.10.10.2 mg0.2 mg秋水仙碱可引起中毒,摄入秋水仙碱可引起中毒,摄入3 320mg20mg可致死。食用鲜黄花菜时一定要用开水焯,浸泡可致死。食用鲜黄花菜时一定要用开水焯,浸泡后,再经充分烹饪,以防中毒。食用干黄花菜较后,再经充分

39、烹饪,以防中毒。食用干黄花菜较安全。安全。(萱草、金针莱)(萱草、金针莱)预防措施:预防措施:食用新鲜黄花菜要去其长柄;食用新鲜黄花菜要去其长柄;开水焯后再冷水浸泡开水焯后再冷水浸泡2 2小时;小时;开水焯后晒干食用;开水焯后晒干食用;9.9.毒蘑菇毒蘑菇 毒蘑菇所含有的有毒成分可分为生物碱类、毒蘑菇所含有的有毒成分可分为生物碱类、肽类及其他化合物,根据中毒的症状可分为胃肠肽类及其他化合物,根据中毒的症状可分为胃肠毒素、神经毒素、血液毒素、原浆毒素和其他毒毒素、神经毒素、血液毒素、原浆毒素和其他毒素五类。磨菇毒素的检验常用纸层析法或薄层层素五类。磨菇毒素的检验常用纸层析法或薄层层析法。析法。有

40、毒蕈类(俗称蘑菇)有毒蕈类(俗称蘑菇)白毒伞白毒伞豹斑毒伞豹斑毒伞 块鳞青毒伞块鳞青毒伞角鳞灰伞角鳞灰伞 灰托柄菇灰托柄菇 晶粒鬼伞晶粒鬼伞 在我国目前已经在我国目前已经鉴定的蕈类中,可食鉴定的蕈类中,可食用的近用的近300多种,有毒多种,有毒的近的近80多种,剧毒可多种,剧毒可致死的不到致死的不到10种。种。分布于我国吉林、西藏等地区。可能有毒,毒性因人而异,不可食用。分布于我国河北、吉林、江苏、福建、安徽、陕西、甘肃、湖北、湖南、山西、广西、广东、四川、云南、西藏等地。此蘑菇极毒。毒素为毒肽和毒伞肽。中毒症状主要以肝损害型为主,死亡率很高。大鹿花菌大鹿花菌白毒鹅膏菌白毒鹅膏菌毒蝇鹅膏菌毒蝇

41、鹅膏菌 分布于我国黑龙江、吉林、四川、西藏、云南等地。此蘑菇因可以毒杀苍蝇而得名。误食后约6小时以内发病,产生剧烈恶心、呕吐、腹痛、腹泻及精神错乱,出汗、发冷、肌肉抽搐、脉搏减慢、呼吸困难或牙关紧闭,头晕眼花,神志不清等症状。使用阿托品疗效良好。细环柄菇 分布于黑龙江、吉林、山西、江苏、云南、广东、香港、青海、新疆和西藏等地。可食用,但有人认为有毒,不宜随意采食。毛头鬼伞 半卵形斑褶菇半卵形斑褶菇毒粉褶菌毒粉褶菌介味滑锈伞 美丽粘草菇 粉红枝瑚菌粉红枝瑚菌 八招识别毒蘑菇八招识别毒蘑菇一看一看 生长地带生长地带 可食用的无毒蘑菇多生长在清洁的草地或可食用的无毒蘑菇多生长在清洁的草地或松树上,有

42、毒蘑菇往往生长在阴暗、潮湿的肮脏地带。松树上,有毒蘑菇往往生长在阴暗、潮湿的肮脏地带。二看二看 颜色颜色 有毒蘑菇菌面颜色鲜艳,有红、绿、墨黑、青有毒蘑菇菌面颜色鲜艳,有红、绿、墨黑、青紫等颜色,特别是紫色的往往有剧毒,采摘后易变色。紫等颜色,特别是紫色的往往有剧毒,采摘后易变色。三看三看 形状形状 无毒蘑菇的菌盖较平,伞面平滑,菌面上无轮,无毒蘑菇的菌盖较平,伞面平滑,菌面上无轮,下部无菌托,有毒的菌盖中央呈凸状,形状怪异,菌面厚下部无菌托,有毒的菌盖中央呈凸状,形状怪异,菌面厚实板硬,菌秆上有菌轮,菌托秆细长或粗长,易折断。实板硬,菌秆上有菌轮,菌托秆细长或粗长,易折断。四看四看 分泌物分

43、泌物 无毒的分泌物清亮如水(个别为白色),菌无毒的分泌物清亮如水(个别为白色),菌面撕断不变色;有毒的分泌物稠浓,呈赤褐色,撕断后在面撕断不变色;有毒的分泌物稠浓,呈赤褐色,撕断后在空气中易变色。空气中易变色。八招识别毒蘑菇八招识别毒蘑菇五闻五闻 气味气味 无毒蘑菇有特殊香味,有毒蘑菇有怪异味,如无毒蘑菇有特殊香味,有毒蘑菇有怪异味,如辛辣、酸涩、恶腥。辛辣、酸涩、恶腥。六测试六测试 在采摘野蘑菇时,可用葱在蘑菇盖上擦一下,如果在采摘野蘑菇时,可用葱在蘑菇盖上擦一下,如果葱变成青褐色,证明有毒,反之不变色则无毒。葱变成青褐色,证明有毒,反之不变色则无毒。七煮试七煮试 在煮野蘑菇时,放几根灯芯草

44、、些许大蒜或大米同在煮野蘑菇时,放几根灯芯草、些许大蒜或大米同煮,蘑菇煮熟,灯芯草变成青绿色或紫绿色则有毒,变黄煮,蘑菇煮熟,灯芯草变成青绿色或紫绿色则有毒,变黄者无毒;大蒜或大米变色有毒,没变色仍保持本色则无毒。者无毒;大蒜或大米变色有毒,没变色仍保持本色则无毒。八化学鉴别八化学鉴别 取采集或买回的可疑蘑菇,将其汁液取出,用取采集或买回的可疑蘑菇,将其汁液取出,用纸浸湿后,立即在上面加一滴稀盐酸或白醋,若纸变成红纸浸湿后,立即在上面加一滴稀盐酸或白醋,若纸变成红色或蓝色的则有毒。色或蓝色的则有毒。复习内容n化学性食物中毒n化学性食物中毒的特点n格氏法检测亚硝酸盐的基本原理 n处理急性氰化物类物质中毒n间苯二酚法检验敌百虫和敌敌畏的原理人有了知识,就会具备各种分析能力,明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书,广泛阅读,古人说“书中自有黄金屋。”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识,培养逻辑思维能力;通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平,培养文学情趣;通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。有许多书籍还能培养我们的道德情操,给我们巨大的精神力量,鼓舞我们前进。

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