非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体第实用课件.ppt

1、LOGO1 非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体第19、21号外显子突变研究浙江省肿瘤医院浙江省肿瘤医院叶雪梅叶雪梅 毛伟敏毛伟敏 刘杏娥刘杏娥LOGO2listmale(ASR*)listFemale(ASR*)1Lung1Breast2Liver2Lung3Stomach3Esophageal 4Esophagus4Stomach5Colon/rectum5Live我省恶性肿瘤报告发病率为226.12/10万，死亡率为171.03/10万，占总死亡人数的27.67%，居我省死因首位。LOGO3 初次确诊3/4患者局部晚期及晚期,失去手术机会,以化疗主为的综合治疗手段 铂类两药联合方案是目前标准

2、的 化疗方 1.仍不能明显延长晚期肺癌的生存期 2.相互比较无特别优秀方案 3.达到了一个平台,传统方案1年生存率20%25%第3代方案1年生存率33%,2年 生存率11%分子靶向药物毒性较小，耐受性 较好l靶向治疗的目的:改善患者生活质量，延长生存期LOGO4LOGO有效预测因子有效预测因子亚裔亚裔非吸烟非吸烟腺癌腺癌EGFR突变突变女性女性TKILOGO课题思路课题思路随访随访TKI治疗测序测序step1step2step3LOGO目的目的检测90例NSCLC患者肺癌组织中的EGFR基因第19和21号外显子的突变率观察Exon19和Exon21的突变类型分析突变与临床特征的关系，并探讨其生

3、物学活性，为临床医生选择最受益人群提供理论依据。观察TKI疗效与EGFR突变的关系LOGO方法方法收集标本收集标本（90例）例）提取提取DNA（酚氯法）（酚氯法）DNA测序测序（正反双向）（正反双向）LOGOdelL747-P753insSWide type Exon19Nucleotides各种突变类型与EGFR靶向药物疗效的关系GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAA2%，多见于鳞癌，与患者性别、年龄、分期及吸烟于否无关。同义突变可能是使偏爱密码子变成非偏爱密码子，从而导致相应的tRNA由多数型转为少数型，结果使该密码子的表达大大减低，影响蛋白质

4、的合成。B:Exon21扩增片段电泳图（371bp）delE746A750delE746-A750delE746-A750分析突变与临床特征的关系，并探讨其生物学活叶雪梅 毛伟敏 刘杏娥GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAARelationship between EGFR mutation and the clinical characters of NSCLC patients3、检测到了两种经典的Exon19缺失突变和两种Exon21的替代点突变，它们是delL747P753insS（9例）和delE746A750（7例），L858R（9例）

5、和L861Q（4例）。A:Exon19 扩增片段电泳图（371bp）Correlation between EGFR exon19 samesense mutation and the clinical character of NSCLC9ABA:Exon19 扩增片段电泳图（371bp）B:Exon21扩增片段电泳图（371bp）(注：1为marker，210分别为9个不同标本)LOGO10例数例数百分比百分比(%)Exon191617.8Exon211314.4同义突变同义突变 4752.2delE746-A750delL747-P753insS S749S 2244(AG)突变类型突变

6、类型exon19exon21LOGO11Mutation typesNucleotidesAmino acidsWide type Exon19AAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCKELREATSPKAdelL747-P753insSAAGGAAT CGAAAGCCKE SKAdelE746-A750AAG AACATCTCCGAAAGCCK TSPKAWide type Exon21TTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAFGLAKLLGAEL858RTTTGGGCGGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAFGRAKLLGAEL861QT

7、TTGGGCTGGCCAAACAGCTGGGTGCGGAAFGLAKQLGAEWide type Exon19AGACCCTGCTCATCTCCACATCCTRPCSSPHPS749S 2244(AG)AGACCCTGCTCGTCTCCACATCCT RPCSSPHPLOGO12CCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCCCGTCGCTATCAAGGAATCGAAAGCCAAACAAGGAAATCCTTCGATGTGAGTTTCTGCLOGO13CCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCT

8、CCGAAAGCCAACAAGGAAATCCCCGTCGCTATCAAGACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTTCGATGTGAGTTT LOGO14GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAAGATTTTGGGCGGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAALOGO15GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAAGATTTTGGGCTGGCCAAACAGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAALOGOWide type Exon19统计分析显示该突变与病理类型相关,多发生于

9、鳞状细胞癌中，与其他因素没发现统计学意义。分析突变与临床特征的关系，并探讨其生物学活Mutation No.CCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCdelE746-A750Correlation between EGFR exon19 samesense mutation and the clinical character of NSCLC分析突变与临床特征的关系，并探讨其生物学活S749S 2244(AG)Correlation between EGFR exon19 samesense mutation and t

10、he clinical character of NSCLC2%，多见于鳞癌，与患者性别、年龄、分期及吸烟于否无关。03/10万，占总死亡人数的27.EGFR-TK突变类型同义突变及其生物遗传学效应探讨(注：1为marker，210分别为9个不同标本)统计分析显示该突变与病理类型相关,多发生于鳞状细胞癌中，与其他因素没发现统计学意义。EGFR突变与EGFR-TKI疗效的关系S749S 2244(AG)delL747-T751insS突变与患者年龄及TNM分期无相关性。16TGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCATCTCCACATCCTTGGCAGCTGCTCTGCTCTAG

11、ACCCTGCTCGTCTCCACATCCTLOGO17TGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCATCTCCACATCCTTGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCGTCTCCACATCCTLOGO18Item mutation(case，%)wild type(case，%)P valueExon19exon21totalGenderFemal8/25(32.0%)7/25(28.0%)15/25(60.0%)10/25(40.0%)0.000Male8/65(12.3%)6/65(9.2%)14/65(21.5%)51/65(78.5%)Pathology

12、ADC7/34(20.6%)6/34(17.6%)13/34(38.2%)21/34(61.8%)0.000BAC7/10(70.0%)2/10(20.0%)9/10(90.0%)1/10(10.0%)SCC2/46(4.3%)5/46(10.9%)7/46(15.2%)39/46(84.8%)Smoking YES5/54(9.3%)6/54(11.1%)11/54(20.4%)43/54(79.6%)0.003NO11/36(30.6%)7/36(19.4%)18/36(50.0%)18/36(50.0%)Stage2/31(6.5%)5/31(16.1%)7/31(22.6%)24/31

13、(77.4%)0.1068/40(20.0%)4/40(10.0%)12/40(30.0%)28/40(70.0%)6/18(33.3%)3/18(16.7%)9/18(50.0%)9/18(50.0%)0/1(0%)1/1(100%)1/1(100%)0/1(0%)age=70yr5/28(17.2%)4/29(13.8%)9/29(31.1%)20/29(69.0%)LOGO19ItemTotal NoMutation No.Positive rate(%)P valueGenderMale25 11 44.0 0.333Female65 36 55.4 SmokingYES542851.

14、90.931NO361952.8PathologyADC3415 44.1 0.017BAC10 2 20.0 SCC463065.2Stage311754.80.193402460.018633.3100age=70yr291344.8LOGO20 从统计表中看,结果表明四种经典突变的突变率与患者的性别、病理类型、吸烟状态相关，而与年龄、TNM分期无关。本研究中，我们发现47例患者发生了Exon19上的同义突变S749S 2244(AG),总突变率为52.2%，此为全球首次报道。统计分析显示该突变与病理类型相关,多发生于鳞状细胞癌中，与其他因素没发现统计学意义。有关同义突变的生物遗传学效应有

15、待进一步深入研究。LOGO讨论讨论12345EGFR-TK突变类型EGFR突变与EGFR-TKI疗效的关系EGFR突变与患者临床特征的关系各种突变类型与EGFR靶向药物疗效的关系同义突变及其生物遗传学效应探讨12即往的分子生物学理论都认为最终得到的蛋白质结构和功能也不会产生变化日前在科学杂志上报告说，这种沉默突变并不“沉默”，在某种情况下可以决定蛋白质的最终表现*。3同义突变可能是使偏爱密码子变成非偏爱密码子，从而导致相应的tRNA由多数型转为少数型，结果使该密码子的表达大大减低，影响蛋白质的合成。LOGO主要突变类型主要突变类型 delE746-A750 delS752-I759 delL7

16、47-T751insS delL747-P753insS delL747-A750 S768、V769、R776、T790 S768I、G719S,、S768I/G719S、D761-E762insEAFQL858R L861Q L833V H835L Q852 Exon19exon21exon2046%5%41%LOGO23 1、90例NSCLC患者检测到29例突变，突变率达32.2%。其中Exon19和Exon21各占总突变的55.2%和44.8%。2、EGFR基因Exon19及Exon21的突变主要见于腺癌，尤其是细支气管肺泡癌、女性、非吸烟患者；突变与患者年龄及TNM分期无相关性。3、

17、检测到了两种经典的Exon19缺失突变和两种Exon21的替代点突变，它们是delL747P753insS（9例）和delE746A750（7例），L858R（9例）和L861Q（4例）。4、检测到47例的同义点突变S749S 2244(AG)，突变率高达52.2%，多见于鳞癌，与患者性别、年龄、分期及吸烟于否无关。5、同义突变可能与EGFRTKI耐药相关，还需进一步深入研究其遗传生物学效应及其对于EGFRTKI抗肿瘤活性的影响和作用机制。LOGO非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体第19、21号外显子突变研究靶向治疗的目的:改善患者生活质量，延长生存期delE746-A750TGGCAGCTGC

18、TCTGCTCTAGACCCTGCTCGTCTCCACATCCTCorrelation between EGFR exon19 samesense mutation and the clinical character of NSCLC即往的分子生物学理论都认为最终得到的蛋白质结构和功能也不会产生变化3、检测到了两种经典的Exon19缺失突变和两种Exon21的替代点突变，它们是delL747P753insS（9例）和delE746A750（7例），L858R（9例）和L861Q（4例）。(注：1为marker，210分别为9个不同标本)delE746-A750有关同义突变的生物遗传学效应有待

19、进一步深入研究。靶向治疗的目的:改善患者生活质量，延长生存期4、检测到47例的同义点突变S749S 2244(AG)，突变率高达52.浙江省2009年癌症发病率排名delL747-P753insS03/10万，占总死亡人数的27.TTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAS749S 2244(AG)纯合子突变GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAA相互比较无特别优秀方案AAG AACATCTCCGAAAGCCExon19、exon21目的片段TGGCAGCTGCTCTGCTCTAGACCCTGCTCATCTCCACATCCTS749

20、S 2244(AG)delE746-A750浙江省2009年癌症发病率排名观察TKI疗效与EGFR突变的关系检测90例NSCLC患者肺癌组织中的EGFR基因第同义突变及其生物遗传学效应探讨GATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAAAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCRPCSSPHPS749S 2244(AG)S768、V769、R776、T790 S768I、G719S,、S768I/G719S、D761-E762insEAFQ检测90例NSCLC患者肺癌组织中的EGFR基因第Positive rate(%)2%，多见于鳞癌，与患者性别、年龄、分期及吸烟于否无关。AAG AACATCTCCGAAAGCCCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCdelE746A750Thank You!