1、第二十章第二十章脑脊液标本的细菌学检验脑脊液标本的细菌学检验1.概述概述正常人体脑脊液是无菌的正常人体脑脊液是无菌的细菌性脑膜炎属于临床医学急症细菌性脑膜炎属于临床医学急症引起脑脊液感染的常见菌有引起脑脊液感染的常见菌有革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阳性菌革兰阳性菌2引起脑脊液感染的常见菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阴性菌革兰阴性菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌肠杆菌科肠杆菌科非发酵菌非发酵菌类杆菌属类杆菌属多杀巴斯德菌多杀巴斯德菌3引起脑脊液感染的常见菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(1)金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡
2、萄球菌肺炎链球菌肺炎链球菌B群链球菌群链球菌A群链球菌群链球菌肠球菌属肠球菌属消化链球菌消化链球菌4引起脑脊液感染的常见菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(2)结核分枝杆菌结核分枝杆菌产单核李斯特菌产单核李斯特菌炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌5引起脑脊液感染的常见菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌革兰阳性菌(3)新型隐球菌新型隐球菌假丝酵母菌属假丝酵母菌属6标本的采集和运送标本的采集和运送标本采集指征标本采集指征发热发热头痛头痛恶心恶心呕吐呕吐颈项强直和反射增强颈项强直和反射增强7标本的采集和运送标本的采集和运送采集方法采集方法经腰椎穿刺获得经腰椎穿刺获得从从Omm
3、aya管采集管采集8标本的采集和运送标本的采集和运送标本的运送标本的运送采集标本后在常温下采集标本后在常温下立即送检立即送检不可置冰箱冷藏或低不可置冰箱冷藏或低温保存温保存9标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收标本的验收培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染培养瓶上是否有标签培养瓶上是否有标签培养瓶上的标签与申请单是否相符培养瓶上的标签与申请单是否相符脑脊液是否足量，并在申请单上注明标本脑脊液是否足量，并在申请单上注明标本量量10革兰染色革兰染色11标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（标本的显微镜检查
4、（2）抗酸染色抗酸染色4000rpm离心离心30min，沉淀物涂片抗酸染，沉淀物涂片抗酸染色或金胺色或金胺“O”染色染色12抗酸染色抗酸染色13标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（标本的显微镜检查（3）墨汁染色墨汁染色3000rpm离心离心1015min，沉淀物涂片墨汁，沉淀物涂片墨汁染色染色14墨汁染色墨汁染色15标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（1）需氧培养需氧培养血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯或血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯或EMB、营养、营养肉汤肉汤510%CO2孵育孵育16标本的验收、
5、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（2）厌氧培养厌氧培养血琼脂、血琼脂、PEA或或CAN、厌氧肉汤、厌氧肉汤厌氧气体孵育厌氧气体孵育17标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（3）真菌培养真菌培养沙保弱葡萄糖琼脂沙保弱葡萄糖琼脂 30C C孵育孵育 18标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（4）选取平板上生长的菌落作革兰染选取平板上生长的菌落作革兰染色，根据染色结果作细菌的初步色，根据染色结果作细菌的初步分群分
6、群根据初步分群的结果进行种的鉴定根据初步分群的结果进行种的鉴定19标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（标本的培养、分离和鉴定（5）也可根据革兰染色结果直接将分离株种也可根据革兰染色结果直接将分离株种入各种商业鉴定板进行鉴定入各种商业鉴定板进行鉴定20报告及解释报告及解释阳性结果报告阳性结果报告初级报告初级报告涂片或培养阳性应立即电话报告涂片或培养阳性应立即电话报告最终报告最终报告报告细菌种属名报告细菌种属名报告标准抗生素敏感试验结果报告标准抗生素敏感试验结果 21报告及解释报告及解释阴性结果报告阴性结果报告普通培养两天普通培养两天48h培养未见细菌生长培养未见细菌生长疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间22
