个人所得税课件.ppt

1、第八章所得税法第八章所得税法 个人所得税个人所得税本章内容w 第一节 个人所得税基础知识w 第二节 个人所得税基本法律内容w 第三节 个人所得税额计算与征收知识点w 1、纳税人的界定及其所得来源的确定w 2、应税所得项目及其适用的税率w 3、应纳税所得额的确定w 4、应纳所得税额的计算重点、难点w 1、计算个人工资、薪金所得的应纳税所得额和应纳税额w 2、计算个人劳务报酬所得的应纳税所得额和应纳税额第一节个人所得税基础知识个人所得税的涵义w 涵义涵义：n对个人取得的各项应税所得征收的一种税。n是以个人所得为征税对象，并由获得所得的个人缴纳的一种税。第二节个人所得税基本法律内容一、纳税人二、征税

2、范围三、税率四、优惠政策一、纳税人 w 中国公民、个体工商户、个人独资企业和中国公民、个体工商户、个人独资企业和合伙企业的投资者、在中国有所得的外籍合伙企业的投资者、在中国有所得的外籍人员人员(包括无国籍人员包括无国籍人员)和香港、澳门、台和香港、澳门、台湾同胞。湾同胞。一、纳税人w 依据有无住所住所和居住时间时间，分为：n居民纳税义务人居民纳税义务人无限纳税义务l在中国境内有住所，或者无住所而在境内居住满1年的个人，就其从中国境内和境外取得的所得n非居民纳税义务人非居民纳税义务人有限纳税义务l在中国境内无住所又不居住或者无住所而在境内居住不满1年的个人，就其从中国境内取得的所得征税。二、征税

3、范围 w 工资、薪金工资、薪金所得w 生产、经营生产、经营所得w 对企事业单位的承包、承租经营承包、承租经营所得w 劳务报酬劳务报酬所得w 稿酬稿酬所得w 特许权使用费特许权使用费所得 w 财产租赁财产租赁所得w 财产转让财产转让所得w 利息、股息、红利利息、股息、红利所得 w 偶然偶然所得 w 其他其他所得【操作案例操作案例】w 王先生留学归来以后，在国内一家著名大公司工王先生留学归来以后，在国内一家著名大公司工作，单位的工资表上每月发给其工资薪金收入作，单位的工资表上每月发给其工资薪金收入40004000元，其中包含其独生子女补贴。元，其中包含其独生子女补贴。w 单位的工会组织还以劳务费的

4、名义每月发给每个单位的工会组织还以劳务费的名义每月发给每个员工固定收入，王先生因此取得收入员工固定收入，王先生因此取得收入500500元。元。w 由于王先生在国外留学期间专攻法律，回国后通由于王先生在国外留学期间专攻法律，回国后通过考试又获得了律师资格证书，因此，业余时间过考试又获得了律师资格证书，因此，业余时间他不时受人之邀为他人或单位提供法律方面的服他不时受人之邀为他人或单位提供法律方面的服务，不定期的取得部分收入。务，不定期的取得部分收入。【操作案例操作案例】w 由于他钻研理论还出版了数本论文专著，取得一由于他钻研理论还出版了数本论文专著，取得一定数额的稿费。定数额的稿费。w 随着收入水

5、平的提高，王先生为改善家庭的居住随着收入水平的提高，王先生为改善家庭的居住条件，经与家人商量，以高出原购买的价格卖掉条件，经与家人商量，以高出原购买的价格卖掉了已居住了已居住3 3年的家庭唯一住房，获得一笔净收入。年的家庭唯一住房，获得一笔净收入。利用这笔收入，再加入一部分资金，他又另外购利用这笔收入，再加入一部分资金，他又另外购买了一套地理位置好、面积更大的住房。买了一套地理位置好、面积更大的住房。纳税情况w 对于上述各项收入，缴纳税款时应对于上述各项收入，缴纳税款时应分类分项分类分项处理：处理：1 1、单位发放的工资表上的收入全额列、单位发放的工资表上的收入全额列工资薪金工资薪金所得，所得

6、，但独生子女补贴应剔除；但独生子女补贴应剔除；2 2、工会以劳务费名义发放的收入、工会以劳务费名义发放的收入属于工资性质收入，属于工资性质收入，列工资薪金列工资薪金所得所得3 3、为他人或单位提供法律服务取得的收入列为他人或单位提供法律服务取得的收入列劳务报酬劳务报酬所得；所得；4 4、非专业职务出版著作的稿费收入列为、非专业职务出版著作的稿费收入列为稿酬稿酬所得；所得；5 5、对于转让家庭住房取得的所得列、对于转让家庭住房取得的所得列财产转让财产转让所得。所得。三、税率 w 工资、薪金所得n适用5%45%的超额累进税率 w 生产、经营所得和对企事业单位的承包经营、承租经营所得n适用535%的

7、超额累进税率w 稿酬所得n税率为20%，并按应纳税额减征30%，实际征收率为14%三、税率w 劳务报酬所得n适用比例税率，税率为20%n注意加成征收加成征收的规定：实际的累进税率w 其他n包括特许权使用费所得，利息、股息、红利所得，财产租赁所得，财产转让所得，偶然所得和其他所得n适用比例税率，税率为20%。四、优惠政策w（一）免纳个人所得税的 w（二）经批准可以减征个人所得税的w（三）暂免征收个人所得税的第三节个人所得税额计算与征收由于个人所得税采取分类分项计税的由于个人所得税采取分类分项计税的方法，每项个人收入的扣除范围和扣除方法，每项个人收入的扣除范围和扣除标准不尽相同，应纳所得税额的计算

8、方标准不尽相同，应纳所得税额的计算方法差别很大。法差别很大。一、工资薪金所得应纳税额w 工资、薪金所得费用减除标准：应纳税所得额应纳税所得额=每月收入额每月收入额800800元（元（一般一般）或者或者=每月收入额每月收入额800800元元32003200元（元（加计加计）应纳税额应纳税额 =应纳税所得额应纳税所得额适用税率适用税率 速算扣除数速算扣除数工资、薪金所得税的九级超额累进税率表工资、薪金所得税的九级超额累进税率表级数级数应纳税所得额应纳税所得额税率（税率（%）速算扣除数速算扣除数1不超过不超过500元的元的502500-2000元元102532000-5000元元1512545000

9、-20000元元20375520000-40000元元251375640000-60000元元303375760000-80000元元356375880000-100000元元40103759100000元以上元以上4515375某纳税人某纳税人2003年年8月份在中国境内取得工资、薪金月份在中国境内取得工资、薪金收入收入5000元，要求：计算该纳税人应纳个人所得税。元，要求：计算该纳税人应纳个人所得税。应纳税所得额应纳税所得额 =5000=5000 800=4200800=4200（元）（元）应纳所得税额应纳所得税额 =4200=420015%15%125=505125=505（元）（元）个

10、人所得税中对工资、薪金所得税例题一在天津一外商投资企业中工作的美国专家在天津一外商投资企业中工作的美国专家 (为非居民为非居民纳税人纳税人)，20022002年年1 1月份取得由该企业发放的工资收入月份取得由该企业发放的工资收入1000010000元人民币。元人民币。要求：计算其应纳个人所得税税额。要求：计算其应纳个人所得税税额。应纳税所得额应纳税所得额 =10000-(800+3200)=6000(=10000-(800+3200)=6000(元元)应纳税额应纳税额 =6000=600020%-375=82520%-375=825（元）（元）个人所得税中对工资、薪金所得税例题二二、个体工商户

11、的生产、经营所得应纳税额w 生产经营所得费用扣除标准：应纳税所得额应纳税所得额=每一纳税年度的收入总额（成本每一纳税年度的收入总额（成本+费用费用+损失）损失）准予扣除的税金准予扣除的税金w 个人独资企业：全部生产经营所得为收入总额全部生产经营所得为收入总额w 合伙企业的投资者：按照合伙企业的全部生产经按照合伙企业的全部生产经营所得和合伙协议约定的营所得和合伙协议约定的分配比例分配比例的确定收入；的确定收入；合伙协议没有约定分配比例的，以全部生产经营合伙协议没有约定分配比例的，以全部生产经营所得和合伙人数量所得和合伙人数量平均计算平均计算每个投资者的收入；每个投资者的收入；再确定再确定应纳税所

12、得额。应纳税所得额。生产经营所得税的五级超额累进税率表生产经营所得税的五级超额累进税率表级数级数全年应纳税所得额全年应纳税所得额 税率税率（%）速算扣除数速算扣除数 1不超过不超过5000元的元的 502超过超过500010000元部分元部分 102503超过超过1000030000元部分元部分 2012504超过超过3000050000元部分元部分 3042505超过超过50000元部分元部分 356750例题二某个体工商户全年取得生产、经营所得25 000元，经税务机关核定其成本、费用及损失为12 000元。要求：计算该个体户全年应纳个人所得税税额。应纳税所得额应纳税所得额=25 000=

13、25 00012 000=13 00012 000=13 000（元）（元）应纳税额应纳税额=13 000=13 00020%20%1250=13501250=1350（元）（元）应纳税额应纳税额=应纳税所得额应纳税所得额适用税率适用税率-速算扣除数速算扣除数注：业务招待费、捐赠的列支标准、年度亏损注：业务招待费、捐赠的列支标准、年度亏损三、承包经营、承租经营所得三、承包经营、承租经营所得应纳税额应纳税额 w 应纳税所得额应纳税所得额=每一纳税年度的收入总额每一纳税年度的收入总额800800元元 月数月数n每一纳税年度的收入总额，是指纳税义务人按照承包经营、承租经营合同规定分得的经营利润和工资

14、、薪金性质的所得；n必要费用，是指按月减除800元三、承包经营、承租经营所得税额三、承包经营、承租经营所得税额 1 1、工商登记变更为承包者，按个体工商户生产经营、工商登记变更为承包者，按个体工商户生产经营所得的计税方法，适用五级超额累计税率。所得的计税方法，适用五级超额累计税率。2 2、工商登记未变更，先对该企事业单位计征企业所、工商登记未变更，先对该企事业单位计征企业所得税，再按合同规定：得税，再按合同规定：w 承包、租者只取得一定所得，按工资薪金所得计承包、租者只取得一定所得，按工资薪金所得计税，适用九级超额累进税率；税，适用九级超额累进税率；w 经营成果归承包、租者所有，按本项目所得计

15、税，经营成果归承包、租者所有，按本项目所得计税，适用五级超额累计税率。适用五级超额累计税率。例题三2001年1月1日某个人与事业单位签订承包合同经营招待所，据合同协议承包期为一年，该个人全年上缴费用20000元，年终招待所实现利润总额65000元。要求：计算该个人应纳个人所得税税额。答案应纳税所得额应纳税所得额 =承包经营利润承包经营利润 上缴费用上缴费用 每月费用扣减合计每月费用扣减合计 =6500065000200002000080080012=35400(12=35400(元元)应纳所得税额应纳所得税额 全年应纳税所得额全年应纳税所得额适用税率适用税率-速算扣除数速算扣除数 354003

16、540030%30%4250=6370(4250=6370(元元)四、劳务报酬所得应纳税额四、劳务报酬所得应纳税额 应纳税所得额应纳税所得额=每次收入额每次收入额800800元元 或者或者=每次收入额每次收入额（1 120%20%）n每次收入不超过4000元的，减除费用800元（定额扣除费用）；n每次收入超过4000元的，减除20%的费用（定率扣除费用）。n劳务报酬所得、稿酬所得、特许权使用费所劳务报酬所得、稿酬所得、特许权使用费所得、财产租赁所得（同理）得、财产租赁所得（同理）劳务报酬所得税的三级税率表劳务报酬所得税的三级税率表级数 应纳税所得额税率速算扣除数120000元以下的200220

17、000元50000元的302000350000元以上的407000n20000元以下适用基础税率20%；n20000元以上适行加成征收。四、劳务报酬所得应纳税额四、劳务报酬所得应纳税额w 应纳税所得额20000元以下的：应纳税额应纳税额=应纳税所得额应纳税所得额适用税率（适用税率（20%）w 应纳税所得额20000元以上的：应纳税额应纳税额=应纳税所得额应纳税所得额适用税率适用税率-速算扣除数速算扣除数例题四w 顾先生是一家大型装修公司的技术指导，利用业余时间承揽了王姓人家别墅装修的技术顾问和监督的工作，装修材料由用户出。装修初期，户主支付顾先生l万元，中期支付l万元，装修完毕，又支付1万元。

18、顾先生在每次取得装修款后均主动到税务机关按20的税率分别缴纳个人所得税，三次共缴纳个人所得税4800元。分析与处理分析与处理w 个人所得税实施条例规定：劳务报酬所得，属于一次性收入的，以取得该项目收入为一次；属于同一项目连续性收入的，以一个月内取得的收入为一次。顾先生业余时间承揽别墅装修，合计取得服务费3万元，属于劳务报酬所得，应按按“次次”缴纳缴纳个人所得税。由于顾先生承揽房屋装修三次取得的3万元所得，是属于同一项目连续性收入，应将三次收入合并计算。w 应纳税所得额应纳税所得额=3=3（1 120%20%）=2.6=2.6（万元）（万元）w 应纳税额应纳税额=2.6=2.630%30%0.2

19、=0.580.2=0.58（万元）（万元）w 顾先生已经缴纳了4800元，还应补税1000元。五、稿酬所得应纳税额五、稿酬所得应纳税额 应纳税所得额应纳税所得额=每次收入额每次收入额800800元元 或者或者=每次收入额每次收入额（1 120%20%）4000元的标准适用不同的费用扣除方法适用税率为适用税率为20%20%，并按应纳税额减征，并按应纳税额减征30%30%，实际征收率为实际征收率为14%14%应纳税额应纳税所得额应纳税额应纳税所得额20%20%（1 130%30%）书本书本P163P163例例8 88 8 六、特许权使用费所得应纳税额六、特许权使用费所得应纳税额应纳税所得额应纳税所

20、得额=每次收入额每次收入额800800元元 或者或者=每次收入额每次收入额（1 120%20%）4000元的标准适用不同的费用扣除方法适用税率为适用税率为20%20%应纳税额应纳税所得额应纳税额应纳税所得额20%20%七、财产租赁所得应纳税额七、财产租赁所得应纳税额应纳税所得额应纳税所得额=（每次收入额准予扣除项目金额）（每次收入额准予扣除项目金额）800800或者或者=（每次收入额准予扣除项目金额）（每次收入额准予扣除项目金额）（1 120%20%）4000元的标准适用不同的费用扣除方法准予扣除项目金额：准予扣除项目金额：l财产租赁过程中缴纳的税费l由纳税人负担的该出租财产实际开支的修缮费（

21、以800元为限）七、财产租赁所得应纳税额七、财产租赁所得应纳税额适用税率为适用税率为20%20%应纳税额应纳税所得额应纳税额应纳税所得额20%20%习题册习题册P112P112单选题单选题17 17 P116P116计算题计算题11 11八、财产转让所得应纳税额八、财产转让所得应纳税额应纳税所得额应纳税所得额=每次收入额财产原值合理费用每次收入额财产原值合理费用合理费用：卖出财产时按照规定支付的有关费用 w 对股票转让所得暂不征收个人所得税适用税率适用税率20%20%应纳所得税额应纳税所得额应纳所得税额应纳税所得额适用税率适用税率九、利息、股息、红利所得应纳税额九、利息、股息、红利所得应纳税额

22、 应纳税所得额全部利息、股息、红利所得应纳税所得额全部利息、股息、红利所得适用税率适用税率20%20%应纳所得税额应纳税所得额应纳所得税额应纳税所得额适用税率适用税率十、偶然所得应纳税额十、偶然所得应纳税额应纳税所得额全部偶然所得应纳税所得额全部偶然所得适用税率适用税率20%20%应纳所得税额应纳税所得额应纳所得税额应纳税所得额适用税率适用税率十一、其他所得应纳税额十一、其他所得应纳税额应纳税所得额全部其他所得应纳税所得额全部其他所得适用税率适用税率20%20%应纳所得税额应纳税所得额应纳所得税额应纳税所得额适用税率适用税率注：注：利息、股息、红利所得，偶然所得和其他所得，以每次收入额为应纳税

23、所得额应纳税所得额的其他规定w 1、个人将其所得通过中国境内的社会团体、国家机关向社会公益事业以及遭受严重自然灾害地区、贫困地区捐赠，捐赠额未超过纳税义务人申报的应纳税所得额30%的部分，可以从其应纳税所得额中扣除。w 2、个人取得的应纳税所得，包括现金、实物和有价证券。个人所得税的申报与缴纳个人所得税的申报与缴纳w 一、自行申报纳税w 二、代扣代缴纳税核算w 账户的设置w 核算3245常见风湿病实验检查风湿病病因学检查.RA HLA-DRB10405 0409风险高达58.2%.SLE HLA-DQB1(nRNP),DQa(SSA/SSB),DQW6(Sm)DQB1(TCR).AS HLA-

24、B27.3246BS HLA-B51.PMDM HLA-B8,DR3,DR1.HLA-DRB1，ancestral haplotype祖单倍体 8.1。TNF-308ASSC HLA-DR1,DR5,DRQI；P1A2/FN等位基因与肺纤维化，Scl-70的阳性呈正相关。SS HLA-DR3.DRBI0602，03（与肾小管酸中毒及SSB密切相关，DQAI0504，DQBI0202。RF HLA-DR4.OA HLA-A1,B8.3247HLA研究进展w HLA抗原基因的多态性，决定了其所表达的HLA抗原分子的多态性，也决定了HLA系统免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA 基因分型迅猛发展，

25、使得HLA 基因分型更加准确，简便和实用。HLA 基因分型目前大致分为：限制性片段长度多态性方法PCR-RFLP(restriction fragment length polymophism)。PCR-SSOP 是以核酸杂交为基础的分型技术。PCR扩增特定的基因片段，与(sequence specific oligonucleotide probes)序列特异性寡核苷酸探针杂交，进行分析鉴定。w 基因芯片或微阵列技术(gene chip or DNA microarray)：3248w 该技术其原理类似于反向斑点杂交。它是指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅片等固相支持物的表面有规律地合

26、成代表不同基因的寡核苷酸探针，或液相合成探针后，通过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针与放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或 cDNA互补核酸序列相结合，通过放射自显影或荧光检测，对杂交结果进行计算机软件处理分析，获得杂交信号的强度及分布模式图，反映样品中基因表达的情况。w PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)可检测DNA 片段中不同位置的点突变，而不必象PCR-RFLP 那样，必须选择合适的限制酶，使其识别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序列处。3249w PCR-SSP(SEQUENCE SPECIFIC PRIME

27、S)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP，特异的扩增目的DNA 片段，再通过凝胶电泳等手段，判断被扩增序列的存在。w 作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点w(single nucleotide polymorphism)。已有MHC-SNP分型试剂盒面市。w 分子的超型及抗原结合肽超基序的发现，表明可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为合理，简明和实用，对于疾病相关性的研究和异体移植有重大意义。3250AS的相关遗传因素w 1：HLA是一必需的致病基因，但其遗传风险为1650%。其亚型有23个之多，从B27012723。与AS相关的是27052704

28、2701等等。w 2：CYP2D6LMP7和TNF308等TNF-的等位基因；bosak报道HLA-2Bw4Cw1/2DR1基因频率均高于健康人群。这提示HLA-ABCDR和DQ区域有与AS发病的易感基因存在；HLA-B60增加了AS依赖HLA-B27发病的易感性。3251w 链球菌感染的检测 w 1 咽拭子培养 2025%w SZ(链球菌酶)检w 2ASO500 50%w 3DNA酶-B210 85%w 4ASK(抗链球菌激酶)8w 5AH(抗透明质酸酶)128w 6ANDS(抗核苷酸)80%,大于4周25%OTHER:1.白细胞及中性粒细胞.2.糖蛋白及粘蛋白等.3253CRPIL-1IL

29、-6TNFaTGPF4白细胞粘着游走CRP凝血纤溶系统亢进ICAM-1VCAM-1E-SELECTIN血小板凝集亢进血小板释放反应感染外伤免疫异常恶性增生物3254CRP与炎症w CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物抑制剂-1的水平与活性、增强巨噬细胞对低密度脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管紧张素-1型受体的表达等.w CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP.w CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟、感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可使其降低.3255生化检查w

30、1.Ca,P,Fe等电解质.w 2.UA,磷酸钙双水化合物CPP等.w 3.肝,肾,血常规等功能检查.w 4.CPK,LDH同功酶，肌球蛋白，肌凝蛋白重链，肌钙蛋白I（TnI），等肌酶谱检查.w 5.蛋白及蛋白电泳检查.w 6.雌激素,泌乳素等激素检查.w 7.维生素,骨钙素,TRAP,Pyd,Dpyd等.3256雌激素和催乳素PRL w 大家都知道神经-内分泌-免疫调节网络功能失调，会影响的发生和发展。w PRL（prolatin）已被证明具有免疫调节作用，对细胞和体液免疫都有促进作用，而且免疫细胞也能产生PRL样物质，发挥自分泌和旁分泌作用。大量研究表明在SLE中PRL与可的松CS比值增高

31、反与病情进展相关。男性患者PRL水平升高而雄激素功能低下，认为PRL可抑制睾酮的生成，在病因中起作用。但也有人认为不是通过其抑制雄激素而起作用。另外用bromocriptine BRC溴隐停使PRL降低可使SLE病情改善。在RA已证明PRL是AA（adjuvant arthritis）形成的必要条件。国外报道在RA中PRL水平上升发生率为10.8%。3257w SS，PA，Reiter等风湿病都有PRL水平升高。目前认为1.可能与可诱导核细胞产生IgM，IgA，IgG，ds-DNA和ANA及IgM类RF，ANA滴度增加并且PRL水平与ANA相平行。IgG类ds-DNA与抗甲状腺微粒体抗体TMA

32、合成增加，同时伴ESR增快，淋巴细胞减少。2.PRL基因在第6号染色体短臂上，与HLA基因复合体非常近。生殖危险因子与RA病因相互作用可能是其原因。SLE女性患者HLA-DRB10301和PRL基因之间的连锁不平衡也是原因之一。3.降低甾类物产生的允许作用。PRL水平升高在甾类激素分泌减少的情况下起重要作用。一方面糖皮质激素能拮抗PRL的刺激作用，而性激素对免疫的调节作用随性别而异。另一方面PRL可影响甾类激素的产生，也可拮抗糖皮质激素的抑制作用。3258w 4.PRL与细胞因子 PRL和IL-2在免疫方面起协同作用，从而促进AID的发生。同时PRL也可促进滑膜纤维母细胞的增殖，并促进IL-6

33、，IL-8的生成。w 而雌激素和雌激素受体在免疫调节和对许多风湿病发病机制，自身抗体的产生，及对其病理进程的影响巨大。早已为众人所熟悉。3259滑液正常值w PH 7.3-7.43 7.38w WBC(/L)(13180)63w N 0-15 7w L 0-78 24w 单核细胞 0-71 48w 滑膜细胞 0-12 4w 蛋白质(g/L)12-30 18w P(%)56-63 60w A(%)37-44 40w 透明质酸盐(g/L)33260滑液分析w 外观 WBC PC 粘蛋白 滑液与血清 微生物 w 试验 Glu差异(ml/ml)晶体等w正常 清晰，灰黄 0200 10%良好 无差异 _

34、wI类w(非炎性积液)清晰，稍浊 504000 30%良好 无差异 _wII类(非感染 偶有LE细胞w轻度炎性)清晰，稍浊 09000 20%良好 无差异 补体减少wIII类(非感染 w重度炎性)混浊 100160,000 70%不 良 10 30 补体减少晶体等wIV类(感染 炎性)w感染 高度混浊 150250,000 90%不 良 90 细菌培养阳性w结核 混浊 2500100,000 60%不良 70 结核培养阳性3261滑液表现w I II III IVw OA RA 细菌性 创伤w 肢端肥大症 AS 结核性 骨折w 骨坏死 PA 淋球菌 血友病w Paget病 SS 神经病性患节炎

35、w SLE PM/DMw NPA BDw SSC WGw Wilson RFw 淀粉样变 REAw 结节性红斑 IBDw 软骨病 白血病w 激素治疗 一部分细菌性 3262分子生物技术w 1.目的DNA的来源w 从组织或细胞中提取.w 通过载体获得DNA片段.w 以为mRNA模板利用逆转录酶合成互补DNA(cDNA).w DNA合成:通过ligation,PCR,probe来完成.w 2.重组DNA技术:分子构建,细胞转移,宿主细胞鉴定.w 3.核酸测定和应用w DNA/RNA印迹,PCR,原位/斑点杂交.w DNA序列测定.3263ANAsw ANA是指抗细胞内DNA,RNA,AHA,no-

36、AHA,phospholipid蛋白质分子及其复合物成分的抗体.Miescher于1957年发现。w 1957年Ceppelini发现DNA:ssDNA,dsDNA.w AHA:H1,H2A,H2B,H3,H4.w ENA:Sm,Nrnp,rRNP,SSA/SSB,ScL-70,Jo-1,PM-1,PCNA,RA33,centromere.3264DNA研究w DNA大分子可以存在于循环中或黏附于多种器官的微血管结构，这些循环或器官原位抗原型DNA均可以与循环抗dsDNA自体抗体发生反应，形成抗原抗体免疫复合物，激活炎症系统，如补体途径。在器官引起 免疫复合物介导的疾病，引起关节炎，血管炎，肾

37、炎等临床表现。dsDNA抗体水平于疾病活动性，特别与LN有密切关系。也可作为临床复发的指标。w SLE中的抗DNA抗体是异基因的。血清的抗体和单克隆抗DNA抗体可识别不同分子的核酸表位，如磷脂，蛋白，多糖和细胞结构。这说明DNA本身不可能做为免疫原来诱导DNA抗体产生。同时这种抗体的多反应性可能与个体Ig的不同区域的多结合位点或不同抗原的相同表位有关。3265w 抗DNA抗体的产生与NO有关，活性氧可在细胞分裂中期导致淋巴细胞染色体损害和断裂，使淋巴细胞功能失常或凋亡，释放大量核抗原产生自身抗体。NO在SLE中参与产生自身抗体，NO抑制粒细胞活性，诱导其凋亡，抑制吞噬细胞释放促炎介质，抑制T细

38、胞增殖和IL-2释放，阻止T辅助细胞分化Th1细胞，导致细胞免疫功能低下，大量自身抗体产生。在凋亡期间完整的核抗原的大量释放可以提供细胞外足够的核抗原来促进免疫反应，诱导抗体的产生。3266DNA免疫w 哺乳动物具有免疫学特性温和，结构简单的特点，单纯的DNA分子不能有效诱导免疫反应，抗哺乳动物的DNA抗体产生与抗原的交叉反应或多克隆B细胞的活化有关。而细菌DNA由于免疫原性强，结构复杂，能有效地诱导机体对宿主自体细胞以外的DNA序列区域直接产生免疫应答。SLE病人抗DNA抗体主要是Ig1和Ig3而且需要T细胞参与，且与所有DNA的保守序列结合。这与健康人的抗DNA抗体（Ig2）不同.w 通过

39、基因重组技术，将编码有特定蛋白抗原的裸露的质粒DNA注入体内，表达出抗原蛋白，诱导其抗体的表达及T细胞依赖的细胞裂解等一系列特异性免疫应答。DNA免疫不仅可以诱导体液免疫还可诱生特异性的以CTL为代表的细胞免疫应答。3267OTHER ANTIBODYwRA:w Sa99%,AKA（抗角质蛋白抗体）95%-100%,APF（抗核周因子）40%-50%,AFA（抗聚角蛋白微丝蛋白抗体）为的共同抗原决定族。w RF(IgG,IgM,IgA)80%,RA3389.8%.CCP（抗环瓜氨酸肽抗体）46.6%（96.6%），其中IgG型为53%，IgM型为58%。A-p68A（为糖蛋白成分GRP，也称免

40、疫球蛋白结合蛋白Bip binding protein；实际上是一种内质网分子伴侣。）67.8%;91.3。常见于RF阴性患者并出现于RA早期。wSLE:w ds-DNA40-90%,AHA3080%,Sm35%,Nrnp20-35%,SSA25-40%,w SSB10-15%,hsp40-50%,APL20-50%.anti-neuronal antibodies，anti-N（w血清中62.0%。脑脊液中47.4%）3268w 抗细胞膜DNA自身抗体（autoantibidies to membrane associated DNA，抗 mDNA。）90.0%（98.8%）；AuA（以Ds

41、-DNA和AHA为靶抗原）；抗端粒抗体（抗原为真核细胞末端DNA中高度重复的TTAGGG/CCCTAA序列）60%（91%）。C1qAb（42.86%；有肾损害为8 8.33%）。CRPAb与SLE的SLEDAI总IgG/dsDNA滴度呈正相关。w PM/DM:Jo-1 18-20%,pl-730%w Takayasu artertis (抗主动脉抗体)1:32w BD APL ANCA+3273血管炎的抗体w 1 ANCA：w 2 AECA（anti-endothelial cell antibodies，AECA）:w BD 40%;TA37%;MPA36%;PA44%;C-S33%;GCA50%;OTHER62%.w 3 anti-PR3(蛋白酶3，)w anti-MPO(髓过氧化物酶）3274w 其他：内皮素ET-1，致炎因子IL-1/TNF等；趋化因子MIP-1，MCP-1，RANTES等。新喋呤。sTNF-55，软骨低聚质蛋白（COMP）。黏附分子等等。