常见微生物性食物中毒课件.ppt

1、1前言前言 常见细菌性食物中毒常见细菌性食物中毒 沙门氏菌属（鼠伤寒鼠伤寒 猪伤寒猪伤寒 肠炎肠炎）、副溶血性弧菌（嗜盐菌）、肉毒梭菌、葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）、致泻性大肠埃希菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽孢杆菌、志贺氏菌、单增李斯特菌、变形杆菌、椰毒假单孢菌酵米面亚种、其他致病性弧菌（河弧菌、创伤弧菌等）。常见霉菌性食物中毒常见霉菌性食物中毒 霉变谷物（黄曲霉：黄曲霉毒 雪腐镰刀菌：脱氧雪腐镰刀菌稀醇）、霉变甘蔗（节菱孢属：3-硝基丙酸）2一、沙门氏菌属食物中毒一、沙门氏菌属食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品沙门菌属6-7

2、2h（一般12-36h）恶心、呕吐、腹痛、腹泻，黄绿色水样便，便中有时带脓血和粘液，高热，大于38，重者有寒战、惊厥、抽搐、昏迷食品、呕吐物或粪便中检出血清学型别相同的沙门菌预增菌：缓冲蛋白胨水（BPW）增菌：四硫磺酸钠煌绿(TTB)、亚硒酸盐胱氨酸(SC)分离特征：亚硫酸铋（BS）琼脂上菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色,菌落周围培养基可呈黑色或棕色;有些菌株形成灰绿色的菌落,周围培养基不变。HE琼脂上蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全黑色。木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂上菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全

3、部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心。三糖铁琼脂：斜面产碱（K）底层产酸（A）产气+（-）硫化氢+（-）血清学鉴定：多价菌体抗原(O)鉴定，多价鞭毛抗原(H)鉴定 分型：被A-F多价O 血清凝集者,依次用O4;O3;O10;O7;O8;O9;O2和O11因子血清做凝集试验。属于A-F各O 群的常见菌型,依次用H 因子血清检查第1相和第2相的H 抗原。用Vi因子血清检查，已知具有Vi抗原的菌型有:伤寒沙门氏菌,丙型副伤寒沙门氏菌,都柏林沙门氏菌。肉、禽、蛋、鱼、奶类及其制品等3沙门氏菌检验程序沙门氏菌检验程序4二、二、副溶血性弧菌副溶血性弧菌食物中毒食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期

4、临床特点临床特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品副溶血性弧菌（嗜盐菌）8-12h恶心、呕吐次数不多、腹痛，多在脐部，呈阵发性胀痛或绞痛，腹泻，无里急后重，水样或洗肉水样便，少数便中有粘液，可能发热38-40，重者脱水、虚脱、血压下降。病程2-3d食品、容器、呕吐物、粪便中检出生物学特征或血清型一致的副溶血性弧菌增菌：1:10 样品匀液（3%NaCl碱性蛋白胨水）于36 1 培养8 h18 h。分离：典型的副溶血性弧菌在硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖（TCBS）琼脂上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落，用接种环轻触，有类似口香糖的质感，直径2 mm3 mm。纯培养：

5、挑取3 个或以上可疑菌落，划线接种3%NaCl胰蛋白胨大豆琼脂平板。初步鉴定：氧化酶试验阳性，涂片镜检革兰氏阴性，呈棒状、弧状、卵圆状等多形态，无芽胞，有鞭毛。3%NaCl三糖铁琼脂中的反应为底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色加深，有动力。嗜盐性试验无NaCl和10%NaCl的胰胨水中不生长或微弱生长，在6%NaCl和8%NaCl的胰胨水中生长旺盛。确定鉴定：3%NaCl甘露醇试验（+）、3%NaCl赖氨酸脱羧酶试验（+）、3%NaClMR-VP 培养基（-）；3%NaCl三糖铁琼脂隔夜培养物进行-半乳糖苷酶(ONPG)试验（-）。选做项目:血清学分型、神奈川试验（在我妻氏琼脂上测试是

6、否存在特定溶血素。神奈川试验阳性结果与副溶血性弧菌分离株的致病性显著相关。阳性结果为菌落周围呈半透明环的 溶血。）海产品、卤菜、咸菜等5副溶血性弧菌检验程序副溶血性弧菌检验程序6三、三、肉毒梭菌肉毒梭菌食物中毒食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品肉毒梭菌1h-7d头晕、无力、视力模糊、复视、眼睑下垂、咀嚼无力、张口或伸舌困难、咽喉阻塞感、饮水发呛、吞咽困难、呼吸困难、头颈无力、垂头等。病死率较高食品、血液、粪便中检出肉毒毒素，食品检出肉毒梭菌样品制备：液态5mL，固态与半固态25g+25mL(或50mL)明胶磷酸盐缓冲液。

7、离心、胰酶处理制备毒素液。1.肉毒毒素检测 分别取离心上清液和胰酶处理上清液腹腔注射小鼠3只,每只0.5mL,观察和记录小鼠48h内的中毒表现。典型肉毒毒素中毒症状多在24h内出现,通常在6h内发病和死亡,其主要表现为竖毛、四肢瘫软,呼吸困难,呈现风箱式呼吸、腰腹部凹陷、宛如峰腰,多因呼吸衰竭而死亡。若在24h后发病或死亡,应仔细观察小鼠症状,必要时浓缩上清液重复试验,以排除肉毒毒素中毒。若小鼠出现猝死(30min内)导致症状不明显时,应将毒素上清液进行适当稀释,重复试验。确证试验：上清液或(和)胰酶处理上清液的毒素试验阳性者,取相应试验液3份,每份0.5mL,其中第一份加等量多型混合肉毒毒素

8、诊断血清,混匀,37孵育30min;第二份加等量明胶磷酸盐缓冲液,混匀后煮沸10min;第三份加等量明胶磷酸盐缓冲液,混匀。将三份混合液分别腹腔注射小鼠各两只,每只0.5mL,发酵豆、谷类制品（面酱、臭豆腐）、肉制品、低酸性罐头等7三、三、肉毒梭菌肉毒梭菌食物中毒食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品肉毒梭菌1h-7d头晕、无力、视力模糊、复视、眼睑下垂、咀嚼无力、张口或伸舌困难、咽喉阻塞感、饮水发呛、吞咽困难、呼吸困难、头颈无力、垂头等。病死率较高。食品、血液、粪便中检出肉毒毒素，食品检出肉毒梭菌观察96h内小鼠的中毒和死

9、亡情况。结果判定:若注射第一份和第二份混合液的小鼠未死亡,而第三份混合液小鼠发病死亡,并出现肉毒毒素中毒的特有症状,则判定检测样品中检出肉毒毒素。2.肉毒梭菌检验 增菌培养与检出试验：庖肉培养基4支和TPGY 肉汤管2支,隔水煮沸10min15min,排除溶解氧,迅速冷却,切勿摇动,在TPGY 肉汤管中缓慢加入胰酶液至液体石蜡液面下肉汤中,每支1 mL,制备成TPGYT。按要求进行培养。肉毒梭菌培养物为产气、肉汤浑浊(庖肉培养基中A 型和B型肉毒梭菌肉汤变黑)、消化或不消化肉粒、有异臭味。取增菌培养物阳性管的上清液进行毒素检出和确证试验，阳性结果可证明样品中有肉毒梭菌存在。分离与纯化培养：取增

10、菌培养物和经乙醇处理的增菌液分别划线接种至卵黄琼脂平板,35 1 厌氧培养48h。肉毒梭菌菌落隆起或扁平、光滑或粗糙,易成蔓延生长,边缘不规则,在菌落周围形成乳色沉淀晕圈(E型较宽,A 型和B型较窄)，发酵豆、谷类制品（面酱、臭豆腐）、肉制品、低酸性罐头等8三、三、肉毒梭菌肉毒梭菌食物中毒食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品肉毒梭菌1h-7d头晕、无力、视力模糊、复视、眼睑下垂、咀嚼无力、张口或伸舌困难、咽喉阻塞感、饮水发呛、吞咽困难、呼吸困难、头颈无力、垂头等。病死率较高。食品、血液、粪便中检出肉毒毒素，食品检出肉毒梭菌

11、在斜视光下观察,菌落表面呈现珍珠样虹彩,这种光泽区可随蔓延生长扩散到不规则边缘区外的晕圈。菌株纯化培养,在分离培养平板上选择5个肉毒梭菌可疑菌落,分别接种卵黄琼脂平板,351,厌氧培养48h,按5.3.2.3观察菌落形态及其纯度。鉴定试验：染色镜检为革兰氏阳性粗大杆菌、芽胞卵圆形、大于菌体、位于次端,菌体呈网球拍状。毒素基因检测（PCR检测）阴性对照和空白对照均未出现条带,阳性对照出现预期大小的扩增条带，判定本次PCR检测成立;待测样品出现预期大小的扩增条带,判定为PCR结果阳性，,待测样品未出现预期大小的扩增条带,判定PCR结果为阴性。菌株产毒试验 将PCR阳性菌株或可疑肉毒梭菌菌株接种庖肉

12、培养基或TPGYT 肉汤(用于E型肉毒梭菌),厌氧培养5d，进行毒素检测和(或)定型试验,毒素确证试验阳性者,判定为肉毒梭菌,根据定型试验结果判定肉毒梭菌型别。3.结果报告：（1）报告25g(mL)样品中检出或未检出肉毒毒素，（2）报告25g(mL)样品中检出某型肉毒毒素。（3）报告样品中检出或未检出肉毒梭菌或检出某型肉毒梭菌。发酵豆、谷类制品（面酱、臭豆腐）、肉制品、低酸性罐头等9肉毒梭菌及肉毒毒素检验程序肉毒梭菌及肉毒毒素检验程序10四、葡萄球菌食物中毒四、葡萄球菌食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品葡萄球菌一般2-4

13、h，不超过6h突然恶心、反复剧烈呕吐、上腹痉挛性疼痛、腹泻呈水样便，一般不发热，常因剧烈呕吐导致失水和休克。病程1-3d食品中检出葡萄球菌肠毒素，食品、呕吐物和粪便培养检出金黄色葡萄球菌增菌：金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。分离：增菌后的培养物,分别划线接种于血平板36 1 18h4h，Baird-Parker平板361 24h48h。初步鉴定：Baird-Parker平板上呈圆形,表面光滑、凸起、湿润、菌落直径为2mm3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰带。接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感。有时可见到不分解脂肪

14、的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。在血平板上,形成菌落较大,圆形、光滑凸起、湿润、金黄色(有时为白色),菌落周围可见完全透明溶血圈。确证鉴定:革兰氏染色阳性球菌,排列呈葡萄球状,无芽胞,无荚膜,直径约为0.5m1m。血浆凝固酶试验:5个可疑菌落(小于5个全选),分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面,361培养18h24h。新鲜配制兔血浆0.5mL,放入小试管中,再加入BHI培养物0.2mL0.3mL,振荡摇匀,置361温箱或水浴箱内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固)或凝固体积大于原体积的一半,被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作

15、为对照。葡萄球菌肠毒素的检验(选做)奶、蛋及其制品、糕点、熟肉等11金黄色葡萄球菌定性检验程序金黄色葡萄球菌定性检验程序12五、致泻性大肠埃希菌性食物中毒五、致泻性大肠埃希菌性食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品致泻性大肠埃希菌6-72h产肠毒素型ETEC：水样腹泻、腹痛、恶心、低热；肠道侵袭型EIEC：发热、剧烈腹痛、水样腹泻、粪便中有少量粘液和血，与痢疾相似；肠道致病型EPEC：发热、呕吐、腹泻，粪便中有大量粘液但无血，有类似感冒症状；肠道出血型EHEC：潜伏期长，3-10d，突发性腹部痉挛，类似阑尾炎的疼痛，水样便继

16、而转为血性腹泻，可引起多器官损害，病死率高；肠聚集性粘附型EAEC：成年人中度腹泻，病程1-2d、婴幼儿为2周以上的持续性腹泻食品、呕吐物和粪便检出血清型相同的致泻性大肠埃希菌增菌：1：10样品匀液（营养肉汤）于361 6h。取10L,接种于30mL肠道菌增菌肉汤管内,421 18h。分离：36 1 18h-24h 在MAC琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为砖红色至桃红色,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色;在EMB琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为中心紫黑色带或不带金属光泽,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色。生化试验：TSI斜面产酸或不产酸,底层产酸,靛基质阳性,H2S阴性和尿素酶阴性的培养物为大肠埃

17、希氏菌。TSI斜面底层不产酸,或H2S、KCN、尿素有任一项为阳性的培养物,均非大肠埃希氏菌。大肠埃希氏菌为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阴性。PCR 确认试验：取生化反应符合大肠埃希氏菌特征的菌落进行PCR确认试验。熟肉制品、蛋及其制品、奶、奶酪、蔬菜、水果、饮料等13致泻大肠埃希氏菌检验程序致泻大肠埃希氏菌检验程序14六、产气荚膜梭菌食物中毒六、产气荚膜梭菌食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床临床特点特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品产气荚膜梭菌8-24h腹痛和腹泻食品、粪便检出产气荚膜梭菌，粪便检出产气荚膜梭菌毒素样品应尽快检验，若不能及时检验，可在2 5 保存；如

18、8 h 内不能进行检验，应以无菌操作称取25 g（mL）样品加入等量缓冲甘油-氯化钠溶液（液体样品应加双料），并尽快至于-60 低温冰箱中冷冻保存或加干冰保存。培养：检品（0.1%蛋白胨水稀释，同稀释度）1mL置于个平皿，倾注冷却至50 的TSC琼脂，充分混匀，静置凝固后，正置于厌氧培养装置内，36 1 培养20 h24 h。典型的产气荚膜梭菌在TSC 琼脂平板上为黑色菌落。确证试验：从单个平板上任选5 个（小于5 个全选）黑色菌落，分别接种到FTG 培养基，36 1 厌氧培养18 h24 h。培养液涂片革兰氏染色镜检并观察其纯度。生长旺盛的FTG 培养液1 mL 接种于含铁牛乳培养基，在46

19、 0.5 水浴中培养2 h 后，每小时观察一次有无“暴烈发酵”现象，该现象的特点是乳凝结物破碎后快速形成海绵样物质，通常会上升到培养基表面。5 h 内不发酵者为阴性。产气荚膜梭菌发酵乳糖，凝固酪蛋白并大量产气，呈“暴烈发酵”现象，但培养基不变黑。用接种环（针）取FTG 培养液穿刺接种缓冲动力-硝酸盐培养基，于36 1 培养24 h。产气荚膜梭菌无动力，能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。用接种环（针）取FTG 培养液穿刺接种乳糖-明胶培养基，于36 1 培养24 h，观察结果。产气荚膜梭菌能发酵乳糖，使明胶液化。肉类、水产品、熟食、奶等15产气荚膜梭菌检验程序产气荚膜梭菌检验程序16七、蜡样芽孢杆菌食物

20、中毒七、蜡样芽孢杆菌食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特临床特点点诊断参诊断参考考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品蜡样芽孢杆菌8-16h呕吐型：恶心、呕吐伴头晕、四肢无力等；腹泻型：腹痛和腹泻为主。病程8-36h食品检出蜡样芽孢杆菌，呕吐物或粪便中检出相同型菌株样品制备：制成1：10系列的磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水稀释液。样品接种：根据对样品污染状况的估计，选择2 3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），以0.3mL、0.3 mL、0.4 mL 接种量分别移入三块MYP 琼脂平板，然后用无菌L 棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。分离：MYP 琼脂平板上，典型菌

21、落为微粉红色(表示不发酵甘露醇)，周围有白色至淡粉红色沉淀环（表示产卵磷脂酶）。纯培养：每个平板挑取至少5 个典型菌落（小于5 个全选），分别划线接种于营养琼脂平板做纯培养，30 1 培养24 h2 h，典型菌落为灰白色，偶有黄绿色，不透明，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，边缘常呈扩展状，直径为4 mm10 mm。确定鉴定：蜡样芽胞杆菌为革兰氏阳性芽胞杆菌，大小为（1 m1.3 m）（3 m5 m），芽胞呈椭圆形位于菌体中央或偏端，不膨大于菌体，菌体两端较平整，短链或长链状排列。生化鉴定：过氧化氢酶（+）、动力（+/-）、硝酸盐还原（+）、酪蛋白分解（+）、溶菌酶耐性（+）、卵黄反应（+）、V-P

22、（+）、甘露醇产酸（-）、葡萄糖利用(厌氧)（+）、根状生长（-）、TSSB琼脂溶血（羊红细胞）（+）、蛋白质毒素结晶（-）。剩米饭、剩菜、凉拌菜、奶、肉、豆制品等17蜡样芽胞杆菌平板计数法检验程序蜡样芽胞杆菌平板计数法检验程序18八、八、单增李斯特单增李斯特菌食物中毒菌食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品单增李斯特菌8-24h初期为一般胃肠炎症状，重者可表现为败血症、脑膜炎等，有时引起心内膜炎，孕妇可发生流产或死胎食品和粪便检出单核细胞增多性李斯特菌增菌：一次增菌李氏增菌肉汤LB1；二次增菌李氏增菌肉汤LB2。分离：取L

23、B2 二次增菌液划线接种于李斯特氏菌显色平板和PALCAM 琼脂平板,36 1 2448h，典型菌落在PALCAM 琼脂平板上为小的圆形灰绿色菌落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落有黑色凹陷;在李斯特氏菌显色平板上菌落显蓝色，周围有一不透明环。初筛：挑取35个典型或可疑菌落,分别接种木糖、鼠李糖发酵管，同时在TSA-YE平板上划线，36 1 1824h，然后选择木糖阴性、鼠李糖阳性的纯培养物继续进行鉴定。鉴定(或选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物鉴定系统等)：镜检革兰氏阳性短杆菌，生理盐水制成菌悬液,在油镜或相差显微镜下观察,该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。半固体或SIM 动力培养基上方呈伞状生长（

24、25 30 8h）。过氧化氢酶阳性反应的菌落继续做生化鉴定，溶血反应（+）、葡萄糖（+）、麦芽糖（+）、MR-VP（+/+）、甘露醇（）、鼠李糖（+）、木糖（）、七叶苷（+）禽蛋类、奶、肉及期制品、水果、蔬菜等19单核细胞增生李斯特氏菌定性检验程序单核细胞增生李斯特氏菌定性检验程序20九、九、变形杆变形杆菌食物中毒菌食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品变形杆菌5-18h上腹部刀绞样痛和急性腹泻为主，伴有恶心、呕吐、头痛、发热（38-39）。病程1-3d食品、粪便检出血清型相同的变形杆菌；病人急性期和恢复期（12-15d后）

25、的血清凝集效价有4倍增高增菌：样品接种于GN肉汤，36士1培养24h。分离培养：接种于EMB平板或SS平板，置37培养1824h，观察菌落形态特征。典型变形杆菌在EMB培养基上为无色透明，部分蔓延生长；在SS培养平板上形成单个菌落，有的菌落边缘呈扩散状，有粘性，打开平皿时有臭味。将可疑菌落转种三糖铁斜面，37培养24h观察结果。初步鉴定：将三糖铁培养基上乳糖反应阴性、硫化氢阳性或阴性的菌株接种尿素和苯丙氨酸鉴定培养基，37培养24h，变形杆菌二者均为阳性。变形杆菌易与沙门氏菌混淆，但变形杆菌能够水解尿素。生化试验：根据生化结果，判定种属或种群。也可用API20E和全自动微生物分析系统进行生化鉴

26、定。动物性食品和豆制品、凉拌菜等21变形杆菌检验程序变形杆菌检验程序计数TSI，37,24h检 样 选择性SS、EMB培养基37,1824h报告血清学或动物实验生化实验WS/T 9199622十、十、椰毒假单孢菌酵米面亚种椰毒假单孢菌酵米面亚种食物中毒食物中毒致病致病原原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参诊断参考考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品椰毒假单孢菌酵米面亚种2-24h上腹部不适，恶心、呕吐（呕吐物为胃内容物，重者呈咖啡色），轻微腹泻、头晕、全身无力等；重者出现黄疸、肝大、皮下出血、呕血、血尿、少尿、意识不清、烦躁不安、惊厥、抽搐、休克，一般无发热。病死率极高，达40%-1

27、00%食品检出椰毒假单孢菌酵米面亚种或检出其代谢毒物米酵菌酸增菌：GVC增菌液36148h。分离：PDA平板361 24-48h，菌落12mm，灰白色或乳白色，光滑、湿润、边缘整齐。培养48h后，中心有凸起，呈草帽状，菌落周围有黄绿色素扩散到基质中。可疑菌落做革兰染色和氧化酶试验，G、氧化酶（）的菌落再点种卵黄琼脂平板和SS琼脂平板，361分别培养48和24h。卵黄琼脂平板上菌落表面光滑、湿润，48h后，菌落周围形成乳白色混浊环，斜射日光下可见环的表面呈虹彩现象；SS琼脂平板上不生长或微弱生长。纯化：从卵黄琼脂平板上挑取卵黄脂酶阳性，并带有虹彩环的单个菌落，接种PDA斜面，361培养24h。生

28、化试验：HughLeifson培养基、蛋白胨水、缓冲蛋白胨水、西檬氏柠檬酸盐、糖发酵管及苯丙氨酸。产毒培养：确证菌株接种PDA斜面，36124h，然后制成粗毒素。动物试验：灌胃体重为1820g的小白鼠3只，观察7天。灌胃后20min24h内发病、死亡。主要症状为竖毛，萎靡不振，继而躁动，行步蹒跚、肢体麻痹、瘫软、抽搐，呈角弓反张状，呼吸急促、死亡。玉米面制品、银耳、淀粉类制品等23椰毒假单孢菌酵米面亚种检验程序椰毒假单孢菌酵米面亚种检验程序24十一、志贺氏菌性食物中毒十一、志贺氏菌性食物中毒致病致病原原潜伏期潜伏期临床特点临床特点诊断参诊断参考考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品志贺

29、氏菌10-24h剧烈腹痛、呕吐和频繁地腹泻、水样便混有血液或粘液，并有里急后重，寒战、高热，体温达40，重者会出现痉挛食品、呕吐物分离出志贺氏菌，恢复期血清凝集效价比初期明显升高增菌：志贺氏菌增菌肉汤（新生霉素）41.5，厌氧培养16 20 h。分离：36 1 20 24 h，宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。MAC 琼脂上无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐；XLD 琼脂上粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐；志贺氏菌显色培养基上显白色或无色，有些宋内氏志贺氏菌有蓝色中心。初步生化：种TSI、半固体和营养琼脂斜面各1管。三糖铁琼脂中斜面产碱、

30、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力。生化试验：-半乳糖苷酶、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶以及水杨苷和七叶苷的分解试验，除宋内氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌13 型的鸟氨酸阳性;宋内氏菌和痢疾志贺氏菌1 型，鲍氏志贺氏菌13 型的-半乳糖苷酶为阳性以外，其余生化试验志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。血清学鉴定：志贺氏菌属主要有菌体（O）抗原。菌体O 抗原又可分为型和群的特异性抗原。含水量高的食品、熟食品，冷盘和凉拌菜等25志贺氏菌检验程序志贺氏菌检验程序26十二、十二、其他致病性弧其他致病性弧菌食物中毒菌食物中毒致病致病原

31、原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品其他致病性弧菌（河弧菌、创伤弧菌等）24-48h恶心、呕吐、水样便、腹泻，创伤弧菌还有发热、畏寒、肌肉痛、血压下降、血小板减少等食品、容器、呕吐物和粪便检出生物学特征或血清型相同的致病性弧菌；分离到的弧菌对实验动物具有毒性或与病人血清有抗原抗体反应方法同嗜盐性弧菌河弧菌生化特性：氧化酶（+）、赖氨酸（）、精氨酸（+）、鸟氨酸（）、明胶（+）、尿酶（）、VP（）、42生长（V）、蔗糖（+）、D纤维二糖（+）、乳糖（）、阿拉伯糖（+）、D甘露糖（+）、D甘露醇（+）、ONPG（+）嗜盐性试验（NaCl%）0（

32、）、3（+）、6（+）、8（V）、10（）。创伤弧菌生化特性：氧化酶（+）、赖氨酸（+）、精氨酸（）、鸟氨酸（+）、明胶（+）、尿酶（）、VP（）、42生长（+）、蔗糖（）、D纤维二糖（+）、乳糖（+）、阿拉伯糖（）、D甘露糖（+）、D甘露醇（V）、ONPG（+），嗜盐性试验（NaCl%）0（）、3（+）、6（+）、8（）、10（）。含水量高的食品、熟食品，冷盘和凉拌菜等27十三、十三、霉变谷物霉变谷物食物中毒食物中毒致病原致病原潜伏潜伏期期临床特点临床特点诊断诊断参考参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品霉变谷物（黄曲霉毒和脱氧雪腐镰刀菌稀醇）1h内短时间一过性的恶心、呕吐、腹痛、

33、腹泻、头晕、头痛、乏力，可有发热、黄疸、嗜睡。一般1d到1周恢复，黄曲霉毒素中毒的重症病人在2-3周内可出现腹水、下肢浮肿、肝脾肿大，甚至很快死亡食物检出黄曲霉毒素或脱氧雪腐镰刀菌稀醇；血、尿检出黄曲霉毒素M1(1)黄曲霉：查氏琼脂上生长迅速，菌落致密丝绒状,有时稍现絮状或中央部分呈絮状,平坦或现辐射状至不规则的沟纹;分生孢子结构多,颜色为黄绿至草绿色,初期较淡,老后稍深,大多近于浅水芹绿色，有的菌株有菌核。菌落反面无色至淡褐色,产生菌核的菌株,在形成菌核处的反面显现黑褐色斑点。(2)雪腐镰刀菌：马铃薯-葡萄糖琼脂上呈白色、浅桃色、粉红色至杏黄色，培养基稍呈浅黄色,菌丝呈稀疏棉絮状、蛛丝状。在

34、4发育良好。分生孢子纺锤镰刀形至香肠形,弯曲,两端渐变窄,末端钝圆,无脚胞。无厚垣孢子,子座小,透明,呈粉红至砖红色,后期变为革褐色。子囊阶段:雪腐小赤壳。主要分布在水稻上,还可在玉蜀黍、甘蔗及橘柑、棉、洋葱等植物的根、茎、穗、种子及土壤中,灭菌秸秆上低于18培养10d15d,子囊壳生长茂盛,可产生镰刀菌烯酮-X、雪腐镰刀菌烯醇和二乙酸雪腐镰刀菌烯醇等有毒代谢产物。各类谷物（玉米、花生、大米、麦等）28十四、十四、霉变甘蔗霉变甘蔗食物中毒食物中毒致病原致病原潜伏期潜伏期临床特点临床特点诊断参考诊断参考实验室检查实验室检查常见中常见中毒食品毒食品霉变甘蔗（3-硝基丙酸）10min至10h初期呕吐

35、、头晕、视力模糊，进而眼球向一侧凝视，阵发性抽搐，抽搐时四肢强直、屈曲、内旋、手呈鸡爪状，继而昏迷，甚至死亡。脑电图呈弥散性变化，CT检查可见双侧豆状核区密度减低。重症多为儿童，重者1-3d内死亡，幸存者常留有终生残疾。进食霉变甘蔗史，吃剩甘蔗中分离出节菱孢和3-硝基丙酸毒素节菱孢属：在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上,菌落生长蔓延,5d6d直径达9cm,白色或略带黄色絮状,背面(基质菌丝)微黄至深褐。有的菌落中间呈褐色,背面黑褐色,有的菌落带粉红色,有的菌丝较稀疏,并具有大量黑色孢子团。孢子褐色,光滑,双凸镜形。有的菌株具有腊肠形孢子,褐色、光滑。该属的甘蔗节菱孢和蔗生节菱孢中的一些菌株能产生3-硝基丙酸。甘蔗29