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高效液相色谱常见故障及解决方案.ppt

1、高效液相色谱常见故障及解决方案高效液相色谱常见故障及解决方案高效液相色谱仪器出现故障可以从多高效液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手方面入手1.从部件的运转情况推测,如压力、流速的变化2.从色谱图的异常情况推测,如出峰时间、峰形3.从数据结果中分析一.从压力变化判断1.压力无现象判断故障排除面版灯不亮电源不通检查电源接头松脱拧紧接头泵头漏液接口太松拧紧泵头螺丝泵密封垫磨损更换密封垫现象判断故障排除泵不送溶剂泵头有气泡排气泡,溶剂需脱气使用的溶剂黏性太高换低黏性溶剂溶剂贮液器中过滤器脏清洗贮液瓶、过滤器,排空阀打开关闭排空阀控制器设定不正确设置正确流动相不够补足流动相现象判断故障排除压力值高泵流

2、速设定太高设定正确的流速流动相使用不恰当使用恰当的流动相缓冲结晶盐沉淀冲洗样品与流动相不互溶稀释或改变流动相柱温太低升高温度色谱柱性能下降换柱2.压力高现象判断故障排除压力值高溶剂贮液器中过滤器脏清洗链接管路阻塞冲洗,必要时更换进样阀阻塞冲洗进样器现象判断故障排除压力值低泵流速设定太低设定正确的流速色谱柱选择不恰当更换恰当的色谱柱柱温过高降低柱温系统漏液检查漏液位置并维修流动相使用不当改变流动相3.压力低4.压力不稳现象判断故障排除压力变化重现性好采用梯度所引起的压力是正常泵内有气泡溶剂脱气不适当排气泡,溶剂需脱气压力波动泵密封垫损坏更换密封垫溶剂混合器故障清洗或更换混合器漏液连接口太松拧紧接

3、口管路损坏更换1.峰前沿现象判断故障排除峰前沿柱性能下降更换色谱柱保护柱失效换柱芯进样体积太大或样品浓度太高降低进样体积或降低样品浓度二、从色谱图的异常情况推测2.峰拖尾现象判断故障排除峰拖尾柱性能下降更换色谱柱保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱,必要时更换色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱流动相选择不当选择恰当的流动相3.峰变宽现象判断故障排除峰变宽柱性能下降更换色谱柱保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱,必要时更换色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱流动相选择不当选择恰当的流动相流动相流速太低调节流速现象判断故障排除峰变宽缓冲液浓度太低增加浓度系统没到达平衡使系统到达平

4、衡进样器问题检查进样器环境温度变化使用柱温箱漏夜检查漏夜的位置并维修出现两个或多个未被完全分离的物质的峰选择其它色谱条件以改善分离效果检测器时间常数太大使用较小的时间常数4.峰分叉现象判断故障排除峰分叉柱性能下降更换色普柱保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱,必要时更换进样体积太大或样品浓度太高降低进样体积或降低样品浓度样品溶剂不溶流动相改变溶剂或采用流动相溶解样品5.无峰现象判断故障排除无峰检测器参数设置错误设置正确的检测器参数样品降解检查样品配制过程,更换样品自动进样器故障检查进样器无样品加样品检测器与数据处理装置链接故障检查并正确链接6.负峰现象判断故障排除出现所有负峰连接

5、数据处理系统信号线接反正确连接记录仪或检测器信号极性相反改变极性设置出现一个或几个负峰离子对分离体系对峰的影响在流动相中溶解样品使用的流动相吸收高使用流动相稀释样品自动进样器注射进空气清洗自动进样器 7.鬼峰现象判断故障排除色谱图出现鬼峰样品前处理时产生降解或混入杂质用标准品对照、检查样品处理过程,换新样品前一次进样的洗脱物增加分析时间或梯度洗脱、提高流速、如问题仍存在,两次进样间用强溶剂冲洗色谱柱注射器脏清洗注射器、冲洗进样口现象判断故障排除色谱图出现鬼峰流动相被污染清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂柱被污染清洗柱或更换柱六通阀污染清洗六通阀检测器污染清晰检测器管路污染冲

6、洗流动相中含有稳定剂或稳定剂变化使用无防腐溶剂8.保留时间变化现象判断故障排除保留时间不重复系统不问或未达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡室温波动大使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境柱被污染冲洗柱或更换柱溶剂配比不合适调节溶剂配比进样体积太大或样品浓度太高减小进样体积9.保留时间不断变化现象判断故障排除保留时间不断变化流速变化重新设定流速,检查泵 是否正常工作系统没有达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡柱被污染冲洗柱或更换柱流动相被污染清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂系统泄漏检查并进行维修现象判断故障排除保留时间不断变化流动相脱气不够充分清洗溶剂贮液瓶

7、、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂 室温变化使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境柱恒温箱设置有误设置正确的温度10.基线漂移现象判断故障排除基线漂移系统不稳或没有达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡室温不稳使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境流动相污染或分解清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂流动相脱气不充分脱气重新平衡系统现象判断故障排除基线漂移流动相配比不当或流速变化更改配比或流速柱被污染冲洗柱或更换柱固定相流失为说明问题存在,用一段连接管路代替色谱柱,通流动相检测基线检测池被污染或有气体用甲醇或其他强极性的溶剂冲洗流通池现象判断故障排除基线漂移

8、测定的波长选择有误使用分光光度计说明背景吸收,如背景值高,说明流动相含有紫外吸收化合物导致基线漂移。使用的流动相应在紫外截止波长以外,或更换溶剂系统泄漏检查并进行维修样品中有强保留的物质用强度合适的溶剂清洗色谱柱现象判断故障排除无规则基线噪音系统不稳或没有达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡系统泄漏检查并进行维修流动相污染或分解清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂柱被污染冲洗柱或更换柱色谱柱填料流失或阻塞更换色谱柱11.无规则基线噪音现象判断故障排除无规则基线噪音流动相混合不均或混合器工作不正常维修或更换混合器检测池被污染或用甲醇或其他强极性的溶剂冲洗流通池系统内有气泡用

9、强极性的溶剂清洗系统检测器内有气泡清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器检测器灯能量不足更换灯12.规则基线噪音现象判断故障排除规则基线噪音流动相、检测器或泵内有气泡流动相脱气,冲洗系统除去检测器或泵内的空气室温不稳稳定环境温度。使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境流动相回收使用除非特殊需要不使用回收溶剂流动相混合不完全使流动相混合均匀或使用低黏度的溶剂现象判断故障排除规则基线噪音泵振动在系统中假如脉冲阻尼器泵入口管路松或阻塞检查泵入口管路在同一水平上有其他设备关掉仪器,检查干扰是否来自于外部三、从数据结果中分析1.定量结果现象判断故障排除精密度降低样品预处理时样品降解或混入杂质用

10、标准品对照、检查样品处理过程,换新样品保留时间改变,峰形不正常见“峰形不正常”的故障排除方法检测器响应故障检查检测器现象判断故障排除精密度降低峰积分不正确重新设置参数进样问题(对外标法)随手动进样器的类型不同而异,有下列情况:(1)如使用全部定量环的手动进样器,在进样前需在“取样”状态下清洗三次;(2)如使用部分定量环的手动进样器,进样量需少于定量唤体积的50%现象判断故障排除精密度降低进样问题(对外标法)(3)如使用注射器的手动进样器,需确保进样操作重复;(4)如使用自动进样器需确保正确的进样体积,注射器不含空气,样品瓶有足够的样品,系统不泄漏(5)如手动进样器、自动进样器都使用,应确保系统的平衡现象判断故障排除准确度降低峰积分不正确见“精密度降低”的故障排除方法进样问题见“精密度降低”的故障排除方法样品预处理时样品降解或混入杂质用标准品对照、检查样品处理过程,换新样品样品蒸发样品密封保存在适当的温度下现象判断故障排除准确度降低样品前处理不当检查样品的处理过程内标物配置不当配置新的内标物现象判断故障排除峰不能分辨改变保留时间见“保留时间改变”的故障排除数据处理装置的参数不正确适当输入参数,进标准样,提高准确度无峰改变保留时间故障排除方法数据处理装置的参数不正确重新适当输入参数,进标准样,提高准确度鬼峰见“鬼峰”可能的原因见“鬼峰”的故障排除方法2.定性结果

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