分子生物学实验室安全常识课件.ppt

1、实验室安全管理实验室安全管理内容介绍 分子生物学实验安全常识分子生物学实验安全常识1.1 实验室电、气、水、火1.2 化学试剂的安全使用1.3 微生物的危害及处理1.4 紫外线辐射的危害及防护分子生物学实验安全常识v1.1 实验室电、气、水、火实验室电、气、水、火 连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑料绞线。电话线可用普通的塑料绞线。料绞线。电话线可用普通的塑料绞线。严禁私拉乱扯。严禁私拉乱扯。接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性及安全系数。接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性及安全系数。维

2、修：仪器出现故障时，应切断电源，立即向实验室负责人报告。维修仪维修：仪器出现故障时，应切断电源，立即向实验室负责人报告。维修仪器时必须切断电源，方可拆机修理。器时必须切断电源，方可拆机修理。墙电：不得私自对墙电进行维修、改造，该工作由实验室负责人进行计划，墙电：不得私自对墙电进行维修、改造，该工作由实验室负责人进行计划，由相关专业人员进行维修、改造。由相关专业人员进行维修、改造。检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。触电：断电或触电：断电或绝缘脱离绝缘脱离 急救急救电灯：进入实验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开实验室时若无电灯：进入实验室，有需要时打

3、开电源开关、排气扇；离开实验室时若无人请关闭电灯及排气扇。人请关闭电灯及排气扇。空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于27；每天下班；每天下班时实验室负责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！时实验室负责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！电！电！危危险险节节约约分子生物学实验安全常识v1.1 实验室电、气、水、火实验室电、气、水、火气！气！搬运搬运：搬运或转动钢瓶时，不得用手执着开关阀移动。：搬运或转动钢瓶时，不得用手执着开关阀移动。使用使用：按气瓶的类别选用减压器，安装时螺扣应拧紧，并检漏。：按

4、气瓶的类别选用减压器，安装时螺扣应拧紧，并检漏。开启钢瓶：逆时针方向为开；先开总阀，后开减压阀。开启钢瓶：逆时针方向为开；先开总阀，后开减压阀。关闭钢瓶：顺时针方向为关；先关总阀，后关减压阀。关闭钢瓶：顺时针方向为关；先关总阀，后关减压阀。气嘴保护：用死扳手夹紧气嘴后再开总阀。气嘴保护：用死扳手夹紧气嘴后再开总阀。安全安全：气瓶内的气体不可用尽。：气瓶内的气体不可用尽。惰性气体：应剩余惰性气体：应剩余0.05MPa以上压力的气体。以上压力的气体。可燃气体：应剩余可燃气体：应剩余0.2Mpa以上压力的气体。以上压力的气体。氢氢 气：应剩余气：应剩余2.0MPa以上压力的气体。以上压力的气体。存放

5、存放：分类分处存放：分类分处存放 直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动；直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动；一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。分子生物学实验安全常识v1.1 实验室电、气、水、火实验室电、气、水、火水！水！上上 水：水龙头或水管漏水时，应及时向实验室负责人报告，以便及时维水：水龙头或水管漏水时，应及时向实验室负责人报告，以便及时维修。修。下下 水：水：水池内不得倒入培养基、琼脂糖胶等凝胶物质；清洗废液缸时请水池内不得倒入培养基、琼脂糖胶等凝胶物质；清洗

6、废液缸时请注意将其中的固体物质倒入到垃圾桶后才能冲洗，特别是注意将其中的固体物质倒入到垃圾桶后才能冲洗，特别是tip和和eppendorf管。管。下水道排水不畅时，应及时向实验室负责人报告，以便及时疏通。下水道排水不畅时，应及时向实验室负责人报告，以便及时疏通。冷却水：输水管必须使用橡胶管，不得使用乳胶管；上水管与水龙头的冷却水：输水管必须使用橡胶管，不得使用乳胶管；上水管与水龙头的连接处及上水管、下水管与仪器或冷凝管的连接处必须用管箍夹紧；下水连接处及上水管、下水管与仪器或冷凝管的连接处必须用管箍夹紧；下水管必须插入水池的下水管中。管必须插入水池的下水管中。纯净水：应按照纯净水：应按照“操作

7、规程操作规程”进行操作；取水时应注意及时地关闭取水开进行操作；取水时应注意及时地关闭取水开关，防止溢流。关，防止溢流。分子生物学实验安全常识v1.1 实验室电、气、水、火实验室电、气、水、火火火报警：报警：119（说明火源、火情、单位名称、地理位置，或明显标志）（说明火源、火情、单位名称、地理位置，或明显标志）措施：早发现、早处理、早报告措施：早发现、早处理、早报告 灭火：灭火：学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）沉着、冷静沉着、冷静 易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用 干粉灭火器灭火

8、干粉灭火器灭火；导线或电器着火时，应先断电，再用导线或电器着火时，应先断电，再用干粉干粉灭火器灭火。灭火器灭火。切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑。切忌外跑。防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防 消除消除火灾火灾隐患（电、火、气、试剂）隐患（电、火、气、试剂）备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）禁止吸烟！分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化

9、学试剂的安全使用 标标 识：自配试剂应贴标签，并注明化合物名称、浓识：自配试剂应贴标签，并注明化合物名称、浓 度、配制日期，以及配制人姓名。度、配制日期，以及配制人姓名。总原则：总原则：药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性；药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性；受热见光易分解，存放低温棕色瓶；受热见光易分解，存放低温棕色瓶；特殊试剂特殊放，互不反应要记清。特殊试剂特殊放，互不反应要记清。分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用易燃易爆易燃易爆 化学试剂化学试剂：一般将闪点在25以下的化学试剂列入易燃化学试剂，它们多是极易挥发的液体，遇明火即可燃烧。有毒有毒 化学试剂化学试剂：以

10、较小剂量进入人体而导致疾病或死亡的才被划为有毒物质。腐蚀性腐蚀性 化学试剂化学试剂：化学试剂碰到皮肤、粘膜、眼、呼吸器官都有及时清洗，如各种酸和碱、溴、苯酚等。强氧化性强氧化性 化学试剂化学试剂：包括过氧化物和含有强氧化能力的含氧酸及其盐，如硝酸铵、高氯酸及其盐、重铬酸及其盐等。放射性放射性 化学试剂化学试剂：同位素示踪技术的发展，广泛应用于生物化学与分子生物学。由于由于其特殊性，该种试剂不得带入公共实验室，在各自实验室进行专项管理或者由学院进行其特殊性，该种试剂不得带入公共实验室，在各自实验室进行专项管理或者由学院进行统一管理。统一管理。不相容不相容 化学试剂化学试剂：一些化学试剂在储存和操

11、作过程中不能与其他物质接触，否则就发生爆炸，这些化学试剂称为不相容化学试剂。如：叠氮化物通常用作溶液中的抗菌剂，由于轻微碰撞就可能造成叠氮化铜的爆炸，因此不能与铜接触（如污水管及管道设施）。分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用EB EB是一种强诱变剂（可能造成遗传性危害），直接接触有中是一种强诱变剂（可能造成遗传性危害），直接接触有中等毒性。等毒性。EB可以通过皮肤吸收，因此应当避免一切与EB的直接接触。EB对皮肤，眼睛，口腔和上呼吸道系统有刺激性作用。应将EB安全密封，并密闭存放于干燥避光处。提取组织和细胞提取组织和细胞RNA的一种重要试剂，在提取的一种重要试

12、剂，在提取RNA时一定要时一定要在通风橱进行。如皮肤接触在通风橱进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。废液埋入地下。Trizol分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用 RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩，在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。DEPC(Diethylprocarbonate)(二乙基焦碳酸酯二乙基焦碳酸酯)常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行操作时戴手套在通风橱里进行，废液

13、收集后埋入地下。CHCl3（Chloroform，氯仿），氯仿）Acrylamide（丙烯酰胺）（丙烯酰胺）DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道.。分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用DMSO（二甲亚砜）（二甲亚砜）是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细胞的冻存液和配制AS。皮肤沾上之后用大量的水洗及1%5%稀氨水洗涤。有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和Southern杂交时的洗膜液中的去垢

14、剂。戴合适的手套和安全护目镜，不要吸入其粉末。十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠(SDS)强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封。TEMED分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用 很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。DTT 二硫苏糖醇二硫苏糖醇 一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或皮肤，已污染的工作服作为有害废物处

15、理。PMSF 苯甲基磺酰氟苯甲基磺酰氟 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和护目镜。Triton X-100分子生物学实验安全常识v1.2 化学试剂的安全使用化学试剂的安全使用 对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作，操作完后彻底洗手。过硫酸铵过硫酸铵(NH4)2S2O8 毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜，操作时要格外小心。叠氮钠（叠氮钠（NaN3）染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和

16、皮肤吸收是有毒的。其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。吉姆萨（吉姆萨（Giemsa）分子生物学实验安全常识v1.3 微生物的危害及处理微生物的危害及处理生物安全生物安全重点任务：实验室感染的控制、实验室对周围环境影响的控制以及实验室和感染性实验材料的管理控制。世界大多国家都是以致病微生物的危害程度进行分类，形成不同的实验室安全防护等级。我国一般以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4 表示实验室的相应生物安全防护水平;以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4 表示动物实验室的相应生物安全防护水平。病原微生物实验室生物

17、安全管理条例中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法实施办法中华人民共和国国境卫生检疫法中华人民共和国进出境动植物检疫法中华人民共和国卫生行业标准微生物和生物医学实验室生物安全通用准则实验室生物安全通用要求动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法 我国实验室生物安全法规v1.3 微生物的危害及处理微生物的危害及处理分子生物学实验安全常识v重组核酸技术和生物安全重组核酸技术和生物安全v方法方法 121 15-40min：适用于所有污染物的：适用于所有污染物的灭菌灭菌v紫外线照射灭菌紫外线照射灭菌：空气、物体表面，无菌室或污：空气、物体表面，

18、无菌室或污染区域照射，至少染区域照射，至少30minv乙醇，次氯酸钠乙醇，次氯酸钠 消毒消毒分子生物学实验安全常识 v1.4 紫外线辐射的危害和防护紫外线辐射的危害和防护 紫外辐射是指波长范围在100nm400nm的光辐射，一般把100nm280nm称作UVC，把280nm315nm称作UVB，把315nm400nm称作UVA。其中我们观察观察胶体胶体用的最多的就是280nm315nm280nm315nm的紫外线的紫外线。紫外线的有害效应主要是由于紫外线对脱氧核糖核酸（DNA）的作用造成的。最有害有害的效应是细胞致死，其它的效应则包括致突、致癌、干扰致突、致癌、干扰DNADNA、核糖核酸（核糖

19、核酸（RNARNA）和蛋白质的合成、细胞分裂的延迟、以及在通透性和能动）和蛋白质的合成、细胞分裂的延迟、以及在通透性和能动性上的变化性上的变化等。1.紫外光对眼睛的损伤紫外光对眼睛的损伤 白内障白内障被认为过量紫外光辐射的主要原因，经紫外光照射后，射线大部分被角膜上皮细胞核蛋白吸收，导致细胞核膨胀，碎裂和细胞死亡，以至损伤眼角膜和晶状体，导致浑浊。总的说来，紫外光辐射增加，人类的白内障患者增加。分子生物学实验安全常识 v1.4 紫外线辐射的危害和防护紫外线辐射的危害和防护2、紫外光对人皮肤的损伤紫外光对人皮肤的损伤 紫外光的影响有积累作用，它的主要机理：蛋白质受紫外光照射后，形成光解产物，此外

20、，其溶解度和粘度，对热变性的敏感性及荧光等物理化学和光学性质均有显著的改变。紫外光对皮肤的作用分为急性作用急性作用和慢性作用和慢性作用。急性作用表现为红斑效应红斑效应其症状为水肿脱皮水肿脱皮，全身症状有寒战，发烧，恶心，罕见循环衰竭。慢性作用如致皮肤老化，色素沉着皮肤老化，色素沉着，加速老化，甚至引起肿瘤，加速老化，甚至引起肿瘤。轻者皮肤出现水肿性红斑，重者会出现水疱或大疱，还可伴有休克，发热，畏寒，恶心，心悸和头昏等症状。3、紫外光对其他部位的损伤紫外光对其他部位的损伤 紫外光辐射对免疫系统的影响，免疫系统的一些成分存在于皮肤中，皮肤暴露在紫外光下，使得免疫系统受紫外光辐射，使其功能受到干扰

21、。研究表明，紫外光辐射的免疫抑制作用可导致皮肤癌免疫抑制作用可导致皮肤癌，同时引起一些传染病和其他一些疾病。分子生物学实验安全常识v1.4 紫外线辐射的危害和防护紫外线辐射的危害和防护 在实验室里常用的紫外光源包括手提式紫外灯和紫外透射仪、凝手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统胶成像系统。只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手套。应佩戴具有紫外线防护功能的护目镜和/或防护面罩，并遮蔽暴露的皮肤。紫外照射消毒后由于空气中臭氧富集，不宜立即开始工作，应在停止紫外照射30 min后开始工作，有条件的实验室，可安装无臭氧紫外灯。超净工作台中进行紫外照射消毒

22、超净工作台中进行紫外照射消毒后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身体健康。胶房EB清除方案vB B除污剂：除污剂：4.24.2克亚硝酸钠（克亚硝酸钠（NaNONaNO2 2和和2020毫升毫升 的次磷酸的次磷酸(H(H3 3POPO2 2)(50)(50)，加入，加入300300毫升水。毫升水。v用纸巾蘸取去污剂擦洗被污染的区域，再用纸巾用纸巾蘸取去污剂擦洗被污染的区域，再用纸巾加自来水清洗加自来水清洗5 5次，每次实用的纸巾都必须是干净次，每次实用的纸巾都必须是干净未污染的。未污染的。实验室安全守则v不要在实验室吃东西、喝水和抽烟不要在实验室吃东西、喝水和抽烟v不要穿漏脚趾的鞋或

23、短裤不要穿漏脚趾的鞋或短裤v在实验过程穿实验服在实验过程穿实验服v不在试验区域以外的区域穿实验服不在试验区域以外的区域穿实验服v事先了解你所接触的每个药品的组分事先了解你所接触的每个药品的组分实验室工作礼节v公用试剂剩下或快用完时，多配置或订购备用公用试剂剩下或快用完时，多配置或订购备用v不要移动物品或仪器在试验区域内的位置不要移动物品或仪器在试验区域内的位置v不要到处乱放东西、实验完毕台面收拾干净不要到处乱放东西、实验完毕台面收拾干净v没有许可不要使用别人的专用试剂或缓冲液没有许可不要使用别人的专用试剂或缓冲液v设备的破损及时报告或提出警告设备的破损及时报告或提出警告v请问，而不是命令；他人是合作伙伴请问，而不是命令；他人是合作伙伴v实验室资源外借务必通过老板！实验室资源外借务必通过老板！