黄酮类化合物教材课件.pptx

1、概概 述述一、一、黄酮的含义：黄酮的含义：1经典含义是指以二苯基色原酮衍生的一类化合物的总称，由于该类化合物大多呈淡黄色或黄色，且分子中多具酮基，因此称为黄酮。2现代含义是泛指二个苯环（A环和B环）通过三个碳原子相互连接而成的一系列化合物的总称，即具有C6-C3-C6结构的一类化合物的总称。色原酮二苯基色原酮OO12345678OO12345678O12345678C6-C3-C6AB二、存在形式二、存在形式 黄酮类化合物广泛存在于植物中，不少的常用中药中主要含有此类成分。大多与糖结合成苷，称为黄酮苷类；有的以游离形式存在，即未与糖结合，称为游离黄酮或黄酮苷元，同一植物中可能同时存在游离黄酮及

2、其苷。三、生物活性三、生物活性 1.对心血管系统的作用对心血管系统的作用 Vp样作用：芦丁、橙皮苷等有样作用：芦丁、橙皮苷等有Vp样作用，样作用，能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。成的力可定。降血脂及胆固醇：木樨草素降血脂及胆固醇：木樨草素 芦丁片芦丁片 芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素物药，也称维生素P P，具有降低毛细血管的异常，具有降低毛

3、细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化妆品。大量用于食品添加剂和化妆品。2.抗肝脏毒作用抗肝脏毒作用 从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。化及多种中毒性肝损伤。（+）-儿茶素儿茶素(catergen)也可抗肝脏毒作也可抗肝脏毒作用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝损伤。碳

4、等引起的中毒性肝损伤。3.抗炎抗炎 芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具 抗炎作用。抗炎作用。4.抗菌及抗病毒作用抗菌及抗病毒作用 如木樨草素、黄芩苷、黄芩素如木樨草素、黄芩苷、黄芩素 5.解痉作用解痉作用 异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛；异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛；大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；者的头痛等症状；杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羟基芫花素：止咳祛痰。羟基芫花素：止咳祛痰。6.雌性激素样作用雌性激素样作用 大豆素

5、大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。似。己烯雌酚HOOH大豆素(dadzein)OOHOOH适用于苷类的精制工作。母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断5Hz)B环氢，邻偶(35-H)Na2CO3 +-查耳酮 分子间排列不紧密，讪酮（双苯吡酮)：苯骈色原酮，其基本母核由苯环和色原酮的2，3位骈合而成。3.152证明A环有两个酚羟基；此类化合物大多不符合C6-C3-C6的基本骨架，但因具有苯骈-吡喃酮结构，我们也将其归为黄2(d)二氢黄酮醇类芦丁是从中国所独有的国槐的

6、花蕾中提取的植物药，也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化妆品。三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元固定相（水）极性 流动相 （*有认为是吸附原理）？黄酮醇3-O-葡萄糖苷5.大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；铝离子络和而被牢固吸附，难于洗脱。分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异（见黄酮酸性规律）15(1H,J=2.7.清除人体自由基作用清除人体自由基作用 黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧成醌类而提供氢离子，故有显著

7、的抗氧特点。特点。另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样硬化及抗癌抗突变等作用。硬化及抗癌抗突变等作用。第一节 黄酮类化合物的结构与分类C6-C3-C6结构（黄酮）结构（黄酮）依：三碳链的氧化程度 三碳链是否构成环 3-位羟基取代与 B-环连接位置(2、3-位)正相色谱 反相色谱黄酮类化合物溶解性（极性）规律:（1）原理：氢键吸附苷元与苷元二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇）152证明A环有两个酚羟基；沸水 多糖苷易于水 +成本低、安全,水溶性杂质多NaOMe 265 388 43，4-OH+-+苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf规律与左边相反越难洗脱（

8、薄层Rf越小）7，4-OH黄酮 7或4-OH黄酮 一般-OH黄酮 5-OH黄酮并且，途径I裂解产生的碎片离子丰度大致与途径II裂解产生的碎片离子的丰度互成反比。黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OHEI-MS（以前）：苷看不到,须制备成衍生物（PM等）方能测得很弱的银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。如木樨草素、黄芩苷、黄芩素1.1.黄酮类：黄酮类：黄酮类即以黄酮类即以2-2-苯基色原酮为基本母核，且苯基色原酮为基本母核，且3 3位上位上无含氧基团取代的一类化合物。无含氧基团取代的一类化合物。OOABC1234567823465 芹菜素（5，7，4-三OH黄酮）木犀草素（5，7，3，4-四OH黄酮

9、）黄芩素(5，6，7-三OH黄酮)2.2.黄酮醇类：黄酮醇类：黄酮醇类的结构特点是在黄酮基本母核的黄酮醇类的结构特点是在黄酮基本母核的3 3位上连位上连有羟基或其他含氧基团。有羟基或其他含氧基团。23OOOH 山柰酚（山柰酚（5，7，4-三三OHOH黄酮醇黄酮醇）槲皮素（槲皮素（5，7，3，4-四四OHOH黄酮醇黄酮醇）杨梅素（杨梅素（5，7，3，4，55-五五OHOH黄酮醇黄酮醇）3.3.二氢黄酮类：二氢黄酮类：二氢黄酮类结构可视为是黄酮基本母核的二氢黄酮类结构可视为是黄酮基本母核的2 2、3 3位双键被氢化而成位双键被氢化而成。23OO甘草苷（甘草素甘草苷（甘草素-7-O-glu-7-O-

10、glu苷）苷）甘草素（甘草素（7 7，4 4 二二OHOH二氢黄酮）二氢黄酮）橙皮苷（橙皮苷（5，7，3-三三OH，4-OCH3二氢黄酮）二氢黄酮）4.4.二氢黄酮醇类：二氢黄酮醇类：二氢黄酮醇类具有黄酮醇类的、位被氢化的二氢黄酮醇类具有黄酮醇类的、位被氢化的基本母核，且常与相应的黄酮醇共存于同一植物体中。基本母核，且常与相应的黄酮醇共存于同一植物体中。23OOOH 二氢槲皮素（二氢槲皮素（5，7，3，4-四四OH二氢黄酮醇）二氢黄酮醇）二氢桑色素（二氢桑色素（5，7，2，4-四四OH二氢黄酮醇）二氢黄酮醇）5.5.异黄酮类：异黄酮类：异黄酮类母核为异黄酮类母核为3-3-苯基色原酮的结构，苯基

11、色原酮的结构，即即B B环连接在环连接在C C环的环的3 3位上。位上。23OO 大豆素（大豆素（7 7，4-4-二二OHOH异黄酮）异黄酮）大豆苷（大豆素大豆苷（大豆素-7-O-glc-7-O-glc苷）苷）葛根素（葛根素（7 7，4-4-二二OHOH，8-glc8-glc异黄酮苷）异黄酮苷）6.6.二氢异黄酮类：二氢异黄酮类：二氢异黄酮类具有异黄酮的二氢异黄酮类具有异黄酮的2 2、3 3位被位被氧化的基本母核。氧化的基本母核。23OO紫檀素紫檀素鱼藤酮鱼藤酮7.7.查尔酮类：查尔酮类：查耳酮类的结构特点是二氢黄酮查耳酮类的结构特点是二氢黄酮C C环的环的1 1、2 2位位键断裂生成的开环衍

12、生物，即三碳链不构成环。键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环。2345623465OOHOOHOHOHOHOglc红花苷红花苷 查耳酮的主要结构特点是C环未成环，另外定位也与其他黄酮不同。其可以看作是二氢黄酮在碱性条件下C环开环的产物，两者互为同分异构体，常在植物体内共存。同时两者的转变伴随着颜色的变化。二氢黄酮 2-羟基查耳酮 OOOHOH+OH-123456123456 红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植物成分。物成分。红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠呈深黄色；开花后期或采收干

13、燥过程中由于酶的作呈深黄色；开花后期或采收干燥过程中由于酶的作用，氧化成红色。用，氧化成红色。SO2氧化酶异构化醌式红花苷(红色)红花苷(carthamone)(黄色)新红花苷(neo-carthamin)(无色)OHOOOOglcOHOHOHOHOOglcOHOOHOHOOglcOH8.8.二氢查尔酮类：二氢查尔酮类：二氢查耳酮类为查耳酮二氢查耳酮类为查耳酮，位双键氢化而成。位双键氢化而成。此种类型在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根此种类型在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷（皮和苹果种仁中含有的梨根苷（phloridzinphloridzin）。）。OOHOOH

14、OHOHOglc梨根苷梨根苷9.橙酮类橙酮类 黄酮的C环分出一个碳原子变成五元环，其余部位不变，但C原子定位也有所不同。是黄酮的同分异构体，属于苯骈呋喃的衍生物，又名噢哢。如黄花波斯菊花中含有的硫磺菊素就属于此类。橙酮基本结构 硫磺菊素 OCHO2345612361745ABOCHOHO234561236174510.10.花色素类花色素类 花色素类是一类以离子形式存在的色原烯的衍生物。广泛存在于植物的花、果、叶、茎等部位，是形成植物蓝、红、紫色的色素。由于花色素多以苷的形式存在，故又称花色苷。如矢车菊素、飞燕草素、天竺葵素等属于此类。飞燕草素R1=R2=OH 矢车菊素R1=OH R2=H 天

15、竺葵素R1=R2=HOHOOHOHR2R1OH+90100ppm范围内查耳酮 分子间排列不紧密，7(d)71.聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相（非极性脂肪链）2(d)二氢黄酮醇类1(d)查耳酮类二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇）1：形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。类型：Sephadex G型（亲水性凝胶）也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。有的以游离形式存在，即未与糖结合，称为游离黄酮或黄酮苷元，同一植物中可能同时存在游离黄酮及其苷。黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OHNaOAc 275,322,367碱水（0.位，羰基的共轭诱导）。将以上各种光谱数据

16、（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。NaOAc 275,322,367370-430(3-4个小峰)黄酮的C环分出一个碳原子变成五元环，其余部位不变，但C原子定位也有所不同。MeOH 267 367苯甲酰系统 桂皮酰系统11.11.黄烷醇类黄烷醇类 黄烷醇类生源上是由二氢黄酮醇类还原而来，可看成是脱去C4位羰基氧原子后的二氢黄酮醇类化合物。黄烷-3-醇在植物界分布很广，如儿茶素和表儿茶素。故又称为儿茶素类。儿茶素为中药儿茶的有效成分，具有一定的抗癌活性。（+）儿茶素 （-）表儿茶素 OHOOHHOHHOHOHOHOOHHOHOHOHHn黄烷黄烷-3，4-二醇二醇OO HO H34O

17、O HOHO HO HO HO HO H无色飞燕草素无色飞燕草素12.12.双黄酮类双黄酮类 由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。物中。银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。GINKGETINOOOHCH3OOCH3OHHOOHOO13.13.其他黄酮类其他黄酮类 OOOHOHOHOHglcOO异芒果素讪酮（双苯吡酮讪酮（双苯吡酮)：苯：苯骈骈色原酮，其基本母核由苯环和色色原酮，其基本母核由苯环和色原酮的原酮的2，3位位骈合而成。骈合而成。此类化合物大多不符合C6-C3-C6的基本骨架，但因具有苯骈

18、-吡喃酮结构，我们也将其归为黄酮类化合物。凯林 麦冬高异黄酮A 红镰酶素 OOOHOHOOOCH3OCH3OCH3OOOCH3HOOCH3OHO 类别 特点或组间区别 组内区别黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH （C2-C3双键）二氢黄酮和 2-苯基色原酮 3-OH二氢黄酮醇 （C2-C3单键）异黄酮和二氢异黄酮 3-苯基色原酮 C2-C3双键和单键查耳酮和二氢查耳酮 C环开环 3碳链为双键和单键橙酮 C环为五元环花色素和黄烷醇 无4位羰基 离子和分子其他类 均有色原酮结构总结：各类黄酮类化合物的特点和区别章目录章目录橙皮苷（5，7，3-三OH，4-OCH3二氢黄酮）为同分异构体，常在植物

19、体内共存。花色素类是一类以离子形式存在的色原烯的衍Rf值：苷元 苷 苷元 苷（TLC色谱鉴别）15,7-二OH黄酮23,4-二氧取代黄酮类化合物橙酮 C环为五元环AlCl3/HCl 276,295,351,383仅溶于强的、浓酸二氢黄酮和 2-苯基色原酮 3-OH位，羰基的共轭诱导）。13C-NMR谱中黄酮类化合物结构中的中央三碳核的信号特征300,299,285,272,153,152,151,148橙皮苷（5，7，3-三OH，4-OCH3二氢黄酮）羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消失。黄酮醇3-O-鼠李糖苷5.但有时也会发生H-2和

20、H-6重叠的现象。MeOH 267,296sh,336118证明B环有一个酚羟基。第二节第二节 理化性质理化性质一性状一性状1：形态：形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。多为结晶性固体，少数为无定形粉末。（苷）（苷）2：颜色：颜色：多为黄色多为黄色 交叉共轭体系（电子转移、重排，共轭增强，产生颜色的基础）交叉共轭体系（电子转移、重排，共轭增强，产生颜色的基础）助色团（给系统提供电子，使颜色加深，尤其助色团（给系统提供电子，使颜色加深，尤其7，4-位，辅助作用）位，辅助作用）花色素类等383-344=39有5-OH旋光性黄酮类-7-O-葡萄糖苷 4.带II红移510nm 示A环有邻二酚羟基1

21、)二氢黄酮1：形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。NaOMe 270,303(sh),386NaOAc 275,322,367二氢异黄酮类具有异黄酮的2、3位被氧化的基本母核。方法：双相色谱对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。加AlCl3/HCl 265,425H-2受C环负屏蔽和3-OR屏蔽作用，H-6 也受C环负屏蔽作用，而H-5则仅4-OR屏蔽作用。2)葡萄糖苷与鼠李糖苷的区别苷元与苷元5Hz)A环氢，间偶(6-H)游离黄酮：黄酮0Hz)B环氢(5-H)1分子离子峰 为基峰 用于测定分子量。有

22、有 交 叉 共 轭 体 系交 叉 共 轭 体 系 无无黄酮（灰黄黄酮（灰黄黄色）黄色）二氢黄酮二氢黄酮黄酮醇（灰黄黄酮醇（灰黄黄色）黄色）二氢黄酮醇二氢黄酮醇查耳酮（黄查耳酮（黄橙橙黄色）黄色）二氢查耳酮二氢查耳酮花色素类（颜色随花色素类（颜色随pH而改变）而改变）黄烷醇类黄烷醇类 异黄酮（无或微黄色）异黄酮（无或微黄色）红色（红色（pH 8.8.5）OOOOOO47+二旋光性：二旋光性：旋光性旋光性 取决于取决于 不对称碳原子的有无不对称碳原子的有无 有有 无无 所有黄酮苷（糖）所有黄酮苷（糖）游离黄酮：游离黄酮：游离黄酮游离黄酮：黄酮黄酮 二氢黄酮二氢黄酮 黄酮醇黄酮醇 二氢黄酮醇二氢黄酮

23、醇 异黄酮异黄酮 二氢异黄酮二氢异黄酮 查耳酮（二氢查耳酮（二氢 ）黄烷醇类黄烷醇类 橙酮橙酮 花色素类等花色素类等 （2-位）位）（2，3-位）位）（无）（无）*OHOOOO2*OO三溶解性：符合苷的溶解性规律三溶解性：符合苷的溶解性规律 水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀碱水 1.游离黄酮 -+（酚羟基)取决于 分子的立体结构 取代基团的性质、数目、连接位置 引入羟基，数目多，7、4-位，水溶度较大 羟基甲基化（-OCH3）,水溶度降低R=H 平面型分子 非平面型分子 黄酮 二氢类（C-环半椅式结构）黄酮醇 异黄酮（羰基与B-环立体障碍）查耳酮 分子间排列不紧密，（交叉共轭）水分子易于

24、进入 水溶度小 水溶度大 2OOHRH R=H 二氢黄酮R=OH 二氢黄酮醇节目录节目录章目录章目录水水 甲醇乙醇甲醇乙醇 乙酸乙酯乙酸乙酯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 稀碱水稀碱水+-+黄酮类化合物溶解性（极性）规律黄酮类化合物溶解性（极性）规律:三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元3-O-糖苷 7-O-糖苷（平面性分子）花色素(平面性分子,离子型)非平面性分子 平面性分子2.黄酮苷黄酮苷(亲水性亲水性)黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。黄酮 二氢类（C-环半椅式结构）位，羰基的共轭诱导）。

25、黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OHAlCl3=AlCl3/HCl，结构中无邻二酚羟基（甲醇）苷、苷元均可溶 （9095%）(60%）甲醇毒性大5Hz)B环氢，邻偶(26-H)1：形态：多为结晶性固体，少数为无定形粉末。总结：各类黄酮类化合物的特点和区别外定位也与其他黄酮不同。Rf值：苷元 苷 苷元 7或4-OH 其他位-OH 5-OHNaHCO3 +-Na2CO3 +-NaOH +应用应用pH梯度法分离（游离黄酮）节目录节目录章目录章目录OOH+Cl2.碱性：碱性：-吡喃酮环吡喃酮环1-氧原子氧原子 微弱碱性（孤对电子，接受质子）微弱碱性（孤对电子，接受质子）仅溶于强的、浓酸仅溶于强的、浓

26、酸+水水 （浓硫酸）（浓硫酸）烊烊 盐（呈色）盐（呈色）应用应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 黄黄橙色，并有荧光橙色，并有荧光 二氢黄酮二氢黄酮 橙红（冷）、紫红（热）橙红（冷）、紫红（热）查耳酮查耳酮 橙红橙红洋红洋红 异黄酮（二氢）异黄酮（二氢）黄色黄色 橙酮橙酮 红红洋红洋红节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录水或热水提取，（多糖苷在热水 中溶解度较大，在冷水中溶解度较小）；152证明A环有两个酚羟基；5%NaHCO3液 5%Na2CO3液 0.85(2H,d,J

27、=8.（1）原理：氢键吸附IR:3292,1667,1600,1500cm-1二氢黄酮和二氢黄酮醇1硅胶薄层色谱 主要用于极性较小的黄酮类化合物（黄酮苷元）的分离鉴别，其色谱行为可参考硅胶柱色谱。B-环连接位置(2、3-位)5(1H,d,J=2.若R1=R2=R3=H，则H-2,6为单峰，6.利用13C-NMR谱中黄酮类化合物的中央三个碳核如木樨草素、黄芩苷、黄芩素2(d)二氢黄酮醇类样品33mg 经2%H2SO4加热水解，冷却,水洗后过滤得浅黄结晶21mg(苷元),水解液经处理进行纸层析,证明有鼠李糖,1H-NMR波谱示鼠李糖端基H信号:5.FD-MS、FAB-MS、ESI-MS（目前）：可

28、测得分子离子峰氢黄酮在碱性条件下C环开环的产物，两者互带I紫移3040 nm 示B环有邻二酚羟基1,d,J=2Hz（二平伏键偶合系统）节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录8(dd,1H,J=2.黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH麦冬高异黄酮A 红镰酶素有的以游离形式存在，即未与糖结合，称为游离黄酮或黄酮苷元，同一植物中可能同时存在游离黄酮及其苷。152证明A环有两个酚羟基；黄酮

29、类化合物结构中的交叉共轭体系水或热水提取，（多糖苷在热水 中溶解度较大，在冷水中溶解度较小）；对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。152证明A环有两个酚羟基；如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱四MS在黄酮类化合物结构研究中的应用（三）柱色谱法麦冬高异黄酮A 红镰酶素若R1=R2=R3=H，则H-2,6为单峰，6.B环上有-OH,OCH3对带I影响不大依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取H-2,6 7.盐水（0.节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目

30、录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录由于C环对H-2,6的负屏蔽作用大于对H-3,5，且H-3,5受4-OR的屏蔽作用，故前者较低场；麦冬高异黄酮A 红镰酶素二氢桑色素（5，7，2，4-四OH二氢黄酮醇）（一）纸色谱（PPC）15,7-二OH黄酮C3-OR 1-H的 值约为5.二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇）0Hz)B环氢(5-H)黄酮醇-3-O-葡萄糖苷 5.元素分析:C%(56.二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇）石油醚液 乙醚液 乙酸乙酯 水饱和正丁醇 母液类型：Sephadex G型

31、（亲水性凝胶）从中药柴胡中得到山奈苷，酸水解PPC检查出鼠李糖，该苷及苷元的UVmax(nm)谱如下，解析结构。并且，途径I裂解产生的碎片离子丰度大致与途径II裂解产生的碎片离子的丰度互成反比。类化合物的分离2主要碎片离子峰为裂解途径I 产生的A1和B1 母核确定X Zi Zo Zm Zp（105，活化）高度甲基化或乙酰化黄酮（醇）混合溶剂洗脱若用DMSO-d6作溶剂，则8.5(1H,d,J=2.节目录节目录章目录章目录章目录章目录章目录章目录52525353节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录节目录节目录章目录章目录 第三节第三节 提取、分离提取、分离 溶

32、剂法溶剂法 关键关键 溶剂的选择溶剂的选择 选择依据选择依据 黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性 溶剂的溶解性能溶剂的溶解性能 提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择 溶剂溶剂 提取原理提取原理 游离黄酮游离黄酮 黄酮苷黄酮苷 备备 注注 乙醇乙醇 溶解范围广溶解范围广 +（甲醇）（甲醇）苷、苷元均可溶苷、苷元均可溶 （9095%）(60%）甲醇毒性大甲醇毒性大沸水沸水 多糖苷易于水多糖苷易于水 +成本低、安全成本低、安全,水溶性杂质多水溶性杂质多 碱性水或碱性水或 稀氢氧化钠溶出能力强稀氢氧化钠溶出能

33、力强 碱性乙醇碱性乙醇 酚羟基的酸性酚羟基的酸性 +石灰水除杂质效果好石灰水除杂质效果好一提取方法一提取方法 溶剂法溶剂法 1.苷元苷元 多用多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小等极性较小溶剂提取；溶剂提取；对于多对于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提化的成分，用苯、石油醚提取；取；对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。等溶剂提取。2.苷类苷类 水或热水提取，（多糖苷在热水水或热水提取，（多糖苷在热水 中溶解度较大，在冷水中溶解度较中溶解度

34、较大，在冷水中溶解度较小）；小）；也可用也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。提取。3.含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。4.提取花青素类可加入少量酸，但一提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮类化合物则应避免。般黄酮类化合物则应避免。碱水提酸沉淀法碱水提酸沉淀法 适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。取。注意事项：注意事项：酸碱度不宜过大酸碱度不宜过大 邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护基易被氧化，加硼砂保护 石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸石灰

35、乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质性杂质 炭粉吸附法炭粉吸附法 适用于苷类的精制工作。适用于苷类的精制工作。植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。过滤得吸附苷的活性炭粉末。依次用沸甲醇、沸水、依次用沸甲醇、沸水、7%酚酚/水、水、15%酚酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。醇洗脱，分步收集、检查、合并。大部分苷类可用大部分苷类可用7%酚酚/水洗下，经减压浓水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。压浓缩得较纯黄酮苷。二二.分离方法分离方法（一）溶剂萃取法（一）溶剂萃取法

36、 黄酮与杂质黄酮与杂质 分离依据：成分之间分离依据：成分之间 苷与苷元苷与苷元 之间的极性（分配系数之间的极性（分配系数K）差异）差异 苷元与苷元苷元与苷元 分离工艺：分离工艺：原料的提取浓缩液（水溶液）原料的提取浓缩液（水溶液）依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取 石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水饱和正丁醇水饱和正丁醇 母液母液（脂溶性杂质）（脂溶性杂质）回收回收 回收回收 减压回收减压回收 （水溶性杂质（水溶性杂质)苷元苷元 单糖苷单糖苷 多糖苷多糖苷 （二）（二）pH梯度萃取法梯度萃取法 分离依据：游离黄酮类化合

37、物的酸性差异（见黄酮酸性规律）分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异（见黄酮酸性规律）分离工艺：总游离黄酮的乙醚液分离工艺：总游离黄酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取萃取 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 0.2%NaOH液液 4%NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性杂质）（脂溶性杂质）7，4-OH黄酮黄酮 7或或4-OH黄酮黄酮 一般一般-OH黄酮黄酮 5-OH黄酮黄酮（三）柱色谱法（三）柱色谱法 吸附原理吸附原理 异黄酮、二氢黄酮（醇）、异黄酮、二氢黄酮（醇）、氯仿氯仿-甲醇不同比例甲醇不同比例（105，活化），活化

38、）高度甲基化或乙酰化黄酮（醇）高度甲基化或乙酰化黄酮（醇）混合溶剂洗脱混合溶剂洗脱 （极性小）（极性小）分配原理分配原理 多羟基黄酮醇或黄酮苷类多羟基黄酮醇或黄酮苷类 氯仿氯仿-甲醇甲醇-水水 （加水失活或不活化）（加水失活或不活化）（极性大）（极性大）（80：20：1）等比例）等比例1硅胶柱色谱硅胶柱色谱2聚酰胺色谱聚酰胺色谱 （1）原理：）原理：氢键吸附氢键吸附 吸附规律：吸附规律：酚羟基数目越多，吸附能力越强。酚羟基数目越多，吸附能力越强。酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置有利酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置有利形成分子内氢键，吸附能力减弱。形成分子内氢键，吸附能力减弱。3

39、-OH3-OH或或5-OH5-OH黄酮的吸附力小于其他位置黄酮的吸附力小于其他位置-OH-OH黄酮；黄酮；邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄酮酮 分子内芳香化程度越高，吸附力越强。分子内芳香化程度越高，吸附力越强。查耳酮查耳酮 二氢黄酮二氢黄酮 黄酮醇黄酮醇 黄酮黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 异黄酮异黄酮 与介质的关系：吸附力与介质的关系：吸附力 水（中）水（中）甲醇、乙醇甲醇、乙醇（浓度由（浓度由 低到高）低到高）碱性溶剂碱性溶剂 洗脱规律洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越难洗脱（薄层越难洗

40、脱（薄层Rf越小）越小）（2）“双重色谱双重色谱”原理原理主要用于解释黄酮苷与苷元聚酰胺色谱现象主要用于解释黄酮苷与苷元聚酰胺色谱现象 正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱聚酰胺：聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相非极性固定相（非极性脂肪链）（非极性脂肪链）洗脱剂：洗脱剂：有机溶剂（氯仿有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小甲醇，极性小）含水溶剂含水溶剂（甲醇（甲醇-水，极性大）水，极性大）先洗脱：先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）游离黄酮（苷元，极性小）苷苷（极性大）（柱色谱分离）（极性大）（柱色谱分离）Rf值：值：苷元苷元 苷苷 苷元苷元 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷

41、 苷元苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5-OH黄酮黄酮 常用洗脱剂常用洗脱剂：碱水（碱水（0.1mol/L NH3.H2O）盐水（盐水（0.5mol/L NaCl）醇或醇水不同比例。醇或醇水不同比例。6高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）适用于各种黄酮适用于各种黄酮 类化合物的分离类化合物的分离 原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）固定相：固定相：ODS 流动相：水流动相：水-乙腈不同比例乙腈不同比例 第四节第四节 鉴定鉴定一理化检识一理化检识 1.颜色：多呈黄色颜色：多呈黄色 2.母核检识：盐酸母核检识：盐酸-镁粉反应镁粉反应-黄酮

42、、黄酮醇、二氢黄酮黄酮、黄酮醇、二氢黄酮 二氢黄酮醇（二氢黄酮醇（+）四氢硼钠反应四氢硼钠反应-二氢黄酮（醇）类（二氢黄酮（醇）类（+）五氯化锑五氯化锑-查耳酮类（查耳酮类（+）3.取代基团检识：锆盐取代基团检识：锆盐-枸橼酸反应枸橼酸反应-3-OH（+）5-OH（-）黄酮鉴别黄酮鉴别 氨性氯化锶反应氨性氯化锶反应-邻二酚羟基（邻二酚羟基（+）二二.色谱检识色谱检识 （一）纸色谱（一）纸色谱（PPC）原理：分配原理原理：分配原理 适用范围：游离黄酮（苷元）及黄酮苷的分离鉴别适用范围：游离黄酮（苷元）及黄酮苷的分离鉴别 方法方法：双相色谱双相色谱 第第I向向 醇性展开剂醇性展开剂 第第II向向

43、水性展开剂水性展开剂（BAW、TBA、水饱和正丁醇）、水饱和正丁醇）（28%HAc、3%NaCl、1%HCl）正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱固定相（水）极性固定相（水）极性 流动相流动相 （*有认为是吸附原理）？有认为是吸附原理）？Rf规律：极性小的化合物规律：极性小的化合物Rf大大 极性大的化合物极性大的化合物Rf大大 苷元（苷元（0.7以上）以上）单糖苷单糖苷 双糖苷（双糖苷（0.7以下）以下）苷元中，平面型分子苷元中，平面型分子 非平面型分子非平面型分子 Rf规律与左边相反规律与左边相反母核相同，母核相同，2 2-OH 3 3-OH 4 4-OH 5 5-OH黄酮黄酮 主要应用：苷元

44、的分离鉴别主要应用：苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类的分离鉴别黄酮苷及花色素类的分离鉴别（二）薄层色谱（TLC）1硅胶薄层色谱 主要用于极性较小的黄酮类化合物（黄酮苷元）的分离鉴别，其色谱行为可参考硅胶柱色谱。2聚酰胺薄层色谱 可用于黄酮苷及游离黄酮的分离鉴别，其色谱行为可参考聚酰胺柱色谱。3纤维素薄层色谱分配原理，其色谱行为可参考PC。各种色谱的检识顺序：各种色谱的检识顺序：日光下观察多数黄酮有黄色斑点紫外光下观察多数黄酮呈黄绿色荧光斑点氨蒸气熏多数黄酮有颜色变化喷显色剂（2%AlCl3甲醇液）多数黄酮黄色变深，荧光加强第五节第五节 结构研究结构研究一一.紫外可见光谱在黄酮类化合物结构测定中

45、的应用紫外可见光谱在黄酮类化合物结构测定中的应用 一般鉴定程序一般鉴定程序：先测定在甲醇中的光谱 再测定在加入各种诊断试剂后的紫外光谱 如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱 将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。黄酮（醇）：带 II、带I均强母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断母核的推断 （甲醇）查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强 取代基：OH等，为助色团 依红移规律推断取代基团依红移规律推断取代基团 甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠：碱性弱，酸性强的酚羟基解离 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和

46、 相应吸收峰红移 三氯化铝：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 络和 邻二酚羟基OOROOROOR+1.黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征 苯甲酰系统苯甲酰系统 桂皮酰系统桂皮酰系统（带（带II 220280nm）（带（带1 300400nm）黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系 多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：带带I在在300-400nm区间，由区间，由B环桂皮酰系统的环桂皮酰系统的电子跃迁所引起；电子跃迁所引起；OOOO带带II在在240-285nm区间，由区间，由A环苯甲酰系统环苯甲

47、酰系统的电子跃迁所引起。的电子跃迁所引起。OOOO 带带 I I(2 4 0-285nm)（苯甲（苯甲酰系统）酰系统）带带I(300-400nm)桂皮酰系统桂皮酰系统类类 型型说说 明明 250-285304-350黄酮类黄酮类-OH越多，越多，带带I带带II越红越红移移 B环环3,4有有-OH基，带基，带II为 双 峰（主为 双 峰（主峰伴肩峰）峰伴肩峰）328-357黄酮醇类黄酮醇类(3-OR)352-385黄酮醇类黄酮醇类(3-OH)245-270270-295300-400异黄酮类异黄酮类二 氢 黄 酮二 氢 黄 酮（醇）（醇）B环上有环上有-OH,OCH3对带对带I影响不大影响不大

48、220-270340-390或或340-390(Ia)300-320(Ib)查耳酮类查耳酮类查耳酮查耳酮2-OH使带使带I向红移向红移影响大影响大370-430(3-4个小峰个小峰)橙酮类橙酮类 不同类型黄酮类化合物的紫外光谱取代基团对共轭吸收的影响 黄酮类核中引入黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相程度增强，相 应的吸收峰红移。应的吸收峰红移。一般，一般，A环引入环引入 OH，带，带II红移，红移，B环引入环引入 OH带带I红移。红移。羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力下降，引羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力下降，引起相应的吸收峰

49、紫移。起相应的吸收峰紫移。3-OH甲基化或苷化，带甲基化或苷化，带I紫移，紫移，5-OH（与羰基形成分子内氢键）甲基化，带（与羰基形成分子内氢键）甲基化，带I、带带II均紫移均紫移515nm，4-OH甲基化，带甲基化，带I紫移紫移310nm。羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消失。失。黄酮黄酮、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带I、带、带II）的位移规律）的位移规律诊断试剂诊断试剂 位移规律位移规律 归归 属属 NaOM

50、e 带带I红移红移4060nm，强度不降，强度不降 示有示有4-OH 带带I红移红移5060 nm，强度下降，强度下降 示有示有3-OH、但无、但无4-OHNaOAc 带带II红移520nm 示有7-OH2.加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义（见下表（见下表）NaOAc/H3BO3 带带I红移1230nm 示B环有邻二酚羟基 带带II红移510nm 示A环有邻二酚羟基 （不包括5，6-邻二酚羟基）AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图=AlCl3谱图 示无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 AlCl3谱图 示有邻二酚羟