项目3黄色短杆菌培养基的制备灭菌和优化课件.ppt

1、制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术-课件课件项目项目1项目项目2项目项目3项目项目4项目项目5制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术1-2黄色短杆菌培养基的制备、灭菌和优化黄色短杆菌培养基的制备、灭菌和优化 黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌最佳黄色短杆菌培养基的确定最佳黄色短杆菌培养基的确定 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术告知：告知：制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 1.1.学会一般培养基的制备原理、方法。学会一般培养基的制备原理、方法。2.2.掌握培养基及器皿的灭菌方法。掌握培养基及器皿的灭菌方法。引入引入（任务项目）制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术操练

2、操练 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 不同微生物对营养物质的要求各不相同。因此，配制培养基不同微生物对营养物质的要求各不相同。因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培要根据微生物的营养特点。一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用马铃薯培养基养基，培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养基(或麦芽糖、蛋白胨培养基或麦芽糖、蛋白胨培养基)。制药微

3、生物发酵技术制药微生物发酵技术训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应碱度，渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应将培养基调节到一定的将培养基调节到一定的pHpH范围，如细菌培养基中性偏碱，范围，如细菌培养基中性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌培养基偏酸。放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌培养基偏酸。训练项目训

4、练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液体三种形式，固体培养基的成分与液体培养基相同，仅在液体三种形式，固体培养基的成分与液体培养基相同，仅在液体培养基中加入凝固剂作支持物，通常加入体培养基中加入凝固剂作支持物，通常加入1.51.52.02.0的琼的琼脂，半固体培养基加入脂，半固体培养基加入0.30.30.50.5琼脂作支持物，有时也可琼脂作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固剂。用明胶或硅胶作为凝固剂。黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生

5、物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 一、材料和用具一、材料和用具训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 二二 、方法、方法训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目

6、训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌(6)灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基0.1MPa，20-30min，含糖培养基为，含糖培养基为0.05MPa，30min。三、内容三、内容训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基

7、的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 3.3.高氏高氏1 1号号(W/V)(W/V)(培养放线菌用培养放线菌用)可溶性淀粉可溶性淀粉 2.0g FeSO4 0.001g2.0g FeSO4 0.001g K2HP04 0.05g K2HP04 0.05g 琼脂琼脂 2.0g2.0g MgS04 MgS047H20 0.05g 7H20 0.05g 蒸馏水蒸馏水 100mL100mL KNO3 0.1g pH 7.6-7.8 KNO3 0.1g pH 7.6-7.8 NaClNaCl 0.05g 0.05g

8、 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌（二）培养基制作注意事项（二）培养基制作注意事项制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1 4.4.分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上端沾染，以免引起杂菌污染。端沾染，以免引起杂菌污染。5.5.培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的规培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的规定进行，以保证杀菌效果和不损失培养基的必要成分定进行，以保证杀菌效果和不损失

9、培养基的必要成分，培养基灭菌后，必须放在，培养基灭菌后，必须放在37C37C温箱培育温箱培育24h24h无菌生无菌生长方可使用。长方可使用。制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1（三）棉塞制作（三）棉塞制作 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌训练项目训练项目1 1制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术（四）灭菌四）灭菌 训练项目训练项目1 1黄色短杆菌

10、培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌 将灭菌锅盖的排气管插入套筒侧壁的凹槽内，关闭灭菌锅将灭菌锅盖的排气管插入套筒侧壁的凹槽内，关闭灭菌锅盖旋紧螺栓，切勿漏气。盖旋紧螺栓，切勿漏气。打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，排打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，排气约气约5 510min10min，关闭放气阀。，关闭放气阀。训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术训练项目训练项目

11、1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术（五）实验步骤（五）实验步骤 训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 四、报告四、报告训练项目训练项目1 1黄色短杆菌培养基的制备与灭菌黄色短杆菌培养基的制备与灭菌制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术因素水因素水平平 葡萄糖葡萄糖(A)(A)蛋白蛋白胨胨(B)(B)牛肉膏牛肉膏(C)(C)NaClNaCl（D D）(1)(1)1.0 1.0 0.0 0

12、.0 0.5 0.5 0.5 0.5(2)(2)2.0 2.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0(3)(3)3.0 3.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术编编号号葡萄葡萄糖糖(A)蛋白蛋白胨胨(B)牛肉牛肉膏膏(C)NaCl(D)生物量（生物量（OD）0h12h24h36h48h60h1(1)(1)(1)(1)2(1)(2)(2)(2)3(1)(3)(3)(3)4(2)(1)(2)(3)5(2)(2)(3)(1)6(2)(3)(1)(2)7(3)(1)(3)(2)8(3)(2)(1)(3)9(3)(3)(2)(1)制药微生物发

13、酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术最佳黄色短杆菌培养基的确定最佳黄色短杆菌培养基的确定 训练项目训练项目2 2制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 掌握微生物斜面培养基、种子培养基及掌握微生物斜面培养基、种子培养基及发酵培养基的确定方法。发酵培养基的确定方法。了解对已确定菌种的发酵条件进行优化了解对已确定菌种的发酵条件进行优化的方法。的方法。归纳总结归纳总结制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术 应知应会应知应会 制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术培养基（培养基（medium）优化（）优化（optizium）问题与讨论问题与讨论制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术作业作业:制药微生物发酵技术制药微生物发酵技术优化配方的报告优化配方的报告 谢谢！谢谢各位专家！谢谢各位专家！恳请指导恳请指导谢谢！谢谢！