食品微生物检测基础课件.ppt

1、食品微生物简介食品微生物简介l微生物的概念微生物的概念l微生物包括的种类微生物包括的种类l病原微生物的概念病原微生物的概念l微生物的特性微生物的特性l细菌的基本形态和结构细菌的基本形态和结构 微生物的定义：微生物的定义：是一群形体细小、结构简单、是一群形体细小、结构简单、人肉眼看不见，必须借助于光人肉眼看不见，必须借助于光学显微镜、电子显微镜放大几学显微镜、电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能百倍、几千倍甚至几万倍才能看到的生物。看到的生物。微生物包括微生物包括细菌、放线菌、酵细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、螺旋菌、立克次母菌、霉菌、螺旋菌、立克次氏体、衣原体、病毒及微藻类氏体、衣原体、病毒

2、及微藻类等。等。病原微生物定义：病原微生物定义：大部分微生物是有益的，只有小大部分微生物是有益的，只有小部分微生物是有害的，可以引起部分微生物是有害的，可以引起各种疫病，这部分微生物叫做病各种疫病，这部分微生物叫做病原微生物原微生物微生物的特性微生物的特性l1 个体微小，结构简单个体微小，结构简单l2 分布广，种类多分布广，种类多l3 繁殖快，数量大繁殖快，数量大l4 易于变异，适应力强易于变异，适应力强l5 易于培养，代谢活力强易于培养，代谢活力强细菌的基本形态和结构细菌的基本形态和结构细菌是一种具有细胞壁的单细胞生物细菌是一种具有细胞壁的单细胞生物.细菌的大小以微米（细菌的大小以微米（m）

3、为测量单位）为测量单位（一微米等于千分之一毫米）。（一微米等于千分之一毫米）。根据细菌形态一般分为球菌、杆菌、螺根据细菌形态一般分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类。旋菌三大类。细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、核糖体和内含物等基本结构。胞核、核糖体和内含物等基本结构。细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛、细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。芽孢等。食品微生物检测所涉及的类群食品微生物检测所涉及的类群微生物微生物非细胞生物非细胞生物细胞生物细胞生物病毒病毒原核生物原核生物真核生物真核生物细菌细菌酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌微生物检测程序微生物检测程序l 样品的采集

4、样品的采集l 注意：注意：l 1 所用接触样品的用具所用接触样品的用具经过灭菌经过灭菌 l 2 取样要均匀、特殊样取样要均匀、特殊样品要控制温度品要控制温度 l 3 样品采好后要贴上标样品采好后要贴上标签（注明：样品名称、签（注明：样品名称、来源、数量、采样人、来源、数量、采样人、地点及时地点及时间）间）l样品的微生物检样品的微生物检验验l注意：注意：l1 采好的样品送检不采好的样品送检不要超过要超过3小时小时l2 检完的样品的存放检完的样品的存放时间时间 l3 报告的填写报告的填写 菌落总数的测定菌落总数的测定首先要明白菌落的定义。首先要明白菌落的定义。菌落的定义：菌落的定义：将细菌划线接种

5、在固体培养将细菌划线接种在固体培养基上经基上经1824小时培养，长出肉眼可见的小时培养，长出肉眼可见的有单一细菌生长繁殖而成的细菌集团。有单一细菌生长繁殖而成的细菌集团。菌落总数：菌落总数：食品检样经过处理，在一定条食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得件下培养后，所得1ml（g）检样中所含菌）检样中所含菌落的总数。落的总数。1、设备和材料：、设备和材料：（见书（见书151页）页）2、培养基和试剂：、培养基和试剂：营养琼脂营养琼脂 75乙醇乙醇 稀释剂：稀释剂：0.85 生理盐水生理盐水菌落总数的检验程序菌落总数的检验程序25g(ml)样品样品+225ml生理盐水生理盐水(1:10的稀释液

6、的稀释液)作几个适当倍数的稀释液作几个适当倍数的稀释液(例如例如1:100，1:1000)选择选择23个适宜稀释度个适宜稀释度各取各取1ml分别加入灭菌培养皿中分别加入灭菌培养皿中每个平皿中加适量（每个平皿中加适量（1520ml）营养琼脂营养琼脂菌落记数菌落记数 （二）菌落计数方法（二）菌落计数方法 做平板菌落计数，用肉眼观察，必要做平板菌落计数，用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，记下各平板菌时用放大镜检查，以防遗漏，记下各平板菌落数后，求出同稀释度的各个平板平均菌落落数后，求出同稀释度的各个平板平均菌落数。数。（三）菌落计数的报告（三）菌落计数的报告 1、平板菌落数的选择、平板菌落数

7、的选择 选取菌落数在选取菌落数在30300之间的平板作之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数。个平板，应采用两个平板平均数。2、稀释度的选择（见下表）、稀释度的选择（见下表）例次例次 稀稀 释液及释液及 菌菌 落落 数数两稀释两稀释液之比液之比菌落总数菌落总数（个（个/g或个或个ml）报告方式报告方式（个（个/g或或ml）10-1 10-2 10-3 1多不可计多不可计164201640016000或或1.6104 2多不可计多不可计295461.6377503800038000或或3.83.810104 4 3多不可计

8、多不可计271602.2271002700027000或或2.72.710104 4 4多不可计多不可计多不可计多不可计313313000310000310000或或3.03.010105 5 527115270270270或或2.72.710102 2 6000110 1010 7多不可计多不可计30512305003100031000或或3.13.110104 4 三、菌落数的报告三、菌落数的报告1、菌落数在、菌落数在100以内的按其实有数报告。以内的按其实有数报告。2、菌落数大于、菌落数大于100的采用两位有效数字，的采用两位有效数字，有效数字后面的数值采用四舍五入计算。有效数字后面的数

9、值采用四舍五入计算。3、结果也可以用、结果也可以用10的指数表示。的指数表示。注意事项：注意事项：l1 操作要在无菌的状态下进行。操作要在无菌的状态下进行。l2 操作时间越短越好。操作时间越短越好。l3 样品不同选择的稀释倍数不同。样品不同选择的稀释倍数不同。l4 培养基冷却温度不宜过高或过低。培养基冷却温度不宜过高或过低。霉菌和酵母菌的计数霉菌和酵母菌的计数1、设备和材料：、设备和材料：（同细菌总数测定）（同细菌总数测定）2、培养基和试剂：、培养基和试剂：孟加拉红培养基孟加拉红培养基 灭菌蒸馏水灭菌蒸馏水霉菌和酵母菌的检测程序霉菌和酵母菌的检测程序25g(ml)样品样品+225ml无菌水无菌

10、水作几个适当倍数的稀释液作几个适当倍数的稀释液选择选择3个适宜稀释度，各个适宜稀释度，各以以1ml的量加入灭菌平皿内的量加入灭菌平皿内每个平皿内加入适量每个平皿内加入适量培养液约培养液约20ml左右左右菌落计数菌落计数管理资源吧（），提供海量管理资料免费下载！菌落计数及报告：菌落计数及报告：1、选择菌落数在、选择菌落数在10150之间的平板进行菌落计之间的平板进行菌落计 数。数。2、其他同菌落总数一样。、其他同菌落总数一样。注意事项：注意事项：1、培养温度是在、培养温度是在2528，培养时间是，培养时间是5 天。天。2、在往平皿中加培养基时应多加一些。、在往平皿中加培养基时应多加一些。（当培养

11、基自然漫过平皿底部时再多加一（当培养基自然漫过平皿底部时再多加一点）点）大肠菌群的测大肠菌群的测定定一、大肠菌群一、大肠菌群MPN的概念及意义的概念及意义 大肠菌群系指一群在大肠菌群系指一群在3724小时能小时能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以次作为粪便指标来评价食品的畜粪便，故以次作为粪便指标来评价食品的卫生质量，具有广泛的卫生学意义。卫生质量，具有广泛的卫生学意义。培养基和试剂：培养基和试剂：乳糖胆盐发酵管乳糖胆盐发酵管 伊红美蓝琼脂平板伊红美蓝琼脂平板 乳糖

12、发酵管乳糖发酵管 0.85生理盐水生理盐水 革兰氏染色液革兰氏染色液大肠菌群的检验程序：大肠菌群的检验程序：注意事项：注意事项：1.乳糖胆盐发酵管和乳糖发酵管在灭菌以后要检乳糖胆盐发酵管和乳糖发酵管在灭菌以后要检查小导管内有无气泡查小导管内有无气泡,如果有气泡就不能再用了。如果有气泡就不能再用了。2.计算产气管的数量时以乳糖发酵管产气管的数计算产气管的数量时以乳糖发酵管产气管的数量为准。量为准。3.从伊红美蓝琼脂平板上挑细菌接种乳糖发酵管从伊红美蓝琼脂平板上挑细菌接种乳糖发酵管和进行革兰氏染色时一定要挑取典型菌落，无典和进行革兰氏染色时一定要挑取典型菌落，无典型菌落时要多挑几个菌落。型菌落时要

13、多挑几个菌落。实验室生物安全基实验室生物安全基本知识本知识微生物实验室玻璃器皿的准备微生物实验室玻璃器皿的准备 一、洗涤一、洗涤 载玻片和盖玻片在清洗前可先在载玻片和盖玻片在清洗前可先在2%盐酸溶盐酸溶液液 中浸泡中浸泡1h。二、灭菌前的准备二、灭菌前的准备 制作棉塞制作棉塞 包扎器皿包扎器皿 灭菌灭菌微生物培养基的制备微生物培养基的制备l培养基的定义：是根据细菌的生长需培养基的定义：是根据细菌的生长需要人工配置的营养环境。要人工配置的营养环境。l按物理性状分类可分为液体、半固体、按物理性状分类可分为液体、半固体、固体培养基。固体培养基。l按用途分类可分为基础培养基、营养按用途分类可分为基础培

14、养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。厌氧培养基。称出一定量粉状培养基称出一定量粉状培养基加加适量的水溶解适量的水溶解分装分装灭菌灭菌检定检定保存保存 消毒与灭菌消毒与灭菌l一、干热灭菌法一、干热灭菌法 1.火焰灭菌（酒精灯）火焰灭菌（酒精灯）2.干热灭菌（电热干燥箱）干热灭菌（电热干燥箱）l二、湿热灭菌法二、湿热灭菌法 1.煮沸消毒煮沸消毒 2.流通蒸汽灭菌流通蒸汽灭菌 3.巴氏消毒巴氏消毒 4.加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅）加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅）消毒灭菌的基本概念l1.灭菌：杀灭物体中所有微生物的繁殖体和灭菌：杀灭物体中所有微生物的繁殖体

15、和芽胞的方法。芽胞的方法。l2.消毒：杀死病原微生物的方法。消毒：杀死病原微生物的方法。l3.防腐：防止或阻止微生物生长繁殖的方法。防腐：防止或阻止微生物生长繁殖的方法。l4.无菌：不含有活的微生物的意思。无菌：不含有活的微生物的意思。l5.无菌技术（无菌操作）：防止微生物进入无菌技术（无菌操作）：防止微生物进入机体或物体的方法。机体或物体的方法。显微镜的构造显微镜的构造 A、机械部分：显微镜的机械装置是、机械部分：显微镜的机械装置是显微镜的重要组成部分。机械装置的作用是显微镜的重要组成部分。机械装置的作用是固定及调节光学镜头，固定与移动标本等。固定及调节光学镜头，固定与移动标本等。只有良好的

16、机械装置，显微镜才能充只有良好的机械装置，显微镜才能充分发挥作用。显微镜的机械装置由各种精密分发挥作用。显微镜的机械装置由各种精密零件组成。零件组成。（1）镜座：它是显微镜的底座，一般）镜座：它是显微镜的底座，一般为马蹄形，作用是支撑整个显微镜。有的显为马蹄形，作用是支撑整个显微镜。有的显微镜座内装有照明光源和反射镜。微镜座内装有照明光源和反射镜。（2）镜柱：联系于镜座和镜臂之间，）镜柱：联系于镜座和镜臂之间，有支持显微镜其他部分的作用。有支持显微镜其他部分的作用。（3）镜臂：一般为弯柄形，拿取显微）镜臂：一般为弯柄形，拿取显微镜时握此臂。镜臂与镜柱之间有关节相连，镜时握此臂。镜臂与镜柱之间有

17、关节相连，可以作适当的倾斜，以便观察。有些显微镜可以作适当的倾斜，以便观察。有些显微镜的镜臂与镜柱之间没有关系，不能做任何角的镜臂与镜柱之间没有关系，不能做任何角度的倾斜。镜臂有持镜筒、镜台、照明装置度的倾斜。镜臂有持镜筒、镜台、照明装置及调节焦距装置等作用。及调节焦距装置等作用。（4）调节器：为了得到清晰的物象，必须调）调节器：为了得到清晰的物象，必须调节物镜和标本之间的距离，使它与物镜的工作距离节物镜和标本之间的距离，使它与物镜的工作距离相等。这种操作叫做调焦。在镜臂上方（各镜位置相等。这种操作叫做调焦。在镜臂上方（各镜位置不一样，有的一个在上方，一个在下方），有大小不一样，有的一个在上方

18、，一个在下方），有大小两种螺旋，一般向前方转动时，镜筒下降，向后方两种螺旋，一般向前方转动时，镜筒下降，向后方转动时镜筒上升；但也有显微镜，转动时镜柱下降；转动时镜筒上升；但也有显微镜，转动时镜柱下降；也有些显微镜在转动螺旋时，镜筒不变，而镜台上也有些显微镜在转动螺旋时，镜筒不变，而镜台上下升降。下升降。大螺旋（粗调节）可使镜筒作较大距离和较快大螺旋（粗调节）可使镜筒作较大距离和较快速度的上升或下降，通常在使用低倍镜时，速度的上升或下降，通常在使用低倍镜时，用大螺旋调节，能迅速找到物景。用大螺旋调节，能迅速找到物景。小螺旋（细调节）可使镜筒缓慢地上升或下降，小螺旋（细调节）可使镜筒缓慢地上升或

19、下降，可以作精细的调节，使物象更加清晰。可以作精细的调节，使物象更加清晰。此外，在镜柱附近还有一个聚光镜螺此外，在镜柱附近还有一个聚光镜螺旋，可以使聚光镜上升或下降旋，可以使聚光镜上升或下降 （5）镜筒：镜筒是由金属制成的圆筒，上端）镜筒：镜筒是由金属制成的圆筒，上端放置目镜，下端连接物镜。镜筒内壁，为了避免光放置目镜，下端连接物镜。镜筒内壁，为了避免光线的乱反射，喷上黑色无光漆。筒长度一般为线的乱反射，喷上黑色无光漆。筒长度一般为155250毫米，常用的为毫米，常用的为160或或170毫米。国产显微毫米。国产显微镜通常是镜通常是160毫米。毫米。（6）物镜转换器（回转盘）：固定在镜筒下）物镜

20、转换器（回转盘）：固定在镜筒下端。它有端。它有34个物镜螺旋口，呈盘状。根据需要放个物镜螺旋口，呈盘状。根据需要放大倍数不同，可调换不同放大倍数的物镜镜头。大倍数不同，可调换不同放大倍数的物镜镜头。（7）载物台：也叫工作台或镜台。它）载物台：也叫工作台或镜台。它的作用是安放载玻片。载物台中心有一个通的作用是安放载玻片。载物台中心有一个通光孔，通光孔后方左右侧各有一个安装片夹光孔，通光孔后方左右侧各有一个安装片夹用的小孔。载物台由上下两片组成，上面一用的小孔。载物台由上下两片组成，上面一片装有旋钮，可向左右移动；下面一片通过片装有旋钮，可向左右移动；下面一片通过旋钮可使上面一片前后移动。旋钮可使

21、上面一片前后移动。载物台的纵横坐标都装有游标尺，既载物台的纵横坐标都装有游标尺，既能固定标本，又能使之前后移动，以便寻找能固定标本，又能使之前后移动，以便寻找物象。物象。B、光学部分：、光学部分：（1）目镜：因为它靠近观察者的眼睛，因此）目镜：因为它靠近观察者的眼睛，因此也叫接目镜。目镜安装在镜筒的上端。各种目镜的也叫接目镜。目镜安装在镜筒的上端。各种目镜的口径尺寸都是统一的，根据需要可以互换使用。目口径尺寸都是统一的，根据需要可以互换使用。目镜只起放大的作用，并不增强显微镜的分辨力。一镜只起放大的作用，并不增强显微镜的分辨力。一般有般有24个，放大功率各不相同。个，放大功率各不相同。镜的圆筒

22、上面刻有放大率，如镜的圆筒上面刻有放大率，如5、7、10、15等符号可以区别。数字越大，放大率越等符号可以区别。数字越大，放大率越高，使用时可根据需要。高，使用时可根据需要。（2）物镜：因为它靠近被观察的物体（标）物镜：因为它靠近被观察的物体（标本），因此也叫接物镜。许多使用者在口语上本），因此也叫接物镜。许多使用者在口语上把物镜和目镜都通俗地叫做镜头。物镜安装在把物镜和目镜都通俗地叫做镜头。物镜安装在镜筒的下端，它的作用是将标本第一次放大，镜筒的下端，它的作用是将标本第一次放大，然后再由目镜将第一次放大的象做第二次放大。然后再由目镜将第一次放大的象做第二次放大。物镜是决定显微镜性能的最重要部

23、位，一般物镜是决定显微镜性能的最重要部位，一般有有24个，放大率也各不相同。镜的圆筒上面个，放大率也各不相同。镜的圆筒上面有放大率如有放大率如4或或10（低倍镜）、（低倍镜）、45（高（高倍境）、倍境）、100（油镜）等符号。有些显微镜（油镜）等符号。有些显微镜的物镜上还刻有镜口率，如的物镜上还刻有镜口率，如0.3、0.5、1.25等等符号，这些符号的数字越大，放大率越高。符号，这些符号的数字越大，放大率越高。一般计算显微镜的放大倍数是：一般计算显微镜的放大倍数是：目镜的放大率目镜的放大率物镜的放大率显微物镜的放大率显微镜的放大倍数。镜的放大倍数。例如，目镜的放大率为例如，目镜的放大率为10，

24、物镜的放，物镜的放大率为大率为45，这时显微镜的放大倍数为，这时显微镜的放大倍数为450。（3）聚光器：是由一片或数片透镜组）聚光器：是由一片或数片透镜组成。其作用相当于凸透镜，起聚光线作用。成。其作用相当于凸透镜，起聚光线作用。装在镜台下面，这样就能增强标本的照明，装在镜台下面，这样就能增强标本的照明，同时能使光线射入整个物镜镜口角。为了充同时能使光线射入整个物镜镜口角。为了充分发挥显微镜的性能，在使用时聚光镜和物分发挥显微镜的性能，在使用时聚光镜和物镜两者的数值孔径应相一致。镜两者的数值孔径应相一致。在使用高倍境时，必须配以聚光镜，在使用高倍境时，必须配以聚光镜，并且要求聚光镜和物镜口率一

25、致，效果最好。并且要求聚光镜和物镜口率一致，效果最好。聚光镜的镜口率可用光圈来调节，有些显微聚光镜的镜口率可用光圈来调节，有些显微镜的光圈上刻有口径的记号。使用某种高倍镜的光圈上刻有口径的记号。使用某种高倍境时，只有对准相应刻度即可。境时，只有对准相应刻度即可。（4）光圈：也叫可变光圈，位于聚光）光圈：也叫可变光圈，位于聚光镜下方，由十几张金属薄片组成，中心部分镜下方，由十几张金属薄片组成，中心部分形成圆孔。推动光圈的把手，可以随意调节形成圆孔。推动光圈的把手，可以随意调节圆孔的大小，有的光圈的边框上还刻有标明圆孔的大小，有的光圈的边框上还刻有标明圆孔直径的尺寸。圆孔直径的尺寸。（5）反光镜：

26、反光镜通常一面是平面镜，）反光镜：反光镜通常一面是平面镜，另一面是凹面镜，装在聚光镜下面的镜座上，另一面是凹面镜，装在聚光镜下面的镜座上，可以水平与垂直两个方向任意旋转。可以水平与垂直两个方向任意旋转。反光镜的作用是使光源发出的光线或天反光镜的作用是使光源发出的光线或天然光射向聚光器。在自然光线下，常用平面然光射向聚光器。在自然光线下，常用平面镜；在室内日光灯下，常用凹面镜。镜；在室内日光灯下，常用凹面镜。革兰氏染色革兰氏染色第一步：制片第一步：制片 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与

27、水混合做成悬液并挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成悬液并涂成直径为涂成直径为1厘米的薄层。若材料为液体培养物或固体培养厘米的薄层。若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可。物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可。第二步：自然干燥第二步：自然干燥第三步：固定第三步：固定 手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来回通过回通过3-4次，共约次，共约2-3秒钟，并不时以载玻片背面加热触及秒钟，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得过烫为宜（不超过皮肤，不觉得过烫为宜（不超过60 ），放置待

28、冷后，进），放置待冷后，进行染色。行染色。第四步：染色第四步：染色1.初染（结晶紫）初染（结晶紫）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。2.媒染（碘液）媒染（碘液）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。3.脱色（脱色（95%酒精）酒精）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。4.复染（沙黄复染液）复染（沙黄复染液）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。第五步：干燥第五步：干燥第六步：镜检第六步：镜检 革兰氏革兰氏阳性阳性菌被染成菌被染成紫色紫色，革兰氏革兰氏阴性阴性菌被染成菌被染成红色红色。练习题练习题l 1、高压蒸汽灭菌时，当压力达高压蒸汽灭菌时，当压力达15磅，温度磅，温度1

29、21时，维持时间时，维持时间()。A、10分钟分钟 B、20分钟分钟 C、30分钟分钟 D、25分钟分钟l 2、在革兰氏染色时草酸铵结晶紫滴加在已固定的在革兰氏染色时草酸铵结晶紫滴加在已固定的涂片上染色，一般染涂片上染色，一般染()，用水洗去。，用水洗去。A、半分钟、半分钟 B、1分钟分钟 C、1.5分钟分钟 D、2分钟分钟l 3、鞭毛是细菌的鞭毛是细菌的()器官。器官。A、捕食、捕食 B、呼吸、呼吸 C、性、性 D、运动运动l 4、真菌繁殖的主要特征是（、真菌繁殖的主要特征是（）。）。A、隔壁、隔壁 B、孢子、孢子 C、细胞壁结构、细胞壁结构 D、营养类型、营养类型l 5、球菌在一个平面上连

30、续分裂后，连成三个或三个以上的、球菌在一个平面上连续分裂后，连成三个或三个以上的或长或短的链状，这种细菌称（）或长或短的链状，这种细菌称（）A、葡萄球菌、葡萄球菌B、双球菌、双球菌C、链球菌、链球菌D、四联球菌、四联球菌l 6、细菌的君体繁殖过程可分为四期，其中细菌体积增大，、细菌的君体繁殖过程可分为四期，其中细菌体积增大，代谢活跃，但细胞分裂缓慢，此阶段称（）。代谢活跃，但细胞分裂缓慢，此阶段称（）。A、迟缓期、迟缓期B、对数生长期、对数生长期C、稳定期、稳定期D、哀退期、哀退期l 7、固体培养基理想的凝固剂是（）。、固体培养基理想的凝固剂是（）。A、琼脂、琼脂B、明胶、明胶C、血清、血清D

31、、海藻酸钠、海藻酸钠l 8、杀死物体中病原微生物的方法，叫（、杀死物体中病原微生物的方法，叫（）。）。A、消毒、消毒 B、无菌、无菌 C、防腐、防腐 D、抑菌、抑菌l 9、对微生物影响的物理因素包括（）。、对微生物影响的物理因素包括（）。A、温度、干燥、温度、干燥B、干燥、渗透压、干燥、渗透压C、温度、辐射、温度、辐射D、B+C l 10、VP试验阳性，呈（）色。试验阳性，呈（）色。A、红、红B、绿、绿C、黄、黄D、褐褐l 11、革兰氏染色液的第一液是（、革兰氏染色液的第一液是（）。）。A、碘液、碘液 B、结晶紫、结晶紫 C、95乙醇乙醇 D、石碳酸复红石碳酸复红l 12、载玻片和盖玻片在清洗

32、前可先在（、载玻片和盖玻片在清洗前可先在（）溶洗）溶洗中浸泡中浸泡1h。A、2的盐酸的盐酸 B、8盐酸盐酸 C、2的的NaOH D、6NaOHl 13饮料作沙门氏菌检验时，需前增菌时间是饮料作沙门氏菌检验时，需前增菌时间是()。(A)4h (B)6h (C)1216h (D)1824h 14、采用高压蒸汽灭菌时，一般选用（、采用高压蒸汽灭菌时，一般选用（）。）。A、121 20min B、100 30min C、115 15min D、110 20minl 15、冰棒检验取样前，操作人员应（、冰棒检验取样前，操作人员应（）A、用、用95的酒精棉球擦手的酒精棉球擦手 B、用、用75的酒精棉球擦手

33、和容器口周圈的酒精棉球擦手和容器口周圈 C、用、用65的酒精棉球擦容器口周围的酒精棉球擦容器口周围 D、用酒精灯烤容器口周围、用酒精灯烤容器口周围l 16、溶血性链球菌在血清肉汤中生长时，管中的现溶血性链球菌在血清肉汤中生长时，管中的现象是象是()。A、块状沉淀、块状沉淀 B、絮状或颗粒状沉淀、絮状或颗粒状沉淀 C、均匀、均匀生长生长 D、混浊、混浊l 17、尿素酶试验阳性呈尿素酶试验阳性呈()色。色。A、黑、黑 B、红、红 C、绿、绿 D、兰、兰l 18、S.S琼脂，属琼脂，属()培养基。培养基。A、营养、营养 B、鉴别、鉴别 C、选择、选择 D、基础、基础l 19革兰氏染色阳性细菌，在显微

34、镜下呈革兰氏染色阳性细菌，在显微镜下呈()色色 (A)红红 (B)紫紫 (C)黄黄 (D)绿绿l 20、在微生物检测中最常见的是细胞生物，其中最、在微生物检测中最常见的是细胞生物，其中最多的是（多的是（）。）。A、病毒、病毒 B、真菌、真菌 C、霉菌、霉菌 D、细菌、细菌l 21、各种杆菌的长短、大小和粗细很不一致，杆菌、各种杆菌的长短、大小和粗细很不一致，杆菌一般长约一般长约()微米。微米。A、0715 B、23 C、35 D、610l 22粪大肠菌群检验是将所有产气的乳糖胆盐发酵粪大肠菌群检验是将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物转种于管培养物转种于()培养基。培养基。(A)乳糖发酵管乳糖发酵

35、管 (B)葡萄糖发酵管葡萄糖发酵管 (C)EC肉汤管肉汤管 (D)蛋白胨水管蛋白胨水管l 23、半固体接种，采用下列哪种方法半固体接种，采用下列哪种方法()。A、涂布、涂布 B、穿刺、穿刺 C、点种、点种 D、划线、划线l 24原核细胞型微生物只有原核细胞型微生物只有()，无核膜。，无核膜。A、原始核、原始核 B、核蛋白、核蛋白 C、核仁：、核仁：D、细胞浆、细胞浆l 25 菌落计数时，固体样品加入稀释液后，最好置菌落计数时，固体样品加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以灭菌均质器中以()的速度的速度 处理处理1分钟。分钟。(A)4.0006.000rpm (B)6.0008.000rpm (C)

36、8.000-10.000rpm (D)10.00012.000 26细菌群体生长繁殖过程，包括细菌群体生长繁殖过程，包括()期。期。A、二、二 B、二、二 C、四、四 D、五、五l 27、乳糖胆盐发酵管配制好后，放入一个小倒管后，、乳糖胆盐发酵管配制好后，放入一个小倒管后，应于应于()条件下灭茵。条件下灭茵。A、121 15min B、11515min C、10020min D、110 15minl 28用漂白粉杀灭环境中病原微生物，称用漂白粉杀灭环境中病原微生物，称()。A、消毒、消毒 B、灭菌、灭菌 C、防腐、防腐 D、抑菌、抑菌l 29、大肠菌群的证实试验，是挑取可疑苗落接种、大肠菌群的

37、证实试验，是挑取可疑苗落接种()。A、乳糖发酵管、乳糖发酵管 B、蛋白胨水、蛋白胨水 C、作革兰氏染色、作革兰氏染色 D、A+Cl 30、霉菌及酵母菌苗菌落计数，应选择每皿菌落数、霉菌及酵母菌苗菌落计数，应选择每皿菌落数在在()之间进行计数。之间进行计数。A、30300 B、30200 C、30100 D、15150l 31、霉菌检测所需培养温度为、霉菌检测所需培养温度为2528，培养时间，培养时间是是()。A、7天天 B、6天天 C、5天天 D、3天天l 32、测定菌落总数的培养时间是、测定菌落总数的培养时间是()。A、242h B、182h C、362h D、482hl 33玻璃器皿采用干

38、热法灭菌时，玻璃器皿采用干热法灭菌时，下面做法不正下面做法不正确的是确的是()。A、灭菌器放在箱内堆积留有一定空隙、灭菌器放在箱内堆积留有一定空隙 B、打开电源和箱顶通气口、打开电源和箱顶通气口 C、100时，关上箱顶通气口时，关上箱顶通气口 D、在、在100120温度下保温温度下保温23h即可即可l 34、金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点是、金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点是()。A、金黄色，大而凸起的园形菌落、金黄色，大而凸起的园形菌落 B、金黄色，表面光滑的园形菌落，周围有溶血环、金黄色，表面光滑的园形菌落，周围有溶血环 C、金黄色，透明，大而凸起的圆形菌落、金黄色，透明，大而凸起的

39、圆形菌落 D、白色透明圆形菌落、白色透明圆形菌落l 35、乳糖胆盐发酵管制备时，应校正、乳糖胆盐发酵管制备时，应校正pH至至()加入加入指示剂，分装指示剂，分装lOmI灭菌灭菌 (A)55 (B)60 (C)70 (D)74 l 36细菌经培养一段时间后，细菌的繁殖速度愈来细菌经培养一段时间后，细菌的繁殖速度愈来愈慢，细菌的死亡数超过活菌数，以致细菌形态发愈慢，细菌的死亡数超过活菌数，以致细菌形态发生改变，此阶段属细菌的生改变，此阶段属细菌的()。(A)迟缓期迟缓期 (B)对数期对数期 (C)稳定期稳定期 (D)衰退期衰退期l 37物体上没有活的微生物存在叫物体上没有活的微生物存在叫()。(A)灭菌灭菌 (B)无菌无菌 (C)消毒消毒 (D)防腐防腐