1、2023-1-13组织学 绪论1组织学与胚胎学组织学与胚胎学南京中医药大学基础医南京中医药大学基础医学院解剖组胚教研室学院解剖组胚教研室2023-1-13组织学 绪论2 组组 织织 学学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学组织学胚胎学胚胎学2023-1-13组织学 绪论3 第一章:第一章:绪绪 论论2023-1-13组织学 绪论4组织学组织学(histology):):利用利用显微镜显微镜研究研究正常正常机体的机体的微细微细结构结构及其相关功能的科学。及其相关功能的科学。分为:描述组织学、比较组织学、分为:描述组织学、比较组织学、实验组织学、分子生物学。实验组织学、分子生物学。2023-1-13
2、组织学 绪论5一一、组织学的研究内容组织学的研究内容l人体的组织是由细胞和细胞间质发育人体的组织是由细胞和细胞间质发育分化形成的,而器官系统则又是由几种分化形成的,而器官系统则又是由几种不同组织发育分化而成。不同组织发育分化而成。l因此组织学的研究内容包括:因此组织学的研究内容包括:细胞、细胞、组织和器官系统组织和器官系统三部分三部分 2023-1-13组织学 绪论61.1.细胞细胞(cell)(cell)定义定义:是人体形态结构的基本单位,是人体形态结构的基本单位,是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。殖分化的形态学基础。结构特点结构特点:形
3、态各异、大小不等形态各异、大小不等功能特点功能特点:相互调节、相互协同相互调节、相互协同,以以维持整体的生命活动。维持整体的生命活动。2023-1-13组织学 绪论72 2、组织、组织(tissue)(tissue)组成:组成:由一些形态相似、功能相近的由一些形态相似、功能相近的细胞和细胞间质所组成。细胞和细胞间质所组成。形成:形成:在胚胎发育时期形成。在胚胎发育时期形成。分类分类:由于细胞的特性不同,组织也由于细胞的特性不同,组织也相应分为相应分为上皮组织、结缔组织、肌上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。组织、神经组织。2023-1-13组织学 绪论8 3、器官和系统、器官和系统(orga
4、n and system)器官:器官:是在胚胎发育的早期由几种不同是在胚胎发育的早期由几种不同的组织发育、分化和互相结合所形成。的组织发育、分化和互相结合所形成。系统:系统:功能相关的器官组成功能相关的器官组成组织特征:组织特征:成体各器官、系统分别具成体各器官、系统分别具有其细微结构的组织特征,执行着特定有其细微结构的组织特征,执行着特定的功能。的功能。2023-1-13组织学 绪论9 研究内容:研究内容:细细胞胞细胞间质细胞间质组组织织上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌肉组织肌肉组织神经组织神经组织器官器官 系统系统 人体人体2023-1-13组织学 绪论10基本组织基本组织上皮组织上皮组
5、织结缔组织结缔组织肌组织肌组织神经组织神经组织2023-1-13组织学 绪论11二、组织学研究方法二、组织学研究方法组织学研究主要涉及两个方面:组织学研究主要涉及两个方面:显微镜和标本显微镜和标本 光学显微镜光学显微镜(light microscopy,LM):又称光镜,:又称光镜,常用于学习和研究组织学与胚胎学,其分辨率常用于学习和研究组织学与胚胎学,其分辨率为为0.2m,放大倍数约为,放大倍数约为1000倍。倍。电子显微镜电子显微镜(electron microscopy,EM):又称为电:又称为电镜,多用于组织学与胚胎学的研究,其分辨率镜,多用于组织学与胚胎学的研究,其分辨率为为0.1n
6、m,比光镜高,比光镜高1000倍,可放大几万倍到几倍,可放大几万倍到几十万倍。因此电子显微镜能观察到细胞的更微十万倍。因此电子显微镜能观察到细胞的更微细结构。细结构。2023-1-13组织学 绪论12 应用一般光学显微镜应用一般光学显微镜 观察组织切片观察组织切片载玻片载玻片盖玻片盖玻片组织组织 1、一般光学显微镜、一般光学显微镜(light microscope,LM)技术)技术长度单位:长度单位:0.20.2m m 2023-1-13组织学 绪论132023-1-13组织学 绪论14石蜡切片朮石蜡切片朮l取材、固定:取材、固定:为了尽可能地使所获得的材料的形态结构接近为了尽可能地使所获得的
7、材料的形态结构接近其活体状态,故取材时要迅速。而且所获得的其活体状态,故取材时要迅速。而且所获得的材料应及时用固定液材料应及时用固定液(fixative)固定固定(fixation)。常常用的固定液为甲醛、乙醇等。这些固定液可以用的固定液为甲醛、乙醇等。这些固定液可以使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。2023-1-13组织学 绪论15l脱水、包埋:脱水、包埋:为了使组织与包埋剂相融合,所获得材料为了使组织与包埋剂相融合,所获得材料需经乙醇或丙酮脱水;为了便于将材料切需经乙醇或丙酮脱水;为了便于将材料切成薄片,需将其包埋在石蜡或火棉胶内。成薄片,需将其包埋在
8、石蜡或火棉胶内。l切片、染色:切片、染色:用切片机将其切成厚约用切片机将其切成厚约510m的薄片。的薄片。2023-1-13组织学 绪论16苏木精苏木精(Hematoxylin)伊红伊红(Eosin)染色染色碱性染料碱性染料将将嗜碱性嗜碱性物质物质(本身本身酸性酸性)染成蓝色染成蓝色酸性染料酸性染料将将嗜酸性嗜酸性物质物质(本本身碱性身碱性)染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA、RNA细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体细胞质膜性结构细胞质膜性结构(线粒线粒体体、溶酶体溶酶体、滑面内质滑面内质网网)和细胞间质和细胞间质HE染色染色:2023-1-13组织学 绪论17 2023-1-13组织学
9、 绪论182023-1-13组织学 绪论19其他制片技术其他制片技术涂片:涂片:血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上涂在玻片上铺片铺片:疏松结缔组织撕成薄片铺在玻片上疏松结缔组织撕成薄片铺在玻片上磨片磨片:牙和骨等坚硬组织可磨成薄片牙和骨等坚硬组织可磨成薄片2023-1-13组织学 绪论20血涂片2023-1-13组织学 绪论21铺片2023-1-13组织学 绪论222、电子显微镜、电子显微镜(electron microscope,EM)技术技术电子显微镜下才能看到的结构称超微结构电子显微镜下才能看到的结构称超微结构。1.透射电镜:透射电镜:电子密度高:
10、电子密度高:电子密度低电子密度低:2.扫描电镜:扫描电镜:计量单位:计量单位:0.1nm(纳米纳米)2023-1-13组织学 绪论23中性粒细胞中性粒细胞 (透射电镜)(透射电镜)黑白反差黑白反差结构影像结构影像影像较黑称影像较黑称电子密度高电子密度高反之称反之称电子密度低电子密度低2023-1-13组织学 绪论242023-1-13组织学 绪论25柱状细胞表面(扫描电镜)柱状细胞表面(扫描电镜)2023-1-13组织学 绪论26 3、组织化学朮组织化学朮定义:定义:是通过化学反应的原理,定性、定是通过化学反应的原理,定性、定位、定量研究组织或细胞内化学物质的组位、定量研究组织或细胞内化学物质
11、的组成及与功能的关系;若与电子显微镜技术成及与功能的关系;若与电子显微镜技术相结合,则简称为电镜组织相结合,则简称为电镜组织(细胞细胞)化学。化学。基本操作基本操作:在组织切片和细胞样品上滴加在组织切片和细胞样品上滴加一定的试剂,该试剂与组织内的某些成分一定的试剂,该试剂与组织内的某些成分发生化学反应,在局部形成有色沉淀物,发生化学反应,在局部形成有色沉淀物,通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。分进行定位、定性和定量的研究。2023-1-13组织学 绪论27过碘酸过碘酸 Schiff反应反应(periodic acid Schi
12、ff reaction):简称简称 PAS反应反应,是确定组织或细胞中有无是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法多糖存在的一种方法。原理原理:多糖多糖PA氧化氧化醛醛Schiff试剂试剂紫红色沉淀紫红色沉淀2023-1-13组织学 绪论282023-1-13组织学 绪论29 4、组织或细胞培养、组织或细胞培养(tissue or cell culture)定义:将人体或动物的活细胞、活组织在定义:将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养,称细胞或组织培养体外培养,称细胞或组织培养(cell or tissue culture)。细胞在体外生存,必需具备适宜的条件,细胞在体外生存,必需具备适宜的
13、条件,其包括营养、其包括营养、O2和和CO2的比例、渗透压、的比例、渗透压、pH值、温度和湿度。值、温度和湿度。2023-1-13组织学 绪论302023-1-13组织学 绪论31 三、组织学在医学中的地位及学习三、组织学在医学中的地位及学习方法方法 (一一)地位地位 (二二)方法方法1.突出组织学内容突出组织学内容2.建立平面和立体的概念建立平面和立体的概念3.形态和功能的统一形态和功能的统一2023-1-13组织学 绪论32复习与思考复习与思考1、细胞、组织、器官之间的关系、细胞、组织、器官之间的关系2、光镜、电镜分辨率、光镜、电镜分辨率3、石蜡切片术包括哪几步?、石蜡切片术包括哪几步?4
14、、HE染色原理染色原理5、涂片、铺片、磨片针对对象、涂片、铺片、磨片针对对象。2023-1-13组织学 绪论33 细胞质:细胞器 1、线粒体:供能2、核糖体:合成蛋白3、内质网:粗面合成和运输蛋白 滑面合成脂质、解毒等 4、高尔基复合体:加工、浓缩、修饰5、溶酶体:消化、水解6、细胞骨架:微丝、微管、神经丝2023-1-13组织学 绪论34显微镜:组织学的诞生离不开显微镜的发明显微镜 放大倍数 分辨率 结构名称 光源光镜 1000倍 0.2微米 光镜结构 普通光电镜 几十万 0.1纳米 超微结构 电子束2023-1-13组织学 绪论35骨磨片2023-1-13组织学 绪论36l是利用抗原与抗体
15、结合的原理,定性、定位、定量检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的方法。l该方法是先将蛋白质或多肽作为抗原,注入到某种动物体内,使其体内产生与所注入抗原相应的抗体。而后自其血清中提取该抗体,并以荧光染料或铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记。用标记了的抗体来处理组织切片。标记抗体与切片上相应抗原特异性结合。因此切片中有标记物呈现的部位,从而显示该物质在组织中的分布。l这种方法特异性强、敏感度高、发展十分迅速,应用也十分广泛,成为当前生物学和医学众多学科的重要研究方法。4、免疫组织化学(immunohistochemistry method)2023-1-13组织学 绪论37 问题问题 解决方法解决方法 观察对象太小观察对象太小 放大放大 显微镜显微镜 观察对象无色,无反差观察对象无色,无反差 染色染色(HEHE染色染色)观察对象生化成分不同观察对象生化成分不同 细胞化学细胞化学、免疫组织化学免疫组织化学 观察对象是活体观察对象是活体 组织细胞培养组织细胞培养二二、组织学的研究方法组织学的研究方法
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