1、知知识识点点一一知知识识点点二二当当堂堂即即时时达达标标学学业业分分层层测测评评 P C R 扩扩 增增 的的 原原 理理 和和 过过 程程脱氧核苷酸 解旋酶 DNA聚合酶 3端 DNA扩增技术 DNA模板、TaqDNA聚合酶、脱氧核苷酸引物、四种脱氧核苷酸 快速 3端的脱氧核苷酸序列 94 单链DNA 55 引物 72 脱氧核苷酸 目目 的的 D N A 片片 段段 的的 体体 外外 扩扩 增增 5L10倍浓缩的PCR 4种脱氧 核苷酸的溶液 1L 5L 5L 29L 5min Taq聚合酶 94 72 1min 网络构建网络构建核心回扣核心回扣1.DNA聚合酶不能从头开聚合酶不能从头开始合
2、成始合成DNA，只能从，只能从3端端延伸延伸DNA链，因此，链，因此，DNA的合成方向总是从子链的的合成方向总是从子链的5端向端向3端延伸。端延伸。2.PCR反应需要反应需要DNA模板、模板、两种引物、四种脱氧核苷两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的酸、耐热的DNA聚合酶等聚合酶等条件。条件。3.PCR利用了利用了DNA的热变的热变性原理，通过控制温度来性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。控制双链的解聚与结合。4.PCR每次循环都包括变每次循环都包括变性、退火性、退火(复性复性)和延伸三和延伸三步。步。5.PCR扩增扩增DNA片段可以片段可以使目的片段呈指数增长。使目的片段呈指数增长。6.测定测定DNA分子的试剂是分子的试剂是二苯胺。二苯胺。DNA在酸性条件在酸性条件和加热下，能与二苯胺试和加热下，能与二苯胺试剂生成蓝色的物质。剂生成蓝色的物质。
