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期末总复习课件.ppt

1、一、各类微生物比较 分类地位:高分类地位:高低低 真菌真菌放线菌放线菌螺旋体螺旋体细菌细菌支原体支原体 立克次氏体立克次氏体衣原体衣原体病毒病毒类别类别细胞类型细胞类型形态形态DNA/RNADNA/RNA真菌真菌真核、多真核、多(主)或单(主)或单绒毛状绒毛状放线菌放线菌原核、原核、单单 分枝状分枝状细菌细菌原核、原核、单单球、杆、螺形球、杆、螺形螺旋体螺旋体原核、原核、单单 螺旋状螺旋状支原体支原体原核、原核、单单 不定形不定形衣原体衣原体原核、原核、单单 椭圆形椭圆形立克次氏体立克次氏体原核、原核、单单 短杆、球状短杆、球状病毒病毒非细胞非细胞球、杆为主球、杆为主仅一种仅一种类别类别无生命

2、培无生命培养基生长养基生长情况情况繁殖方式繁殖方式核糖体核糖体真菌真菌 孢子、菌丝、孢子、菌丝、裂殖裂殖 +放线菌放线菌 孢子、菌丝孢子、菌丝 +细菌细菌 二分裂二分裂 +螺旋体螺旋体 二分裂二分裂 +支原体支原体 二分裂二分裂 +衣原体衣原体 二分裂二分裂 +立克次氏体立克次氏体 二分裂二分裂 +病毒病毒 复制复制 类别类别常见抗常见抗生素敏生素敏感性感性干扰干扰素敏素敏感性感性 其它其它真菌真菌 孢子和菌丝组成、无性和有性孢子和菌丝组成、无性和有性放线菌放线菌 +孢子和菌丝组成、孢子和菌丝组成、产抗生素最多产抗生素最多细菌细菌 +典型原核微生物典型原核微生物螺旋体螺旋体 +无鞭毛,能运动,

3、无鞭毛,能运动,不同于螺形菌不同于螺形菌支原体支原体 +无胞壁无胞壁,最小独立生存细胞最小独立生存细胞衣原体衣原体 +独特周期独特周期(原、始原、始),),专性活寄生专性活寄生立克次氏体立克次氏体 +专性活细胞寄生专性活细胞寄生病毒病毒 +专性活细胞寄生专性活细胞寄生 细菌细菌 放线菌放线菌 真菌真菌 霉菌霉菌 酵母酵母形态形态 杆、球、螺杆、球、螺 分枝状分枝状 分枝状分枝状 椭圆椭圆细胞壁细胞壁 肽聚糖肽聚糖 肽聚糖肽聚糖 几丁质几丁质 酵母多糖酵母多糖生长温度生长温度 37 37 28283232 22 222828酸碱度酸碱度 6.8-7.4 6.8-7.4 7.2-7.6 7.2-7

4、.6 4-6 4-6常用培养基常用培养基 营养肉汤营养肉汤 高氏一号高氏一号 沙保培养基沙保培养基 查氏培养基查氏培养基代表代表二、微生物的培养二、微生物的培养(一)培养条件(一)培养条件:细菌、放线菌和真菌细菌、放线菌和真菌(二)培养基(二)培养基1 1、概念概念、种类及用途、种类及用途 (固、液、半固、鉴别)(固、液、半固、鉴别)2 2、必备条件必备条件:四个四个3 3、配制过程配制过程:固体?:固体?(三)培养现象(三)培养现象1 1、固体:、固体:2 2、液体:、液体:3 3、半固体:、半固体:菌落菌落(纯、多、可见)和菌苔纯、多、可见)和菌苔沉淀、均匀浑浊、菌膜沉淀、均匀浑浊、菌膜检

5、查细菌动力检查细菌动力(鞭毛鞭毛)(四)细菌鉴别(四)细菌鉴别 1 1、形态结构、形态结构:2 2、染色性、染色性 革兰染色:原理、步骤、试剂与结果革兰染色:原理、步骤、试剂与结果 3 3、培养现象、培养现象:菌落特征、液体生长:菌落特征、液体生长现象现象 4 4、生化反应、生化反应球、杆、螺形球、杆、螺形细胞壁组成和结构差异细胞壁组成和结构差异涂片涂片干燥干燥固定固定初初染染媒染媒染脱色脱色复染复染初染初染(草酸铵结晶紫草酸铵结晶紫)媒染媒染(卢卡氏典卢卡氏典液液)脱色:关键脱色:关键(95(95乙醇乙醇)复染复染(复复红或沙黄红或沙黄)结果:紫为结果:紫为G G+;红为红为G G-吲哚试验

6、吲哚试验(I)硫化氢试验硫化氢试验枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验(C)尿素酶试验尿素酶试验常用的生化反应常用的生化反应甲基红试验甲基红试验(M)单糖发酵试验单糖发酵试验VP试验试验(Vi)糖糖 发发 酵酵蛋白质分解蛋白质分解其其 它它IMViCIMViC试验试验三、消毒灭菌三、消毒灭菌1 1、概念、概念:消毒、灭菌、防腐、无菌操作:消毒、灭菌、防腐、无菌操作杀死杀死病原病原微生物微生物杀死杀死所有所有微生物微生物抑制抑制,生长繁殖生长繁殖2 2、消毒灭菌方法、消毒灭菌方法:物理、化学、生物及:物理、化学、生物及 其适用范围其适用范围 空气空气:滤过、紫外、化学(甲醛、过:滤过、紫外、化学(甲

7、醛、过 氧乙酸、环氧乙烷、臭氧等)氧乙酸、环氧乙烷、臭氧等)车间地面、墙壁车间地面、墙壁:紫外、化学(甲:紫外、化学(甲 醛、过氧乙酸、环氧乙烷、新醛、过氧乙酸、环氧乙烷、新 洁尔灭、煤酚皂、臭氧等)洁尔灭、煤酚皂、臭氧等)制剂设备制剂设备:蒸汽、化学(甲醛、过氧:蒸汽、化学(甲醛、过氧 乙酸、环氧乙烷、新洁尔灭、乙酸、环氧乙烷、新洁尔灭、煤酚皂、臭氧、乙醇等)煤酚皂、臭氧、乙醇等)操作人员操作人员:乙醇:乙醇 原辅料原辅料:干热、湿热、辐射、过滤:干热、湿热、辐射、过滤 制剂:制剂:滤过、干热、湿热、辐射、防滤过、干热、湿热、辐射、防 腐剂腐剂围绕药物生产围绕药物生产 仪器仪器:接种环、培养

8、皿、吸量管、:接种环、培养皿、吸量管、三角瓶、试管三角瓶、试管 培养基培养基:高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌法 压力、温度、时间压力、温度、时间围绕药物检验围绕药物检验四、微生物与药物检查四、微生物与药物检查(一)药物的体外抑菌试验:(一)药物的体外抑菌试验:稀释法、纸片法、挖沟法、稀释法、纸片法、挖沟法、联合抑菌试验联合抑菌试验(二)药物的卫生学检查(二)药物的卫生学检查 u阴性阴性:加稀释液:加稀释液无菌生长无菌生长u阳性阳性:加供试液:加供试液+菌液菌液有菌生长有菌生长u供试品供试品:加供试液:加供试液无菌生长无菌生长,判合格判合格 有菌生长有菌生长,判不合格判不合格 无菌检查无菌检查微生

9、物限度检查微生物限度检查1 1、无菌检查无菌检查:无菌制剂:无菌制剂(如注射剂、植入剂如注射剂、植入剂)方法:直接接种法和薄膜过滤法(优先)方法:直接接种法和薄膜过滤法(优先)2 2、微生物限度检查微生物限度检查:非规定灭菌制剂:非规定灭菌制剂 (如口服液、外用制剂如口服液、外用制剂)u控制菌检查控制菌检查u细菌总数检查细菌总数检查非全检非全检u真菌总数检查真菌总数检查u活螨检查活螨检查大肠埃希菌大肠埃希菌大肠菌群大肠菌群铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌沙门菌沙门菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌梭菌梭菌限制数量限制数量限制种类限制种类不超标不超标,判合格超判合格超标标,判不合格判不合格未检出未检出,判合

10、格判合格检出检出,判不合格判不合格 方法方法:常规平板法和薄膜过滤法:常规平板法和薄膜过滤法u细菌、真菌总数检查细菌、真菌总数检查u阴性阴性:加稀释液:加稀释液无菌生长无菌生长u供试品供试品:加供试液:加供试液不超标,判合格不超标,判合格 超标,判不合格超标,判不合格 数据数据处理处理 混合平混合平板的制板的制备备细 菌、细 菌、真菌的真菌的培养培养结果观结果观察与计数察与计数供试供试液的液的制备制备书写检书写检验记录验记录单单常规平板法基本过程:常规平板法基本过程:配制培配制培养基养基u控制菌检查控制菌检查方法:常规方法法和薄膜过滤法方法:常规方法法和薄膜过滤法u阴性阴性:加稀释液:加稀释液

11、无菌生长无菌生长u阳性阳性:加供试液:加供试液+菌液菌液检出控制菌检出控制菌u供试品供试品:加供试液:加供试液 未检出未检出,判合格判合格 检出检出,判不合格判不合格 供试液制备供试液制备 增菌培养增菌培养鉴别培养基培养鉴别培养基培养 挑取疑似菌落挑取疑似菌落 染色、镜检染色、镜检 生化试验生化试验 书写检验报告单书写检验报告单 供试品控制菌检查的基本程序:供试品控制菌检查的基本程序:五、微生物的致病性与免疫五、微生物的致病性与免疫(一)细菌的致病性(一)细菌的致病性1、影响因素、影响因素毒力毒力侵入数量侵入数量侵入途径侵入途径机体免疫力机体免疫力侵袭力侵袭力毒素毒素:内、外毒素比较内、外毒素

12、比较2、感染类型、感染类型:隐性、显性、带菌状态:隐性、显性、带菌状态菌血症:菌入血,不繁殖菌血症:菌入血,不繁殖毒血症:菌不入血,毒素入血毒血症:菌不入血,毒素入血败雪症:菌入血且繁殖,毒素入血败雪症:菌入血且繁殖,毒素入血(二)免疫基础(二)免疫基础1、免疫功能、免疫功能免疫防御免疫防御免疫自稳免疫自稳免疫监视免疫监视2、免疫系统、免疫系统免疫器官免疫器官免疫细胞免疫细胞免疫分子免疫分子中枢中枢:骨髓、胸腺骨髓、胸腺外周外周:淋巴结、脾脏等淋巴结、脾脏等补体补体:概念概念干扰素干扰素:作用、产生作用、产生3、抗原、抗原特性特性:免疫原性和免疫反应性免疫原性和免疫反应性构成条件构成条件:异物

13、性、复杂大分子、特异性异物性、复杂大分子、特异性主要医学抗原:哪些主要医学抗原:哪些4、抗体、抗体概念概念产生规律:初次反应、再次反应产生规律:初次反应、再次反应作用:哪些作用:哪些以一抗原进入机体后所发生的免以一抗原进入机体后所发生的免疫过程说明非特异性免疫和特异疫过程说明非特异性免疫和特异性免疫性免疫5、免疫防御机能、免疫防御机能非特异性非特异性特异性特异性特点、组成特点、组成6、超敏反应:、超敏反应:类型及其常见疾病类型及其常见疾病7、特异性免疫获得、特异性免疫获得:类型及其示例:类型及其示例1 1、微生物遗传物质:、微生物遗传物质:真菌:真菌:DNADNA 原核:原核:DNA:DNA:

14、核质核质(必需必需)与质粒与质粒(非必需非必需)病毒:病毒:DNADNA或或RNARNA六、微生物的遗传与变易六、微生物的遗传与变易2 2、微生物遗传变异现象、微生物遗传变异现象形态结构形态结构菌落形态菌落形态毒力毒力酶活性酶活性R R质粒:组成、质粒:组成、耐药机制耐药机制3 3、原核微生物、原核微生物 基因转移方式基因转移方式转化转化转导转导接合接合噬菌体转变噬菌体转变4 4、菌种保藏方式、菌种保藏方式斜面低温保藏法斜面低温保藏法液状石蜡封存法液状石蜡封存法砂土管保藏法砂土管保藏法冷冻干燥保藏法冷冻干燥保藏法超低温保藏法超低温保藏法七、实训操作七、实训操作(一)显微镜使用技术(一)显微镜使

15、用技术1 1、放大倍数、放大倍数=目镜倍数目镜倍数物镜倍数物镜倍数2、使用原则:、使用原则:由低到高;先粗后微;宜慢忌快由低到高;先粗后微;宜慢忌快低低:4 4;1010高高:4040油镜油镜:100100(加香柏油加香柏油)放大倍数越大,视放大倍数越大,视野越窄,越暗野越窄,越暗3、使用后处理:、使用后处理:清洁:油镜清洁清洁:油镜清洁“三步曲三步曲”还原:载物台、镜头、聚光器、还原:载物台、镜头、聚光器、虹彩光圈、调光螺旋、玻虹彩光圈、调光螺旋、玻 片夹片夹 教师检查教师检查 放回镜箱放回镜箱(三)微生物培养技术(三)微生物培养技术 1、培养基配制、培养基配制 2、接种技术、接种技术 3、培养技术:温度、培养时间、培养技术:温度、培养时间(二)染色技术(二)染色技术(四)对流免疫电泳技术(四)对流免疫电泳技术

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