1、实验五实验五果蝇唾腺染色体的观察果蝇唾腺染色体的观察 1技术知识1、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法；2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。一、实验目的一、实验目的2技术知识 双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体100150倍的巨大染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为唾腺染色体(salivary gland chromosome)。它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经过多次复制而不分开，约有10004000根染色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体（polytene chromosomes）。二、实验原理二、实验原理3技
2、术知识 黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出5长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n8。其中1号染色体（X染色体）为端着丝粒染色体，其着丝粒附着地一端在染色中心上，另一端游离；2号、3号染色体为中部着丝粒染色体，每条呈“V“伸展两臂，4号染色体很短小，呈点状附在染色中心边缘。4技术知识特征 R巨大；R体细胞配对，染色体只有半数（n）；R各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；R深浅不同、疏密个别的横纹。5技术知识 染色质丝的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒，这些染色粒经多线染色体的“放大”，形成染色较深的横纹。横纹的相对大小和空间排列是恒定
3、的，可以作为天然的精确基因定位的“坐标”。这些横纹的数目和位置一般是恒定的，具有果蝇种的特征，染色体的缺失、重复、倒位、易位等，都能在唾腺染色体上辨别出来。banded chromosomes 1000 x6技术知识材料：果蝇的三龄幼虫试剂：1%醋酸洋红器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、绘图纸三、仪器与材料三、仪器与材料7技术知识（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持镊子按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。四、实验程序四、实验程序8技术知识9技术知识果蝇三龄幼
4、虫解剖图果蝇三龄幼虫解剖图Salivary gland：唾腺Gonad:性腺Ganglion:神经节Trachea:气管Ovary：卵巢Intestine：肠10技术知识挑取果蝇唾腺的过程11技术知识唾腺的位置及形态特征12技术知识13技术知识（2）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（4倍镜）去除唾腺周围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。14技术知识分离出来的果蝇唾腺位置：在幼虫体前约1/3处；形状：形如一对香蕉，上小上大。一边常附着带状的不透明的脂肪。颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围组织透明；细胞
5、特征：唾腺上的细胞较大，轮廓清晰，用低倍镜即可清楚看到。15技术知识唾腺组织唾腺组织16技术知识不同人操作得到的唾腺组织可能不一样不同人操作得到的唾腺组织可能不一样17技术知识放大的唾腺组织放大的唾腺组织18技术知识放大的唾腺组织放大的唾腺组织19技术知识放大的唾腺组织放大的唾腺组织20技术知识（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆上滤纸垂直压片。（4）观察，先在10倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜下观察，比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列顺序，以及由着丝点纠集组成的染色体中心。21技术知识10倍镜22技术知识40倍镜23技术知识100倍镜24技术知识重要实验步骤重要实验步骤：取果蝇三龄幼虫，一手持镊子夹住虫体中部稍后，固定幼虫，另一手持解剖针按住幼虫头部，轻缓拉开头部，去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围的脂肪等其他组织，再用常规染色体制片方法制片。25技术知识实验注意事项实验注意事项：1、取果蝇三龄幼虫最佳，其行动迟缓，肥大，爬上管壁（将要化蛹）。2、要辨别清楚哪些是唾腺细胞。3、去除唾腺周围的其它组织部分。26技术知识作业作业：1、绘出所观察到的唾腺染色体简图。2、果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什么区别？27技术知识
