宫颈上皮内瘤变及宫颈癌课件.ppt

1、60s 53岁；岁；90s 42岁岁）n生物学因素：生物学因素：HPVHPV、HSVHSV、CMVCMVn行为学因素：行为学因素：性行为异常：性行为异常：经期及产褥期卫生不良者经期及产褥期卫生不良者 高危男性配偶高危男性配偶 分娩：早产、多产、多次阴道分娩分娩：早产、多产、多次阴道分娩n其他：其他：遗传因素遗传因素 免疫缺陷：如免疫缺陷：如HIVHIV感染，自身免疫疾病，免疫抑制药物感染，自身免疫疾病，免疫抑制药物 社会经济地位低下社会经济地位低下病病 因因(Etiology)相关因素：性行为性行为：早婚、性生活过早及性生活紊乱 生育生育：早产、多产及密产。男性性行为及有关因素男性性行为及有关

2、因素：多个性伴侣及高危男子。某些病毒感染某些病毒感染（Centain infection with virus.HPV/HSV /HCMV）男性性行为及有关因素：宫颈癌配偶的性伴侣数远较对照组配偶的性伴侣数为多，大多有各种性病史。高危男子与宫颈癌关系密切的论点也被重视。高危男子：凡配偶有阴茎癌、前列腺癌或其前妻曾患有宫颈癌者均为高危男子。配偶阴痉癌其妻子较其他妇女宫颈癌的危险性高36倍。病 因 Etiology危险因素 n人类乳头瘤病毒(HPV)n吸烟 n其他：多个性伴侣；早期性行为；性伴侣的性伴侣患宫颈癌；低社会经济阶层 子宫颈癌危险因素研究子宫颈癌危险因素研究n18001800s:s:与性

3、行为相关与性行为相关n19601960s-80s-80s:s:感染因子感染因子 (HSV-2)(HSV-2)n19801980s-90s-90s:s:发现发现HPVHPV与子宫颈癌有关与子宫颈癌有关n19901990s-:HPVs-:HPV被确认为子宫颈癌的主要病因被确认为子宫颈癌的主要病因 -99.7%-99.7%的子宫颈癌都可检测到高危型的子宫颈癌都可检测到高危型HPV DNAHPV DNA-持续持续HPV+/HPV-HPV+/HPV-的相对危险比的相对危险比(OR)(OR)高达高达250250-归因危险百分比归因危险百分比(ARP)(ARP)超过超过 90%90%-没有没有HPVHPV感

4、染，宫颈癌的发生几率几乎为零感染，宫颈癌的发生几率几乎为零HPV感染n在有性生活的男性和女性中，至少有75将在一生中的某个时间感染HPV。nHPV感染在CIN患者中为70%-78%；在CIN或CIN患者中为80%-89%；在宫颈癌患者中则超过95%。nHPV主要通过性交传播,其感染情况直接与女性的性伴侣数,性伙伴的性伴侣数有关。HPV感染n国外以HPV-16，HPV-18型为主，HPV总检出率为50%左右，HPV-16和HPV-18型分别占40%,10%左右 n我国以16、58型为主，HPV总检出率为53.5%，HPV-16和HPV-18型分别占31.9%,7.6%，明显低于国外。HPVHPV

5、 感染过程感染过程n整合过程导致宿主染色体结构改变：激整合过程导致宿主染色体结构改变：激活癌基因，生长因子及受体的启动子活癌基因，生长因子及受体的启动子n基因组中含多个启动子基因组中含多个启动子n致癌蛋白致癌蛋白E6E6，E7E7的致癌作用的致癌作用:P53:P53、PRbPRbn调节基因调节基因E2E2的结构破坏的结构破坏n免疫逃避：主动；被动免疫逃避：主动；被动E6、E7 原癌蛋白的表达是维持肿瘤原癌蛋白的表达是维持肿瘤细胞处于转化状态所必需的：细胞处于转化状态所必需的：E6蛋白蛋白可结合并降解可结合并降解p53，激活端粒酶而使，激活端粒酶而使细胞永生化细胞永生化E7蛋白蛋白与与pRB反应

6、是反应是E7转化活性的关键，转化活性的关键，导致细胞周期失控而发生永生化导致细胞周期失控而发生永生化人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒(HPV)(HPV)生物学特性生物学特性E6E7宫颈的组织学特性宫颈的组织学特性宫颈阴道部鳞状上皮：宫颈阴道部鳞状上皮：宫颈管柱状上皮：宫颈管柱状上皮：转化区：转化区：宫颈的组织学特性宫颈的组织学特性原始鳞原始鳞柱交接部或鳞柱交界柱交接部或鳞柱交界：子宫颈颈管部被覆柱状上皮与颈管阴道部被覆鳞状上皮之间在宫颈外口的交接部位，称为“原始鳞柱交接部或鳞柱交界。(Primitive squimv-columnar junction、Physiologic squimv-colum

7、nar junction)”。宫颈的组织学特性宫颈的组织学特性 生理鳞生理鳞柱交接部柱交接部：在阴道酸性环境或致病菌作用下，外移的柱状上皮由原始鳞-柱状交接部的内侧向宫颈口方向逐渐被鳞状上皮替代，形成新的鳞-柱状交接部。转化区：原始鳞-柱状交接部和生理鳞-柱状交接部之间的区域。柱状上皮被鳞状上皮替代的机制：鳞状上皮化生 鳞状上皮化 关于关于 E2什么时间E2 新生女婴在母体内受胎儿胎盘单位分泌的高雌激素时，青春期卵泡发育期，生育期，尤其是妊娠期，这时E2。什么时间E2 幼女期来自母体的E2消失，绝经期卵巢萎缩。鳞状上皮化生鳞状上皮化生Squamous metaplasia 被覆的柱状上皮逐渐被

8、鳞状上皮所替代。（它既不同于正常宫颈阴道部的鳞状上皮，又不同于非典型增生，更不能把它认为是癌）鳞状上皮化鳞状上皮化 Squamous epithelazation 宫颈阴道部鳞状上皮直接长入柱状上皮与基底层之间，直至柱状上皮完全脱落而被鳞状上皮替代。多见宫颈糜烂愈合过程。宫颈癌的组织发展宫颈癌的组织发展宫颈上皮内瘤变的病理学分级宫颈上皮内瘤变的病理学分级 是与宫颈浸润癌密切相关的一组癌是与宫颈浸润癌密切相关的一组癌前病变，它反映宫颈癌发生发展的前病变，它反映宫颈癌发生发展的连续过程。连续过程。宫颈不典型增生 cervical dysplasia 宫颈上皮化生过程活跃，某些外来致癌物质刺激，或移

9、行带反复变动，移行带区活跃的未成熟细胞或增生的鳞状上皮细胞分化不良，排列紊乱，核深染，核异型，核分裂相。这种变化称为鳞状上皮不典型增生。宫颈癌的组织发展 宫颈不典型增生为分为三度（III级）：轻度（I级）mild(grade I)病变局限在上皮层下1/3；中度（II级）moderate(gradeII)病变局限在上皮层下2/3；重度（III级）severe(gradeIII)病变几乎累及全部上皮层（上1/3）。宫颈癌的组织发展 宫颈原位癌（carcinoma in situ）CIS：指宫颈上皮细胞发生癌变，但基底层未穿透，间质无浸润，也称为上皮内癌（这是1932年由Broders 首先提出）。

10、宫颈癌的组织发展分 级根据病变程度CIN又分为三个级别：CIN I 级：mild dysplasia 轻度不典型增生 CIN II级：moderate dysplasia 中度不典型增生 CIN III级：severe dysplasia+CIS 重度+原位癌 子宫颈病变的发生、发展子宫颈病变的发生、发展宫颈上皮内瘤变临床表现宫颈上皮内瘤变临床表现 无特殊临床症状和临床体征无特殊临床症状和临床体征宫颈上皮内瘤变临床表现宫颈上皮内瘤变临床表现 无特殊临床症状和临床体征无特殊临床症状和临床体征宫颈上皮内瘤变诊断宫颈上皮内瘤变诊断 子宫颈癌的筛查与早期诊断方法子宫颈癌的筛查与早期诊断方法n肉眼观察肉

11、眼观察n阴道镜检查阴道镜检查n细胞学筛查细胞学筛查nHPVHPV检查检查n宫颈锥切术、宫颈锥切术、LEEPLEEPn确诊：组织病理学检查确诊：组织病理学检查肉眼观察肉眼观察nVIA法法:即用即用3-5%3-5%的冰醋酸的冰醋酸染色染色,一分钟后一分钟后,病变区域病变区域呈白色呈白色,根据白色病变的厚薄、边界、轮廓和消失的根据白色病变的厚薄、边界、轮廓和消失的快慢做出初步诊断快慢做出初步诊断nVILI法法:即用即用4-5%4-5%的碘液的碘液染色染色,正常宫颈上皮染成黄色正常宫颈上皮染成黄色,未着色区为病变区未着色区为病变区,根据未着色的程度根据未着色的程度,局部平坦或局部平坦或隆起的感觉隆起的

12、感觉,边界状态边界状态,大小、离鳞柱交界的距离、大小、离鳞柱交界的距离、单块或多块等作出初步诊断单块或多块等作出初步诊断肉眼观察肉眼观察(VIA)(VIA)的局限性的局限性n研究表明研究表明,VIA,VIA对筛查对筛查绝经后的妇女绝经后的妇女很少有效很少有效n灵敏度和特异度灵敏度和特异度均较低均较低,大约在大约在505070%70%n假阳性和假阴性假阳性和假阴性率都较高率都较高,可靠性相对较低可靠性相对较低nVIAVIA筛出的病例大部分是筛出的病例大部分是浸润性癌和早期癌浸润性癌和早期癌而而非非癌前病变癌前病变n阴道镜可发现肉眼看不见的阴道镜可发现肉眼看不见的亚临床病变亚临床病变,并在可疑并在

13、可疑病变处定位活检病变处定位活检,从而提高活检的阳性率和诊断的从而提高活检的阳性率和诊断的准确率准确率n配合细胞学检查配合细胞学检查,用于阴道细胞学异常或可疑患者用于阴道细胞学异常或可疑患者n是早期诊断宫颈癌及癌前病变的重要辅助方法之一是早期诊断宫颈癌及癌前病变的重要辅助方法之一阴道镜检查局限性阴道镜检查局限性n阴道镜难以观察到阴道镜难以观察到宫颈管内的病变宫颈管内的病变,而绝经前后的妇而绝经前后的妇女约女约121215%15%宫颈上皮的鳞柱交界上移至颈管内宫颈上皮的鳞柱交界上移至颈管内,常常造成假阴性。造成假阴性。n阴道镜的敏感度和特异性均较低阴道镜的敏感度和特异性均较低,尤其是特异性尤其是

14、特异性,不不宜作为筛查的方法；宜作为筛查的方法；细胞学筛查细胞学筛查巴氏涂片法（巴氏涂片法（Pap smear）的演变）的演变1928Papanicolaou提出利用阴道细胞学涂片进行筛查的发现，但被提出利用阴道细胞学涂片进行筛查的发现，但被忽略忽略1934Papanicolaou 和和Traub发表文章，利用细胞学检查发现早期子发表文章，利用细胞学检查发现早期子宫颈病变宫颈病变1950S文章被大批读者阅读，观点被接受，美国和加拿大开始实施普文章被大批读者阅读，观点被接受，美国和加拿大开始实施普查查1955Scheffey介绍阴道镜，起初认为可以替代繁琐的介绍阴道镜，起初认为可以替代繁琐的PA

15、P检查；检查；10年后公认是异常细胞学检查的进一步补充手段年后公认是异常细胞学检查的进一步补充手段1960S巴氏涂片法被广泛接受为早期发现子宫颈早期病变的金标准巴氏涂片法被广泛接受为早期发现子宫颈早期病变的金标准子宫颈癌细胞学筛查意义子宫颈癌细胞学筛查意义传统细胞学检查方法不足之处传统细胞学检查方法不足之处取样工具的改进取样工具的改进制片方法的改进制片方法的改进 液基薄层细胞学技术液基薄层细胞学技术液基薄层制片方法与巴氏涂片法的比较液基薄层制片方法与巴氏涂片法的比较巴氏涂片法巴氏涂片法液基薄层制片法液基薄层制片法涂片示意图涂片示意图镜下观镜下观细胞重叠较多，形态难以看清楚。含有大量粘液、红细胞

16、和杂菌，背景污浊。细胞重叠少，依次排列，形态清晰，去除了粘液、红细胞和杂菌，背景清晰。涂片面积涂片面积90 mm215 mm2可供诊断的细胞可供诊断的细胞比例比例20%接近100%Papnet扫描时间扫描时间10 min 2 min 阅片方式：阅片方式：巴氏分类法巴氏分类法TBSTBS分类法（分类法（The Bethesda System The Bethesda System）TBSTBS分类法的优点分类法的优点n强调标本适宜的重要性；强调标本适宜的重要性；n为各种癌前病变提供标准化可重复的标准和术语，以为各种癌前病变提供标准化可重复的标准和术语，以便达到：便达到：A A、降低不同观察者的差

17、异、降低不同观察者的差异 B B、与临床医师进行有效的交流、与临床医师进行有效的交流 C C、依据巴氏涂片诊断，有助于形成统一的病人处理、依据巴氏涂片诊断，有助于形成统一的病人处理办法办法n可以提供建议。可以提供建议。TBSTBS分类法（分类法（2001)2001)描述描述结果结果 鳞状上皮细胞异常鳞状上皮细胞异常腺上皮细胞异常腺上皮细胞异常 非典型腺细胞非典型腺细胞（AGCAGC）非典型腺细胞非特异性非典型腺细胞非特异性（AGCAGCNOSNOS）非典型子宫颈管内膜细胞非典型子宫颈管内膜细胞 非典型子宫内膜细胞非典型子宫内膜细胞 非典型子宫颈管内膜细胞，倾向于恶变非典型子宫颈管内膜细胞，倾向

18、于恶变 子宫颈管原位腺癌（子宫颈管原位腺癌（endocervical endocervical adenocarcinoma in situ,AIS adenocarcinoma in situ,AIS）腺癌腺癌CIN与SIL细胞学筛查法存在问题细胞学筛查法存在问题 病原体检测：病原体检测：HPVHPVDNADNA检测检测放大核酸，检测核酸放大物放大核酸，检测核酸放大物Polymerase chain reaction（PCR）直接检测核酸直接检测核酸 固相杂交：固相杂交：Southern blot hybridization；Dot blot hybridization 液相杂交：液相杂交：

19、杂交捕获（杂交捕获（Hybrid Capture）计算机判读15 min后DNA-RNA杂交60 min抗体捕获60 min化学发光检测30 minDNA分解45 min原理原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测=特点：特点：检测方法简单且效率高检测方法简单且效率高 高危高危HPVHPV检测敏感度高（检测敏感度高（98%98%）高的阴性预测值（高的阴性预测值（99%99%）如HPV DNA检测阴性，该妇女在510年内患宫颈癌的机会几乎为零。重复性好重复性好 操作不受采集样本的影响，不受操作环境的误差影响操作不受采集样本的影响，不受操作环

20、境的误差影响 =检测范围：检测范围：可同时检测可同时检测1313种种高危型高危型HPVHPV：1616，1818，3131，3333，3535，3939，4545，5151，5252，5656，5858，5959、68(68(与与HSIL/HSIL/癌有关癌有关)n进一步明确细胞学结果轻度异常的诊断（进一步明确细胞学结果轻度异常的诊断（ASC）n筛查：筛查：30岁以上妇女，细胞学加岁以上妇女，细胞学加HPV检测检测 双阴性者，双阴性者，3年复查一次年复查一次 细胞学阴性，细胞学阴性，HPV阳性者，一年后复查阳性者，一年后复查nCIN治疗后追踪治疗后追踪 细胞学和细胞学和HPV均为阴性常规筛查均

21、为阴性常规筛查 细胞学阴性、细胞学阴性、HPV阳性复查阴道镜阳性复查阴道镜子宫颈癌的演变过程子宫颈癌的演变过程子宫颈癌筛查与早期诊断子宫颈癌筛查与早期诊断012345Proportion surviving020406080100Stage IaStage IbStage IVaStage IVbYears after diagnosis最佳筛查方案最佳筛查方案（中国癌症基金会）（中国癌症基金会）一般筛查方案一般筛查方案（中国癌症基金会）（中国癌症基金会）最基本筛查方案最基本筛查方案（中国癌症基金会）（中国癌症基金会）何时开始筛查何时开始筛查WHEN TO START SCREENINGWHE

22、N TO START SCREENINGn经济发达地区：经济发达地区：2530岁岁n经济欠发达地区：经济欠发达地区：3540岁岁n高危人群：适当提前高危人群：适当提前筛查间隔筛查间隔SCREENING INTERVALSCREENING INTERVALAmerican Cancer Society American Cancer Society（ACSACS），），20022002停止筛查时间停止筛查时间WHEN TO DISCONTINUE SCREENINGWHEN TO DISCONTINUE SCREENING 6565岁（岁（7070岁）：近岁）：近1010年来，有连续年来，有连续

23、3 3次检次检查记录，技术上满意，结果为阴性查记录，技术上满意，结果为阴性 任何时间：危重患者或出现危及生命的任何时间：危重患者或出现危及生命的病情：如心衰，中风等病情：如心衰，中风等 停止筛查：停止筛查：个性化：个性化：涂片结果不确定；涂片结果不确定；DES应用史；应用史；CIN病史；病史；近期近期HPV阳性；阳性；免疫缺陷；免疫缺陷；HIV阳性阳性子宫切除术后筛查子宫切除术后筛查SCREEING AFTER HYSTERECTOMYSCREEING AFTER HYSTERECTOMYAmerican Cancer Society American Cancer Society（ACSAC

24、S），），20022002HPVHPV疫苗疫苗介导的宫颈癌生物学预防和治疗介导的宫颈癌生物学预防和治疗免疫应答：免疫应答：指机体免疫系统受抗原刺激后，淋巴细胞特异性识指机体免疫系统受抗原刺激后，淋巴细胞特异性识别抗原分子，发生活化、增殖、分化或无能、凋亡，进而表别抗原分子，发生活化、增殖、分化或无能、凋亡，进而表现出一定生物学效应的全过程。现出一定生物学效应的全过程。人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒(HPV)(HPV)生物学特性生物学特性微小的病毒：微小的病毒：有有80008000个个bpsbps的双的双链链DNADNA分子的病毒分子的病毒在空气中可存活在空气中可存活10+10+小时小时庞庞大家族：大

25、家族：目前有目前有100+100+种型别种型别HPVHPV，约，约 3535 种型别与生殖道感种型别与生殖道感染有关染有关特异性感染人特异性感染人粘膜上皮细胞粘膜上皮细胞传播途径：主要由性接触感染，传播途径：主要由性接触感染，是最常见的病毒性性传播疾病是最常见的病毒性性传播疾病 HPVHPV的主要结构和功能的主要结构和功能 Major capsid proteinTransforming genes/growth stimulationMinor capsid proteinRegulation of viral replicationRegulation of viral transcrip

26、tion&replicationURR预防性疫苗：预防性疫苗：针对健康人群。靶向针对健康人群。靶向病毒衣壳蛋白病毒衣壳蛋白L1L1和和L2L2，刺激机体产，刺激机体产生保护性中和抗体，以阻断生保护性中和抗体，以阻断HPVHPV感染。感染。治疗性疫苗：治疗性疫苗：应用对象为已感染人群。靶向应用对象为已感染人群。靶向病毒的病毒的E6E6、E7E7蛋白蛋白。主要。主要用于清除在上皮基底细胞内复制的病毒和用于清除在上皮基底细胞内复制的病毒和HPVHPV导致的异常细胞。导致的异常细胞。预防性预防性HPVHPV疫苗研究方向疫苗研究方向集中于如何集中于如何 有效产生有效产生HPVHPV抗体抗体 预防性疫苗的

27、种类：预防性疫苗的种类：v病毒外壳蛋白疫苗病毒外壳蛋白疫苗v合成多肽疫苗合成多肽疫苗v核酸疫苗核酸疫苗L1L1、L2L2作为作为HPVHPV病毒壳蛋白，是理想的抗病毒壳蛋白，是理想的抗感染免疫靶子。感染免疫靶子。通过酵母细胞、昆虫细胞、哺乳细胞和原通过酵母细胞、昆虫细胞、哺乳细胞和原核细胞系统，如牛痘病毒、杆状病毒、核细胞系统，如牛痘病毒、杆状病毒、SemlikiSemliki森林病毒作为表达载体构建的病毒森林病毒作为表达载体构建的病毒模拟体模拟体VLPVLP，可以作为预防性疫苗。，可以作为预防性疫苗。困难：困难：VLP VLP诱导的中和抗体具有型特异性、诱导的中和抗体具有型特异性、致癌致癌H

28、PVHPV型别的多样性、型别的多样性、HPVHPV感染年龄的难以预计，感染年龄的难以预计，一种针对性强并高效多价的一种针对性强并高效多价的HPVHPV疫疫苗的研究仍需要一定时间。苗的研究仍需要一定时间。在在HPV感染宫颈组织使上皮细胞癌变后，应感染宫颈组织使上皮细胞癌变后，应该构建该构建治疗性疫苗治疗性疫苗诱导诱导CTL清除肿瘤细胞。清除肿瘤细胞。高危型高危型HPV的的E6,E7是是HPV相关的宫相关的宫颈组织癌变的关键因素，颈组织癌变的关键因素，E6,E7在宫在宫颈组织癌细胞上持续表达是维持肿瘤颈组织癌细胞上持续表达是维持肿瘤细胞处于转化状态所必须的。细胞处于转化状态所必须的。将将E6，E7

29、视作肿瘤特异性抗原是研究视作肿瘤特异性抗原是研究治疗性疫苗的着眼点。治疗性疫苗的着眼点。宫颈癌治疗性疫苗种类宫颈癌治疗性疫苗种类1.多肽疫苗多肽疫苗 2.蛋白疫苗蛋白疫苗 3.嵌合性嵌合性HPV VLP疫苗疫苗(cVLPs)4.核酸疫苗核酸疫苗 5.病毒载体疫苗病毒载体疫苗6.反义技术疫苗反义技术疫苗7.细菌载体疫苗细菌载体疫苗 8.细胞疫苗细胞疫苗 多多 肽肽 疫疫 苗苗 多肽疫苗是针对细胞和某些细胞的免疫表位而设计的。多肽疫苗是针对细胞和某些细胞的免疫表位而设计的。T细胞识别抗原是抗原呈递细胞细胞识别抗原是抗原呈递细胞MHC分子呈递的分子呈递的8-10个氨基酸个氨基酸组成的多肽。组成的多肽

30、。人工合成人工合成T细胞和某些线性细胞和某些线性B细胞的多肽免疫表位，辅以适当细胞的多肽免疫表位，辅以适当的佐剂，即能的佐剂，即能与与MHC结合，结合，激发免疫反应。激发免疫反应。HPV16 E6的的T细胞表位位于细胞表位位于E6 41-50,91-100和和146-151，E7的的T细胞表位位于细胞表位位于49-57。蛋蛋 白白 疫疫 苗苗v 在体外纯化的病毒蛋白，如在体外纯化的病毒蛋白，如E2、E6、E7蛋白能诱导抗体和辅助性细胞免蛋白能诱导抗体和辅助性细胞免疫应答以及细胞毒细胞反应。疫应答以及细胞毒细胞反应。v 临床试验表明临床试验表明:此疫苗是安全此疫苗是安全,易耐受易耐受的的,有免疫

31、原性。有免疫原性。嵌合性乳头瘤病毒疫苗嵌合性乳头瘤病毒疫苗 嵌合性HPV VLP是指将6、7等病毒非结构蛋白或来源于这类蛋白的肽表位与 LI VLP合并，既有预防又有治疗作用。E6/E7的抗原表位核核 酸酸 疫疫 苗苗 v指编码蛋白表位的指编码蛋白表位的DNA或或RNA与自然感染途径表达的与自然感染途径表达的蛋白一样被机体加工处理蛋白一样被机体加工处理,启动针对该抗原的体液及细启动针对该抗原的体液及细胞免疫的一种疫苗。胞免疫的一种疫苗。v接种核酸疫苗后，能在宿主细胞内持续表达，不断强接种核酸疫苗后，能在宿主细胞内持续表达，不断强化化T、B细胞记忆。能够从多方面提高免疫反应，降低细胞记忆。能够从

32、多方面提高免疫反应，降低自然感染，诱导保护性的免疫反应自然感染，诱导保护性的免疫反应.包括包括CTL和中和抗和中和抗体。体。病毒载体疫苗病毒载体疫苗 v最普遍使用的病毒载体是重组的牛痘病毒和腺病毒最普遍使用的病毒载体是重组的牛痘病毒和腺病毒,具有具有DNA转导的高效性和基因高水平的表达。转导的高效性和基因高水平的表达。v腺病毒腺病毒载体组装载体组装HPV疫苗更吸引人，尤其是经过改疫苗更吸引人，尤其是经过改造的肿瘤增殖腺病毒，可以在肿瘤细胞内特异性复制，造的肿瘤增殖腺病毒，可以在肿瘤细胞内特异性复制，而不在正常细胞内复制，从而提高了治疗的靶向性。而不在正常细胞内复制，从而提高了治疗的靶向性。最常

33、用的最常用的HPV基因靶点是基因靶点是E2、E6、E7基因。基因。引言反反 义义 技技 术术 v反义技术主要包括反义反义技术主要包括反义DNA，反义，反义RNA和核酶和核酶v作用机制：抑制转录或转录后加工作用机制：抑制转录或转录后加工,或抑制翻译或抑制翻译,v目的：特异性阻断目的：特异性阻断HPV原癌蛋白原癌蛋白E6、E7的合成的合成,逆转逆转宫颈癌的恶性表型宫颈癌的恶性表型,从而达到治疗目的。从而达到治疗目的。细菌载体疫苗细菌载体疫苗 v细菌载体疫苗利用细菌细菌载体疫苗利用细菌(如卡介苗和沙门菌如卡介苗和沙门菌)做载做载体体,将保护性抗原基因重组到细菌中将保护性抗原基因重组到细菌中,制成疫苗

34、。制成疫苗。v优势：能使感染细胞内源性表达目的基因优势：能使感染细胞内源性表达目的基因,有正有正确的翻译后修饰确的翻译后修饰,可刺激应答。可刺激应答。v用于这类疫苗的载体通常为特定微生物的疫苗株用于这类疫苗的载体通常为特定微生物的疫苗株,以保证载体的安全性。可有效呈递嵌合免疫表位以保证载体的安全性。可有效呈递嵌合免疫表位,诱导粘膜免疫和系统免疫反应。诱导粘膜免疫和系统免疫反应。肿瘤细胞疫苗肿瘤细胞疫苗v应用肿瘤细胞或经各种基因修饰后的肿瘤细胞在体外制成应用肿瘤细胞或经各种基因修饰后的肿瘤细胞在体外制成瘤苗，经致死剂量照射后，再重新接种于来源于同一患者瘤苗，经致死剂量照射后，再重新接种于来源于同

35、一患者体内构成了肿瘤细胞疫苗的基础体内构成了肿瘤细胞疫苗的基础v这样使逃避免疫监视的肿瘤细胞可以被免疫系统识别，从这样使逃避免疫监视的肿瘤细胞可以被免疫系统识别，从而诱导机体产生针对肿瘤细胞的主动的特异性的反应。而诱导机体产生针对肿瘤细胞的主动的特异性的反应。v值得注意的是，应用肿瘤细胞制成瘤苗的前提是肿瘤细胞值得注意的是，应用肿瘤细胞制成瘤苗的前提是肿瘤细胞表达具有免疫原性的肿瘤相关抗原。表达具有免疫原性的肿瘤相关抗原。树突状细胞疫苗树突状细胞疫苗v树突状细胞（树突状细胞（DC）是目前发现的功能最强的专是目前发现的功能最强的专职抗原提呈细胞职抗原提呈细胞(APC)，具有强大的激活，具有强大的激活CD8+、CD4+T细胞的功能，并能分泌多种细胞因子参细胞的功能，并能分泌多种细胞因子参与免疫调节与应答。与免疫调节与应答。v随着体外培养随着体外培养DC技术的成熟和基因工程技术的技术的成熟和基因工程技术的进展，采用进展，采用DC疫苗对肿瘤进行治疗已成为生物疫苗对肿瘤进行治疗已成为生物治疗领域的热点。治疗领域的热点。HPVHPV疫苗疫苗介导的宫颈癌生物学预防和治疗介导的宫颈癌生物学预防和治疗曹泽毅曹泽毅 教授教授乔友林乔友林 教授教授