12-感染免疫学诊断试验.ppt

1、北京医院,感染免疫学诊断试验 Immunodiagnostic test of infectious disease,授课内容 Immunodiagnostic test of viral hepatitis HAV、HBV、HCV - 重点是抗原或抗体检测及临床意义。 HDV、HEV 了解抗原或抗体检测及临床意义。 Immunodiagnostic test of Acquired Immunodeficiency Syndrome 熟悉HIV的实验诊断。 Immunodiagnostic test of Sexually Transmitted Disease 熟悉梅毒的实验诊断。 熟悉C

2、RP检测及临床意义 了解淋病、支原体、衣原体感染的免疫学检查及临床意义,感染免疫学诊断试验 Immunodiagnostic test of infectious disease,1. Viral Hepatitis分类及其特征 hepatitis A virus , HAV hepatitis B virus , HBV hepatitis C virus , HCV hepatitis D virus , HDV hepatitis E virus , HEV,病毒性肝炎免疫学标志物检查 Immunodiagnostic Tests of Viral Hepatitis,1. Viral

3、Hepatitis 分类及其特征 分类 核酸特点 传播途径 HAV RNA，7480个bp 粪-口 HBV DNA，3200个bp 血或注射、手术、口腔 不完整的环形 科操作、血液透析、唾 液、精液和乳汁 HCV RNA，9400个bp 主要经血传播 输血和血制品 HDV RNA 主要经血传播 （与HBV同存） HEV RNA 粪-口 HGV/GBV RNA为非甲、乙、 血或密切接触 丙、丁、戊型肝炎,Immunodiagnostic Tests of Viral Hepatitis,2.Hepatitis A virus 免疫学标记物,Immunodiagnostic Tests of Vi

4、ral Hepatitis,HAV为肠道感染一种27nm大小RNA病毒引起的急性肝脏炎症。未见有慢性和肝细胞癌，潜伏期0.5-1.5月。 临床：急性起病，常高热，黄疸，消化道症状（恶心，呕吐，食欲不振），三个月恢复。,2. Hepatitis A virus免疫学标记物 Examination： ELISA；CLEIA； blot hybridization 、 reverse transcription polymerase chain reaction. Clinical significance： Antigen阳性表示HAV在体内存在 抗-HAV IgM 阳性是HAV急性感染早期诊断的

5、标志物(发病后2-3周出现，持续3-4月）。 抗-HAV IgG 检测可判断感染HAV或过去曾感染过HAV，它可持续数年或终生，也可对HAV的感染率进行流行病的调查。,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,3.2 Hepatitis B virus 标志物分类及检测 HBsAg HBcAg（不在血内出现，肝穿病理检查） HBeAg HBsAb（抗- HBs） HBcAb（抗- HBc,IgM 和IgG） HBeAb（抗- HBe） HBV-DNA 潜伏期为1-6月,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,

6、聚合酶链式反应（PCR）是模拟 DNA 体内复制过程,在DNA聚合酶的作用下, 进行特定DNA片段的体外复制。 原理： 变性（93-98）：双链DNA变性成单链作为模板 退火（37-65）：使引物附着于单链模板上 延伸（70-75）：以dNTP为原料从引物开始通过DNA 聚合酶的作用延伸 扩增效率与循环次数的关系： Y=A（1+E）n Y：扩增产物的量 A：起始DNA分子数 E：PCR扩增效率 n：循环次数 当E=100%时 Y=A225=33554432A E=90%时 Y=A1.925=9307649A（28%）,3.3 Hepatitis B virus 标志物阳性临床意义 signif

7、ication HBsAg 正在或曾经感染过、携带者。 抗-HBS 曾经感染过HBV、现已清除。 对疫苗是免疫成功的标志 抗-HBc(IgM) 急性乙肝、慢性乙肝。 (IgG) 过去感染过、正在感染（HBsAg存在） HBeAg 急性乙肝、血中HBV量多、传染性强。 抗-HBe 血中HBV减少、传染性弱。 HBV DNA HBV复制传染性强,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,4. Hepatitis C virus 免疫学标志物 临床：主要是血液传播，症状轻、易发展为慢性；丙肝可以治愈；无预防丙肝的疫苗。 HCV血清免疫学标识物及临床意义 An

8、ti-HCV阴性，不能完全排除感染。 Anti-HCV 阳性，感染,但不能确定现在还是过去感染。 确认实验:重组免疫印迹实验 HCV-RNA阳性说明体内存在病毒，传染性强，是确诊指标；用于监测治疗效果。,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,5. Examination of hepatitis D HDV与乙型肝炎病毒同时感染 轻 （协同感染，coinfection)。 HDV与慢性HBsAg阳性携带者同时感染 慢性、重型 （重叠感染，superinfection)。 传播途径： HDV传播途径与HBV一致，感染通过血液、血液制品 和性接触传播。

9、 检测： 协同感染： HBsAg （+）、 Anti-HDVIgM（+） 重叠感染： HBsAg （+）、 Anti-HDVIgG（+） Anti-HDVIgG（+）,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,6. Examination of hepatitis E HEV 为由粪-口传播，可以流行和散发。 临床：急性传染病，危害青壮年，男高于女，较甲肝病死率高，传染性低。 检测：ALT 、黄疸、HEV（感染证据)、 Anti-HEVIgM（正在感染）。,Immunodiagnostic tests of Viral Hepatitis,Defina

10、tion： AIDS是由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus ，HIV）引起的综合症。 AIDS侵犯 CD4+ T淋巴细胞、引起细胞免疫功能受损、 进而出现肿瘤和多种病原引起的感染发生，最终导 致死亡。,获得性免疫缺陷综合征的免疫学检查 Immunodiagnostic Test of Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS 的窗口期 感染后2-12周查出抗体，窗口期有很强的传染性。 AIDS 的潜伏期 从感染HIV病毒到发病这段时间（几个月至十几年） HIV examination及Clinical signifi

11、cance antibody 阳性 表示 HIV感染 初筛试验（screening test）EIA 确认试验（confirm test）免疫印迹. PCR阳性表示HIV存在 细胞免疫功能检测: CD4+ 、CD4+ / CD8+ ，由于肌体受到 HIV侵入，造成免疫系统缺损。 Comment 缨儿HIV诊断的窗口期；保护隐私,Immunodiagnostic Test of Acquired Immunodeficiency Syndrome,1. 梅毒检查（syphilis） syphilis是由梅毒螺旋体引起 传染性强（性、血液、母婴和接吻、接触病人污染的物品等） 慢性长期感染可对身体各

12、个器官有破坏危险 2. 临床分期（后天梅毒）：期(3-6周,硬下疳) ）、期（ 2年）传染性强，期(2年) ：神经梅毒、心血管梅毒、骨梅毒、潜伏梅毒等。 先天梅毒（胎传梅毒） examination： antigen ( tissue ):软下疳，显微镜（ 期和期） antibody ( serum ) specificity：检测特异性抗体 （IgG和IgM，IgG抗体终身存在） non-specificity：检测非特异性抗体,Immunodiagnostic Test of Sexually Transmitted Disease,non-specificity specificity

13、临床意义 _ _ 排除梅毒 一期梅毒的早期 艾滋病患者合并梅毒 + + 现症梅毒 梅毒孕妇所生的婴儿 + - 生物学假阳性 - + 梅毒治愈 有时早期梅毒,梅毒血清学试验结果的临床意义,2. 淋病检查（gonorrhoea) 由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖道感染，该菌为革兰阴性双球菌。 检测：分泌物直接涂片镜检；细菌培养。 3. 支原体感染的检查(mycoplasma infection) 检测：支原体培养； ELISA 抗体检测。 4. 衣原体感染的检查(chlamydia infection) 检测：细胞培养； ELISA 抗原和抗体检测；PCR.,Immunodiagnostic Test

14、of Sexually Transmitted Disease,C 反应蛋白是在机体受到创伤或炎症时，由炎性的淋巴因子刺激肝脏合成释放入血的急性相反应蛋白。 Reference Interval CRP8 mg/L HS-CRP3 mg /L Clinical significance CRP升高 在细菌感染或组织创伤时可成百倍升高，升高幅度与感染的程度呈正相关。 慢性炎症（自身免疫性疾病及恶性肿瘤）CRP持续升高 病毒感染时，CRP轻度升高50mg /L。,C-Reaction Protein, CRP,Clinical significance hs-CRP对表观健康的人群预示未来发生冠状动脉综合征的可能性, HS-CRP3 mg /L，患冠心病的危险性增加。 hc-CRP 和 TC 或 HDL-c 合并检测将显著提高心脏事件的预警率。,High sensitivity C-Reaction Protein, hs-CRP,谢,谢,