抗化学性肝损伤功能食品课件.ppt

1、抗化学性肝损伤功能食品（优选）抗化学性肝损伤功能食品了解肝脏了解肝脏 肝脏是人体内最大的实质性腺体，是肝脏是人体内最大的实质性腺体，是体内新陈代谢的中心站，被喻为体内新陈代谢的中心站，被喻为“人体最人体最大的化工厂大的化工厂”。肝脏生理功能肝脏生理功能u 糖原生成、分解、异生，维持血糖浓度糖原生成、分解、异生，维持血糖浓度 u 肝脏中的胆汁酸能促进脂类的消化与吸收肝脏中的胆汁酸能促进脂类的消化与吸收 u 肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原等；等；u 储存脂溶性维

2、生素储存脂溶性维生素A、D、E、K及维生素及维生素Bu 能吞噬或胞饮血液中的细菌、衰老破坏的红细胞、能吞噬或胞饮血液中的细菌、衰老破坏的红细胞、病毒、抗原及变性蛋白体等，使血液净化病毒、抗原及变性蛋白体等，使血液净化u 解除氨的毒性解除氨的毒性u 在胚胎期，肝脏还能生成红细胞，具有造血功能在胚胎期，肝脏还能生成红细胞，具有造血功能什么是化学性肝什么是化学性肝损伤呢？损伤呢？概念篇概念篇“不良分子入侵不良分子入侵”u肝炎病毒：甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒：甲、乙、丙、丁、戊型u化学药物化学药物u酒精：长期大量饮酒引起肝病酒精：长期大量饮酒引起肝病u霉菌毒素霉菌毒素u化学污染的食品化学污染的食品

3、参考文献参考文献:蓝莓提取物对急性化学性肝损伤的干预作用蓝莓提取物对急性化学性肝损伤的干预作用2010Na+/K+ATP酶(1)肝细胞气球样变的病理组织学特征与评分值胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的1/2对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的1/2功效成分/标志性成分含量国家食品药品监督管理总局保健食品库中可查的国产保健食品中对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能性食品共有146种。“主力军二”-某些营养成分及物质分别采用丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒（改良赖氏法）测定血清中的ALT 与AST2 血清 ALT、AST每100g含：总皂甙 2.磷脂是细胞膜的构成

4、成分，具有亲水性和亲脂性重属性，对细胞的物质转运、吸收和代谢有重要作用。肝脏中的胆汁酸能促进脂类的消化与吸收国家食品药品监督管理总局保健食品库中可查的国产保健食品中对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能性食品共有146种。能吞噬或胞饮血液中的细菌、衰老破坏的红细胞、病毒、抗原及变性蛋白体等，使血液净化国食健字G20050287钙对维持体内细胞正常生理状态，调节神经肌肉兴奋等有重要作用。国食健字G20050325钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能化学性肝损伤化学性肝损伤 由化学性肝毒性物质（又称由化学性肝毒性物质（又称“亲肝亲肝”毒物）所造毒物）所造成的肝损伤成的肝损

5、伤。剧毒类：剧毒类：磷、三硝基甲苯、四氯化碳、氯奈、丙烯醛等磷、三硝基甲苯、四氯化碳、氯奈、丙烯醛等高毒类：高毒类：砷、汞、锑、苯胺、氯仿、呻化氢等砷、汞、锑、苯胺、氯仿、呻化氢等低毒类：低毒类：二硝基酚、乙醛、有机磷、丙烯晴、铅等二硝基酚、乙醛、有机磷、丙烯晴、铅等“亲肝亲肝”毒毒物物 脂肪醇类脂肪醇类 脂肪醇类脂肪醇类“亲肝亲肝”毒物毒物是怎么损害肝脏是怎么损害肝脏的呢？的呢？机理篇机理篇 肝损伤的化学机制主要通过细胞色肝损伤的化学机制主要通过细胞色素素P450及其结合反应产生的中间代谢及其结合反应产生的中间代谢产物引起的损伤。产物引起的损伤。化学性肝损伤主要与自由基损伤、化学性肝损伤主要

6、与自由基损伤、抗氧化体系不足或耗竭、磷脂的崩解、抗氧化体系不足或耗竭、磷脂的崩解、钙超载有关。钙超载有关。1 自由基（自由基（OFR）自由基是人体进行生命活动时所产生的一种自由基是人体进行生命活动时所产生的一种活性分子。活性分子。正常生理情况下，自由基在机体内能够持续正常生理情况下，自由基在机体内能够持续不断的产生，并具有调节细胞间的信号传递、细不断的产生，并具有调节细胞间的信号传递、细胞生长、抑制病毒和细菌等生物学作用。胞生长、抑制病毒和细菌等生物学作用。当人体处于病理状态，或在吸烟，过度饮酒当人体处于病理状态，或在吸烟，过度饮酒和不健康饮食等因素影响下，或在放射线照射、和不健康饮食等因素影

7、响下，或在放射线照射、环境污染等因素作用下，均会引起自由基过量产环境污染等因素作用下，均会引起自由基过量产生。生。当自由基产生过多超过了机体的抗氧当自由基产生过多超过了机体的抗氧化防御能力或机体的抗氧化防御系统削弱化防御能力或机体的抗氧化防御系统削弱时，自由基不能被及时清除，就会攻击细时，自由基不能被及时清除，就会攻击细胞组织，造成蛋白质、核酸等生物大分子胞组织，造成蛋白质、核酸等生物大分子变性，导致细胞和组织器官发生氧化损伤，变性，导致细胞和组织器官发生氧化损伤，诱发各种疾病，并加速机体衰老。诱发各种疾病，并加速机体衰老。OFR 肝损伤肝损伤 OFROFR细胞能量代谢障碍细胞能量代谢障碍Na

8、+/K+ATP酶酶 多不饱和脂肪酸多不饱和脂肪酸过氧化脂质过氧化脂质肝细胞膜肝细胞膜线粒体膜线粒体膜 呼吸功能受损，呼吸功能受损，肝损严重肝损严重（1）机制一）机制一（2）机制二机制二Ca2+Ca2+Fe2+Fe2+Fe2+非酶促反应非酶促反应产生自由基，产生自由基，加重肝损，加重肝损，肝坏死肝坏死+OFR肝细胞膜肝细胞膜OFR酶活酶活干扰干扰(3)机制三机制三抑制或改变抑制或改变酶促反应酶促反应抗氧化酶活性抗氧化酶活性抗氧化防御能力抗氧化防御能力影影响响影响影响OFRDNA分子分子 氢键氢键 特殊密码特殊密码 多聚酶结合多聚酶结合 位点位点 模板结构模板结构(4)机制四机制四2 抗氧化体系不

9、足或耗竭抗氧化体系不足或耗竭 防护系统防护系统酶抗氧化系统酶抗氧化系统非酶抗氧化系统非酶抗氧化系统氧化氢酶氧化氢酶 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶 维生素维生素A、C、E 还原型谷胱甘肽还原型谷胱甘肽 褪黑素褪黑素-硫辛酸硫辛酸 微量元素铜、锌、硒微量元素铜、锌、硒 葛根、三七提取物、灵芝磷脂是细胞膜的构成成分，具有亲水性和亲脂性重属性，对细胞的物质转运、吸收和代谢有重要作用。有化学性肝损伤危险者、便秘者抗化学性肝损伤功能食品咽部不适者、有化学性肝损伤危险者各种有害因素所致的肝损伤可表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁郁积、肝纤维化、肝硬化及肝癌等。当人体处于病理状态

10、，或在吸烟，过度饮酒和不健康饮食等因素影响下，或在放射线照射、环境污染等因素作用下，均会引起自由基过量产生。功效成分/标志性成分含量1、清除自由基：云南省文山县金达利三七生物科技有限责任公司黄芪、西洋参、淫羊藿、油菜花粉、金银花、沙棘、木瓜、栀子、海狗鞭“主力军一”-中草药、植物及提取物研制而成当自由基产生过多超过了机体的抗氧化防御能力或机体的抗氧化防御系统削弱时，自由基不能被及时清除，就会攻击细胞组织，造成蛋白质、核酸等生物大分子变性，导致细胞和组织器官发生氧化损伤，诱发各种疾病，并加速机体衰老。钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能气球样变的肝细胞占整个视野的1

11、/2评价：四氯化碳肝损伤模型肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原等；(3)主要观察的病变类型有:脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/22 抗氧化体系不足或耗竭 当细胞，组织或机体产生过多氧化物，当细胞，组织或机体产生过多氧化物，在机体抗氧化防御系统与自由基产生失衡在机体抗氧化防御系统与自由基产生失衡时导致氧化应激，最终造成时导致氧化应激，最终造成DNA、蛋白质，、蛋白质，脂类等生物大分子氧化损伤，引起细胞损脂类等生物大分子氧化损伤，引起细胞损伤。伤。（3）磷脂的崩解）磷脂的崩解 磷脂是细胞膜的构成成分，具有亲水磷脂是细胞膜的构成成分，具有亲水性和亲脂

12、性重属性，对细胞的物质转运、性和亲脂性重属性，对细胞的物质转运、吸收和代谢有重要作用。吸收和代谢有重要作用。细胞膜磷脂被自由基攻击而崩解，磷细胞膜磷脂被自由基攻击而崩解，磷脂酶被激活催化细胞膜上的磷脂释放花生脂酶被激活催化细胞膜上的磷脂释放花生四烯酸、前列腺素等介质，加重肝细胞损四烯酸、前列腺素等介质，加重肝细胞损伤伤。（4）肝细胞钙超载）肝细胞钙超载 钙对维持体内细胞正常生理状态，调节钙对维持体内细胞正常生理状态，调节神经肌肉兴奋等有重要作用。钙稳态对维神经肌肉兴奋等有重要作用。钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。持细胞正常功能极为重要。大量钙离子涌入细胞并主要聚集在线粒大量钙离子涌入细胞并主

13、要聚集在线粒体内，会激活钙依赖蛋白酶，诱发黄嘌呤体内，会激活钙依赖蛋白酶，诱发黄嘌呤氧化反应生成更多的氧化反应生成更多的OFR，从而加重肝细，从而加重肝细胞损伤甚至导致肝细胞坏死。胞损伤甚至导致肝细胞坏死。“后果很严重后果很严重”肝损伤是多种严重肝脏疾病的发生、发肝损伤是多种严重肝脏疾病的发生、发展及最终走向肝功能衰竭的始动环节和共展及最终走向肝功能衰竭的始动环节和共同途径。各种有害因素所致的肝损伤可表同途径。各种有害因素所致的肝损伤可表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁郁积、肝纤维现为肝坏死、脂肪肝、胆汁郁积、肝纤维化、肝硬化及肝癌等。化、肝硬化及肝癌等。“主力军一主力军一”-中草药、植物及提取物研制

14、而成中草药、植物及提取物研制而成原料：原料：灵芝、大豆、茶、枸灵芝、大豆、茶、枸杞、当归、黄芪、芦杞、当归、黄芪、芦笋、山楂、香菇、银笋、山楂、香菇、银杏、苦参等杏、苦参等有效成分：有效成分：多糖、黄酮类、萜类多糖、黄酮类、萜类及甙类化合物及甙类化合物如大豆皂甙、银杏黄如大豆皂甙、银杏黄酮类、香菇多糖、黄酮类、香菇多糖、黄芪多糖等芪多糖等 提高免疫能力、抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗衰老等。提高免疫能力、抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗衰老等。活血化瘀、清肝解毒、强肝益肝活血化瘀、清肝解毒、强肝益肝“主力军二主力军二”-某些营养成分及物质某些营养成分及物质 维生素维生素C 硒、维生素硒、维生素E 牛磺酸牛磺

15、酸减轻细胞脂肪性病变减轻细胞脂肪性病变,促进肝细胞再生及促进肝细胞再生及肝糖元的合成肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能增强肝脏的解毒功能自由基清除剂，保护肝细胞膜免受过氧化损伤自由基清除剂，保护肝细胞膜免受过氧化损伤调节肝脏脂肪代谢，稳定细胞膜通透性，调节肝脏脂肪代谢，稳定细胞膜通透性，增加机体抗脂质过氧化能力，清除氧自由基，增加机体抗脂质过氧化能力，清除氧自由基，抑制细胞因子的异常升高，抑制胶原沉积抑制细胞因子的异常升高，抑制胶原沉积“主力军四主力军四”-特殊生物因子特殊生物因子 胎盘因子胎盘因子-解释一下解释一下 多肽（以谷胱甘肽多肽（以谷胱甘肽(GSH)为例）为例）1、清除自由基：、清除自

16、由基：2、抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝、抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝。3、中和解毒的作用：与进入体内的有毒化合物、重金属、中和解毒的作用：与进入体内的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合促其排出体外离子或致癌物质等相结合促其排出体外 国内保健食品现状国内保健食品现状 国家食品药品监督管理总局保健食品库中可查的国产国家食品药品监督管理总局保健食品库中可查的国产保健食品中对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能性食品保健食品中对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能性食品共有共有146种。种。金娜牌青清含片金娜牌青清含片产品名称产品名称 金娜牌青清含片金娜牌青清含片 申请人中文名称申请人中文名称 云南省文山县

17、金达利三七生物科技有限责任公司云南省文山县金达利三七生物科技有限责任公司保健功能保健功能 清咽、对化学性肝损伤有辅助保护作用清咽、对化学性肝损伤有辅助保护作用 功效成分功效成分/标志性成标志性成分含量分含量 每每100g含：总皂甙含：总皂甙 2.0g、总黄酮、总黄酮 0.18g 主要原料主要原料 葛根、三七提取物、灵芝葛根、三七提取物、灵芝 适宜人群适宜人群 咽部不适者、有化学性肝损伤危险者咽部不适者、有化学性肝损伤危险者 不适宜人群不适宜人群 少年儿童少年儿童 注意事项注意事项 本品不能代替药物本品不能代替药物 批准文号批准文号 国食健字国食健字G20050150 同仁堂牌警醒片同仁堂牌警醒

18、片产品名称产品名称同仁堂牌警醒片同仁堂牌警醒片 保健功能保健功能 对化学性肝损伤有辅助保护作用对化学性肝损伤有辅助保护作用 功效成分功效成分/标志性标志性成分含量成分含量每每100g含：牛磺酸含：牛磺酸 20.1g、维生素、维生素C 6.86g、L-肉碱肉碱 4.58g 主要原料主要原料L-谷氨酰胺、牛磺酸、维生素谷氨酰胺、牛磺酸、维生素C、L-肉碱酒石酸盐、肉碱酒石酸盐、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锌、碳酸镁、碳酸镁、维生素维生素B1、葡萄糖、硬脂酸、葡萄糖、硬脂酸镁镁 适宜人群适宜人群有化学性肝损伤危险者有化学性肝损伤危险者 不适宜人群不适宜人群无无 注意事项注意事项本品不能代替药物本品不能代替药

19、物 批准文号批准文号国食健字国食健字G20050325 有化学性肝损伤危险者注：蓝莓提取物，花色苷含量25%；胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的1/4脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/41、清除自由基：肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原等；葡萄籽提取物30mg/kg抗化学性肝损伤功能食品参考文献:蓝莓提取物对急性化学性肝损伤的干预作用2010脂肪变性（肝细胞胞浆内出现界限清晰的脂滴空泡）(1)肝细胞气球样变的病理组织学特征与评分值黄芪、西洋参、淫羊藿、油菜花粉、金银花、沙棘、木瓜、栀子、海狗鞭抗化学性肝损伤功能食品高毒类：砷、汞、锑、苯胺、氯仿、呻化氢

20、等脂肪变性的肝细胞占整个视野05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；每100g含：总皂甙 2.当人体处于病理状态，或在吸烟，过度饮酒和不健康饮食等因素影响下，或在放射线照射、环境污染等因素作用下，均会引起自由基过量产生。抗化学性肝损伤功能食品国食健字G20050215坏死细胞占整个视野的1/4胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的1/4钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。给予四氯化碳 24h 后：对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂灵芝、大豆、茶、枸杞、当归、黄芪、芦笋、山楂、香菇、银杏、苦参等钙对维持体内细胞正常生理状态，调节神经肌肉兴奋等有重要作用。“主力军一”-中草药、植物及提

21、取物研制而成气球样变的肝细胞占整个视野的1/2葛根、三七提取物、灵芝每100g含：总皂甙 2.有化学性肝损伤危险者、中老年人1%四氯化碳给予量（ml/kg）坏死细胞占整个视野的1/2对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；实验开始时与实验结束时分别称量体重，解剖小鼠后立即用生理盐水冲洗肝脏并称量肝脏重量，计算体重增长值及肝脏指数。分组（每组至少10只）肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能气球样变的肝细胞占整个视野的1/2肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原等；肝细胞水样变性抗化学性肝损伤功能食品千

22、元牌千元胶囊千元牌千元胶囊产品名称产品名称千元牌千元胶囊千元牌千元胶囊 保健功能保健功能 对化学性肝损伤有辅助保护作用、延缓衰老对化学性肝损伤有辅助保护作用、延缓衰老功效成分功效成分/标志性标志性成分含量成分含量每每100g含：谷胱甘肽含：谷胱甘肽 8390mg、牛磺酸、牛磺酸 1600mg 主要原料主要原料酵母提取物、牛磺酸、维生素酵母提取物、牛磺酸、维生素E、维生素、维生素B1、维生素、维生素B2、维生素、维生素B6、食用香精、食用香精 适宜人群适宜人群有化学性肝损伤危险者、中老年人有化学性肝损伤危险者、中老年人 不适宜人群不适宜人群少年儿童、孕妇少年儿童、孕妇 注意事项注意事项本品不能代

23、替药物本品不能代替药物 批准文号批准文号国食健字国食健字G20050309普比欧牌金利胶囊普比欧牌金利胶囊产品名称产品名称普比欧牌金利胶囊普比欧牌金利胶囊保健功能保健功能 抗疲劳、对化学性肝损伤有辅助保护作用抗疲劳、对化学性肝损伤有辅助保护作用功效成分功效成分/标志性标志性成分含量成分含量每每100g含：总皂甙含：总皂甙0.4g、总黄酮、总黄酮0.43g主要原料主要原料黄芪、西洋参、淫羊藿、油菜花粉、金银花、沙棘、黄芪、西洋参、淫羊藿、油菜花粉、金银花、沙棘、木瓜、栀子、海狗鞭木瓜、栀子、海狗鞭适宜人群适宜人群易疲劳者、有化学性肝损伤危险者易疲劳者、有化学性肝损伤危险者不适宜人群不适宜人群少年

24、儿童少年儿童 注意事项注意事项本品不能代替药物本品不能代替药物 批准文号批准文号国食健字国食健字G20050287三奇堂牌京茶三奇堂牌京茶 产品名称产品名称三奇堂牌京茶三奇堂牌京茶 保健功能保健功能 对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂 功效成分功效成分/标志性标志性成分含量成分含量每每100g含：总皂甙含：总皂甙 1.1g、粗多糖、粗多糖 620mg、总黄酮、总黄酮 1.46g 主要原料主要原料绞股蓝、山楂、制首乌、橘皮、五味子、蒲公英、泽绞股蓝、山楂、制首乌、橘皮、五味子、蒲公英、泽泻、枸杞子泻、枸杞子 适宜人群适宜人群有化学性肝损伤危险者、血脂偏高

25、者有化学性肝损伤危险者、血脂偏高者 不适宜人群不适宜人群少年儿童、孕妇少年儿童、孕妇 注意事项注意事项本品不能代替药物本品不能代替药物 批准文号批准文号国食健字国食健字G20050215 新动力牌甘保通胶囊新动力牌甘保通胶囊产品名称产品名称新动力牌甘保通胶囊新动力牌甘保通胶囊保健功能保健功能 对化学性肝损伤有辅助保护作用、改善胃肠道功能对化学性肝损伤有辅助保护作用、改善胃肠道功能（润肠通便）（润肠通便）功效成分功效成分/标志性标志性成分含量成分含量每每100g含：葛根素含：葛根素 14.4g、芦荟苷、芦荟苷 0.07g 主要原料主要原料葛根提取物、芦荟提取物葛根提取物、芦荟提取物 适宜人群适宜

26、人群有化学性肝损伤危险者、便秘者有化学性肝损伤危险者、便秘者 不适宜人群不适宜人群少年儿童、孕产妇、哺乳期妇女及慢性腹泻者少年儿童、孕产妇、哺乳期妇女及慢性腹泻者 注意事项注意事项本品不能代替药物；食用本品后如出现明显腹泻者，本品不能代替药物；食用本品后如出现明显腹泻者，请立即停止食用请立即停止食用 批准文号批准文号国食健字国食健字G20050492 评价：四氯化碳肝损伤模型评价：四氯化碳肝损伤模型1.1.原理原理CCl4CCl3P450酶系酶系共共价价结结合合蛋白质蛋白质O2CCl3O2蛋白合成障碍、蛋白合成障碍、脂质分解代谢紊乱，脂质分解代谢紊乱，引起肝细胞内甘油三酯引起肝细胞内甘油三酯(

27、TG)蓄积蓄积脂质过氧化，脂质过氧化，引起细胞膜的变性损伤引起细胞膜的变性损伤,致使酶渗漏以及各种类型的致使酶渗漏以及各种类型的细胞病变，细胞病变，甚至坏死。甚至坏死。2 动物分组与处理动物分组与处理动物动物体重体重分组（每组至少分组（每组至少10只）只）1-30天给予物天给予物第第31天天1%四氯化碳给予量四氯化碳给予量（ml/kg）清洁剂清洁剂雌性小雌性小鼠鼠20-25g正常对照组正常对照组蒸馏水蒸馏水隔夜隔夜禁食禁食16h0（植物油）（植物油）肝损伤模型组肝损伤模型组蒸馏水蒸馏水5阳性对照组阳性对照组葡萄籽提取物葡萄籽提取物30mg/kg5蓝莓提取物低剂量蓝莓提取物低剂量组组蓝莓提取物蓝

28、莓提取物30mg/kg5蓝莓提取物高剂量蓝莓提取物高剂量组组蓝莓提取物蓝莓提取物60mg/kg5注：蓝莓提取物，花色苷含量注：蓝莓提取物，花色苷含量25%；葡萄籽提取物，原花青素含量；葡萄籽提取物，原花青素含量95%给予四氯化碳给予四氯化碳 24h 后：后：取肝脏，称重后，计算肝脏指数取肝脏，称重后，计算肝脏指数 经眼球取血分离血清，测定血清经眼球取血分离血清，测定血清 ALT、AST 取肝左叶，置取肝左叶，置 10%福尔马林中固定，待进行福尔马林中固定，待进行肝脏病理组织学检查及病变评分肝脏病理组织学检查及病变评分3 指标测定指标测定3.1 肝脏指数肝脏指数 实验开始时与实验结束时分别称量体

29、重，实验开始时与实验结束时分别称量体重，解剖小鼠后立即用生理盐水冲洗肝脏并称解剖小鼠后立即用生理盐水冲洗肝脏并称量肝脏重量，计算体重增长值及肝脏指数。量肝脏重量，计算体重增长值及肝脏指数。3.2 血清血清 ALT、AST 分别采用丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨分别采用丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒（改良赖氏法）测定酸氨基转移酶试剂盒（改良赖氏法）测定血清中的血清中的ALT 与与AST 3.3 病理组织学检查病理组织学检查(1)(1)制片制片 从肝左叶中部做横切面取材，常规病理制片从肝左叶中部做横切面取材，常规病理制片（石蜡包埋，（石蜡包埋，H.EH.E染色）。染色）。(2)(2)镜检

30、镜检 从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化，从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化，用用4040倍物镜连续观察整个组织切片。倍物镜连续观察整个组织切片。分别观察每个分别观察每个视野中各种病变所占视野的面积并累计所观察视野视野中各种病变所占视野的面积并累计所观察视野的病变总分。的病变总分。(3)主要观察的病变类型有主要观察的病变类型有:肝细胞气球样变（细胞肿大，胞浆残留少许）肝细胞气球样变（细胞肿大，胞浆残留少许）脂肪变性（肝细胞胞浆内出现界限清晰的脂滴脂肪变性（肝细胞胞浆内出现界限清晰的脂滴空泡）空泡）胞浆凝聚（胞浆嗜伊红增强）胞浆凝聚（胞浆嗜伊红增强）肝细胞水样变性肝细胞水样变性 肝细胞坏

31、死（胞浆嗜伊红改变，凝固性坏死）肝细胞坏死（胞浆嗜伊红改变，凝固性坏死）增加正常细胞与肝损伤细胞图片并说明增加正常细胞与肝损伤细胞图片并说明3.4 组织病理学评分组织病理学评分(1)肝细胞气球样变的病理组织学特征与评分值肝细胞气球样变的病理组织学特征与评分值病理组织学特征病理组织学特征评分值评分值大致正常大致正常0分分气球样变的肝细胞占整个视野的气球样变的肝细胞占整个视野的1/41分分气球样变的肝细胞占整个视野的气球样变的肝细胞占整个视野的1/22分分气球样变的肝细胞占整个视野的气球样变的肝细胞占整个视野的3/43分分气球样变的肝细胞占整个视野气球样变的肝细胞占整个视野4分分(2)肝细胞脂肪变

32、性的病理组织学特征与评分值肝细胞脂肪变性的病理组织学特征与评分值病理组织学特征病理组织学特征评分值评分值大致正常大致正常0分分脂肪变性的肝细胞占整个视野的脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/41分分脂肪变性的肝细胞占整个视野的脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/22分分脂肪变性的肝细胞占整个视野的脂肪变性的肝细胞占整个视野的3/43分分脂肪变性的肝细胞占整个视野脂肪变性的肝细胞占整个视野4分分(3)肝细胞胞浆凝聚的病理组织学特征与评分值肝细胞胞浆凝聚的病理组织学特征与评分值病理组织学特征病理组织学特征评分值评分值大致正常大致正常0分分胞浆凝聚胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的1/41分分

33、胞浆凝聚胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的1/22分分胞浆凝聚胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的3/43分分胞浆凝聚胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的肝细胞占整个视野4分分(4)肝细胞水样变性的病理组织学特征与评分值肝细胞水样变性的病理组织学特征与评分值病理组织学特征病理组织学特征评分值评分值大致正常大致正常0分分水样变性水样变性的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的1/41分分水样变性水样变性的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的1/22分分水样变性水样变性的肝细胞占整个视野的的肝细胞占整个视野的3/43分分水样变性水样变性的肝细胞占整个视野的肝细胞占整个视野4分分

34、对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂有化学性肝损伤危险者清咽、对化学性肝损伤有辅助保护作用05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；葡萄籽提取物，原花青素含量95%多糖、黄酮类、萜类及甙类化合物脂肪变性的肝细胞占整个视野的3/405,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；肝脏中的胆汁酸能促进脂类的消化与吸收方差齐，计算F值，若FF0.国食健字G20050309对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂云南省文山县金达利三七生物科技有限责任公司注：蓝莓提取物，花色苷含量25%；每100g含：总皂甙0.肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能(1)肝细胞气球样变的病理组织学

35、特征与评分值对化学性肝损伤有辅助保护作用胞浆凝聚（胞浆嗜伊红增强）有化学性肝损伤危险者、中老年人每100g含：总皂甙 2.引起细胞膜的变性损伤,(5)肝细胞坏死病理组织学特征与评分值肝细胞坏死病理组织学特征与评分值病理组织学特征病理组织学特征评分值评分值大致正常大致正常0分分坏死细胞坏死细胞占整个视野的占整个视野的1/41分分坏死细胞坏死细胞占整个视野的占整个视野的1/22分分坏死细胞坏死细胞占整个视野的占整个视野的3/43分分坏死肝细胞坏死肝细胞弥漫整个视野弥漫整个视野4分分4 数据分析数据分析采用方差分析，采用方差分析，按方差分析的程序先进行方差齐性检验。按方差分析的程序先进行方差齐性检验

36、。方差齐方差齐，计算，计算F值，若值，若FF0.05，P0.05,用多个实验组和一个对照组用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计验进行统计 正常生理情况下，自由基在机体内能够持续不断的产生，并具有调节细胞间的信号传递、细胞生长、抑制病毒和细菌等生物学作用。

37、抗化学性肝损伤功能食品“主力军一”-中草药、植物及提取物研制而成对化学性肝损伤有辅助保护作用、延缓衰老引起肝细胞内甘油三酯(TG)L-谷氨酰胺、牛磺酸、维生素C、L-肉碱酒石酸盐、葡萄糖酸锌、碳酸镁、维生素B1、葡萄糖、硬脂酸镁灵芝、大豆、茶、枸杞、当归、黄芪、芦笋、山楂、香菇、银杏、苦参等钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。脂肪变性的肝细胞占整个视野(3)主要观察的病变类型有:肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。2 抗氧化体系不足或耗竭气球样变的肝细胞占整个视野的1/2在胚胎期，肝脏还能生成红细胞，具有造血功能分别观察每个视野中各种病变所占视野的面积并累计所观察视

38、野的病变总分。胞浆凝聚（胞浆嗜伊红增强）正常生理情况下，自由基在机体内能够持续不断的产生，并具有调节细胞间的信号传递、细胞生长、抑制病毒和细菌等生物学作用。清咽、对化学性肝损伤有辅助保护作用脂肪变性（肝细胞胞浆内出现界限清晰的脂滴空泡）当自由基产生过多超过了机体的抗氧化防御能力或机体的抗氧化防御系统削弱时，自由基不能被及时清除，就会攻击细胞组织，造成蛋白质、核酸等生物大分子变性，导致细胞和组织器官发生氧化损伤，诱发各种疾病，并加速机体衰老。5 结果判定结果判定(1)血清血清 ALT、AST结果结果 受试样品组的受试样品组的ALTALT、ASTAST与模型对照组比较，差异有显著与模型对照组比较，

39、差异有显著性，可分别判定性，可分别判定ALTALT、ASTAST结果阳性结果阳性。(2)组织病理分析结果组织病理分析结果 a a 受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间，气球样变、受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间，气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性或肝细胞坏死等肝细胞病脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性或肝细胞坏死等肝细胞病变中，肝细胞坏死程度减轻，差异有显著性，而其它病变变中，肝细胞坏死程度减轻，差异有显著性，而其它病变类型与模型对照组比较明显减轻或无明显差异，可判断动类型与模型对照组比较明显减轻或无明显差异，可判断动物实验病理结果阳性。物实验病理结果阳性。最好能补充实例和图片最好能补充实例和图片