精选仪器法血细胞检查资料课件.ppt

1、 概述仪器法测定原理方法学评价分析仪应用进展先进技术预览1.手工法手工法：原理简单、方便实用，但是比较费时费力、影响因素较多。2.仪器法仪器法：灵敏度高、技术 先进、信息含量大、容易标准化，规范化。1)电阻式 2)光学式 3)离心式 仪器法测定原理l 电阻式仪器法测定原理及临床意义l 光学式仪器法测定原理l 离心式仪器法测定原理一白细胞分析原理二红细胞分析原理三血小板分析原理四分析仪检测参数及临床意义 （一）细胞直方图的应用 （二）RDW的临床意义 （三）血小板参数的临床意义1电阻抗法血细胞分析仪基本结构示意图2W.H.Coulter原理:根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的白细胞，在

2、通过计数小孔时引起的电阻变化，而进行血细胞的计数和体积测定。3根据检测项目的不同设定小孔直径的不同。4根据细胞大小的不同，所形成的脉冲信号强弱不同。白细胞体积的大小经过溶血剂的处理后，形成大小不等的颗粒。小细胞区小细胞区主要是淋巴细胞；中间细胞区中间细胞区主要是M、E、B等；大细胞区大细胞区主要是中性粒细胞。WBC Analyzer5血细胞的脉冲信号经过放大、甄别、整形后，送入计数系统，得出计数结果。（细胞分布直方图）图1-2 白细胞体积分布直方图小细胞中间细胞大细胞flRELNOR1R2R3R4WBC1红细胞计数（RBC）和红细胞比积（Hct）1）RBC原理（脉冲数的多少）2）Hct/PCV

3、原理（脉冲的高度与叠加）3）白细胞数的干扰 4）红细胞体积分布直方图2血红蛋白（Hb）含量测定 1）原理：血液稀释剂溶血剂 Hb溶血剂血红蛋白衍生物（HiCN,SLS-Hb）Hb检测系统 2）溶血剂配方不同所形成的Hb衍生物也不同 3）ICSH推荐HiCN法为仪器校正的标准方法 4）HiCN最大吸收在540nm，含毒性。100 200 flRBCRBC溶解RBC Analyzer3各项红细胞指数检测原理 1）MCV,MCH,MCHC计算原理同手工法 2）RDW(红细胞体积分布宽度）RDW反映外周血液红细胞体积异质性的参数，或是反映外周血红细胞体积大小不等的客观指标。3）RDW的表示方法 RDW

4、-CV RDW-SDL1L2X轴上的68.28%(可信区间)RDW-CV100%20%RDW-SD1与RBC共一系统，不同的域值（230fl）为PLT 1）脉冲多少PLT 2）脉冲大小MPV2 专门设置：鞘流技术、浮动界标、拟合曲线等血 小板 准确性技术。102030flPLTPLT Analyzer（一）细胞直方图的应用 1WBC直方图/及“分类”计数 1）初步估计细胞群体的变化 2）技术因素或病理变化100 200 300 400 flfl100 200 300 400 2RBC体积直方图 要注意观察图形峰的位置、峰底的宽度、峰顶的形状及有无双峰现象。1）缺铁性贫血 2）轻型Hb合成障碍

5、3）铁粒幼细胞性贫血 4）叶酸缺乏的巨幼细胞性贫血 5）其他100200fl3血小板直方图 当血小板计数和血小板体积直方图呈现异常现象时，均应检查血液是否有血小板凝聚和微小血块，必要时作血涂片检查，观察是否有小红细胞、红细胞碎片或大血小板增多现象。10 20 30 fl（二）RDW的临床意义 1鉴别缺铁性贫血和-珠蛋白生成障碍性贫血 1）共同点：小细胞性贫 血，峰左移。2）鉴别点：aRDW增高，峰底宽 bRDW正常，峰底窄 2诊断缺铁性贫血 为小细胞低色素性贫血，伴有RDW异常增高者（RDW正常可排除）3进行贫血的新的形态学分类（MCV/RDW）a大细胞不均一性正细胞不均一性小细胞不均一性异常

6、大细胞均一性正细胞均一性小细胞均一性正常RDW增 高正 常减 低MCVbNfl100 200 1PLT 正常参考范围（100300）109 /L 2MPV的变化：1）鉴别血小板减少 PLT而MPV：Pt破坏增多（如DIC、ITP等）PLT而MPV：M增生不良、AIDS、M纤维化、再障、M瘤、白血病化疗、败血症等 2）鉴别血小板增高 PLT而MPV：反应性Pt增多症，失血等。PLT而MPV正常：M增生性疾病，如PLT增多症。3）其他 PLT正常而MPV：慢性M性白血病、脾切等 因MPV先于PLT变化，MPV可用于观察病情变化，如MPV 表示BM恢复，局部炎症MPV正常，败血症MPV 升高。对于出

7、血倾向评估：MPV与出血倾向呈负相关。（三）血小板参数的临床意义 根据每个细胞所产生的散射角度判断细胞的体积和形态特征进行白细胞分类。一原理示意图：二原理：1又称光散射式计数法。由细胞悬液中的血细胞通过流通检测器阻断一次光束，细胞不断阻断光束使检测器在单位时间内检出光束阻断的次数，从而计算出细胞数。一原理：（干式细胞计数仪）血液AC荧光染色剂 离心 红细胞、粒细胞、淋巴细胞、血小板、血浆二细胞着色的特点 1红细胞不着色，为暗红色。2粒细胞呈桔黄色。3淋巴细胞呈绿色。4血小板呈淡黄色。5血浆为透明的浅黄色。细胞着色一WBC计数及分类计数 1手工法：用显微镜目视计数是基础方法，但是存在固有误差（计

8、数板、吸管等系统误差）、技术误差（重复性、准确性相对较差）。2仪器法：可标准化，便于质控。精密度、准确性较高（需经严格校正后）二仪器法分类计数为大致的分群不是真正的分类，不能完全代替手工法 1人员培训 1）仪器原理、操作规程、注意事项、异常报警的含义。2）运用质控图的变化进行仪器的调试。2仪器的鉴定 包括总变异、携带污染率、线性范围、可比性和准确性。3仪器的校正：随机的标准品、或者严格的手工法。4标本的采集和运送 1）要求用抗凝的静脉血 2）抗凝血在室温下，WBC、RBC、PLT可以稳定24h，血小板不适合在低温下保存。5注意分析中的几个问题 1）最适宜温度为1822 2）溶血剂用量及溶血时间

9、 3）仪器的半堵孔现象 6分析后的注意事项三仪器法的应用必须全面实行质量管理一仪器测试原理的改进。1容量、电导、光散射白细胞分类法 2阻抗与射频技术联合的白细胞分类法 3光散射与细胞化学技术联合应用于白细胞分类法 4多角度偏振光散射白细胞分类技术二仪器自动化水平的提高。三各种特殊技术的应用。先进技术预览图图1半自动分析仪半自动分析仪 这是一个容易操作的系统。接通电源后，仪器处于正常的操作待机状态时，只要把20l 血液样品在机外稀释，混匀后放在样品架上，按下计数键它就可以对15种血液指标和3个细胞直方图进行一次分析。测定完成后结果会立即在LCD上显示并将结果打印出来。图图2全自动分析仪全自动分析

10、仪 这是一台用于临床实验室体外诊断的全自动血液分析仪，能为血液异常病人提供准确的筛选结果，并提示其需作进一步检查。能每小时分析80份样品，打印出18份参数和3种细胞分布曲线图。操作简便，快速。图图3CD-3500 血球计数分析仪血球计数分析仪30个参数，10项白细胞分类，7个分布图，7个散射表示图可以做网织红细胞分析，以及动物血液测试高达60个品种采用最先进的激光技术和电阻法技术20个质控程序，120个带25个参数的质控样品的SD.CV均值HST-330 SE-9000/R-3000/SP-100 从血球计数、白血球分类到网织红细胞测定以及标本的推片、染色，全面实现了自动化。实现了高效率的检测。图图4HS血液常规检查流水线血液常规检查流水线