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淋巴细胞及其亚群检测的临床意义新版课件.ppt

1、淋巴细胞及其亚群检测的临床意义一、概念一、概念 来源于骨髓的淋巴样干细胞,在胸腺中成熟的淋巴细胞,故称胸腺依赖性淋巴细胞(thymus-dependentlymphocyte),简称T细胞。负责细胞免疫功能,参与抗肿瘤、抗细胞内感染微生物、移植排斥、迟发型超敏反应;对部分体液免疫发挥辅助功能。外周血:约占淋巴细胞总数的60%80%;Lymphocytes外周血中占总淋巴细胞的外周血中占总淋巴细胞的60-80%二、二、T淋巴细胞的分化发育淋巴细胞的分化发育lT细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育lT细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育u The development o

2、f TCRu Positive selectionu Negative selectionuExtrathymic T-cell development1 1、T细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育三个重要事件三个重要事件三个重要结果三个重要结果三三 个个 阶阶 段段双阴性阶段双阴性阶段(DN)双阳性阶段双阳性阶段(DP)单阳性阶段单阳性阶段(SP)TCR基因重排基因重排阳性选择阳性选择阴性选择阴性选择获得功能性获得功能性TCR获得获得MHC限制性限制性获得自身耐受获得自身耐受T细胞受体(细胞受体(TCR)的发育)的发育过程:DP细胞 胸腺上皮细胞The development of TCR功

3、能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。(TCR、CD4+/CD8+)(自身抗原肽-MHC分子)CD8+T细胞IL-2、IFN-、TNF主要表面标记:CD8+CD28+二、T淋巴细胞的分化发育释放穿孔素,颗粒酶杀伤靶细胞按T细胞的CD4和CD8分子表型主要表面标志:CD8+CD28-初始T细胞(naive T cell)对免疫应答有重要的负调节功能部位:胸腺皮髓质交界处及髓质区。初始T细胞(naive T cell)T细胞发育过程中的阴性选择(negative selection)功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。T细胞表面CD分子表达不

4、同表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)l 、四种肽链基因的重排与表达,形成四种肽链基因的重排与表达,形成TCR 和和TCR,将,将T细胞分为细胞分为 TCR 和和 TCR 两种类型。两种类型。l CD3分子的低度表达分子的低度表达结果:获得功能性结果:获得功能性TCRTCRCD3+CD4+CD8-SP SP细胞细胞 部位:胸腺皮质。部位:胸腺皮质。过程:过程:DP细胞细胞 胸腺上皮细胞胸腺上皮细胞 (TCR、CD4+CD8+)(抗原肽抗原肽-自身自身MHC分子复合物分子复合物)适当亲和力发生适当亲和力发生结合结合不能发生有效结合不能发生有效结合或结合亲和力过高或结合亲和力过高结合结合

5、MHC-类分子类分子CD3+CD4-CD8+SP 凋亡凋亡结合结合MHC-类分子类分子结果:单阳性细胞(结果:单阳性细胞(SPSP)、获得自身、获得自身MHC限制性。限制性。T T细胞发育过程中的阳性选择细胞发育过程中的阳性选择(positive selection)部位:胸腺皮髓质交界处及髓质区。部位:胸腺皮髓质交界处及髓质区。过程:过程:SP细胞细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞胸腺树突状细胞、巨噬细胞 (TCR、CD4+/CD8+)(自身抗原肽(自身抗原肽-MHC分子分子)高亲和力结合高亲和力结合不结合或低亲和力结合不结合或低亲和力结合凋亡删除凋亡删除存活存活结果:成熟的结果:成熟的SPSP

6、、获得自身(中枢)免疫耐受。、获得自身(中枢)免疫耐受。T T细胞发育过程中的阴性选择细胞发育过程中的阴性选择(negative selection)CD4+/CD8+的比值过程:SP细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞数量多,CD4+或CD8+(SP细胞)过程:DP细胞 胸腺上皮细胞初始T细胞(naive T cell)4)CD4+/CD8+的比值TCR+T细胞2、TCRT细胞和TCRT细胞TCR+T细胞过程:DP细胞 胸腺上皮细胞评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态,此外,这一比值还可用来监测骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻击1)T淋巴细胞(CD3+)Ly

7、mphocytes肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常,可预测患者存活期。外周血中占总淋巴细胞的60-80%Negative selection3、CD4+T细胞和CD8+T细胞恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比值恢复正常。主要表面标志:CD8+CD28-IL-2、IFN-、TNF主要表面标志:CD8+CD28-Th(help T cell)2 2、T T细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区 T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后,最终分化为具有不同效应功能的T细胞亚群,效应T细胞和记忆T细胞。三、三、T淋巴细胞亚群淋巴

8、细胞亚群l 按按T细胞所处的活化阶段细胞所处的活化阶段 初始初始T细胞(细胞(naive T cell)效应效应T细胞(细胞(effector T cell)记忆性记忆性T细胞(细胞(memory T cell)l 按按TCR的表型分类的表型分类 TCR+T细胞细胞 TCR+T细胞细胞l 按按T细胞的细胞的CD4和和CD8分子表型分子表型 CD4+T细胞细胞 CD8+T细胞细胞 l 按按T细胞的功能分类细胞的功能分类 Th(help T cell)Tc/C TL(cytotoxic T cell)Tr(regulatory T cell)1 1、初始初始T T细胞、效应细胞、效应T T细胞和记

9、忆细胞和记忆T T细胞细胞 初始T细胞 表型:CD45RA+、CD62L+、CD25-(IL-2R)特点:未接触抗原的成熟T细胞,有分化潜能 效应T细胞 迁往炎症部位,执行细胞免疫效应 记忆性T细胞 表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化 1、根据CD4 和CD8 分子表达,可将成熟T 细胞分为CD4+CD8-或CD4-CD8+细胞;2、根据CD4+细胞所表达CD45分子异构体,可分为CD45RA+和CD45RO+T细胞,两者分别是初始T 细胞(naive T cell,Tn)和记忆性T 细胞(memory T cell,Tm)的重要表型。T

10、细胞表面CD分子表达不同4 4、Th、CTL、Ts和和Treg细胞细胞l 辅助性辅助性T细胞(细胞(Th)CD4CD8-TH1,TH2功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。l 细胞毒性细胞毒性T T细胞(细胞(CTLCTL)主要表面标记:CD8+CD28+功能:特异性直接杀伤靶细胞 杀伤机制:释放穿孔素,颗粒酶杀伤靶细胞通过Fasl介导靶细胞的凋亡TH1TH2分泌CKsIL-2、IFN-、TNFIL-4、5、6、10CKs作用生物学功能l 抑制性抑制性T细胞(细胞(Ts)主要表面标志:CD8+CD28-功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与

11、T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。l 调节性调节性T T细胞(细胞(TregTreg)主要表面标记:CD4+CD25+功能:抑制免疫应答可能的机制有:直接接触;分泌抑制性CKs;此外,抑制CKs分泌,抑制APC等。效应T细胞(effector T cell)CD4+/CD8+的比值对免疫应答有重要的负调节功能外周血中占总淋巴细胞的60-80%过程:DP细胞 胸腺上皮细胞1、T细胞在胸腺中的发育CD4+/CD8+的比值1、初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞(TCR、CD4+/CD8+)(自身抗原肽-MHC分子)表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)部位:胸腺皮髓质交界处及髓

12、质区。CD8+T细胞初始T细胞(naive T cell)CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病(如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分率相对降低,而CD8+群体的百分率相对升高),自身免疫性疾病(如在SLE病人中,CD8+淋巴细胞的相对百分比往往会降低,但当使用类固醇药物治疗时,也可能上升。Tr(regulatory T cell)主要表面标志:CD8+CD28-结果:成熟的SP、获得自身(中枢)免疫耐受。T细胞受体(TCR)的发育特点:未接触抗原的成熟T细胞,有分化潜能评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态,此外,这一比值还可用来

13、监测骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻击功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。初始T细胞(naive T cell)小结ThCTLTsTreg 表面标记CD8+CD28-主要功能对免疫应答有重要的负调节功能四、四、T T淋巴细胞亚群检测的临床意义淋巴细胞亚群检测的临床意义 通过T淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情况下体内免疫功能状态,辅助临床疾病的诊断,探索疾病的发病机理、病程、预后,监测、指导临床治疗方案。目前主要可以做以下项目的检测1)T淋巴细胞(CD3+)2)CD4+细胞3)CD8+细胞4)CD4+/CD8+的比值

14、 总T淋巴细胞可以结合总B淋巴细胞来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病(如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分率相对降低,而CD8+群体的百分率相对升高),自身免疫性疾病(如在SLE病人中,CD8+淋巴细胞的相对百分比往往会降低,但当使用类固醇药物治疗时,也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中,CD8+淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范围之外)CD4+/CD8+的比值 评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态,此外,这一比值还可用来监测骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻击 CD4/CD8 升高:

15、自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、SLE。CD4/CD8 降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等。CD4/CD8比值与肿瘤 恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比值恢复正常。当发生癌转移时,CD3、CD4 细胞数明显减少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/CD8 比值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低,预后更差。肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常,可预测患者存活期。常见疾病与T细胞免疫检测关系疾病疾病CD3+CD4+CD8+CD4/CD8肿瘤再生障碍性贫血粒细胞减少症过敏性皮炎类风湿(活动期)红斑狼疮(活动期)膜性肾小球肾炎胰岛素依赖性糖尿病乙型肝炎急性/慢性疾病疾病

16、CD3+CD4+CD8+CD4/CD8自身溶血性贫血上呼吸道感染传染性单核细胞增多症(急性期)巨细胞病毒感染乙肝结核病疟疾血吸虫病获得性免疫缺陷综合症初始T细胞(naive T cell)TCR+T细胞3、CD4+T细胞和CD8+T细胞初始T细胞(naive T cell)对免疫应答有重要的负调节功能过程:SP细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞初始T细胞(naive T cell)外周血:约占淋巴细胞总数的60%80%;过程:DP细胞 胸腺上皮细胞四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义对部分体液免疫发挥辅助功能。四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义CD4/CD8 降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等。

17、T细胞发育过程中的阴性选择(negative selection)多为CD4CD8(DN细胞);、四种肽链基因的重排与表达,形成TCR 和TCR,将T细胞分为 TCR 和 TCR 两种类型。特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化结果:单阳性细胞(SP)、获得自身MHC限制性。对免疫应答有重要的负调节功能对免疫应答有重要的负调节功能Tr(regulatory T cell)功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。主要表面标志:CD8+CD28-过程:DP细胞 胸腺上皮细胞结果:单阳性细胞(SP)、获得自身MHC限制性。

18、淋巴细胞及其亚群检测的临床意义1、T细胞在胸腺中的发育TCR+T细胞TCR+T细胞T细胞发育过程中的阴性选择(negative selection)初始T细胞(naive T cell)功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。外周血中占总淋巴细胞的60-80%引起迟发型超敏反应(TDTH)功能:特异性直接杀伤靶细胞过程:SP细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义外周血中占总淋巴细胞的60-80%主要表面标志:CD8+CD28-CD4/CD8比值与肿瘤T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后,最终分化为具有不同效应功能

19、的T细胞亚群,效应T细胞和记忆T细胞。四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义总T淋巴细胞可以结合总B淋巴细胞来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+T细胞对免疫应答有重要的负调节功能T细胞受体(TCR)的发育CD4+/CD8+的比值初始T细胞(naive T cell)(TCR、CD4+/CD8+)(自身抗原肽-MHC分子)调节性T细胞(Treg)2、根据CD4+细胞所表达CD45分子异构体,可分为CD45RA+和CD45RO+T细胞,两者分别是初始T 细胞(naive T cell,Tn)和记忆性T 细胞(memory T cell,Tm)的重要表型。T细胞受体(TCR)的发育淋巴细胞及其亚群

20、检测的临床意义T淋巴细胞亚群的正常参考值4)CD4+/CD8+的比值特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化(TCR、CD4+/CD8+)(自身抗原肽-MHC分子)过程:DP细胞 胸腺上皮细胞外周血:约占淋巴细胞总数的60%80%;过程:DP细胞 胸腺上皮细胞功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。CD4+/CD8+的比值2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育主要表面标志:CD8+CD28-特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化主要表面标记:CD8+

21、CD28+外周血:约占淋巴细胞总数的60%80%;主要表面标志:CD8+CD28-4、Th、CTL、Ts和Treg细胞对免疫应答有重要的负调节功能表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)T细胞发育过程中的阳性选择(positive selection)1、初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育CD3+CD4+CD8-SP4)CD4+/CD8+的比值按T细胞所处的活化阶段结果:获得功能性TCR过程:DP细胞 胸腺上皮细胞IL-2、IFN-、TNFT

22、淋巴细胞亚群的正常参考值TCR+T细胞T细胞表面CD分子表达不同过程:DP细胞 胸腺上皮细胞CD3+CD4-CD8+SP结果:单阳性细胞(SP)、获得自身MHC限制性。主要表面标记:CD8+CD28+功能:特异性直接杀伤靶细胞对免疫应答有重要的负调节功能介导细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,辅助抗体生成,参与细胞免疫及迟发型超敏性炎症的发生初始T细胞(naive T cell)1、初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞IL-4、5、6、10不能发生有效结合或结合亲和力过高CD3+CD4+CD8-SP主要表面标志:CD8+CD28-T细胞受体(TCR)的发育常见疾病与T细胞免疫检测关系1)T淋巴细胞(

23、CD3+)初始T细胞(naive T cell)恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比值恢复正常。特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化两者通常是针对TCRT细胞而言CD4/CD8 升高:自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、SLE。部位:胸腺皮髓质交界处及髓质区。过程:DP细胞 胸腺上皮细胞1、T细胞在胸腺中的发育2、根据CD4+细胞所表达CD45分子异构体,可分为CD45RA+和CD45RO+T细胞,两者分别是初始T 细胞(naive T cell,Tn)和记忆性T 细胞(memory T cell,Tm)的重要表型。1、初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞初始T细胞(naive T

24、 cell)主要表面标志:CD8+CD28-过程:DP细胞 胸腺上皮细胞主要表面标志:CD8+CD28-对免疫应答有重要的负调节功能特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义Negative selectionTCR+T细胞2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育CD4+T细胞外周血中占总淋巴细胞的60-80%TCR+T细胞功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用。对免疫应答有重要的负调节功能1)T淋巴细胞(CD3+)不能发生有效结合或结合亲和力过高对免疫应答有重要的负调节功能CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病(如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分率相对降低,而CD8+群体的百分率相对升高),自身免疫性疾病(如在SLE病人中,CD8+淋巴细胞的相对百分比往往会降低,但当使用类固醇药物治疗时,也可能上升。常见疾病与T细胞免疫检测关系T淋巴细胞亚群的正常参考值项项 目目百分含量(百分含量(%淋巴淋巴细胞)细胞)Total T lymphocyte(CD3+)50-84%T helper/inducer cell(CD3+/CD4+)27-51%T supressor/cytotoxic cell(CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD81.4-2.5

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