艾滋病实验室检测技术及职业暴露教学课件.ppt

1、艾滋病实验室检测技术及职业暴露 目前我省艾滋病检测实验室已达目前我省艾滋病检测实验室已达630个个 1个艾滋病确证中心实验室（省疾控中心）个艾滋病确证中心实验室（省疾控中心）6个艾滋病确证实验室（济南、青岛、淄博、烟台、临沂疾个艾滋病确证实验室（济南、青岛、淄博、烟台、临沂疾控中心、山东出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心）控中心、山东出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心）18个艾滋病筛查中心实验室（含个艾滋病筛查中心实验室（含5个艾滋病确证实验室）个艾滋病确证实验室）610个艾滋病筛查实验室。个艾滋病筛查实验室。目前已验收目前已验收16个个待验收艾滋病筛查实验室待验收艾滋病筛查实验室2个、确

2、证实验室个、确证实验室1个个1995年2月6日，山东省卫生防疫站艾滋病确证实验室通过卫生部验收。2005年2月18日，青岛市疾控中心艾滋病确证实验室通过验收。2009年4月8日济南、淄博、烟台市疾控中心艾滋病确证实验室通过验收。2013年4月1日临沂疾控中心艾滋病确证实验室通过验收。省疾控中心：艾滋病抗体的筛查、确证；省疾控中心：艾滋病抗体的筛查、确证；CD4淋巴细淋巴细胞；病毒载量；耐药；新发感染；婴幼儿早期诊断、胞；病毒载量；耐药；新发感染；婴幼儿早期诊断、HBV、HCV、TP。抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市CDC（待建潍坊市（待建潍坊市C

3、DC）。）。CD4淋巴细胞：济南、青岛、烟台、菏泽、泰安、济淋巴细胞：济南、青岛、烟台、菏泽、泰安、济宁、临沂、潍坊市宁、临沂、潍坊市CDC 艾滋病抗体筛查：艾滋病抗体筛查：610个实验室。个实验室。2013年8月23日顺利通过资质认定、食品检验机构资顺利通过资质认定、食品检验机构资质认定、实验室认可质认定、实验室认可“三合一三合一”现场评审现场评审.实验室认可项目：实验室认可项目：27类类1313项项实验室资质认定（计量认证）项目：实验室资质认定（计量认证）项目：22类类740项项食品检验机构资质认定项目：食品检验机构资质认定项目：5类类573项项艾防所通过项目：艾滋病抗体筛查、确证艾防所通

4、过项目：艾滋病抗体筛查、确证 CD4T淋巴细胞检测淋巴细胞检测 病毒载量病毒载量 乙肝、丙肝确证乙肝、丙肝确证目前全部建在疾控系统目标：2015年底，17市疾控全部建立，鼓励医疗卫生系统建立艾滋病确证实验室。山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通知 鲁卫疾控字201328号（2013年5月9日下发）目标：2013年底，皮肤病性病防治机构、妇幼保健机构、采供血机构（单采浆站）及各类二级以上（含二级）医疗机构要建立艾滋病筛查实验室。山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通知 鲁卫疾控字201328号（2013年5月9日下发）1、目前全省尚未建立2、目标：2015年底，所有的乡镇卫

5、生院、社区卫生服务中心和一级医疗机构都建立艾滋病检测点，鼓励具备条件的乡镇卫生院、社区卫生服务中心和一级医疗机构建立艾滋病筛查实验室。山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通知 鲁卫疾控字201328号（2013年5月9日下发）1、肾透析人群2、医院侵入性诊疗人群3、计划生育门诊就诊人群4、单位体检人群5、无偿献血人群 五类人群全部进行丙肝检测五类人群全部进行丙肝检测山东省卫生厅关于印发山东省艾滋病扩大检测工作活动方案的通知 鲁卫疾控字201329号（2013年5月9日下发）（一）（一）HIV (ELISA、金标、金标、PA、化学发光、化学发光、WB)（二）（二）TP (ELISA、T

6、PPA、TRUST)（三）（三）HCV (ELISA、RIBA)（四）（四）BED （ELISA、亲和力、亲和力)2009 20062006200820112011 2008 2004 OD值S/CO值 双波长的优点CUTOFF值OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。S/CO=OD/CUTOFF使用双波长的优点可以消除 反应板条上的划痕手印的干扰。(1)试剂试剂1.观察外包装，内主份有无漏液，注意效期等。观察外包装，内主份有无漏液，注意效期等。2.仔细阅读说明书，严格按照试剂说明书进行操作。仔细阅读说明书，严格按照试剂说明书进行操作。3.操作前将试剂

7、在室温下平衡操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟，保证酶等液体分钟，保证酶等液体的初始反应温度及活性剂的溶解。的初始反应温度及活性剂的溶解。1.血清或血浆标本分离不好即进行加样。血清或血浆标本分离不好即进行加样。2.漏加样品或加样量不足的漏加样品或加样量不足的 3.加液器的校正加液器的校正 4.加样时间过长加样时间过长 5.手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长等待时间过长 6.洗板机不足，不能及时洗板洗板机不足，不能及时洗板 将第一次两种试剂检出的15份假阳性标本（科美东雅6份，生物梅里埃9份），分别进行重复检测，结果均阴性。优点：

8、快速、简便、易操作BED 2次/年用一次性采样环收集约 5 l 血样其特点在于灵敏度高、测定范围宽、使用范围广，快速、简便，并在测试中不使用有害试剂，无放射污染等。我省艾滋病检测实验室建设情况由于血液中纤维原蛋白，造成洗板针堵塞，抽吸不完全，造成洗板不畅，导致洗板效果差，直接影响本底。必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；婴幼儿早期诊断、HBV、HCV、TP。在短时间(30分钟)内出结果CD4T淋巴细胞检测试剂必须在有效期内使用；（三）HCV (ELISA、RIBA)快速检测，不是为了取代实验室，但不能因为有了实验室而放弃使用快速检测。按说明步骤严格控制孵育时间。可检测100份以

9、内小批量样品2读板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。艾滋病抗体筛查和确证 3次/年数据来源:Residual risk of transfusion-transmitted viral infections in Shenzhen,China,2001 through 2004山东省卫生厅关于印发山东省艾滋病扩大检测工作活动方案的通知 鲁卫疾控字201329号（2013年5月9日下发）1.温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；难于清洗彻底；2.孵育时间

10、人为延长，导致非特异性结合，难以清洗彻底。孵育时间人为延长，导致非特异性结合，难以清洗彻底。3.孵育时温度不符合说明书的规定范围。孵育时温度不符合说明书的规定范围。1.按规定加盖封板膜。按规定加盖封板膜。2.按说明步骤严格控制孵育时间。按说明步骤严格控制孵育时间。3.严格控制温育仪器（水箱、温箱、全自动酶免）的温度，建议在严格控制温育仪器（水箱、温箱、全自动酶免）的温度，建议在仪器内放置测量工具（全自动酶免除外）。仪器内放置测量工具（全自动酶免除外）。1.采用手工洗板采用手工洗板,孔与孔之间液体容易交叉，切不可随意洗板。孔与孔之间液体容易交叉，切不可随意洗板。2.采用洗板机洗板时，洗液注入孔中

11、量不足，导致洗板不彻底，造采用洗板机洗板时，洗液注入孔中量不足，导致洗板不彻底，造成本底高。成本底高。3.由于血液中纤维原蛋白，造成洗板针堵塞，抽吸不完全，造成洗由于血液中纤维原蛋白，造成洗板针堵塞，抽吸不完全，造成洗板不畅，导致洗板效果差，直接影响本底。板不畅，导致洗板效果差，直接影响本底。4.反应板过多，不能保证及时洗板，造成洗板等待时间过长，影响反应板过多，不能保证及时洗板，造成洗板等待时间过长，影响结果。结果。5.洗板前先将孔内液体甩出包被板。洗板前先将孔内液体甩出包被板。解决办法解决办法1.禁止手工洗板。禁止手工洗板。2.保证洗液注满各孔。保证洗液注满各孔。3.洗板时注意观察是否有堵

12、孔现象，保持洗板针畅通。洗板时注意观察是否有堵孔现象，保持洗板针畅通。4.合理安排操作（洗板）时间。合理安排操作（洗板）时间。5.洗板前不要先将孔内液体甩出包被板，以免酶液沾于孔边缘。洗板前不要先将孔内液体甩出包被板，以免酶液沾于孔边缘。1.显色剂配制后放置时间过长或使用已经变色失效的显色显色剂配制后放置时间过长或使用已经变色失效的显色剂剂 2.用排枪加用排枪加A、B混合液时，加样槽不够干净，造成花板混合液时，加样槽不够干净，造成花板3.不同厂家试剂的显色液混用不同厂家试剂的显色液混用1加完终止后加完终止后30分钟内读取数据。分钟内读取数据。2读板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，读

13、板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。优点优点1、价格低、价格低2、一般实验室均可操作、一般实验室均可操作3、不需特殊仪器设备、不需特殊仪器设备4、适用于大面积查体、适用于大面积查体缺点缺点1、易出假阳性、易出假阳性2、不适用于单个样本测定、不适用于单个样本测定优先使用项目包括优先使用项目包括:VCT、母婴传播、临床评估、农村血检、术前检、母婴传播、临床评估、农村血检、术前检测、紧急事件等。测、紧急事件等。技术角度的考虑包括技术角度的考虑包括:需要快速得到结果、免去试剂和样本的冷链运输需要快速得到结果、

14、免去试剂和样本的冷链运输环节、小空间实验室的成本效益、环节、小空间实验室的成本效益、检测的简单性等。检测的简单性等。免疫层析实验免疫层析实验渗滤实验（间接法渗滤实验（间接法/双抗原夹心法）双抗原夹心法）样本：血浆/血清/全血（唾液）不同部位固定不同抗原可区分HIV-1/HIV-2,质控线：抗人IgG一般需时15-30min弱阳性结果较难判断试验步骤将检测条的外包装撕去 血清和EDTA抗凝血浆 EDTA抗凝全血加入50 uL样品 加入 50 uL样品 过15分钟读结果 加1滴示踪缓冲液 最多60 分钟(HIV)过15分钟读结果 最多60 分钟(HIV)阳性阳性 阴性阴性 无效无效 无效无效15分

15、钟后读结果，对结果的解释不要超过1小时。CD4T淋巴细胞检测实验需几步：加样本，加洗液，加信号试剂。一般在5-15min完成用采样盘沿上/下牙床外表面采样一周反应线的强度不一定与标本中的抗体滴度相关。其特点在于灵敏度高、测定范围宽、使用范围广，快速、简便，并在测试中不使用有害试剂，无放射污染等。6.结果判读不客观，易受主观因素影响抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市CDC（待建潍坊市CDC）。免疫渗滤原理的产品构造示意图应用BED-CEIA进行新近感染检测只适用于HIV阳性样品。必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；（三）HCV (ELISA、RIBA)简单、易操作、反应时间

16、短610个艾滋病筛查实验室。艾滋病抗体筛查：610个实验室。其特点在于灵敏度高、测定范围宽、使用范围广，快速、简便，并在测试中不使用有害试剂，无放射污染等。艾滋病实验室检测技术及职业暴露快速检测，是艾滋病实验室多了一种检测方法。实验室认可项目：27类1313项Determine HIV-1/2 试验只能使用人类血清、血浆和全血，试验只能使用人类血清、血浆和全血，对其他标本结果可能不准确。对其他标本结果可能不准确。反应线的强度不一定与标本中的抗体滴度相关。反应线的强度不一定与标本中的抗体滴度相关。含含EDTA以外抗凝剂的全血或血浆标本给出的结果可能不以外抗凝剂的全血或血浆标本给出的结果可能不正确

17、。正确。阴性结果应当与临床症状和风险因子一起考虑。阴性结果应当与临床症状和风险因子一起考虑。阳性结果应当用第二种方法证实。结合临床证据对结果做阳性结果应当用第二种方法证实。结合临床证据对结果做过评价后才能作出诊断。过评价后才能作出诊断。原理：双抗原夹心法样本:血浆/血清（若有过滤装置，则可测全血）可将抗原固定于不同位置，区分HIV-1和HIV-2实验需几步：加样本，加洗液，加信号试剂。一般在5-15min完成弱阳性结果较难判断免疫渗滤原理的产品构造示意图免疫渗滤原理的产品构造示意图结果结果可检测可检测100份以内小批量样品份以内小批量样品需要很少的设备和试剂需要很少的设备和试剂检测地点可扩展到

18、实验室以外检测地点可扩展到实验室以外只需对技术人员做适当培训只需对技术人员做适当培训大部分为一步法大部分为一步法在短时间在短时间(30分钟分钟)内出结果内出结果结果易目测判读结果易目测判读可在室温下保存可在室温下保存不宜一次检测不宜一次检测100份以上的大批量样品份以上的大批量样品比比ELISA法价格略高。法价格略高。结果判读不客观，易受主观因素影响结果判读不客观，易受主观因素影响1.必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；2.试剂必须在有效期内使用；3.根据检测目的，选择试剂初筛选择敏感性高的试剂，复检选择特异性高的试剂；4.推荐使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳定的试剂

19、。四代试剂不仅可以检测出血清/血浆/全血样本中的HIV-1和HIV-2抗体，还可以检测出p24抗原。p24抗原是感染HIV病毒后产生的一种蛋白质，比HIV抗体出现的要早，在艾滋病感染初期、窗口期内可以通过检测p24抗原来判断是否感染HIV。四代试剂比三代试剂平均提前5天可以检测出HIV感染者。灵敏度为92.31%，特异性为99.66%。目前国内尚未上市阳性结果应当用第二种方法证实。科美东雅：灵敏度100%；用采样盘沿上/下牙床外表面采样一周只需对技术人员做适当培训31%，特异性为99.2%，但却将残余风险降低了46.抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市CDC（待建潍坊市CDC）。性病艾滋病

20、预防控制中心于2004年将该方法引进国内。必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；CD4检测 2次/年艾滋病抗体筛查和确证 3次/年耐药检测 2次/年2006年6月美国CDC发布了“资源有限国家BED检测/监测HIV-1新发感染指南”暴露于HIV的潜在污染源包括：血液、血性体液、精液、阴道分泌物、脑脊液、胸膜液、腹水、心包液、滑膜液、羊水和组织或病毒培养液。(5)显色过程中易出现的问题滤纸片干血斑HIV-DNA 1次/年阿克苏：灵敏度100%；将第一次两种试剂检出的15份假阳性标本（科美东雅6份，生物梅里埃9份），分别进行重复检测，结果均阴性。BED 2次/年二次结果汇总统计：两种

21、试剂检测结果一致，符合率为100%。替代组合替代组合WB检测结果检测结果阳性一致率（阳性一致率（%）EIA1+RT135100100EIA1+RT234900100RT1+EIA135100100RT1+EIA233800100RT1+RT23575098.5EIA1+EIA23341099.7优点：1.检测结果的保存 2.自动生成报告 3.结果可导出缺点：1.不适合批量操作快速检测，是艾滋病实验室多了快速检测，是艾滋病实验室多了一种检测方法。一种检测方法。快速检测，是为了更多、更快的快速检测，是为了更多、更快的的发现感染者。的发现感染者。快速检测，不是为了取代实验室，快速检测，不是为了取代实

22、验室，但不能因为有了实验室而放弃使但不能因为有了实验室而放弃使用快速检测。用快速检测。将提纯后的将提纯后的HIV抗原连接到有色明胶颗粒上，制成致抗原连接到有色明胶颗粒上，制成致敏颗粒。当加入的检测标本中有敏颗粒。当加入的检测标本中有HIV抗体存在时，即抗体存在时，即可使致敏颗粒凝集，出现肉眼可见的浅色凝集环可使致敏颗粒凝集，出现肉眼可见的浅色凝集环（斑）；而若标本中无（斑）；而若标本中无HIV抗体，致敏颗粒即在重力抗体，致敏颗粒即在重力作用下沉人作用下沉人U型板底，形成一个深色红点。型板底，形成一个深色红点。1、加入样品稀释液、加入样品稀释液孔号75l25l25l13212、加入测试样品、加入

23、测试样品25l孔号1321弃去弃去3、样品倍比稀释、样品倍比稀释孔号1321最终稀释倍数1：1625l25l25l1：8过15分钟读结果应在暴露当日、暴露后4周、8周、12周、6个月，定期抽血检测HIV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。建立了适合于我国的BED方法的窗口期（168天）和4个关键校正系数（=0.科美东雅：灵敏度100%；2009艾滋病抗体筛查：610个实验室。2读板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。BED 2次/年(5)显色过程中易出现的问题Determine HIV-1/2 试验只能使用人类血清、血浆和

24、全血，对其他标本结果可能不准确。（三）HCV (ELISA、RIBA)滤纸片干血斑HIV-DNA 1次/年温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；而若标本中无HIV抗体，致敏颗粒即在重力作用下沉人U型板底，形成一个深色红点。目标：2015年底，17市疾控全部建立，鼓励医疗卫生系统建立艾滋病确证实验室。美国已将用BED方法监测新发感染率纳入了国家艾滋病常规监测体系，全美所有需要进行新发感染检测的样品均寄至纽约州公共卫生实验室，统一检测，统一质控，统一数据处理。对临床工作者来讲，最常见的暴露源是血液。手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长艾滋病实验室

25、检测技术及职业暴露应在暴露当日、暴露后4周、8周、12周、6个月，定期抽血检测HIV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。5、混匀，加盖，室温、混匀，加盖，室温2个小时个小时6、结果判读、结果判读致敏颗粒4、加入明胶颗粒、加入明胶颗粒最终稀释倍数孔号13211：32未致敏颗粒25l25l1：16优点：优点：凝集试验具有操作简便，经一步即可迅速得出结凝集试验具有操作简便，经一步即可迅速得出结果，不需任何仪器等优点果，不需任何仪器等优点该方法的敏感性及特异性与该方法的敏感性及特异性与EL1SAEL1SA方法相近方法相近不需特殊仪器不需特殊仪器该方法的敏感性及特异性与该方法的敏感

26、性及特异性与EL1SAEL1SA方法相近方法相近溶血标本不影响结果溶血标本不影响结果缺点与不足：缺点与不足：判定结果用肉眼观察，无法保存。判定结果用肉眼观察，无法保存。为了保存试验结果，需配备数码相机。为了保存试验结果，需配备数码相机。应选用高质量的应选用高质量的U U型板型板用一次性采样环收集约用一次性采样环收集约 5 l 血样血样用采样盘沿上用采样盘沿上/下牙床外表面采样一周下牙床外表面采样一周 将样本转入小瓶将样本转入小瓶 中搅动搅动插入检测设备插入检测设备 20分钟后读取结果分钟后读取结果 无效无效阴性阴性阳性阳性优点优点:简单、易操作、反应时间短简单、易操作、反应时间短适用于吸毒人群

27、适用于吸毒人群缺点：缺点：价格高价格高影响因素多（口腔杂质、反应温度等）影响因素多（口腔杂质、反应温度等）化学发光检测使窗口期由化学发光检测使窗口期由43.6天缩短为天缩短为38.3天，虽然只缩短了天，虽然只缩短了12.2%，但却将残余风险降低了，但却将残余风险降低了46.4%。数据来源数据来源:Residual risk of transfusion-transmitted viral infections in Shenzhen,China,2001 through 2004方法学方法学窗口期（天）窗口期（天）残余风险残余风险ELISA43.61/17501CLIA38.31/32637本

28、次评估使用随机抽样方式抽取已知血清标本 1556份，其中阳性标本 501份，阴性标本为 1055 份。科美东雅：灵敏度100%；特异度99.43%；准确度99.61%。阿克苏：灵敏度100%；特异度99.15%；准确度99.42%结论：科美东雅CLIA试剂HIV抗体初筛结果与生物梅里埃（Ag+Ab）ELISA试剂比较有较高的灵敏度、特异性。统计分析表明：二者准确度显著性检验无差异(u=0.7765，u1.96，P0.05)。将第一次两种试剂检出的15份假阳性标本（科美东雅6份，生物梅里埃9份），分别进行重复检测，结果均阴性。二次结果汇总统计：两种试剂检测结果一致，符合率为100%。对临床工作者

29、来讲，最常见的暴露源是血液。应在暴露当日、暴露后4周、8周、12周、6个月，定期抽血检测HIV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。统计分析表明：二者准确度显著性检验无差异(u=0.预防性用药应在暴露后立即开始，一般在1h之内服药效果最好。梅毒抗体 3次/年应在暴露当日、暴露后4周、8周、12周、6个月，定期抽血检测HIV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。二、艾滋病实验室检测技术用一次性采样环收集约 5 l 血样(6)终止和读数时的注意事项(6)终止和读数时的注意事项只需对技术人员做适当培训3、计划生育门诊就诊人群山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病

30、检测工作的通知 鲁卫疾控字201328号（2013年5月9日下发）只需对技术人员做适当培训15分钟后读结果，对结果的解释不要超过1小时。一般在5-15min完成温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；科美东雅：灵敏度100%；食品检验机构资质认定项目：5类573项1加完终止后30分钟内读取数据。美国已将用BED方法监测新发感染率纳入了国家艾滋病常规监测体系，全美所有需要进行新发感染检测的样品均寄至纽约州公共卫生实验室，统一检测，统一质控，统一数据处理。2006年6月美国CDC发布了“资源有限国家BED检测/监测HIV-1新发感染指南”性病艾滋病预防控制中心于20

31、04年将该方法引进国内。建立了适合于我国的BED方法的窗口期（168天）和4个关键校正系数（=0.8098，=0.7571，=0.9315，=0.0685）其原理是根据其原理是根据HIV特异性特异性IgG占总占总IgG抗体的比例随着抗体的比例随着感染时间的延长而逐渐增高。感染时间的延长而逐渐增高。应用应用BED-CEIA进行新近感染检测只适用于进行新近感染检测只适用于HIV阳性阳性样品。样品。由于个体间抗体生成的变异性，对个体而言，由于个体间抗体生成的变异性，对个体而言，BED结结果的预测值偏低，而且在个体水平上，果的预测值偏低，而且在个体水平上，BED检测可能检测可能产生一定的假阳性和假阴性

32、，但在人群水平上，假阳产生一定的假阳性和假阴性，但在人群水平上，假阳性的数目与假阴性的数目相近，因此可以相互抵消彼性的数目与假阴性的数目相近，因此可以相互抵消彼此的作用。美国此的作用。美国FDA将将BED-CEIA归为归为“只应用于监只应用于监测目的，不能用于个体诊断和临床测目的，不能用于个体诊断和临床”的实验方法。的实验方法。国家级国家级PT艾滋病抗体筛查和确证艾滋病抗体筛查和确证 3次次/年年梅毒抗体梅毒抗体 3次次/年年乙肝表面抗原乙肝表面抗原 3次次/年年HCV抗体检测抗体检测 3次次/年年WB条带判读条带判读 3次次/年年BED 2次次/年年CD4检测检测 2次次/年年耐药检测耐药检

33、测 2次次/年年基因序列判读基因序列判读 1次次/年年滤纸片干血斑滤纸片干血斑HIV-DNA 1次次/年年省级省级PT筛查实验室筛查实验室 1次次/年年筛查中心实验室筛查中心实验室 2次次/年年 2011年，年，26个省份（系统）报告有艾滋病防治工作人员发生职个省份（系统）报告有艾滋病防治工作人员发生职业暴露，总例数为业暴露，总例数为1043（比（比2010年增加年增加15.4%）765例暴露者及时服用了抗病毒药物，并接受了咨询与随访检测，例暴露者及时服用了抗病毒药物，并接受了咨询与随访检测，到目前为止未发现职业暴露后感染到目前为止未发现职业暴露后感染HIV的案例。的案例。待验收艾滋病筛查实验

34、室2个、确证实验室1个比ELISA法价格略高。由于个体间抗体生成的变异性，对个体而言，BED结果的预测值偏低，而且在个体水平上，BED检测可能产生一定的假阳性和假阴性，但在人群水平上，假阳性的数目与假阴性的数目相近，因此可以相互抵消彼此的作用。应在暴露当日、暴露后4周、8周、12周、6个月，定期抽血检测HIV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。本次评估使用随机抽样方式抽取已知血清标本 1556份，其中阳性标本 501份，阴性标本为 1055 份。2006年6月美国CDC发布了“资源有限国家BED检测/监测HIV-1新发感染指南”样本：血浆/血清/全血（唾液）用一次性采样环

35、收集约 5 l 血样其特点在于灵敏度高、测定范围宽、使用范围广，快速、简便，并在测试中不使用有害试剂，无放射污染等。必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；艾防所通过项目：艾滋病抗体筛查、确证耐药检测 2次/年31%，特异性为99.2、一般实验室均可操作四代试剂不仅可以检测出血清/血浆/全血样本中的HIV-1和HIV-2抗体，还可以检测出p24抗原。建立了适合于我国的BED方法的窗口期（168天）和4个关键校正系数（=0.艾滋病抗体筛查和确证 3次/年（三）HCV (ELISA、RIBA)加入50 uL样品 加入 50 uL样品免疫层析结果判读记录仪暴露于暴露于HIV的潜在污染源包

36、括：血液、血性体液、精液、阴道分的潜在污染源包括：血液、血性体液、精液、阴道分泌物、脑脊液、胸膜液、腹水、心包液、滑膜液、羊水和组织或泌物、脑脊液、胸膜液、腹水、心包液、滑膜液、羊水和组织或病毒培养液。病毒培养液。对对HIV检测实验室来讲，最重要而常见的检测实验室来讲，最重要而常见的HIV来源是血液、含血来源是血液、含血液的各种体液和含有高滴度液的各种体液和含有高滴度HIV的实验室培养物。对临床工作者的实验室培养物。对临床工作者来讲，最常见的暴露源是血液。来讲，最常见的暴露源是血液。应在暴露当日、暴露后应在暴露当日、暴露后4周、周、8周、周、12周、周、6个月，定期抽血检测个月，定期抽血检测H

37、IV抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期抗体，有条件时，可以采用核酸检测和病毒分离等进行早期诊断。诊断。预防性用药应在暴露后立即开始，一般在预防性用药应在暴露后立即开始，一般在1h之内服药效果最好。之内服药效果最好。对于感染危险性很高的暴露者，即使间隔时间很长（比如对于感染危险性很高的暴露者，即使间隔时间很长（比如12周），也应考虑使用预防性治疗；因为即使不能防止感染，早期周），也应考虑使用预防性治疗；因为即使不能防止感染，早期治疗对治疗对HIV急性感染也有好处。急性感染也有好处。由于服用由于服用4周周AZT才有一定保护作用，如果无很大的副作用，预才有一定保护作用，如果无很大的副作用，预防性治疗用药时间应持续防性治疗用药时间应持续4周。周。