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1、本本 章章 重重 点点掌握抗体与免疫球蛋白的概念掌握抗体与免疫球蛋白的概念掌握免疫球蛋白的基本结构、结构域及其功能掌握免疫球蛋白的基本结构、结构域及其功能掌握各类免疫球蛋白的特性与功能掌握各类免疫球蛋白的特性与功能熟悉多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体的熟悉多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体的制备制备了解免疫球蛋白的异质性了解免疫球蛋白的异质性免疫球蛋白概述浆细胞浆细胞第第 一一 节节 免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构(construction)一、免疫球蛋白基本结构一、免疫球蛋白基本结构 由两条相同的重链和轻由两条相同的重链和轻链通过链间二硫键连接链通过链间二硫键连接而成的四肽链结构而成

2、的四肽链结构N端端C端端（一）重链和轻链（一）重链和轻链1.1.重链重链（heavy chain,H链）链）组成：组成：450-550450-550个氨基酸残基个氨基酸残基 分子量：分子量：50-75kD50-75kD 五类五类(class)(class)：重链类型：重链类型：g a d m eg a d m e (链链)组成的组成的Ig：IgG IgA IgD IgM IgE 亚类：同一类亚类：同一类IgIg根据绞链区氨基酸组成、重链二根据绞链区氨基酸组成、重链二 硫键数目和位置的差别可分为亚类（硫键数目和位置的差别可分为亚类（IgG1IgG14 4、IgA1-2IgA1-2）。）。组成：组

3、成：214214个氨基酸残基个氨基酸残基 分子量：分子量：25kD25kD 型型(type)(type)：根据轻链恒定区免疫原性不同分为：根据轻链恒定区免疫原性不同分为 和和 型型 亚型亚型(type)(type)：根据：根据 链个别氨基酸的差异，分为链个别氨基酸的差异，分为 1 14 42.2.轻链轻链（light chain，L链）链）（二）可变区和恒定区（二）可变区和恒定区In heavy chains,the V,D and J segments encode the variable domain while the C segment encodes the constant do

4、main.In light chains,the V and J segments encode the variable domain whilethe C segment encodes the constant domain.1.1.可变区可变区（variable region，V区）：区）：N端重链端重链1/41/4和轻链和轻链1/2 1/2 组成，氨基酸序列变化很大。组成，氨基酸序列变化很大。高变区（高变区（hypervariable region,HVR）互补性决定区（互补性决定区（complementarity-determining region,CDR）独特型决定簇（独特型决

5、定簇（idiotypic determinants）骨架区（骨架区（framework region,FR）医学免疫学上海第二医科大学免疫教研室 2.2.恒定区恒定区（constant region,C区区)：位于位于Ig分子的分子的C端，占轻链端，占轻链1/21/2和重链和重链3/43/4（IgG、IgA、IgD）或）或4/54/5（IgM、IgE）。在同）。在同一种属中，同一类重链和同一类轻链一种属中，同一类重链和同一类轻链C区氨基区氨基酸的组成或排列比较恒定。酸的组成或排列比较恒定。（三）（三）铰链区铰链区（hinge region)：位于位于CH1和和CH2之间，含有丰富的之间，含有丰

6、富的脯氨酸。易伸展、弯曲，有利于同时脯氨酸。易伸展、弯曲，有利于同时结合两个不同的抗原表位。结合两个不同的抗原表位。链内二硫键折叠成的球形结构域或功能区，链内二硫键折叠成的球形结构域或功能区，约由约由110110个氨基酸组成。个氨基酸组成。轻链：两个结构域（轻链：两个结构域（VL,CL）;重链：重链：4 4个或个或5 5个结构域个结构域 IgG、IgA、IgD：VH、CH1、CH2、CH3 IgM、IgE：VH、CH1、CH2、CH3、CH4(四四)免疫球蛋白的功能域免疫球蛋白的功能域(domain)Unfolded VL region showing 8 antiparallel b b-p

7、leated sheets connected by loops.NH2COOHS SThe Immunoglobulin FoldBarrel under constructionA barrel made of many staves arranged in a folded over sheetA b b barrel of 7(CL)or 8(VL)polypeptide strands connected by loops and arranged to enclose a hydrophobic interiorSingle VL domain 免疫球蛋白功能域及其功能免疫球蛋白功

8、能域及其功能VL,VH:VL,VH:超变区，超变区，互补决定区（互补决定区（CDR)CDR)与抗原特异性结合部位与抗原特异性结合部位CL,CH1CL,CH1同种异型的遗传标记同种异型的遗传标记CH2,CH3CH2,CH3(IgG,IgM)(IgG,IgM)补体补体C1qC1q结合点，激活补体结合点，激活补体IgG CH2IgG CH2通过胎盘通过胎盘IgG CH3IgG CH3与单核细胞、巨噬细胞、中性与单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、粒细胞、NKNK细胞、细胞、B B细胞表面细胞表面的的FcFcg gR R结合结合铰链区铰链区适于适于V V区同抗原的结合。含大量脯氨酸，富区同抗原的结合。含大

9、量脯氨酸，富有弹性和伸展性，能使有弹性和伸展性，能使AbAb与不同距离的抗原与不同距离的抗原决定簇结合，也利于暴露补体结合位点。决定簇结合，也利于暴露补体结合位点。(一一)J J链链（joining chain）：）：将单体将单体Ig分子连接成多聚体，存在于分子连接成多聚体，存在于IgA和和IgM中中(二二)分泌片分泌片（secretory piece,SP）或）或分泌成分分泌成分（secrtory component，SC）：）：是分泌型是分泌型IgA的辅助成分，保护分泌型的辅助成分，保护分泌型IgA的铰链区的铰链区免受蛋白水解酶的降解，并介导免受蛋白水解酶的降解，并介导IgA二聚体的转运二

10、聚体的转运二、免疫球蛋白的其它成分：二、免疫球蛋白的其它成分：EpithelialcellJCCSSSSCCSSSSCCssSecretory IgA and transcytosisBJC CSSSSCCSSSSCCs sJCCSSSSCCSSSSCCssJCCSSSSCCSSSSCCsspIgR&IgA areinternalisedStalk of the pIgR is degraded to release IgA containing part of the pIgR-the secretory componentJCCSSSSCCSSSSCCssIgA and pIgR are

11、transported to the apical surface in vesiclesB cells located in the submucosaproduce dimeric IgAPolymeric Ig receptors are expressed on the basolateral surface of epithelial cells to capture IgA produced in the mucosa三、三、免疫球蛋白的水解片断免疫球蛋白的水解片断（一）（一）木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶（二）（二）胃蛋白酶胃蛋白酶2 2个个Fab 段段结合抗原结合抗原1 1个个Fc段段结

12、合细胞结合细胞F(ab)2段段双价抗体活性双价抗体活性pFc段段无生物学活性无生物学活性第第 二二 节节 免疫球蛋白的异质性免疫球蛋白的异质性重链重链C C区分区分类类轻链轻链C C区分区分型型铰链区氨基酸组成和铰链区氨基酸组成和重链二硫键分重链二硫键分亚类亚类一、免疫球蛋白的类型一、免疫球蛋白的类型CCVV轻链轻链C C区区N N端氨基端氨基酸的差异分酸的差异分亚型亚型 多样性抗原的存在是导致免疫球多样性抗原的存在是导致免疫球蛋白异质性（即具有不同的抗原识别蛋白异质性（即具有不同的抗原识别特异性）的外源因素，是免疫球蛋白特异性）的外源因素，是免疫球蛋白异质性的物质基础。异质性的物质基础。二、

13、外源因素所致的异质性二、外源因素所致的异质性-IgG的多样性的多样性三、内源因素所致的异质性三、内源因素所致的异质性-IgG的血清型的血清型 同一种系所有个体的同一种系所有个体的Ig都含有的抗原都含有的抗原决定簇，但与其它物种的有差别，为种属决定簇，但与其它物种的有差别，为种属型标志，存在于型标志，存在于Ig的的C区。区。(一一)同种型同种型（isotype):):（种属特异性）（种属特异性）IgM(kappa)IgG1(kappa)Human IgHuman Igantiserum(Anti-Human Igantibody)IgM(kappa)IgG1(kappa)Rabbitl同一个种属

14、，同类免疫球蛋白分子具有相同的免疫原性同一个种属，同类免疫球蛋白分子具有相同的免疫原性（二）（二）同种异型同种异型(allotype）：）：(个体特异性，个体遗传标志）个体特异性，个体遗传标志）同一个种属，不同个体同类免疫同一个种属，不同个体同类免疫球蛋白分子球蛋白分子CHCH或或CLCL一个或几个氨基酸一个或几个氨基酸不同而表现出具有不相同的免疫原性。不同而表现出具有不相同的免疫原性。Allotype同种异型同种异型IgG1 Person 3IgG1 Person 2IgG1Person 1（三）（三）独特型独特型(idiotype):):（B细胞克隆特异性）细胞克隆特异性）同一个体，不同同

15、一个体，不同B细胞克隆产生的细胞克隆产生的抗体，在其超变区具有不同的免疫原抗体，在其超变区具有不同的免疫原性，可诱导其它性，可诱导其它B细胞克隆产生抗独特细胞克隆产生抗独特型抗体。抗原部位存在于型抗体。抗原部位存在于IgG的的V区。区。Idiotype独特型独特型IgG1 Person 1anti-AIgG1 Person 1anti-BIgG1 Person 1anti-C第第 三三 节节 免疫球蛋白的功能免疫球蛋白的功能（function）一、一、Ig V区区的功能的功能 识别并特异性结合抗原识别并特异性结合抗原:中和病毒、毒素，介导炎症反应中和病毒、毒素，介导炎症反应 抗体的抗原结合价：

16、抗体的抗原结合价：单体单体Ig：两价：两价 sIgA：四价：四价 五聚体五聚体IgM：五价：五价 （一）（一）激活补体激活补体 IgM、IgG13 激活补体经典途径激活补体经典途径 凝聚的凝聚的IgA或或IgG4 激活补体替代途径激活补体替代途径二、Ig C区的功能Antibody+complement-mediated damage to E.coliHealthy E.coliElectron micrographs of the effect of antibodies and complement upon bacteriaElectron micrographs of Antibod

17、ies and complement opsonising Epstein Barr Virus(EBV)Negatively stained EBVEBV coated with a corona ofanti-EBV antibodiesEBV coated with antibodies and activated complement components1.1.调理作用调理作用（opsonization）：）：Ig Fc段与吞噬细胞表面段与吞噬细胞表面FcR结合结合促吞噬促吞噬2.2.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 （antibody-dependent

18、 cell-mediated cytotoxicity,ADCC)3.3.介导介导I型超敏反应型超敏反应:IgE （二）结合（二）结合Fc受体受体（三）穿过胎盘和粘膜（三）穿过胎盘和粘膜:IgG、sIgA 第第 四四 节节 各类免疫球蛋白的特性及功能各类免疫球蛋白的特性及功能各类抗体的特性与功能各类抗体的特性与功能IgG四个亚类，分布广、血清含量最高、唯一能四个亚类，分布广、血清含量最高、唯一能通过胎盘通过胎盘,半衰期较长半衰期较长,主要的抗感染抗体主要的抗感染抗体,参与参与IIII、IIIIII型超敏反应型超敏反应IgM五个单体由五个单体由J J链连接成五聚体，最早、可诊链连接成五聚体，最早

19、、可诊断宫内及近期感染，断宫内及近期感染，天然血型抗体天然血型抗体IgA血清型（单体）和分泌型（双体），初乳中血清型（单体）和分泌型（双体），初乳中高浓度高浓度sIgA，参与参与型超敏反应型超敏反应IgD含量低、含量低、B B细胞成熟标志细胞成熟标志IgE含量最低、亲细胞、超敏反应含量最低、亲细胞、超敏反应/寄生虫免疫寄生虫免疫未成熟未成熟B细胞细胞 成熟成熟B细胞细胞 活化或记忆活化或记忆B细胞细胞mIgM mIgD 第第 五五 节节 人工制备抗体人工制备抗体一、一、多克隆抗体多克隆抗体（polyclonal antibody，PcAb）二、二、单克隆抗体单克隆抗体（monoclonal a

20、ntibody，McAb）三、三、基因工程抗体基因工程抗体（engineering antibody）利用利用DNA重组技术和基因工程手段生产的重组技术和基因工程手段生产的抗体抗体,包括人包括人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等性抗体、小分子抗体等多克隆抗体的制备多克隆抗体的制备单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备多克隆抗体多克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体来源来源动物免疫血清、恢复期病人血动物免疫血清、恢复期病人血清或免疫接种人群清或免疫接种人群多为鼠源性多为鼠源性特点特点来源广泛、制备容易来源广泛、制备容易纯度高、特异性强、效价高、少纯度高、特异性强、效

21、价高、少或无血清交叉反应、制备成本低或无血清交叉反应、制备成本低组成组成针对不同抗原表位的抗体的混针对不同抗原表位的抗体的混合物合物针对单一表位，结构和组成高度针对单一表位，结构和组成高度均一，抗原特异性及同种型一致均一，抗原特异性及同种型一致应用应用疾病的被动免疫治疗疾病的被动免疫治疗广泛用于疾病诊断、特异性抗原广泛用于疾病诊断、特异性抗原或蛋白的检测和鉴定、疾病的被或蛋白的检测和鉴定、疾病的被动免疫治疗和生物导向药物制备动免疫治疗和生物导向药物制备缺点缺点特异性不高、易发生交叉反应，特异性不高、易发生交叉反应，不易大量制备不易大量制备人体应用后可导致人鼠抗体反应人体应用后可导致人鼠抗体反应多克隆抗体与单克隆抗体的比较多克隆抗体与单克隆抗体的比较基基因因工工程程抗抗体体种种类类Humanization（Chimeric/Reshaped Antibody)小小 结结 概念概念 基本结构基本结构 水解片段水解片段 功能区功能区 生物学活性生物学活性 免疫原性免疫原性 人工制备的抗体人工制备的抗体 思思 考考 题题1.试述免疫球蛋白的结构与功能。试述免疫球蛋白的结构与功能。2.简述免疫球蛋白的功能区及其功能。简述免疫球蛋白的功能区及其功能。