临床输血学检查课件.ppt

1、第四章第四章 临床输血学检查临床输血学检查 王王 梅梅临床检验与输血学教研室临床检验与输血学教研室江苏大学医学院江苏大学医学院主主 要要 内内 容容一、血型系统一、血型系统二、交叉配血二、交叉配血三、新生儿溶血病三、新生儿溶血病四、输血不良反应四、输血不良反应五、输血性传染病五、输血性传染病一、血型系统一、血型系统u血型血型 是人体血液的一种遗传性状，各种血液成是人体血液的一种遗传性状，各种血液成分包括红细胞、白细胞、血小板及某些血浆蛋分包括红细胞、白细胞、血小板及某些血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异，受独立白在个体之间均具有抗原成分的差异，受独立的遗传基因控制。的遗传基因控制。u血型血

2、型抗原抗原分类分类 1.红细胞血型红细胞血型抗原抗原:ABO、Rh、MNS 等等 2.白细胞血型白细胞血型抗原抗原:CD、HLA等等 3.血小板血型血小板血型抗原抗原:HPA等等 4.其他血型抗原其他血型抗原血型血型抗原抗原u完全抗体完全抗体(complete antibody)在血型抗原物质刺激下可形成，与红细胞生理在血型抗原物质刺激下可形成，与红细胞生理盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体。盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体。血型抗体血型抗体u不完全抗体不完全抗体(low-order antibody)只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝集的抗体。只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝

3、集的抗体。血型抗体与红细胞的表面抗原结合后，产生血管内或血型抗体与红细胞的表面抗原结合后，产生血管内或血管外溶血。血管外溶血。u血型抗体血型抗体(Blood group antibody)在血型抗原物质刺激下可形成的免疫球蛋白。红在血型抗原物质刺激下可形成的免疫球蛋白。红细胞血型抗体可分为细胞血型抗体可分为完全抗体和不完全抗体。完全抗体和不完全抗体。红细胞血型红细胞血型红细胞上的遗传性标志。红细胞上的遗传性标志。包括包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。等。（1 1）ABOABO血型系统血型系统 1901年，年，Landsteiner发现了人类的第一个血型系发现了人类的第

4、一个血型系统统ABO血型系统，含抗原成分不同将人的红细血型系统，含抗原成分不同将人的红细胞分成胞分成A、B、O和和AB四种血型。四种血型。A B AB OABOABO血型合成血型合成 ABOABO血型系统独特的性质血型系统独特的性质u1.血清存在反应强的抗体。血清存在反应强的抗体。u2.组织细胞及各种体液中存在着组织细胞及各种体液中存在着ABH物质。物质。ABOABO血型的遗传血型的遗传ABOABO血型的血型的A A抗原亚型抗原亚型1.A1亚型亚型 红细胞上具有红细胞上具有A1和和A抗原，血清中含抗抗原，血清中含抗B抗体抗体2.A2亚型亚型 红细胞上具有红细胞上具有A抗原，血清中含抗抗原，血清

5、中含抗B和少量抗和少量抗A1抗体抗体1.正向定型正向定型2.反向定型反向定型ABOABO血型鉴定血型鉴定3结果判定结果判定正正定型（细胞定型）定型（细胞定型）抗抗-A 抗抗-B 抗抗-A，B反定型反定型（血清定型）（血清定型）AC BC OC检测结果检测结果 +O+A +B+AB（2 2）Rh Rh 血型系统血型系统u概述概述 抗抗Rh抗体一般指抗抗体一般指抗-D。uRh血型抗原血型抗原及抗体及抗体 1.Rh抗原：抗原：含含D D、C C、E E、c c和和e e五种，五种，D D抗原抗原性最强。性最强。2.2.Rh抗体：抗体：主要通过输血或妊娠免疫而产主要通过输血或妊娠免疫而产生。生。uRh

6、抗体临床意义：抗体临床意义：引起输血反应或新生儿引起输血反应或新生儿溶血病。溶血病。RhRh血型鉴定血型鉴定u原理原理:（1）单克隆混合试剂检测法）单克隆混合试剂检测法 用用Rh各抗血清各抗血清（IgM+IgG型）试剂通过凝集反应对红细胞上型）试剂通过凝集反应对红细胞上Rh抗抗原进行鉴定。原进行鉴定。（2）酶介质检测法）酶介质检测法 酶介质可破坏红细胞表面的唾酶介质可破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，减少细胞间的静电液酸，降低红细胞表面负电荷，减少细胞间的静电排斥力，使细胞间的距离缩小，有利于排斥力，使细胞间的距离缩小，有利于IgG型小分型小分子特异性子特异性Rh血型抗体与红细胞上

7、的血型抗体与红细胞上的Rh抗原反应，抗原反应，形成肉眼可见的凝集。形成肉眼可见的凝集。白细胞血型白细胞血型u1.包括红细胞血型抗原包括红细胞血型抗原u2.白细胞本身所特有的血型抗原白细胞本身所特有的血型抗原u3.人类白细胞抗原（人类白细胞抗原（HLA）一、一、HLAHLA系统基因、抗原结构系统基因、抗原结构uHLA基因型基因型:位于位于6号染色体短臂号染色体短臂6p21.3区域。区域。uHLA抗原抗原 .分为分为HLA-类分子类分子 .HLA-类分子类分子HLAHLA抗原临床应用抗原临床应用uHLA多态性的研究多态性的研究;u器官和骨髓移植前组织相容性配型器官和骨髓移植前组织相容性配型;u亲子

8、鉴定亲子鉴定;uHLA与某些疾病的关联与某些疾病的关联;u遗传学方面。遗传学方面。二、二、HLAHLA系统抗原的检测方法系统抗原的检测方法.HLA血清学技术血清学技术(微量淋巴细胞毒试验微量淋巴细胞毒试验)分型血清中含有的抗特定分型血清中含有的抗特定HLA抗原的细胞毒抗体与抗原的细胞毒抗体与待检淋巴细胞膜表面的待检淋巴细胞膜表面的HLA抗原结合后，在补体的抗原结合后，在补体的参与下损伤细胞膜，经伊红或台盼蓝染色后，观察参与下损伤细胞膜，经伊红或台盼蓝染色后，观察细胞是否被染色，了解细胞损伤、死亡的情况。细胞是否被染色，了解细胞损伤、死亡的情况。二、二、HLAHLA系统抗原的检测方法系统抗原的检

9、测方法u.HLA的分子生物学检测的分子生物学检测：PCR-SSP（PCR序列特异序列特异性引物）性引物）PCR-RFLP（PCR限制性限制性片段长度多态性）片段长度多态性）PCR-SBT（PCR-直接测序直接测序分型分型）血小板血型血小板血型u1.包括非特异抗原包括非特异抗原u2.本身所特有的特异抗原（本身所特有的特异抗原（HPA）u3.血小板抗体包括同种抗体和自身血小板抗体包括同种抗体和自身抗体。抗体。血小板同种抗体血小板同种抗体 同种血小板抗体一般由输血、妊娠或骨髓移植等免同种血小板抗体一般由输血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生。最常见的抗体是疫刺激而产生。最常见的抗体是HRA-lb和和5

10、b抗体。抗体。这和相应这和相应HPA抗原在群体中的分布频率有关。抗原在群体中的分布频率有关。u1.新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 u2.输血后紫癜输血后紫癜 u3.血小板输注无效血小板输注无效二、交叉配血实验二、交叉配血实验u 概念概念 是指将受血者与供血者的红细胞和血是指将受血者与供血者的红细胞和血清（浆）交叉混合，观察有无凝集或溶血等清（浆）交叉混合，观察有无凝集或溶血等现象的试验。现象的试验。u分类分类 1.“主侧主侧”配血配血 2.“次侧次侧”配血配血 3.自身对照自身对照交叉配血实验技术交叉配血实验技术u1.盐水介质盐水介质法法 u2.酶介质法酶介质

11、法 u3.抗人球蛋抗人球蛋白介质法白介质法 u4.凝聚胺法凝聚胺法u5.微柱凝胶免疫技术微柱凝胶免疫技术 三、新生儿溶血病（三、新生儿溶血病（HDNHDN）是指母亲与胎儿血型不合引起血型抗原是指母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病免疫所致的一种溶血疾病 我国最多见的是我国最多见的是ABOABO血型系统所引起的溶血型系统所引起的溶血病，其次是血病，其次是RhRh系统引起。系统引起。(一一)ABO)ABO新生儿溶血病新生儿溶血病 ABO-HDN ABO-HDN是由于母婴血型不合，母体的是由于母婴血型不合，母体的IgGIgG抗抗A(B)A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引

12、经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。起。(二二)Rh)Rh血型引起的新生儿溶血血型引起的新生儿溶血 实验室检查实验室检查u直接抗人球蛋白试验直接抗人球蛋白试验u游离试验游离试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。是检测新生儿血清中的血型抗体。u释放试验释放试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。细胞上是否存在免疫抗体。四、输血不良反应四、输血不良反应u.概念：概念：输血过程中或输血后，因输注输血过程中或输血后，因输注血液或血液制品而发生的输血前不能预血液或血液制品而发生的输血前不能预期的不良反应。期的不良反应。u.分类：分类：.

13、按输血反应发生的时间，输血不良反按输血反应发生的时间，输血不良反应可分为急性反应和迟发性反应。应可分为急性反应和迟发性反应。.按输血反应发生的机制，输血不良反按输血反应发生的机制，输血不良反应可分为免疫性反应和非免疫性反应。应可分为免疫性反应和非免疫性反应。常见输血不良反应常见输血不良反应u1.溶血反应：溶血反应：（1）急性溶血性输血反应（）急性溶血性输血反应（AHTR)（2）迟发性溶血性输血反应（）迟发性溶血性输血反应（DHTR)2.非溶血性发热性输血反应非溶血性发热性输血反应（FNHTR)u3.过敏反应过敏反应u4.输血相关性移植物抗宿主病（输血相关性移植物抗宿主病（TA-GVHD）u5.输血相关性急性肺损伤（输血相关性急性肺损伤（TRALI）五、输血传播疾病五、输血传播疾病u病毒性疾病病毒性疾病:1.病毒性肝炎病毒性肝炎:乙肝、丙肝乙肝、丙肝 2.获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）3.巨细胞病毒感染巨细胞病毒感染u梅毒感染梅毒感染总总 结结1.粪便检验内容粪便检验内容 及临床意义及临床意义2.FOBT3.ABO、Rh血型鉴定血型鉴定4.HLA的临床意义的临床意义5.交叉配血交叉配血6.HDN概念、类型概念、类型7.输血不良反应及传染病输血不良反应及传染病