第十一章-脑脊液—临床检验专业知识课件.ppt

1、学习目标学习目标1.说出脑脊液的采集方法和注意事项说出脑脊液的采集方法和注意事项2.简述正常脑脊液的感官检验表现及病理情况下脑简述正常脑脊液的感官检验表现及病理情况下脑脊液感官变化脊液感官变化3.说出脑脊液蛋白质定性、原理、操作、结果判断说出脑脊液蛋白质定性、原理、操作、结果判断及临床意义及临床意义4.叙述脑脊液细胞计数和分类计数的方法和临床意叙述脑脊液细胞计数和分类计数的方法和临床意义义5.区别常见中枢神经系统疾病脑脊液变化特征区别常见中枢神经系统疾病脑脊液变化特征本章目录第一节第一节 标本的采集与处理标本的采集与处理第二节第二节 脑脊液理学检验脑脊液理学检验第三节第三节 脑脊液的化学检验脑

2、脊液的化学检验第四节第四节 脑脊液的显微镜检验脑脊液的显微镜检验第五节第五节 常见中枢神经系统疾病的脑脊液变化常见中枢神经系统疾病的脑脊液变化第一节第一节 标本的采集与处理标本的采集与处理一、脑脊液概述二、脑脊液的采集三、脑脊液检验的临床应用一、脑脊液概述一、脑脊液概述 脑脊液（脑脊液（CSF）是一种细胞外液，主要由各）是一种细胞外液，主要由各脑室的脉络丛通过血液的透析作用所产生，充满脑室的脉络丛通过血液的透析作用所产生，充满脑室系统及脑和脊髓的蛛网膜下腔，脑脊液主要脑室系统及脑和脊髓的蛛网膜下腔，脑脊液主要通过各侧脑室的脉络丛细胞对血浆的选择过滤形通过各侧脑室的脉络丛细胞对血浆的选择过滤形成

3、，然后通过蛛网膜吸收返回血液循环，它的产成，然后通过蛛网膜吸收返回血液循环，它的产生和回流保持着动态平衡。正常人脑脊髓液的量生和回流保持着动态平衡。正常人脑脊髓液的量约约100150ml。一、脑脊液概述一、脑脊液概述 脑脊液是血浆通过脉络丛选择性过滤而成，脑脊液是血浆通过脉络丛选择性过滤而成，因而其成分与血浆有很大差异，正常情况下易通因而其成分与血浆有很大差异，正常情况下易通过脉络丛的有钠、镁、氯化物、过脉络丛的有钠、镁、氯化物、CO2等；部分通等；部分通过的有蛋白质、葡萄糖、尿素、氨基酸、尿酸、过的有蛋白质、葡萄糖、尿素、氨基酸、尿酸、乳酸及酶等；不易透过的有胆红素、纤维蛋白原、乳酸及酶等；

4、不易透过的有胆红素、纤维蛋白原、补体、抗体、胆固醇等。补体、抗体、胆固醇等。二、脑脊液的采集二、脑脊液的采集 脑脊髓液的采集一般由临床医生操作，经腰脑脊髓液的采集一般由临床医生操作，经腰椎穿刺采集。椎穿刺采集。脑脊髓液穿刺的适应证有：有脑膜刺激征；脑脊髓液穿刺的适应证有：有脑膜刺激征；原因不明的剧烈头痛、昏迷、抽搐、瘫痪等；原因不明的剧烈头痛、昏迷、抽搐、瘫痪等；疑有颅内出血、中枢神经梅毒、中枢神经系统疑有颅内出血、中枢神经梅毒、中枢神经系统白血病等；中枢神经系统疾病需要系统观察、白血病等；中枢神经系统疾病需要系统观察、椎管内给药等。椎管内给药等。脑脊髓液穿刺的禁忌证有：颅内高压，特脑脊髓液穿

5、刺的禁忌证有：颅内高压，特别是有视乳头水肿时；腰椎结核或穿刺部位有别是有视乳头水肿时；腰椎结核或穿刺部位有感染时；全身情况不允许等。感染时；全身情况不允许等。二、脑脊液的采集二、脑脊液的采集 脑脊液标本抽取后，可用脑脊液标本抽取后，可用3支无菌试管收集，每管支无菌试管收集，每管12ml.第一管第一管:作细菌学检查作细菌学检查 第二管第二管:生化和免疫学检查生化和免疫学检查 第三管第三管:作一般性状和显微镜检查作一般性状和显微镜检查三、脑脊液检验的临床应用三、脑脊液检验的临床应用 脑脊液的检验可了解中枢神经系统的脑脊液的检验可了解中枢神经系统的改变，如感染、肿瘤、外伤、水肿、阻塞改变，如感染、肿

6、瘤、外伤、水肿、阻塞等，可协助诊断，对治疗及预后判断都有等，可协助诊断，对治疗及预后判断都有很大价值。很大价值。一、颜色一、颜色二、透明度二、透明度 三、凝固性三、凝固性 第二节第二节 脑脊液理学检验脑脊液理学检验 一、颜色一、颜色 正常脑脊液为无色水样液体正常脑脊液为无色水样液体.病理情况下可出现下列颜色：病理情况下可出现下列颜色：1乳白色乳白色 见于急性化脓性脑脊髓膜炎。见于急性化脓性脑脊髓膜炎。2红色红色 常因各种原因出血所致，如蛛网膜下常因各种原因出血所致，如蛛网膜下腔出血或脑出血，脑脊液离心后上清夜为淡红色腔出血或脑出血，脑脊液离心后上清夜为淡红色或黄色（陈旧性出血），隐血试验阳性。

7、或黄色（陈旧性出血），隐血试验阳性。穿刺损伤也可出现红色，脑脊液离心后上清液穿刺损伤也可出现红色，脑脊液离心后上清液为无色，且上清液作隐血试验为阴性。为无色，且上清液作隐血试验为阴性。一、颜色一、颜色 3黄色黄色 又称黄变症，形成原因有：又称黄变症，形成原因有：（1）陈旧性出血：常见于蛛网膜下腔出血和）陈旧性出血：常见于蛛网膜下腔出血和脑出血，因红细胞破坏，血红蛋白变性所脑出血，因红细胞破坏，血红蛋白变性所致，停止出血后致，停止出血后3周左右黄色可吸收消退。周左右黄色可吸收消退。（2）椎管梗阻：常见于脊髓或脊髓外肿瘤）椎管梗阻：常见于脊髓或脊髓外肿瘤所致，蛛网膜下腔粘连梗阻。因脑脊髓液所致，蛛

8、网膜下腔粘连梗阻。因脑脊髓液循环受阻，蛋白质含量明显升高，但隐血循环受阻，蛋白质含量明显升高，但隐血试验为阴性，当脑脊髓液中蛋白质含量试验为阴性，当脑脊髓液中蛋白质含量1.5g/L时颜色变黄，黄变程度与蛋白含量时颜色变黄，黄变程度与蛋白含量成正比，且梗阻部位越低，黄变越明显，成正比，且梗阻部位越低，黄变越明显，此现象称为弗氏（此现象称为弗氏（Froins）综合征。）综合征。一、颜色一、颜色 一、颜色一、颜色 （3）感染：化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎可）感染：化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎可致脑脊液中蛋白含量增高而变黄。致脑脊液中蛋白含量增高而变黄。（4）其他：重症黄疸、新生儿溶血病或某些药物

9、）其他：重症黄疸、新生儿溶血病或某些药物色素也可使脑脊液呈黄色。色素也可使脑脊液呈黄色。一、颜色一、颜色 4 4其他颜色其他颜色 中枢神经系统黑色素瘤可使脑脊中枢神经系统黑色素瘤可使脑脊髓液为棕黑色，铜绿假单孢菌性脑膜炎的脑脊髓髓液为棕黑色，铜绿假单孢菌性脑膜炎的脑脊髓液可呈现绿色。液可呈现绿色。报告方式：直接用颜色进行描述性报告，如报告方式：直接用颜色进行描述性报告，如“红色红色”、“黄色黄色”等。等。二、透明度二、透明度 .清晰透明：见于正常脑脊液，病毒性清晰透明：见于正常脑脊液，病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观；透明外观；.乳白色混浊：见

10、于化脓性脑膜炎；乳白色混浊：见于化脓性脑膜炎；.毛玻璃样混浊：见于结核性脑膜炎；毛玻璃样混浊：见于结核性脑膜炎；.血性混浊：穿刺损伤或颅内出血血性混浊：穿刺损伤或颅内出血报告方式：以报告方式：以“清晰清晰”、“微浑微浑”、“混浊混浊”等等进行报告。进行报告。三、凝固性三、凝固性收集脑脊髓液于试管中，静置收集脑脊髓液于试管中，静置1224小时，观察小时，观察有无凝块或凝膜形成。有无凝块或凝膜形成。正常脑脊液无凝块、沉淀或薄膜形成。正常脑脊液无凝块、沉淀或薄膜形成。化脓性脑膜炎在脑脊髓液抽出后化脓性脑膜炎在脑脊髓液抽出后12小时有明显小时有明显凝块或沉淀出现；凝块或沉淀出现；结核性脑膜炎的脑脊液静

11、置结核性脑膜炎的脑脊液静置1224后可在表面形后可在表面形成膜状物；成膜状物；脊髓灰白质炎及神经梅毒可有絮状凝块；脊髓灰白质炎及神经梅毒可有絮状凝块；蛛网膜下腔阻塞可因阻塞远端蛋白含量增高常呈黄蛛网膜下腔阻塞可因阻塞远端蛋白含量增高常呈黄色胶冻样。色胶冻样。凝固性凝固性报告方式：以报告方式：以“无凝块无凝块”、“凝块凝块”、“胶样胶样”、“有薄膜有薄膜”、“有凝块有凝块”等方式进行报告。等方式进行报告。一、蛋白质检验一、蛋白质检验二、葡萄糖检验二、葡萄糖检验 三、氯化物测定三、氯化物测定 （一）蛋白定性试验（一）蛋白定性试验（二）总蛋白定量测定（二）总蛋白定量测定（三）蛋白质定性和定量的临床意

12、义（三）蛋白质定性和定量的临床意义（四）脑脊液蛋白电泳（四）脑脊液蛋白电泳（五）免疫球蛋白测定（五）免疫球蛋白测定 一、蛋白质检验一、蛋白质检验（一）蛋白定性试验（一）蛋白定性试验1潘（潘（Pandy）氏试验）氏试验2罗罗-琼（琼（Ross-Jones）试验）试验1潘（潘（Pandy）氏试验）氏试验 原原 理理脑脊液中蛋白质与石炭酸结合成不溶性蛋白盐而脑脊液中蛋白质与石炭酸结合成不溶性蛋白盐而出现白色沉淀。此试验较敏感，不仅局限于球蛋出现白色沉淀。此试验较敏感，不仅局限于球蛋白，当蛋白质浓度超过白，当蛋白质浓度超过0.25g/L即可呈阳性反应，即可呈阳性反应，因此正常人脑脊液也可呈弱阳性反应。

13、因此正常人脑脊液也可呈弱阳性反应。1潘（潘（Pandy）氏试验）氏试验试剂试剂 饱和石炭酸液饱和石炭酸液操作操作 取饱和石炭酸液约取饱和石炭酸液约2ml于试管中，用滴管加入于试管中，用滴管加入脑脊液脑脊液1滴，置黑色背景处观察，如显白色混浊滴，置黑色背景处观察，如显白色混浊即为阳性，结果可根据其白色混浊的程度分级报即为阳性，结果可根据其白色混浊的程度分级报告。告。1潘（潘（Pandy）氏试验）氏试验结果判断结果判断-清晰，无浑浊清晰，无浑浊+白色混浊不明显白色混浊不明显+白色微浑白色微浑+白色混浊，呈云雾状白色混浊，呈云雾状+出现絮状沉淀出现絮状沉淀+立即形成白色凝块立即形成白色凝块2罗罗-琼

14、（琼（Ross-Jones）试验）试验 原理原理半饱和硫酸铵可沉淀球蛋白。正常脑脊液球蛋半饱和硫酸铵可沉淀球蛋白。正常脑脊液球蛋白含量很低，故本试验呈阴性反应。在病理情况白含量很低，故本试验呈阴性反应。在病理情况下，当脑脊液球蛋白增加时，本试验呈阳性反应。下，当脑脊液球蛋白增加时，本试验呈阳性反应。试剂试剂 饱和硫酸铵（饱和硫酸铵（850g/L）溶液）溶液2罗罗-琼（琼（Ross-Jones）试验）试验 操作及结果判断操作及结果判断 取饱和硫酸铵溶液取饱和硫酸铵溶液0.5ml于小试管内，沿管壁加于小试管内，沿管壁加脑脊液脑脊液0.5ml，先作环状试验，如果，先作环状试验，如果3分钟内出现分钟内

15、出现白色环表示有蛋白质，然后混匀，使呈半饱和硫白色环表示有蛋白质，然后混匀，使呈半饱和硫酸铵，若白色消失，表示无球蛋白，若白色沉淀酸铵，若白色消失，表示无球蛋白，若白色沉淀不消失或混浊表示球蛋白阳性。不消失或混浊表示球蛋白阳性。2罗罗-琼（琼（Ross-Jones）试验）试验 3注意事项 （1）潘氏法所需标本量少，灵敏度高，操作简便，结果易于观察，罗-琼法对球蛋白特异性好，但敏感性较低。（2）脑脊液细胞多时应离心取上清夜进行蛋白质的定性试验，排除细胞所致的假阳性。（3）若试验用试管和滴管不干净，石炭酸和硫酸铵纯度不合格，可出现假阳性；两种试剂饱和度低均可出现假阴性。（二）总蛋白定量测定（二）总

16、蛋白定量测定 磺基水杨酸磺基水杨酸-硫酸钠比浊法或邻苯三酚红钼络和显硫酸钠比浊法或邻苯三酚红钼络和显色法，详见色法，详见生物化学检验技术生物化学检验技术（三）蛋白质定性和定量的临床意义（三）蛋白质定性和定量的临床意义 正常脑脊液中蛋白含量为正常脑脊液中蛋白含量为0.145g/L0.45g/L，以白，以白蛋白为主，球蛋白极少，无纤维蛋白原，故蛋白定蛋白为主，球蛋白极少，无纤维蛋白原，故蛋白定性试验为阴性或极弱阳性。性试验为阴性或极弱阳性。蛋白质升高常见于：蛋白质升高常见于：中枢神经系统炎症，如化脓性脑膜炎、结核性脑中枢神经系统炎症，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎等，脑脊液中蛋白含量可达膜炎等，脑脊

17、液中蛋白含量可达1015g/L，病，病毒性脑炎则轻度升高；毒性脑炎则轻度升高；神经根病变，如多发性神经根神经炎，多有蛋白神经根病变，如多发性神经根神经炎，多有蛋白质含量升高，而细胞正常或接近正常，呈蛋白质含量升高，而细胞正常或接近正常，呈蛋白-细细胞分离现象；胞分离现象；椎管内梗阻和颅内占位性病变椎管内梗阻和颅内占位性病变脑或蛛网膜下腔出血及梗阻脑或蛛网膜下腔出血及梗阻脑软化、脑肿瘤及脑退行性变脑软化、脑肿瘤及脑退行性变（四）脑脊液蛋白电泳（四）脑脊液蛋白电泳 脑脊液蛋白电泳的临床意义脑脊液蛋白电泳的临床意义电泳区电泳区 带参考值（带参考值（）临床意义临床意义前清蛋白前清蛋白 26 增加见于脑

18、积水、脑萎缩及中枢神经系增加见于脑积水、脑萎缩及中枢神经系 统病变；降低见于脑膜炎时降低。统病变；降低见于脑膜炎时降低。清蛋白清蛋白 55 69 增加见于椎管梗阻、脑溢血、脑肿瘤增加见于椎管梗阻、脑溢血、脑肿瘤1球蛋白球蛋白 38 增高见于急性化脓性脑膜炎、结核性脑膜增高见于急性化脓性脑膜炎、结核性脑膜 2球蛋白球蛋白 49 炎急性期、脊髓灰质炎、脑膜白血病及脑炎急性期、脊髓灰质炎、脑膜白血病及脑 转移瘤等转移瘤等球蛋白球蛋白 1018 增高多见于动脉硬化、脑血栓等脂代谢障碍性增高多见于动脉硬化、脑血栓等脂代谢障碍性 疾病；也见于中枢神经系统萎缩和退行性变等疾病；也见于中枢神经系统萎缩和退行性

19、变等 球蛋白球蛋白 413 增加见于中枢神经系统炎症和脱髓鞘病变如多增加见于中枢神经系统炎症和脱髓鞘病变如多 性硬化症等性硬化症等（五）免疫球蛋白测定（五）免疫球蛋白测定 正常脑脊液中免疫球蛋白含量极少，主要为正常脑脊液中免疫球蛋白含量极少，主要为IgG，不易检出。中枢神经系统疾病可引起脑脊液免疫不易检出。中枢神经系统疾病可引起脑脊液免疫球蛋白变化：球蛋白变化：1.IgG增高增高 见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、神经梅毒、病毒性脑炎等。神经梅毒、病毒性脑炎等。2.IgM增高增高 多见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎。多见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎。3.IgA增高增

20、高 主要见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜主要见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜 炎、病毒性脑炎等。炎、病毒性脑炎等。4.IgE增高增高 主要见于脑瘤。主要见于脑瘤。二、葡萄糖检验二、葡萄糖检验（一）半定量法（五管法）一）半定量法（五管法）（二）葡萄糖定量测定（二）葡萄糖定量测定（三）葡萄糖检查的临床意义（三）葡萄糖检查的临床意义（一）半定量法（五管法）（一）半定量法（五管法）原理原理 同尿糖班氏法定性试验（用前稀释至同尿糖班氏法定性试验（用前稀释至1/10）。）。试剂试剂 同尿糖班氏法定性试验。同尿糖班氏法定性试验。操作操作取班氏试剂与脑脊液按下表加于取班氏试剂与脑脊液按下表加于5支试管中，煮支试管中，

21、煮沸沸10分钟，冷却后观察，有黄色沉淀者为阳性，分钟，冷却后观察，有黄色沉淀者为阳性，颜色不变为阴性，根据出现阳性反应最少量脑脊颜色不变为阴性，根据出现阳性反应最少量脑脊液推知糖含量。液推知糖含量。五管法测定脑脊液糖含量折算表五管法测定脑脊液糖含量折算表（二）葡萄糖定量测定（二）葡萄糖定量测定 测定方法多用葡萄糖氧化酶法或己糖测定方法多用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法，详见激酶法，详见生物化学检验技术生物化学检验技术教材。教材。（三）葡萄糖检查的临床意义（三）葡萄糖检查的临床意义 正常人脑脊液中糖含量约为血糖的一半，病理情正常人脑脊液中糖含量约为血糖的一半，病理情况下可出现如下变化：况下可出现如下

22、变化：1脑脊髓液糖含量降低脑脊髓液糖含量降低 常见于化脓性脑膜炎、常见于化脓性脑膜炎、结核和霉菌性脑膜炎等，脊髓液中糖含量少，病结核和霉菌性脑膜炎等，脊髓液中糖含量少，病毒性脑膜炎葡萄糖浓度正常。毒性脑膜炎葡萄糖浓度正常。2脑脊液糖含量增高脑脊液糖含量增高 见于糖尿病、脑或蛛网见于糖尿病、脑或蛛网膜下腔出血、精神分裂症、病毒感染、下丘脑损膜下腔出血、精神分裂症、病毒感染、下丘脑损害及饱餐后或注射葡萄糖等。害及饱餐后或注射葡萄糖等。三、氯化物测定三、氯化物测定 常用硝酸汞滴定法、电位分析法等，详见常用硝酸汞滴定法、电位分析法等，详见生物化生物化学检验技术学检验技术。正常成人脑脊液中氯化物含量为正

23、常成人脑脊液中氯化物含量为119129mmol/L。结核性脑膜炎时氯化物明显降低；结核性脑膜炎时氯化物明显降低；化脓性脑膜炎时氯化物下降较少；化脓性脑膜炎时氯化物下降较少；病毒性脑炎、脊髓灰质炎、中毒性脑炎等氯病毒性脑炎、脊髓灰质炎、中毒性脑炎等氯化物往往无显著变化；化物往往无显著变化；慢性肾衰竭尿毒症、脱水、心力衰竭等情况慢性肾衰竭尿毒症、脱水、心力衰竭等情况下，脑脊液中氯化物可升高。下，脑脊液中氯化物可升高。第四节第四节 脑脊液的显微镜检验脑脊液的显微镜检验 一、细胞计数一、细胞计数二、白细胞计数二、白细胞计数三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数四、脑脊髓液中细胞种类和形态四、脑脊髓液中细

24、胞种类和形态 五、细胞计数和分类计数的临床意义五、细胞计数和分类计数的临床意义 六、脑脊髓液检验注意事项六、脑脊髓液检验注意事项 一、细胞计数一、细胞计数（一）直接计数（一）直接计数 如细胞较少，直接充入计数池内计数并换算成每如细胞较少，直接充入计数池内计数并换算成每升细胞总数。升细胞总数。（二）稀释计数（二）稀释计数如细胞较多，可用等渗盐水或红细胞稀释液将如细胞较多，可用等渗盐水或红细胞稀释液将脑脊液稀释后按上法计数，结果乘以稀释倍数。脑脊液稀释后按上法计数，结果乘以稀释倍数。二、白细胞计数二、白细胞计数 （一）直接计数（一）直接计数 若细胞不多，可用吸管吸取冰乙酸湿润管壁若细胞不多，可用吸

25、管吸取冰乙酸湿润管壁后吹出，用同一吸管吸取均匀的脑脊液，充入计后吹出，用同一吸管吸取均匀的脑脊液，充入计数池内计数。数池内计数。二、白细胞计数二、白细胞计数 （二）稀释计数（二）稀释计数 1若细胞太多，可用白细胞稀释液稀释后若细胞太多，可用白细胞稀释液稀释后计数，结果乘以稀释倍数后再换算成每升白细胞计数，结果乘以稀释倍数后再换算成每升白细胞数。数。2若穿刺损伤血管而出现血性脑脊液，白若穿刺损伤血管而出现血性脑脊液，白细胞计数须经校正，扣除因出血带入的白细胞影细胞计数须经校正，扣除因出血带入的白细胞影响后才有价值。响后才有价值。三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数（一）直接分类计数（一）直接分类

26、计数（二）染色分类计数（二）染色分类计数 三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数 （一）直接分类计数（一）直接分类计数 白细胞计数后换成高倍镜观察，分类白细胞计数后换成高倍镜观察，分类100个白细胞，根据细胞形态和核型分别计个白细胞，根据细胞形态和核型分别计算出单个核细胞和中性粒细胞所占百分比，算出单个核细胞和中性粒细胞所占百分比，若白细胞少于若白细胞少于100个，应直接写出单个核细个，应直接写出单个核细胞和多核细胞的数字。胞和多核细胞的数字。三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数（二）染色分类计数（二）染色分类计数1细胞沉淀室法细胞沉淀室法 2玻片离心法玻片离心法 三、白细胞分类计数三、白细胞分

27、类计数 1细胞沉淀室法细胞沉淀室法 利用细胞自然沉淀和滤纸毛吸管利用细胞自然沉淀和滤纸毛吸管作用使水分吸出的原理设计了脑脊液作用使水分吸出的原理设计了脑脊液细胞沉淀室（如图细胞沉淀室（如图11-1），使细胞自），使细胞自然沉降在玻片上。此法收集的细胞完然沉降在玻片上。此法收集的细胞完整清晰，且仪器结构简单，标本用量整清晰，且仪器结构简单，标本用量少。少。三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数图图11-1 11-1 脑脊液细胞沉淀室结构示意脑脊液细胞沉淀室结构示意1.1.塑料沉淀管塑料沉淀管 2.2.带孔滤纸带孔滤纸 3.3.载玻片载玻片 4.4.橡皮胶衬垫橡皮胶衬垫5.5.拧紧螺母拧紧螺母 6.

28、6.压紧板压紧板 7.7.螺柱螺柱 8.8.底板底板 三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数 1细胞沉淀室法细胞沉淀室法 操作方法：先将清洁的载玻片和两张带操作方法：先将清洁的载玻片和两张带孔的滤纸插入沉淀室底盘的橡皮软垫上，放入沉孔的滤纸插入沉淀室底盘的橡皮软垫上，放入沉淀管，沉淀管之管底与滤纸上圆孔对齐，旋紧沉淀管，沉淀管之管底与滤纸上圆孔对齐，旋紧沉淀室；将淀室；将0.52ml脑脊液加入沉淀室内，让细脑脊液加入沉淀室内，让细胞直接沉降在玻片上；胞直接沉降在玻片上；3040min后，沉淀管后，沉淀管周围的滤纸吸干水分，即可取下玻片，室温或周围的滤纸吸干水分，即可取下玻片，室温或37温箱待干后

29、，经瑞温箱待干后，经瑞-吉染色或其他染色后油吉染色或其他染色后油镜观察并分类计数细胞。镜观察并分类计数细胞。三、白细胞分类计数三、白细胞分类计数 2玻片离心法玻片离心法 该法综合了沉淀室法与离心法的优点，该法综合了沉淀室法与离心法的优点，将沉淀室类似装置进行离心（将沉淀室类似装置进行离心（RCF177g）10分钟。由于离心力克服了滤纸的吸附力，分钟。由于离心力克服了滤纸的吸附力，使细胞均匀地分布在玻片上，干燥后染色使细胞均匀地分布在玻片上，干燥后染色镜检。镜检。四、脑脊髓液中细胞种类和形态四、脑脊髓液中细胞种类和形态 1 1正常脑脊髓液中以小淋巴细胞为主，约正常脑脊髓液中以小淋巴细胞为主，约占

30、占60%60%70%70%，单核细胞约占，单核细胞约占30%30%。.淋巴细胞淋巴细胞-浆细胞浆细胞 当中枢神经系统病毒当中枢神经系统病毒感染或结核时，可见转化过程中的淋巴细胞、淋感染或结核时，可见转化过程中的淋巴细胞、淋巴样细胞和浆细胞。巴样细胞和浆细胞。淋巴样细胞系淋巴细胞受到淋巴样细胞系淋巴细胞受到抗原刺激后转化而来，一般直径抗原刺激后转化而来，一般直径20m，核大，核大，可出现多种形态学改变，胞质受色深浅不一；未可出现多种形态学改变，胞质受色深浅不一；未成熟者细胞核大，胞质浅蓝色，成熟者核小，偏成熟者细胞核大，胞质浅蓝色，成熟者核小，偏位明显，染色质固缩成块，胞质深蓝色，有时可位明显，

31、染色质固缩成块，胞质深蓝色，有时可见双核。见双核。四、脑脊髓液中细胞种类和形态四、脑脊髓液中细胞种类和形态 3单核单核-巨噬细胞巨噬细胞 根据细胞的大小、形态及是根据细胞的大小、形态及是否含有吞噬物分为：否含有吞噬物分为：（1）单核细胞：与外周血中单核细胞相似。）单核细胞：与外周血中单核细胞相似。（2）激活型单核细胞：胞体和核变大，外形不规）激活型单核细胞：胞体和核变大，外形不规则，胞质淡蓝色，含大小不等的空泡，胞质边缘则，胞质淡蓝色，含大小不等的空泡，胞质边缘常有磨损状改变和突起。常有磨损状改变和突起。（3）巨噬细胞：由激活型单核细胞进一步演变而）巨噬细胞：由激活型单核细胞进一步演变而来，形

32、态不一，胞质中含有各种吞噬物，胞质丰来，形态不一，胞质中含有各种吞噬物，胞质丰富，边缘不清，淡蓝色或深蓝色，核型圆或不规富，边缘不清，淡蓝色或深蓝色，核型圆或不规则，染色质颗粒状，可见则，染色质颗粒状，可见1个个 2个核仁。个核仁。四、脑脊髓液中细胞种类和形态四、脑脊髓液中细胞种类和形态 4 4肿瘤细胞肿瘤细胞 见见“脱落细胞检验脱落细胞检验”。5 5其他其他 脑脊髓液中尚可见白血病细脑脊髓液中尚可见白血病细胞，其形态与血液或骨髓中同类幼稚细胞胞，其形态与血液或骨髓中同类幼稚细胞相似，见于脑膜白血病。亦可见嗜酸粒细相似，见于脑膜白血病。亦可见嗜酸粒细胞等。胞等。五、细胞计数和分类计数的五、细胞

33、计数和分类计数的临床意义临床意义 参考值参考值 正常脑脊髓液中无红细胞，白细胞极正常脑脊髓液中无红细胞，白细胞极少，成人为少，成人为0 010109 9/L/L 0.010.0110109 9/L/L，儿，儿童为童为0 010109 9/L/L 0.0150.01510109 9/L/L，分类主要，分类主要为单个核细胞，几乎都是淋巴细胞。为单个核细胞，几乎都是淋巴细胞。五、细胞计数和分类计数的五、细胞计数和分类计数的临床意义临床意义 白细胞升高见于如下疾病：白细胞升高见于如下疾病：（）白细胞轻度升高多见于脑瘤、病毒性脑炎、（）白细胞轻度升高多见于脑瘤、病毒性脑炎、脑膜炎等；脑膜炎等；（）白细胞

34、中度升高多见于病毒性脑膜炎、结（）白细胞中度升高多见于病毒性脑膜炎、结核性脑膜炎、乙型脑炎等；核性脑膜炎、乙型脑炎等；（）白细胞高度升高多见于化脓性脑膜炎、脑（）白细胞高度升高多见于化脓性脑膜炎、脑脓肿等。此外，脑出血、损伤等也可见白细胞升脓肿等。此外，脑出血、损伤等也可见白细胞升高。高。五、细胞计数和分类计数的五、细胞计数和分类计数的临床意义临床意义 各类细胞增多的临床意义（1）淋巴细胞）淋巴细胞-浆细胞：增多主要见于中枢浆细胞：增多主要见于中枢神经系统感染（病毒感染、慢性炎症等）、神经系统感染（病毒感染、慢性炎症等）、蛛网膜下腔出血、脑肿瘤等；蛛网膜下腔出血、脑肿瘤等；（2）单核）单核-巨

35、噬细胞：增多常见于病毒性和巨噬细胞：增多常见于病毒性和细菌性脑膜炎、中枢神经系统变性疾病及细菌性脑膜炎、中枢神经系统变性疾病及出血、外伤等；出血、外伤等；五、细胞计数和分类计数的五、细胞计数和分类计数的临床意义临床意义 （3 3）中性粒细胞：增多主要见于中枢神经系中性粒细胞：增多主要见于中枢神经系统感染、外伤、出血等；统感染、外伤、出血等；（4）嗜酸粒细胞：增多主要见于脑寄生虫病、）嗜酸粒细胞：增多主要见于脑寄生虫病、结核性脑膜炎、病毒性脑炎及少数脑瘤；结核性脑膜炎、病毒性脑炎及少数脑瘤；（5）白血病细胞见于急性白血病并发脑膜白）白血病细胞见于急性白血病并发脑膜白血病。血病。六、脑脊髓液检验注

36、意事项六、脑脊髓液检验注意事项 1脑脊液标本应及时检验，计数应在脑脊液标本应及时检验，计数应在1h内完成。内完成。2由于脑脊液中细胞或细菌分解葡萄糖，故标本由于脑脊液中细胞或细菌分解葡萄糖，故标本抽出后抽出后30min内测定葡萄糖，否则葡萄糖浓度降内测定葡萄糖，否则葡萄糖浓度降低。低。3脑脊液蛋白测定时标本需经离心沉淀，用上清脑脊液蛋白测定时标本需经离心沉淀，用上清液测定以排除细胞的影响。液测定以排除细胞的影响。六、脑脊髓液检验注意事项六、脑脊髓液检验注意事项 4作五管糖测定时若标本中蛋白质过多，应先作五管糖测定时若标本中蛋白质过多，应先将蛋白质去掉，否则会引起干将蛋白质去掉，否则会引起干 5

37、细胞计数时应注意白细胞与新型隐球菌区别，细胞计数时应注意白细胞与新型隐球菌区别，后者有芽生现象，不溶于乙酸，加印度墨汁或优后者有芽生现象，不溶于乙酸，加印度墨汁或优质墨汁后可见不着色的荚膜。质墨汁后可见不着色的荚膜。6计数池使用后应用计数池使用后应用75%乙醇消毒乙醇消毒60min，忌用，忌用有损计数池刻度的酚类消毒。有损计数池刻度的酚类消毒。总结总结第五节第五节 常见中枢神经系统疾病的脑脊液变化常见中枢神经系统疾病的脑脊液变化想一想想一想1.脑脊液感官检验包括哪些内容？正常脑脊液有何脑脊液感官检验包括哪些内容？正常脑脊液有何表现？病理情况下如何变化？表现？病理情况下如何变化？2.脑脊液蛋白质检验有何临床意义？脑脊液蛋白质检验有何临床意义？3.穿刺损伤血管导致血性脑脊液时，白细胞计数应穿刺损伤血管导致血性脑脊液时，白细胞计数应如何校正？如何校正？4.化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑膜炎三化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑膜炎三者脑脊液各有何特征者脑脊液各有何特征?