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血小板检测在类风湿关节炎诊治中的意义 课件.ppt

1、血小板检测在类风湿关节炎血小板检测在类风湿关节炎诊治中的意义诊治中的意义 n类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性进行性的自身免疫疾病,其主要病理特征是基于炎性刺激的滑膜细胞增殖,从而导致具有侵袭性的组织风湿血管翳的形成,血管翳的扩张可促进软骨和骨的破坏,而导致关节功能的丧失。临床发现70%活动期RA患者存在血小板计数的增高,近年研究证实血小板不仅具有凝血和止血功能,而且参与了RA 的炎症和免疫反应。血小板功能及其临床检测 血小板由骨髓造血组织中的巨核细胞产生,主要受血小板生成素等的调节,经过骨髓造血组织中的血窦进入血液循环成为血小板。血小板无细胞核,胞浆内含

2、颗粒,致密颗粒及溶酶体等。颗粒可释放血小板因子,凝血因子V、VII等,致密颗粒可释放5羟色胺、儿茶酚胺、ADP、ATP、Ca等。临床血小板相关检测包括血小板参数及血小板活化功能检测等。n血小板参数n血小板参数是临床实验常用的检测指标,对于多种疾病的诊断、治疗有非常重要的意义。血小板参数包括主要包括血小板计数(PLT):指计数单位容积周围血小板的含量;血小板压积(PCT):是单位容积周围血小板的总的压缩体积;平均血小板容积(MPV):代表单个血小板的平均容积;血小板分布宽度(PDW):可反映血液内血小板容积大小的离散度,PDW减小表明血小板的均一性高,PDW增高表明血小板大小悬殊。大型血小板比率

3、(P-LCR):是单位容积周围血小板中大型血小板的百分比。血小板的功能与结构有关,血小板的体积对决定其功能具有重要意义,血液中大型的血小板代表新生的活性高的血小板,含有较多的细胞器(如丰富的颗粒,致密颗粒及溶酶体等),代谢旺盛,活性强,聚集性也强。血小板分布密度表示血小板体积变异系数,也可反映血小板功能。当循环中体积较大的血小板数量增多时,MPV 相应增大;而当血小板体积大小差别增大时,PDW 也升高。其大小和体积不仅反映骨髓巨核细胞代谢增生及血小板生成情况,也在一定程度上显示了循环池中血小板的年龄。n血小板活化 n血小板活化是指血小板由静息状态转变为功能状态的过程,在这一过程中血小板发生粘附

4、、变形、聚集和释放等一系列反应。活化的血小板能分泌血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF-)等多种细胞因子。近几年来,随着流式细胞技术(FCM)的发展,FCM已广泛应用于基础与临床研究,并逐渐成为检测血小板活化的重要手段。活化血小板与静息血小板相比,其质膜糖蛋白常发生显著的变化,这些变化的糖蛋白便成为活化血小板的检测标志物。1 1、血小板质膜表面糖蛋白:、血小板质膜表面糖蛋白:(1)GPb/a(CD41-CD61)它仅在血小板活化时才因构象变化而显露出来,因此,使用其荧光单抗,就能更精确地在更早阶段检测到血小板的活化。(2)GPIb-IX-V(CD42)则相反,与静息血小板相比,

5、活化血小板上表达量显著降低。可以作为活化血小板的分子标志。n(3)GPIV(CD36)虽然在静息血小板上也表达,但活化血小板上表达量更高,也可以作为血小板活化标志。n(4)另外还有GPc/a(CD49e-CD29)、GPa/a(CD49b-CD29)等与血小板活化有关。n2 2、血小板颗粒膜糖蛋白:、血小板颗粒膜糖蛋白:主要包括血小板-颗粒膜蛋白(GMP-140,CD62)和溶酶体完整膜蛋白(LIMP,CD63)。CD62P又名血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白(GMP-140)或P-选择素(P-selection),血小板被激活时,其颗粒膜与质膜发生融合,在质膜上表达,成为活化血小板的分子标志。

6、n3 3、出现在活化血小板上能与血小板表面受体相结合、出现在活化血小板上能与血小板表面受体相结合的一些抗原:的一些抗原:包括纤维蛋白原,Xa因子等,这些抗原在血小板表面的出现和消失在临床检测上也是有意义的。血小板与类风湿关节炎 n血小板与RA疾病活动相关 n有学者通过活动期和缓解期RA患者血小板参数水平的比较发现,与RA临床缓解组比较,活动期组PLT、PCT均显著升高,RA活动期PLT与RF、ESR、CRP、WBC呈正相关;MPV与ESR、CRP呈负相关;P-LCR与ESR、CRP呈负相关;PCT与ESR、WBC呈正相关。n有文献报道RA患者PLT升高组SJC、TJC比PLT正常组增多,且两组

7、ESR、CRP和 RF滴度等差异均有统计学意义。另有文献报道与正常对照组比较,活动期RA患者血小板(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板平为体积(MPV)、P-选择素显著升高,采用透射电镜观察血小板超微结构破坏严重。n研究显示RA活动期患者PLT、PCT、MPV高于缓解组和正常对照组,PLT、PCT与反映RA病情活动的室验室指标ESR、1-AGP及免疫学指标IgG、IgA呈正相关;活动期RA患者PLT与关节疼痛、关节肿胀、口唇紫黯、肌肤甲错、舌体出现瘀斑或瘀点等症状显著相关;PCT与口唇紫黯、肌肤甲错相关;MPV与关节肿胀、口唇紫黯、肌肤甲错呈负相关,认为(1)PLT、PCT与RA病情变化有

8、关,可作为判断RA疾病活动的临床指标;(2)PLT、PCT、MPV与RA血瘀证症状相关,可作为指导临床辨证用药及判断中医药疗效的实验室指标。n血小板参与RA的有关机制 nRA 的基本病理改变主要为滑膜炎及血管翳形成,活化的血小板参与了RA 的病理发生发展过程。国外研研究表明血小板可定位于RA活动期滑膜炎症病灶中,静止期关节内则不出现,在RA患者关节滑液和血清中可检测到血小板特异性蛋白,提示血小板在RA发病中发挥作用。n国外学者研究发现RA患者的关节液中存在活化血小板产生的血小板微粒,这些微粒具有促炎症反应的作用,可通过IL-1诱导滑膜成纤维细胞产生细胞因子反应,并确定胶原受体糖蛋白VI是血小板

9、微粒产生的关键,而血小板耗损则可减轻大鼠的炎性关节炎。有学者通过成纤维样滑膜细胞(FLS)培养发现,血小板源性生长因子-AA(PDGF-AA)可以提高RA患者FLS的IL-1和IL-8的蛋白及mRNA表达,并且与TNF-具有协同作用,另外PDGF-AA还诱导了核因子kappaB的激活。nRA血小板增多的可能机制 n研究表明,参与RA炎症的一些细胞因子可能在RA反应性血小板增多的机制中发挥作用,尤其是IL-1、IL-6与TNF-。TNF-和IL-1在骨髓血小板生成过程中,通过诱导合成与分泌巨核细胞生长因子以及其他细胞因子,间接促使血小板增多。nIL-6能增强IL-1和TNF-的效应,并能促进肝细胞合成急性反应蛋白和促进类风湿因子的合成;IL-6在巨核细胞及血小板生成中的作用主要包括通过影响巨核细胞的大小和数量及多倍体的形成促进巨核细胞成熟;保护巨核细胞免于凋亡,在巨核细胞前体细胞增生中起关键作用。Thank you

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