1、食物中还原型维生素C的测定 2, 6-二氯酚靛酚滴定法 讲师：邢秀梅 1 人体每天VitC摄入标准 l0岁婴儿宝宝每天维生素C摄入量为40毫克。 l半岁婴儿每天维生素C摄入量为50毫克。 l1岁儿童每天维生素C摄入量为60毫克。 l4岁以上儿童每天维生素C摄入量为70毫克。 l7岁以上儿童每天维生素C摄入量为80毫克。 l11岁以上儿童每天维生素C摄入量为90毫克。 l18岁以上成年人每天维生素C摄入量为100毫克。 l孕妇人群，在孕早期每天维生素C摄入量标准应为100毫克，孕中期 和孕晚期妇女每天维生素C摄入量标准应为130毫克。哺乳期妇女每 天维生素C摄入量标准也应为130毫克。 中国居民
2、膳食指南 3 各种蔬菜水果中的VitC的含量 lNo.1 樱桃 50g 12粒 500mg lNo.2 番石榴 80g 1 个 216mg lNo.3 红椒 80g 1/3个 136mg lNo.4 黄椒 80g 1/3个 120mg lNo.5 柿子 150g 1 个 105mg lNo.6 青花菜 60g 1/4株 96mg lNo.7 草莓 100g 6粒 80mg lNo.8 橘子 130g 1 个 78mg lNo.9 芥蓝 60g 1/3株 72mg lNo.10 猕猴桃 100g 1个 68mg 4 u 实验目的 了解食物中还原型VitC测定方法 5 u 实验原理 6 蓝色 红色
3、 无色 无杂质干扰时， 一定量的食物溶 液中还原性VitC 的含量与消耗的 染料的量呈正比 。 用标准VitC溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料（计 算1ml二氯酚靛酚相当于多少mg抗坏血酸） 用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，计 算其还原VitC 的浓度。 7 u 实验原理 u 试剂及器材 2, 6-二氯酚靛酚溶液（0.02%）：取50mg溶解于 NaHCO3热溶液中，冷却后4过夜，过滤后用 蒸馏水定容250ml，然后短期、棕色瓶、冷藏； 1%草酸溶液； 抗坏血酸储备液：0.1%（1mg/ml）； 待测样本：水溶C100 饮料20倍稀释； 容量瓶、滴定管、三角瓶、烧杯、移液管等。 8
4、 I.配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液 于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。 II.标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液 (0.1mg)、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红 色，能保持15秒不褪色为终点。记录所用染料A ml。（两次） III.空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染 料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录C ml。（两 次） IV.计算：1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg，T=0.1/(AC)。 V.果汁稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml果汁 稀释液、5
5、ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色 ，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Bml。（两次） VI.VitC(mg/ml)=T(B-C) N/5 ; (N=20) 9 u 实验步骤 取标准VitC工作 液与1%草酸各 5ml，混匀(2) 空白组: 1%草酸 10ml (2) 10 配VitC工作液:取1ml 0.1%抗 坏血酸标准母液于50ml容量 瓶，加1%草酸至刻度 待测样本：取稀释(20倍 )后的饮料与1%草酸 各 5ml，混匀(2) 2, 6-二氯酚靛酚染液 滴定 (由无色变为淡红色，15s内不褪色) C mlA ml B ml T = 0.1mg A-C（ml） VitC样(mg/ml)= (B C) T 5 ml N u 操作流程 1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg u 注意事项 l测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般 不超过2min; l滴定终点的判断:样品中可能有其他杂质也能还原2, 6- 二氯酚靛酚，但还原速度比还原型维生素C慢，故滴 定时以15s内粉红色不褪去为止； l滴定操作规范； l维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏； 11 实验报告要求 l实验目的 l实验结果 l分析与讨论 下周五之前交给 公共卫生学院 915 邓棋霏老师
