骨髓细胞形态学检测教学课件.pptx

1、骨髓检查的临床应用骨髓检查的临床应用n造血系统疾病造血系统疾病q骨髓细胞学检查是诊断造血系统疾病的最有骨髓细胞学检查是诊断造血系统疾病的最有价值的检查方法价值的检查方法n造血系统疾病诊断造血系统疾病诊断n造血系统疾病疗效分析和预后估计造血系统疾病疗效分析和预后估计肯定性诊断：肯定性诊断：骨髓中具有骨髓中具有特异性病理细胞特异性病理细胞如白血病如白血病细胞、骨髓瘤细胞、异形组织细胞、癌细胞等细胞、骨髓瘤细胞、异形组织细胞、癌细胞等符合性诊断：符合性诊断：骨髓象表现骨髓象表现异常变化异常变化，结合临床病史可符，结合临床病史可符合诊断如缺铁性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫合诊断如缺铁性贫血、溶血性贫

2、血、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏、免疫性血小板减少性紫癜、脾功能亢血、粒细胞缺乏、免疫性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、类白血病反应等进、类白血病反应等提示性诊断：提示性诊断：骨髓象可骨髓象可提供进一步诊断线索提供进一步诊断线索如溶血如溶血性贫血需结合病史作溶血检查才能明确诊断性贫血需结合病史作溶血检查才能明确诊断除外性诊断：除外性诊断：骨髓象的检查能排除临床上被怀疑的疾病骨髓象的检查能排除临床上被怀疑的疾病如全白细胞减少，疑患急性白血病而骨髓检查无相如全白细胞减少，疑患急性白血病而骨髓检查无相应改变时，可作出排除性诊断应改变时，可作出排除性诊断 临床应用临床应用n诊断非造血系统疾病诊断非造血系统

3、疾病q某些原虫感染，如疟疾和某些原虫感染，如疟疾和黑热病黑热病q某些代谢性疾病如高雪病某些代谢性疾病如高雪病q协助诊断感染性疾病协助诊断感染性疾病如如伤寒、败血症等伤寒、败血症等q某些转移性癌肿等某些转移性癌肿等在骨髓涂片中能查到相在骨髓涂片中能查到相应的病原体或特殊细胞应的病原体或特殊细胞增生程度增生程度 有核细胞有核细胞/成熟红成熟红 常见疾病常见疾病极度活跃 1:1（1:0.52.0）白血病明显活跃 1:10（1:512）白血病、增生性贫血增生活跃 1:20（1:1632）正常骨髓或某些贫血 增生减低 1:50（1:3570）再障、粒缺或 粒细胞减少症增生极度减低 1:200（1:300

4、）再障骨髓增生程度骨髓增生程度55级级主要内容n血细胞发育过程形态变化血细胞发育过程形态变化n血细胞正常形态学特征血细胞正常形态学特征n血细胞的细胞化学染色血细胞的细胞化学染色n常见血液病血液学特征常见血液病血液学特征一、血细胞生成、发育规律及形态特点一、血细胞生成、发育规律及形态特点原始原始、幼稚、幼稚、成熟、成熟 n胞体：大胞体：大 小（巨核细胞：小小（巨核细胞：小 大大,且不规则且不规则）n胞核：胞核：q大大 小：大小：大 小（红细胞核消失，巨核细胞：小小（红细胞核消失，巨核细胞：小 大）大）q形形 状：圆状：圆 凹陷凹陷 分叶（粒细胞）分叶（粒细胞）q染色质：细染色质：细致稀致稀疏疏

5、粗粗糙致糙致密密，浅，浅 深深q核核 仁：多仁：多 少少 无无 ，核膜由不明显转为明显，核膜由不明显转为明显n胞质：胞质：q数量：少数量：少 多多 ,仅淋巴细胞变化不大仅淋巴细胞变化不大q染色：嗜碱、深染染色：嗜碱、深染 嗜碱、淡染嗜碱、淡染 嗜酸、淡染（单核细胞和淋巴嗜酸、淡染（单核细胞和淋巴细胞仍嗜碱）细胞仍嗜碱）q特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无 少少 多多NSE主要存在于单核细胞中，从原单核细胞到成熟单核细胞逐渐增强，粒细胞一般呈阴性或弱阳性，淋巴细胞一般为阴性。酸性磷酸酶染色（ACP）10%，呈圆形，大小接近成熟红细胞，712m【结果】NAP主

6、要存在于成熟粒细胞胞浆中，其他血细胞均为阴性反应。阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别:前者NAP活性减低，后者增高。结合组化染色，免疫分型考虑核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状对有些细胞既有上一阶段特点，又有下一阶段特点-宜划分为下一阶段原始淋巴细胞：正常不见或很少见核变小，约占整个细胞的 1/2，呈卵圆形或有凹陷，偏于一旁颗粒型巨核：为过渡型巨核细胞，占 1027%，浆中无血小板形成核:占细胞1/2，可有核仁，核的一侧可有淡染区，核染色质较浓集增生减低 1:50（1:3570）再障、粒缺或 粒细胞减少症正常骨髓中约占 0-5【原理】POX可分解底物中H2O2,释放氧使无色的联

7、苯胺转化为蓝色，与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒沉着于细胞质中或巨核细胞脆弱，在涂片过程中受到损伤，使核排出；有核红细胞呈阴性反应；某些代谢性疾病如高雪病其他血液病：淋巴瘤、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴细胞性白血病等NAP活性中度增高，恶组时活性降低。胞浆量多，有多量特异性颗粒细胞发育规律n细胞体积与外形q大小：n通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。n巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。q外形：n红细胞系始终呈圆形；n粒细胞及淋巴细胞系则保持圆形或椭圆形；n单核细胞系由圆形或椭圆形变为不规则形；n巨核细胞系由圆形变为明显不规则形。细胞发育规律n细胞质q量：一般由少到多。淋巴细胞变化不大。q染色：

8、红、粒及巨核细胞系细胞浆着色多由深蓝色或浅蓝色而变为浅红色，红细胞最终变为桔红色。q颗粒：从无到有，由非特异性颗粒到特异性颗粒。如原始粒一般无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒。红细胞系胞浆中不含颗粒。细胞发育规律n细胞核q大小：由大变小，巨核细胞则相反。q细胞核核形：n幼红细胞胞核始终呈圆形，最后脱核而消失。n各系白细胞原始阶段胞核均呈圆形或椭圆形，随着细胞成熟，核的一侧逐渐凹陷，最后形成分叶状；n单核细胞则由圆形变为不规则形；n淋巴细胞及浆细胞系核形保持不变。n巨核细胞胞核逐渐增大并分叶，分叶不规则堆叠成为一巨大的核。细胞发育规

9、律n细胞核q染色质：n由细致疏松逐渐变为粗糙密集，最后紧缩成块，着色由浅变深，随DNA含量增加而逐渐变为深紫色。q核位置：n红细胞系胞核位置居中，核四周均有胞浆。n粒细胞、单核细胞及浆细胞的核常偏位。n淋巴细胞胞核常一侧着边。细胞发育规律n细胞核q核膜：由不明显到明显q核仁：由清晰到模糊不清最后消失n原始阶段均有核仁n早幼阶段核仁模糊不清或消失n中幼阶段多无核仁二、血细胞正常形态学特征二、血细胞正常形态学特征红细胞系统n原始红细胞：原始红细胞：q01.5%,1522 mq圆形或有圆形或有伪足突出伪足突出q核浆比例大核浆比例大q核仁核仁15个，边界不清个，边界不清q核膜清楚，核膜清楚，核周淡染区

10、核周淡染区q浆呈浆呈深蓝深蓝，不含颗粒不含颗粒n早幼红细胞：早幼红细胞：q02%，体积变小，体积变小，1120 mq核染色质开始聚集核染色质开始聚集粗颗粒状粗颗粒状q核仁模糊或消失核仁模糊或消失q胞浆更蓝胞浆更蓝n中幼红细胞：中幼红细胞：q210，体积显著变小，体积显著变小，818 mq胞核变小，染色质排列紧密，浓集成块，胞核变小，染色质排列紧密，浓集成块，车轮状排列，或如车轮状排列，或如砸碎之墨砸碎之墨(明显空隙明显空隙)q核仁已完全消失核仁已完全消失q胞浆明显增多，胞浆明显增多，胞浆胞浆嗜多色嗜多色-灰蓝色，灰蓝色，蓝色或灰红色蓝色或灰红色(血红蛋白血红蛋白)qn晚幼红细胞：晚幼红细胞：q

11、10%，呈圆形，大小接近成熟红细胞，呈圆形，大小接近成熟红细胞，712 mq胞核更小，胞核更小，染色质固缩呈炭团状染色质固缩呈炭团状q胞浆量更多，胞浆量更多，淡红与淡红与成熟成熟RBC相近相近粒细胞系统n原始粒细胞：原始粒细胞：0.50.52%2%，11111818 m m，圆形，圆形q浆浆淡蓝色，淡蓝色，浆内浆内无颗粒或少量嗜天青颗粒无颗粒或少量嗜天青颗粒q核圆，染色质细致如核圆，染色质细致如薄沙薄沙q核仁核仁3 35 5个，个，清晰可见清晰可见n早幼粒细胞：早幼粒细胞：0.50.54%4%q胞体较大胞体较大q染色质粗糙稍有浓集，核仁仍存在或开始消染色质粗糙稍有浓集，核仁仍存在或开始消失失（

12、少，不清）（少，不清）q胞浆较原粒细胞为多，蓝色稍浅，浆内充满胞浆较原粒细胞为多，蓝色稍浅，浆内充满嗜天青颗粒紫红，大小不一，形态不一，嗜天青颗粒紫红，大小不一，形态不一，分布不均匀，可盖在核上或在核周围分布不均匀，可盖在核上或在核周围n中幼粒：圆形中幼粒：圆形q核变小，约占整个细胞的核变小，约占整个细胞的 1/2 1/2，呈卵，呈卵圆形或有凹陷，偏于一旁圆形或有凹陷，偏于一旁q染色质开始染色质开始密集密集q核仁消失核仁消失 q胞浆内出现胞浆内出现特异颗粒特异颗粒（中性（中性2 212%12%，嗜，嗜酸酸0-1%0-1%，嗜碱，嗜碱偶见偶见）n晚幼粒细胞：晚幼粒细胞：3 313 13，圆形，圆

13、形q胞核胞核凹陷凹陷呈肾形或马蹄形，呈肾形或马蹄形，但凹陷不超但凹陷不超胞核假想横径的一半胞核假想横径的一半q染色质染色质明显密集明显密集，呈粗条状呈粗条状q胞浆量多，有多量特异性颗粒胞浆量多，有多量特异性颗粒n杆状核杆状核q核的凹陷超过假想横径的核的凹陷超过假想横径的1/2q染色质密集成块状染色质密集成块状n分叶核分叶核细胞核分成细胞核分成35叶，核叶之间叶，核叶之间分界清楚，有核丝相连分界清楚，有核丝相连单核细胞系统单核细胞系统n原始单核细胞：正常原始单核细胞：正常骨髓很少见骨髓很少见，有原始细胞特点，有原始细胞特点q核圆，有扭曲折叠核圆，有扭曲折叠q核仁核仁13个，不清楚个，不清楚q染色

14、质疏松，均匀染色质疏松，均匀网状结构网状结构q胞浆灰蓝胞浆灰蓝n幼单核细胞：正常骨髓中很少见幼单核细胞：正常骨髓中很少见q核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状q染色质疏松较原单为粗，但仍呈网状染色质疏松较原单为粗，但仍呈网状q核仁可有可无核仁可有可无q胞浆增多，灰蓝色，可见多数胞浆增多，灰蓝色，可见多数细小的嗜天青颗粒细小的嗜天青颗粒淋巴细胞系统淋巴细胞系统n原始淋巴细胞：正常原始淋巴细胞：正常不见或很少见不见或很少见 q胞体大，直径胞体大，直径10-18um10-18um，（，（ALALL L则不一定）则不一定）q胞浆亮蓝胞浆亮蓝(原粒：天蓝原粒：

15、天蓝 单单:灰蓝灰蓝)，一般无颗粒，一般无颗粒q核大、核浆比例大核大、核浆比例大q染色质如细沙状染色质如细沙状q核仁核仁1 12 2个个、较原粒清楚较原粒清楚n幼淋巴细胞：幼淋巴细胞：0.5%0.5%，圆形或椭圆形，与原淋大小相仿，圆形或椭圆形，与原淋大小相仿或稍小或稍小q胞核圆形，染色质较为紧密，核仁模糊或不见胞核圆形，染色质较为紧密，核仁模糊或不见q胞浆稍增多呈淡蓝色，无或有少量嗜天青颗粒胞浆稍增多呈淡蓝色，无或有少量嗜天青颗粒特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无少多巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。呈强阳性反应，阳性物质呈均匀弥漫或细颗胞浆量多，有多量特异性颗粒阴性反应：急性淋巴细胞性

16、白血病。根据其周围细胞（幼稚细胞)胞质丰富，呈不透明深蓝色或蓝紫色通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。如原始粒一般无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒。原始淋巴细胞：正常不见或很少见胞体：大小（巨核细胞：小大,且不规则）巨幼红细胞：胞体及胞核均增大，核染色质纤细、疏松，着色浅淡，胞浆量丰富极度活跃 1:1（1:0.极度活跃 1:1（1:0.红系明显增生，以早及中幼红为主明显活跃 1:10（1:512）白血病、增生性贫血巨核细胞：为正常骨髓中最大的细胞，胞核呈不规则或分叶状，染色质粗糙，排列很紧密，胞浆多呈均匀的淡紫红或淡红色，内含极

17、细的紫红色颗粒中性粒碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中成分水解，产生黑色物质核仁 15 个，边界不清【临床意义】同POX染色反应。细胞化学染色：以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，进行血细胞涂片以及染色，显微镜下观察细胞内化学组成以及变化淋巴细胞系统淋巴细胞系统n淋巴细胞：淋巴细胞：q大淋巴细胞：直径大淋巴细胞：直径13-18um13-18umn胞核圆形或椭圆胞核圆形或椭圆n染色质较为紧密呈块，排列均匀染色质较为紧密呈块，排列均匀n胞浆稍增多呈天兰色，可有少量大而稀疏的嗜天青胞浆稍增多呈天兰色，可有少量大而稀疏的嗜天青颗粒颗粒q小淋巴细胞：直径小淋巴细胞：直径6-10um6-10umn染色质粗

18、糙、致密呈大块染色质粗糙、致密呈大块n胞浆量少，胞浆量少，有较多的嗜天青颗粒有较多的嗜天青颗粒巨核细胞系统巨核细胞系统n原巨核细胞：正常骨髓中原巨核细胞：正常骨髓中很少见很少见q原始细胞中最大，原始细胞中最大，多为不规则形，很少呈卵圆形多为不规则形，很少呈卵圆形q胞核大，圆形或椭圆形或不规则，核偏位胞核大，圆形或椭圆形或不规则，核偏位q核仁核仁2 23 3个，不明显个，不明显q染色质较粗，染色质较粗，呈呈网状排列网状排列土豆皮样土豆皮样 q胞浆不整齐胞浆不整齐,边缘边缘有空泡有空泡及及伪足样突出伪足样突出，浆量少，不透明，浆量少，不透明深蓝色，不含颗粒深蓝色，不含颗粒巨核细胞系统巨核细胞系统n

19、幼巨核细胞：幼巨核细胞：q正常骨髓中约占正常骨髓中约占 0-5 0-5 q胞体比原巨稍大，外形不规则，有伪足样突出胞体比原巨稍大，外形不规则，有伪足样突出q胞浆增多，可有伪足，呈（灰）兰色，核旁区较淡，可胞浆增多，可有伪足，呈（灰）兰色，核旁区较淡，可出现嗜天青颗粒出现嗜天青颗粒q核为肾形或不规则形核染色增粗，浓集核为肾形或不规则形核染色增粗，浓集q核仁可有可无核仁可有可无巨核细胞系统巨核细胞系统n巨核细胞：为正常骨髓中最大的细胞，胞核呈巨核细胞：为正常骨髓中最大的细胞，胞核呈不规则或分叶状，染色质粗糙，排列很紧密，不规则或分叶状，染色质粗糙，排列很紧密，胞浆多呈均匀的淡紫红或淡红色，内含极细

20、的胞浆多呈均匀的淡紫红或淡红色，内含极细的紫红色颗粒紫红色颗粒q颗粒型巨核：为过渡型巨核细胞颗粒型巨核：为过渡型巨核细胞，占，占1027%，浆中无血小板形成浆中无血小板形成n胞体更大胞体更大n胞浆弥漫紫红色胞浆弥漫紫红色n核分叶核分叶q产板型巨核：成熟型，产板型巨核：成熟型，胞浆中出现血小板胞浆中出现血小板，约占约占4460q裸核型：巨核细胞胞浆完全血小板化后，细裸核型：巨核细胞胞浆完全血小板化后，细胞退化；或巨核细胞脆弱，在涂片过程中受胞退化；或巨核细胞脆弱，在涂片过程中受到损伤，使核排出；占到损伤，使核排出；占830%浆细胞系统浆细胞系统n原浆细胞原浆细胞q胞体大，呈圆形胞体大，呈圆形q核

21、大，占细胞核大，占细胞2/3以上，染色质均匀分布呈颗粒状以上，染色质均匀分布呈颗粒状q核仁明显核仁明显q浆灰蓝浆灰蓝n幼浆细胞幼浆细胞q核核:占细胞占细胞1/2，可有核仁，核的一侧可有淡染区，可有核仁，核的一侧可有淡染区，核染色核染色质较浓集质较浓集q浆浆:较原浆为多，淡染区扩大较原浆为多，淡染区扩大n浆细胞浆细胞q胞体胞体:大小不一大小不一,形不规则形不规则,圆或椭圆圆或椭圆q染色质结块较大染色质结块较大,呈车轮状呈车轮状q胞质丰富，呈不透明深蓝色或蓝紫色胞质丰富，呈不透明深蓝色或蓝紫色分析单个血细胞注意点分析单个血细胞注意点n全面的观点：即识别每一个细胞时应根据每个细胞的大全面的观点：即识

22、别每一个细胞时应根据每个细胞的大小、核浆比例、胞核、胞浆特点进行全面分析，不能单小、核浆比例、胞核、胞浆特点进行全面分析，不能单凭一点下结论凭一点下结论n细胞发育是一个连续过程，人为划分为不同阶段。对有细胞发育是一个连续过程，人为划分为不同阶段。对有些细胞既有上一阶段特点，又有下一阶段特点些细胞既有上一阶段特点，又有下一阶段特点-宜划分为宜划分为下一阶段下一阶段n病理情况下核浆发育不平衡，核发育落后于浆同时病理情况下核浆发育不平衡，核发育落后于浆同时有上下两阶段特点有上下两阶段特点-辨认以辨认以核形态核形态为主为主n分类不明细胞需描述形态特点，不要随便弃之分类不明细胞需描述形态特点，不要随便弃

23、之n各种原始细胞难以鉴别不能完全根据形态来定各种原始细胞难以鉴别不能完全根据形态来定n根据其周围细胞（幼稚细胞根据其周围细胞（幼稚细胞)n结合组化染色，免疫分型考虑结合组化染色，免疫分型考虑n鉴别细胞需在同一片与其他细胞比较染色深浅，酸鉴别细胞需在同一片与其他细胞比较染色深浅，酸碱差异碱差异三、血细胞的细胞化学染色三、血细胞的细胞化学染色n细胞化学染色：以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，进行血细胞涂片以及染色，显微镜下观察细胞内化学组成以及变化n可鉴别血细胞形态n有助于临床疾病的诊断，指导治疗特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无少多原始淋巴细胞：正常不见或很少见增生减低 1:50（1:35

24、70）再障、粒缺或 粒细胞减少症【结果】NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，其他血细胞均为阴性反应。染色：红、粒及巨核细胞系细胞浆着色多由深蓝色或浅蓝色而变为浅红色，红细胞最终变为桔红色。胞核凹陷呈肾形或马蹄形，但凹陷不超胞核假想横径的一半核仁 15 个，边界不清成熟粒细胞有核分叶过多现象巨粒细胞可较早出现细胞化学染色：以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，进行血细胞涂片以及染色，显微镜下观察细胞内化学组成以及变化幼单核细胞：正常骨髓中很少见核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状骨髓增生明显活跃，G/E 倒置核仁35个，清晰可见幼单核细胞：正常骨髓中很少见急性粒-单核细胞性白血病时，白血病细胞

25、部分阳性，部分阴性巨幼细胞性贫血骨髓象特点阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。SAA:骨髓造血岛呈空网状，仅见成纤维细胞、淋巴细胞和大量网状纤维未见造血细胞通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。四、常见血液病骨髓象特点血细胞的细胞化学染色血细胞的细胞化学染色过氧化物酶（过氧化物酶（peroxidaseperoxidase，POX)POX)苏丹黑染色（苏丹黑染色（Sudan black B stainSudan black B stain，SBSB）中性粒细胞碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶(Neutrophli alkaline(Neutrophli alkaline phosphatasephosp

26、hatase，NAP)NAP)非特异性酯酶染色（非特异性酯酶染色（NSENSE）+NaF+NaF抑制试验抑制试验糖原染色糖原染色(periodic acid(periodic acid SchiffSchiffs reactions reaction，AS)AS)铁染色铁染色酸性磷酸酶染色（酸性磷酸酶染色（acid phosphataseacid phosphatase，ACPACP）特异性酯酶染色（特异性酯酶染色（specific esterasespecific esterase，SESE）POXPOX【原理原理】POX POX可分解底物中可分解底物中H H2 2O O2 2,释放氧使无色

27、的联苯胺转化为蓝色，释放氧使无色的联苯胺转化为蓝色，与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒沉着于细胞质中与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒沉着于细胞质中【结果结果】强阳性：胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集强阳性：胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集 弱阳性：胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏弱阳性：胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏 阴阴 性性:胞质中无蓝黑色颗粒者胞质中无蓝黑色颗粒者【正常参考值正常参考值】POX主要存在于主要存在于粒细胞系统，原粒细胞为阴性粒细胞系统，原粒细胞为阴性,随随细胞的成熟细胞的成熟-反应增强，但嗜碱性粒细胞为阴性。反应增强，但嗜碱性粒细胞为阴性。【临床意义临床意义】阳性反应：急性粒细胞性白血病细胞呈

28、强阳性，急性单核细阳性反应：急性粒细胞性白血病细胞呈强阳性，急性单核细胞白血病细胞弱阳性或阴性。胞白血病细胞弱阳性或阴性。阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。骨髓片POX染色骨髓片POX染色APL：呈强阳性反应AML-M4：部分呈阳性反应，部分成弱阳性反应AML-M5：呈弱阳性ALL：呈阴性，3%苏丹黑染色苏丹黑染色SBSB【原理原理】SB作为一种脂溶性染料溶于细胞内含脂质物质中，使其呈棕黑色或深黑色。【结果和正常参考值结果和正常参考值】与POX染色大致相同。【临床意义临床意义】同POX染色反应。NAPNAP【原理原理】：q偶氮偶联法、钙偶氮偶联法、钙-钴法钴法q中

29、性粒碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中成分水解，中性粒碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中成分水解，产生黑色物质产生黑色物质【结果结果】NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，其他血细胞均为阴性反应。【正常参考值正常参考值】阳性率：平均为1040，以“+”阳性反应为主。积分值：阳性积分值40 80（分）。明显活跃 1:10（1:512）白血病、增生性贫血（POX）（-）（+）染色质粗糙稍有浓集，核仁仍存在或开始消失（少，不清）巨幼变各阶段幼红细胞、粒细胞、巨核细胞骨髓增生明显活跃或增生活跃结合组化染色，免疫分型考虑如原始粒一般无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基本消失而代

30、之以大量特异性颗粒。急性白血病类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病时NAP活性增高，急性粒细胞白血病时减低，急性单核细胞白血病细胞时正常或减低。巨幼细胞性贫血骨髓象特点通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。核仁 15 个，边界不清原始细胞中最大，多为不规则形，很少呈卵圆形小体、嗜碱性点彩染色质较粗，呈网状排列土豆皮样急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。碱性磷酸酶 增加 减少或（-）正常或增加NEC：非红系的骨髓有核细胞细胞外铁：按阳性强度（蓝色物质、蓝色颗粒、蓝色小珠）分为5级。淋巴细胞胞核常一侧着边。原始淋巴细胞：正常不见或很少见【临床意义临床意义】感染时感染时的鉴别：急性化脓感染时活性明显增高，病毒感

31、染时活性正常或略减低。慢性粒细胞性白血病与类白血病反应慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性明显减低，类白血病反应NAP活性极度增高。阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别:前者NAP活性减低，后者增高。急性白血病类型急性白血病类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病时NAP活性增高，急性粒细胞白血病时减低，急性单核细胞白血病细胞时正常或减低。其他血液病其他血液病：淋巴瘤、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴细胞性白血病等NAP活性中度增高，恶组时活性降低。其他情况：其他情况：肾上腺皮质激素功能亢进、妊娠及应用肾上腺皮质激素、雌激素等，NAP积分可增高

32、。中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）NSE+NSE+NaF抑制试验【原理原理】NSE可将基质液中a-醋酸萘酚水解，产生a-萘酚，再与重氮染料偶联形成不溶性有色沉淀，定位于细胞质中NSE+NSE+NaF抑制试验【正常参考值正常参考值】NSE主要存在于单核细胞中，从原单核细胞到成熟单核细胞逐渐增强，粒细胞一般呈阴性或弱阳性，淋巴细胞一般为阴性。【临床意义临床意义】n急性单核细胞性白血病为强阳性，且可被氟化钠抑制。n急性粒细胞性白血病与均为阴性或弱阳性,但阳性反应不被氟化钠所抑制。n急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。PASPAS【原理原理】过碘酸-Schiff反应；糖原遇过碘酸氧化生成醛酸，与Schi

33、ff液中的品红结合，形成紫红色化合物PASPAS【正常参考值正常参考值】n有核红细胞呈阴性反应；n淋巴细胞多呈阴性，少数弱阳性；n粒系中，原粒细胞糖原染色（），早幼粒以下阶段为（+），逐渐增强；n单核细胞呈弱阳性反应n巨核细胞和血小板呈阳性反应【临床意义临床意义】n鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病：鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病：红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应，积分值增高。n鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病：鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病：恶性淋巴细胞增生性疾病，其淋巴细胞的PSA染色积分值增高；病毒感染等淋巴细胞良性增生时，淋巴细胞积分值正常。n三种急性白血病类型的鉴

34、别：三种急性白血病类型的鉴别：急性粒细胞白血病时，原始及幼稚粒细胞PAS染 色常呈阴性反应；急性淋巴细胞白血病时，原始及幼稚淋巴细胞常 呈阳性反应，阳性物质呈粗颗粒或块状；急性单核细胞白血病时，原始及幼稚单核细胞多 呈强阳性反应，阳性物质呈均匀弥漫或细颗 粒状。n鉴别某些细胞类型：鉴别某些细胞类型：（1）不典型的巨核细胞与李-斯（Reed-sternberg）细胞的鉴别：前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。（2）高雪细胞与尼曼匹克细胞的鉴别：前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。（3）腺癌细胞呈强阳性反应，骨髓转移时有助于与白血病细胞的鉴别。NSE+NaF抑制试验形 状：圆凹陷分

35、叶（粒细胞）5%，圆形或椭圆形，与原淋大小相仿或稍小染色质疏松较原单为粗，但仍呈网状慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性明显减低，类白血病反应NAP活性极度增高。如原始粒一般无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒。幼单核细胞：正常骨髓中很少见其他血液病：淋巴瘤、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴细胞性白血病等NAP活性中度增高，恶组时活性降低。大淋巴细胞：直径13-18um粒系中，原粒细胞糖原染色（），早幼粒以下阶段为（+），逐渐增强；【结果】NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，其他血细胞均为阴性反应。过氧化物酶 （-）分化

36、差的原始细胞 （-）（）阳性率：平均为1040，以“+”阳性反应为主。有核红细胞呈阴性反应；病理情况下核浆发育不平衡，核发育落后于浆同时有上下两阶段特点-辨认以核形态为主幼红细胞胞核始终呈圆形，最后脱核而消失。某些原虫感染，如疟疾和黑热病早幼阶段核仁模糊不清或消失糖原遇过碘酸氧化生成醛酸，与Schiff液中的品红结合，形成紫红色化合物网状细胞、吞噬细胞、组织细胞和单核细胞均呈阴性反应。PASMA幼红细胞呈阴性反应AML-M6幼红细胞呈阳性反应细胞化学染色 急淋 急粒 急单 过氧化物酶 （-）分化差的原始细胞 （-）（）（POX）（-）（+）分化好的幼稚细胞 （+）（+）糖原染色 粗颗粒或块状

37、弥漫性淡红色 淡红色细颗粒状 （PAS）（+）（-）/（）（+）非特异酯酶 （-）NaF抑制不敏感 可被NaF抑制（NSE）（-）（+）（+）（+）碱性磷酸酶 增加 减少或（-）正常或增加（NAP）PAS（糖原染色）用于鉴别红白血病M6（强阳性）和巨幼贫 铁染色【原理原理】人体内铁存在形式：铁蛋白，含铁血红素。铁在酸性环境下在低铁氰化钾中形成蓝色的铁氰化铁，又称普鲁士蓝反应。铁染色【结果结果】n细胞外铁：按阳性强度（蓝色物质、蓝色颗粒、蓝色小珠）分为5级。n细胞内铁：以铁粒幼细胞所占的百分率表示。n环状铁粒幼细胞：10个以上的粗大铁粒，环绕细胞核排列超过核周径的2/3以上。【参考值参考值】n细

38、胞外铁：一般为+或+n细胞内铁：阳性率为2090%，平均为65%。细胞浆内常见15个铁染色颗粒。【临床意义临床意义】缺铁性贫血：细胞外铁明显降低或消失，细胞内铁阳性率减低，常30%，急性溶血可达50%，以中、晚幼红为主n分裂相多见n小体、嗜碱性点彩粒系相对减少，各阶段比例及形态大致正常巨核细胞系大致正常再生障碍性贫血再生障碍性贫血骨髓象特点骨髓象特点n骨髓脂肪滴增多，颗粒减少n增生减低或极度减低n粒系及红系有核细胞均减少，早期造血细胞少见n淋巴细胞相对增多n浆细胞、网状细胞、组织嗜硷细胞增多n巨核细胞：减少甚至缺乏（SAA）增生活跃 1:20（1:1632）正常骨髓或某些贫血通常从原始到成熟，

39、胞体由大逐渐变小。呈阳性反应，阳性物质呈粗颗粒或块状；细胞化学染色：以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，进行血细胞涂片以及染色，显微镜下观察细胞内化学组成以及变化核仁 15 个，边界不清细胞发育是一个连续过程，人为划分为不同阶段。染色质：细致稀疏粗糙致密，浅深粒系中，原粒细胞糖原染色（），早幼粒以下阶段为（+），逐渐增强；幼单核细胞：正常骨髓中很少见巨核细胞系由圆形变为明显不规则形。急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。某些代谢性疾病如高雪病由细致疏松逐渐变为粗糙密集，最后紧缩成块，着色由浅变深，随DNA含量增加而逐渐变为深紫色。胞浆增多，灰蓝色，可见多数细小的嗜天青颗粒ACP染色呈阳性反应（桔红

40、色粗大颗粒）提示为T淋巴细胞白血病中性粒碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中成分水解，产生黑色物质核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无少多原始单核细胞：正常骨髓很少见，有原始细胞特点某一系或两系的血细胞过度异常增生，原始/幼稚细胞明显增多，30%ANC其他系列细胞受抑巨幼红细胞：胞体及胞核均增大，核染色质纤细、疏松，着色浅淡，胞浆量丰富SAASAA骨髓象：有核细胞增生骨髓象：有核细胞增生极度减低极度减低NSAANSAA骨髓象：有核细胞增生骨髓象：有核细胞增生减低减低SAA:SAA:骨髓造血岛呈空网状，仅见骨髓造血岛呈空网状，仅见成纤维细胞、淋巴细胞和大量网成

41、纤维细胞、淋巴细胞和大量网状纤维未见造血细胞状纤维未见造血细胞NSAA:NSAA:淋巴细胞较多，可见中性淋巴细胞较多，可见中性晚幼粒细胞、杆状核和分叶核粒晚幼粒细胞、杆状核和分叶核粒细胞，晚幼红细胞核高度致密，细胞，晚幼红细胞核高度致密，浓缩浓缩“炭核炭核”样样急性白血病（acute leukemia,AL）：病程短，6个月骨髓和血液中以分化差的原始/幼稚细胞大量增殖为主慢性白血病(chronic leukemia,CL)：骨髓和血液中以成熟或接近成熟的异常细胞为主急性白血病骨髓象特点急性白血病骨髓象特点l增生明显活跃或极度活跃l某一系或两系的血细胞过度异常增生，原始/幼稚细胞明显增多，30%

42、ANC其他系列细胞受抑l细胞特殊形态或结构：Auer小体，蓝细胞（all nucleated cell）急性早幼粒细胞白血病急性早幼粒细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病CML骨髓象特点骨髓象特点骨髓增生极度活跃粒系显著增生，G/E明显增高，主要为中幼粒，晚幼粒及杵状核比例显著增高，原、早幼10%，嗜碱、嗜酸细胞比例增高10%红系增生受抑巨核细胞早期增多，晚期减少多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（MMMM）n骨髓增生明显活跃或增生活跃n典型的骨髓瘤细胞典型的骨髓瘤细胞n粒系、红系及巨核系细胞的比例随骨髓瘤细胞百分率的高低而不同临床应用临床应用n诊断非造血系统疾病诊断非造血系统疾病q某些原虫

43、感染，如疟疾和某些原虫感染，如疟疾和黑热病黑热病q某些代谢性疾病如高雪病某些代谢性疾病如高雪病q协助诊断感染性疾病协助诊断感染性疾病如如伤寒、败血症等伤寒、败血症等q某些转移性癌肿等某些转移性癌肿等在骨髓涂片中能查到相在骨髓涂片中能查到相应的病原体或特殊细胞应的病原体或特殊细胞增生程度增生程度 有核细胞有核细胞/成熟红成熟红 常见疾病常见疾病极度活跃 1:1（1:0.52.0）白血病明显活跃 1:10（1:512）白血病、增生性贫血增生活跃 1:20（1:1632）正常骨髓或某些贫血 增生减低 1:50（1:3570）再障、粒缺或 粒细胞减少症增生极度减低 1:200（1:300）再障骨髓增生

44、程度骨髓增生程度55级级细胞发育规律n细胞体积与外形q大小：n通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。n巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。q外形：n红细胞系始终呈圆形；n粒细胞及淋巴细胞系则保持圆形或椭圆形；n单核细胞系由圆形或椭圆形变为不规则形；n巨核细胞系由圆形变为明显不规则形。单核细胞系统单核细胞系统n原始单核细胞：正常原始单核细胞：正常骨髓很少见骨髓很少见，有原始细胞特点，有原始细胞特点q核圆，有扭曲折叠核圆，有扭曲折叠q核仁核仁13个，不清楚个，不清楚q染色质疏松，均匀染色质疏松，均匀网状结构网状结构q胞浆灰蓝胞浆灰蓝n幼单核细胞：正常骨髓中很少见幼单核细胞：正常骨髓中很少见q核形状不

45、一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状核形状不一，为椭圆形，亦可成折叠或分叶状q染色质疏松较原单为粗，但仍呈网状染色质疏松较原单为粗，但仍呈网状q核仁可有可无核仁可有可无q胞浆增多，灰蓝色，可见多数胞浆增多，灰蓝色，可见多数细小的嗜天青颗粒细小的嗜天青颗粒巨核细胞系统巨核细胞系统n巨核细胞：为正常骨髓中最大的细胞，胞核呈巨核细胞：为正常骨髓中最大的细胞，胞核呈不规则或分叶状，染色质粗糙，排列很紧密，不规则或分叶状，染色质粗糙，排列很紧密，胞浆多呈均匀的淡紫红或淡红色，内含极细的胞浆多呈均匀的淡紫红或淡红色，内含极细的紫红色颗粒紫红色颗粒q颗粒型巨核：为过渡型巨核细胞颗粒型巨核：为过渡型巨核细胞，占，

46、占1027%，浆中无血小板形成浆中无血小板形成n胞体更大胞体更大n胞浆弥漫紫红色胞浆弥漫紫红色n核分叶核分叶q产板型巨核：成熟型，产板型巨核：成熟型，胞浆中出现血小板胞浆中出现血小板，约占约占4460q裸核型：巨核细胞胞浆完全血小板化后，细裸核型：巨核细胞胞浆完全血小板化后，细胞退化；或巨核细胞脆弱，在涂片过程中受胞退化；或巨核细胞脆弱，在涂片过程中受到损伤，使核排出；占到损伤，使核排出；占830%PASPAS【正常参考值正常参考值】n有核红细胞呈阴性反应；n淋巴细胞多呈阴性，少数弱阳性；n粒系中，原粒细胞糖原染色（），早幼粒以下阶段为（+），逐渐增强；n单核细胞呈弱阳性反应n巨核细胞和血小板呈阳性反应细胞外铁观察+血色病+AA、铁粒幼贫血+感染+AA、铁粒幼贫血+IDA治疗后IDAn阳性为蓝绿色沉淀阳性为蓝绿色沉淀巨幼细胞性贫血骨髓象特点巨幼细胞性贫血骨髓象特点骨髓增生明显活跃，粒、红比值明显减低红系明显增生，以早及中幼红为主n老浆幼核n分裂相多见n小体、嗜碱性点彩成熟红细胞：明显大小不均，呈高色素性粒系相对减少可见各阶段巨粒细胞，以晚幼粒、杆状核细胞最多见巨核细胞数量大致正常或增多