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遗传学期末总结课件.ppt

1、遗传学期末总结遗传学期末总结第九章 基因突变 基因突变的概念和分类;基因突变的一般特征;诱变因素及突变的分子机理 损伤的修复方式及意义。(1)按突变发生的细胞类型:1.基因突变:基因(DNA)分子中发生碱基对的替换、增添和缺失,而引起的基因结构的改变,与原来基因形成对应关系。如红眼基因W白眼基因w 2.基因突变的分类(2)按突变后氨基酸的变化:体细胞突变和生殖细胞突变同义、错义、无义、移码突变(3)按突变后表型的变化:形态、生化、致死、渗漏、中性突变 1、突变的稀有性3.基因突变的特征2、突变的可逆性3、突变的平行性4、突变的多向性5.突变的多害少利性第九章 基因突变4.基因突变的诱发因素基因

2、突变自发突变诱发突变DNA复制错误自发化学损伤物理诱变化学诱变.DNA损伤的后果 1.点突变(point mutation)2.缺失(deletion)3.增添(插入)(insertion)4.DNA断裂(DNA break).DNA损伤修复方式?错配修复:GA*TC 光修复:光复活酶 切除修复:DNA内、外切酶,聚合酶,连接酶 重组修复:复制后修复 SOS修复:错误倾向修复基因及基因组的相关概念;基因组学研究的内容及目标;人类基因组计划核心内容包括哪些;遗传图谱及物理图谱的概念及作用;第十章 基因与基因组学是储存特定遗传信息,具有遗传效应的DNA片段。1.基因的概念第十章 基因与基因组学 启

3、动子 增强子 沉默子 终止子2.真核生物的顺式作用元件:真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的相关转录调控序列,至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。远离转录起始点、决定基因的时空表达特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。基因的负性调节元件,当其结合特异蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用。转录后修饰密切相关。3.基因组:4.C值:5.C值悖理:6.N值悖理:一个物种单倍体的染色体数目,全部遗传物质的总和一个物种单倍体基因组的DNA含量C值和进化程度之间没有严格的对应关系7.基因组学:基因组学按研究内容:q 结构基因组学q 功能基因组学q 蛋白质组学研究基因组的组成、结构和功能的学科

4、基因数目与其生物结构的复杂性不成比例的现象8.结构基因组学:9.功能基因组学:是指通过基因作图、核苷酸序列分析,确定基因的组成、进行基因定位的学科。利用结构基因组学研究所得到的各种遗传信息,在基因组水平上研究基因功能表达的学科。研究细胞内全部蛋白质的组成、结构与功能的学科。11.基因组学研究的最终目标u 获得生物体全部基因组序列u 鉴定所有基因的功能u 明确基因之间的相互作用关系10.蛋白质组学1、遗传图谱;2、物理图谱;3、序列图谱;4、转录图谱12.人类基因组计划核心内容15.绘制遗传图谱和物理图谱的目的?13.遗传图谱:14.物理作图:采用分子生物学技术,直接将DNA分子标 记或序列标定

5、在基因组实际位置。限制性片段作图图距单位为碱基对。采用遗传学分析方法将基因或DNA序列标定在染色体上,构建连锁图。遗传图距单位为厘摩(cM)。.遗传标记 遗传物质特殊的、易于识别的多态性表现形式。1.基因标记 1)形态标记;2)细胞学标记;3)生化标记 2.分子标记 1)RLFP;2)SSLPs;3)SNP.有遗传图谱为什么还要构建物理图谱?遗传图谱分辨率有限。人类只能研究少数减数分裂事件,不能获得大量子代个体。人类遗传图谱实际是599kb,测序要求每个标记的间隔小于100kb2.遗传图谱精确性不够。经典遗传学认为,交换是随机发生的、基因组中有些区域是重组热点。倒位、重复等染色体结构变异会限制

6、交换重组。免疫遗传的相关概念;(抗原、抗体)免疫球蛋白(Ig)的基因结构免疫球蛋白(Ig)基因重排,等位排斥、同种型排斥、类别转换的概念抗体多样性产生的机制;第十一章 免疫遗传1.抗原(antigen):凡是能够刺激机体的免疫系统产生抗体,并且能够和相应的抗体发生特异性结合反应的物质2.新生儿溶血症由胎儿与母体红细胞抗原不相容所引起的。胎盘渗血、胎盘剥离时胎儿红细胞进入母体,母体产生全抗体IgG。IgG抗体通过胎盘屏障进入胎儿循环,胎儿红细胞大量凝集破坏。Rh新生儿溶血症 多见于Rh-(dd)母亲的Rh+(Dd)胎儿第十一章 免疫遗传定义:不同个体的组织移植会引起免疫反应,导致移植物被排斥,与

7、排斥反应有关的抗原称为组织相容性抗原(移植抗原)。按功能分为主要组织相容性抗原和次要组织相容性抗原。3.组织相容性抗原编码主要组织相容性抗原,调控细胞间相互识别,调节免疫应答的一组紧密连锁的基因群。主要组织相容性复合体(MHC):基因组印记的相关概念及印记基因的鉴定方法(2)supC+trpA+pyrF-114性导:接合时由F因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。缺失(deletion)F因子:整合到E.1)产生重组子的频率不同,HfrF的重组子频率是10-2,而F+F产生的重组子仅为10-6;H链:包括V、D、J、C 基因片段。基因型 菌落数his(51)met(70)str(47

8、)ser(61)xyl(52)(2)按突变后氨基酸的变化:指B细胞在受抗原刺激后,首先合成IgM,然后转为合成IgG、IgA和IgE等的现象。RNA interference(RNAi):与靶基因序列同源的双链RNA诱导的序列特异性的转录后基因沉默现象。如何区别核外遗传和母性影响;3)F+不能传递细菌染色体基因,Hfr可以传递。RF=4.抗体(antibody,Ab)和免疫球蛋白:抗体:在对抗原刺激的免疫应答中,由B淋巴细胞产生能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白;免疫球蛋白:具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白;人类胚系Ig基因结构H链:包括V、D、J、C 基因片段。L(/)链

9、:包括V、J、C 基因片段。Ig胚系基因中,V、(D)、J基因片段之间被内含子隔开,通过基因片段的随机重排,形成V(D)J连接,再与基因片段连接,才能编码完整的Ig多肽链。Ig胚系基因重排程序l 首先是重链发生基因重排,随后是轻链重排。l 重链:胚系基因 D-J连接 V-DJ连接6.Ig基因重排等位排斥(allelic exclusion):一条染色体上Ig重链基因的有效重排,抑制另一条同源染色体重链基因重排。同种型排斥(isotype exclusion):是指两种轻链之间的排斥,轻链有链和链,但一个Ig分子只能表达其中的一种,先链,再链。(注意:二者在非同源的染色体)7.等位排斥与同种型排

10、斥指B细胞在受抗原刺激后,首先合成IgM,然后转为合成IgG、IgA和IgE等的现象。由于Ig的类型由重链决定,所以在重链重排时,在V区基因不变的情况下,C基因发生重排,使得最终的基因产物的V区相同,而C区不同;也就是说抗体识别的特异性相同,但Ig分子的类型却发生了改变。8.Ig的类别转换编码Ig基因的多样性(原始因素)随机重排产生的多样性(主要因素)H、L链的随机组合不准确连接、核苷酸插入体细胞高频突变:B细胞在受到抗原剌激后,已重排好的V区基因(尤CDR3)突变频率增高,称体细胞高频突变。9.抗体多样性机制?第十二章表观遗传学表观遗传学概念;甲基化的相关概念及检测方法基因组印记的相关概念及

11、印记基因的鉴定方法miRNA和siRNA的异同点 研究基因序列没有发生改变的情况下,基因表达发生可遗传的变化,导致表型变化的遗传学分支学科。(研究没有基因序列变化的,可遗传的基因表达变化的学科。).表观遗传学在甲基化转移酶的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,将甲基集团连接到DNA分子的腺嘌呤或胞嘧啶碱基上。.DNA甲基化第十一章表观遗传学.DNA甲基化酶类u维持型甲基转移酶,需以半甲基化的双链 DNA 为模板,指导新合成的链甲基化;DNMT1u全新甲基化酶,不依赖半甲基化 DNA 分子中的甲基化模板而从新开始合成5mC;DNMT3a,3b.DNA去甲基化方式 1.主动去甲基化 2

12、.被动去甲基化(复制相关的去甲基化).DNA甲基化的功能启动子高甲基化基因表达沉默启动子低甲基化基因表达激活基因调控-DNA甲基化的主要功能宿主防御-抑制转座子的活性.DNA甲基化检测方法:1.亚硫酸氢钠法亚硫酸氢钠把非甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,以此实现两类的分离;2.限制性内切酶法限制性内切酶可以切割非甲基化的位点,而保留甲基化位点;7.基因组印迹二倍体细胞中来自某一亲本的等位基因或它所在染色体发生了表观遗传修饰,导致不同亲本来源的两个等位基因只有一个可以表达,另一个因甲基化而沉默。鉴定新印记基因是应用分子标记的方法,从表达水平上验证候选印记基因的印记状况,其关键

13、在于区分表达的两条同源染色体各自的亲本来源。(1)基于SNP位点的测序分析或酶切分析8.印记基因的鉴定印记基因的鉴定-测序分析AK003491A C C C C A C A C C T C A C A C C N C A CA C C N C A C IBF1 BIF1ICR(纯合子)B6(纯合子)亲本DNA子代DNAA C C C C A C A C C T C A C BIF1 IBF1子代cDNA(B6ICR)(ICRB6)(B6ICR)(ICRB6)RNA interference(RNAi):与靶基因序列同源的双链RNA诱导的序列特异性的转录后基因沉默现象。MicroRNAs(miR

14、NAs)是一类长度约1925nt的非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3UTR区完全或部分互补,剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因的表达。核外遗传和母性影响的概念与特点;如何区别核外遗传和母性影响;植物的雄性不育概念及类型不育系、保持系、恢复系的关系第十三章 核外遗传 pur+和nad+基因的并发转导频率是多少?接种B板 K()板 计数供体 leu+thr+azis 受体 leu thr azirsupC+trpA+pyrF+两基因间无重组1)都能与F进行杂交发生重组;性导:是Hfr菌株中F因子的错误环出,产生了携带有供体菌遗传物质的F因子,接合

15、时随F因子的转移而使供体菌遗传物质导入到受体菌中。基因数目与其生物结构的复杂性不成比例的现象比较接合、性导、转化、转导的异同a1 B植物的雄性不育概念及类型Coli染色体上的F 因子环出时偶尔不够准确,携带了E.二倍体细胞中来自某一亲本的等位基因或它所在染色体发生了表观遗传修饰,导致不同亲本来源的两个等位基因只有一个可以表达,另一个因甲基化而沉默。8125/20172=0.明确基因之间的相互作用关系细胞质内遗传物质控制的遗传现象和遗传规律。-细胞质遗传第十三章 核外遗传1.正交和反交的遗传表现不同,F1通常只表现母本的性状;2.与父本连续回交母本核基因可被全部置换掉,但母本细胞质基因变化不大;

16、3.由细胞质中附加体或共生体决定的性状,其表现往往类似病毒的转导或感染,即可传递给其它细胞;4.非孟德尔遗传,杂交后代不表现有比例的分离;带有胞质基因的细胞器在细胞分裂时分配是不均匀的。1.核外遗传的概念和特点2.母性影响的概念:母体核基因的产物在卵细胞的细胞质中积累,使子代的表型不由自身的基因型所决定,而是表现为由母本基因型决定的一种遗传现象。由于受控于核基因组,所以母性影响并不属于细胞质遗传的范畴3.母性影响与细胞质遗传的异同 相同点:正反交结果不一致 不同点:细胞质性状的遗传受细胞质基因控制,表型是稳定的。母性影响的性状受母本核基因控制,有持久性的,也有短暂性的。4.植物的雄性不育性.细

17、胞质不育:细胞质基因控制的雄性不育,表现细胞质遗传特点。2.细胞核不育:由核基因控制,其作用不受细胞质类型的影响,这种雄性不育性的遗传和表达是完全遵循孟德尔遗传规律的。3.质-核互作不育型:由细胞质不育基因S和核内一对隐性基因rr共同作用的结果。当胞质不育基因S存在时,核内必须为隐性基因rr,个体才表现不育;育性表现为核基因与细胞质基因的重叠作用,只要一方具有可育基因,花粉粒的发育就表现为正常基因型:S(rr)以S(rr)作母本与五种可育个体杂交结果 F1S(rr)不育S(RR)可育 S(Rr)可育 S(rr)不育S(Rr)可育 S(Rr/rr)可育/不育 S(rr)不育N(Rr)可育 S(R

18、r/rr)可育/不育 S(rr)不育N(RR)可育 S(Rr)可育S(rr)不育N(rr)可育 S(rr)不育上述杂交组合可归纳为三种情况:不育系:S(rr)能被N(rr)所保持,后代出现全部稳定不育的个体。保持系:N(rr)具有保持不育性在世代中稳定遗传的能力。恢复系:N(RR)或S(RR)具有恢复育性的能力,称为恢复系。转化、接合、性导与转导的概念与基本原理;F-菌株、F+菌株、Hfr菌株的概念、区别;F因子、F因子的异同点;细菌遗传作图(中断杂交作图、重组作图、转化作图、转导作图)的原理和基本过程;第十四章 细菌的遗传分析接合(conjugation)性导(sexduction)转化(t

19、ransformation)转导(transduction)1.原核生物遗传物质转移的方式:2.接合:遗传物质通过细胞的直接接触从供体转移到受体内的过程。3.F 因子供体和受体的性别差异,是由F因子引起的 F 因子:致育因子(性因子),是一种附加体。携带F因子的菌株称为供体菌或雄性,用F表示。未携带F因子的菌株为受体菌或雌性,用F表示。第十四章 细菌的遗传分析4.E.coli 与F 因子的三种状态:没有F因子,即F;一个自主状态F因子,即F;一个整合到宿主染色体内的F因子,即Hfr。外基因子(Hfr)内基因子不能复制,细菌不能繁殖重组型不能复制,丢失重组发生在部分二倍体中。单交换产生不平衡的线

20、性染色体;只有偶数次交换才能产生平衡的重组子。相反的重组子不出现。5.细菌接合重组的特点当F因子处于游离状态时,细菌为F+,当整合到宿主染色体上时即为Hfr品系。1)产生重组子的频率不同,HfrF的重组子频率是10-2,而F+F产生的重组子仅为10-6;2)F+F的后代常为F+,而HfrF的后代为F;3)F+不能传递细菌染色体基因,Hfr可以传递。1)都能与F进行杂交发生重组;2)杂交时都要通过接合管和受体菌连接;F+和Hfr的相同点是:F+和Hfr的不同点是:6.F+和Hfr的关系7.中断杂交与染色体作图原理:HfrF-杂交中染色体是定向地、均匀地、逐渐进入F-细菌的,大部分F因子并没有进入

21、受体,随接合管断开(中断杂交)的时间不同,进入的基因也不同。中断杂交作图根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘制连锁图的技术。Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入 F菌株的。基因位点离原点越近,进入F越早,重组机会越多;反之越晚。F 因子插入的位置不同,使不同的Hfr菌株有自己稳定的转移起点和次序。习题:从A到E为源于同一大肠杆菌F菌株的5个Hfr株,括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F受体菌所需的时间 A B C D E mal(1)ade(13)pro(3)pro(10)his(7)str(11)his(28)met(29)gal(16)gal(17)ser(16)gal(38

22、)xyl(32)his(26)pro(23)ade(36)pro(44)mal(37)ade(41)met(49)his(51)met(70)str(47)ser(61)xyl(52)1.绘出F菌株的遗传图,表明所有基因的位置,并以分钟表示基因的相对距离。2.指出F因子在每一Hfr菌株中插入位点和方向3.为得到一个最高比例的Hfr重组体,理论上接合后在受体中选择那个供体标记基因?(ade+lac+)+(ade+lac)当顺式有功能,而反式没有功能时,突变位点突变位点在同一顺反子内;维持型甲基转移酶,需以半甲基化的双链 DNA 为模板,指导新合成的链甲基化;二倍体细胞中来自某一亲本的等位基因或它

23、所在染色体发生了表观遗传修饰,导致不同亲本来源的两个等位基因只有一个可以表达,另一个因甲基化而沉默。supC-trpA-pyrF-a和 b基因重组频率=正交和反交的遗传表现不同,F1通常只表现母本的性状;2)杂交时都要通过接合管和受体菌连接;(2)supC+trpA+pyrF-114重链:胚系基因 D-J连接 V-DJ连接由胎儿与母体红细胞抗原不相容所引起的。基因突变的概念和分类;正交和反交的遗传表现不同,F1通常只表现母本的性状;str(11)his(28)met(29)gal(16)gal(17)(1)supC+trpA+pyrF+36 A B C D Emal(1)ade(13)pro(

24、3)pro(10)his(7)str(11)his(28)met(29)gal(16)gal(17)ser(16)gal(38)xyl(32)his(26)pro(23)ade(36)pro(44)mal(37)ade(41)met(49)his(51)met(70)str(47)ser(61)xyl(52)mal str serade hisgalpro metxyl10520151062635ABDCE8.细菌重组与E.Coli染色体作图两基因转移时间间距2分钟时,中断杂交法的图距不够精确,应采用传统的重组作图法。Hfr:lac+ade+(lac在5)举例:重组作图例:二个基因紧密连锁:l

25、ac-(乳糖不发酵)ade-(腺嘌呤缺陷型)Hfr染色体受体染色体 ade+lac+ade lacHfr染色体受体染色体 ade+lac+ade lac ade+lac+两基因间无重组 ade+lac 两基因间有重组RF=ade+lac(ade+lac+)+(ade+lac)ade+lac ade+练习题:在接合试验中,有Hfr:a+b+strs F-:a b-strr 杂交,已知a、b基因控制营养需要,先将杂交菌株接在有链霉素的完全培养基上生长,然后在不同的培养基上测试100个菌落,结果如下:添加a物质得40个菌落;添加b物质,得20个菌落;基本培养基得10个菌落。分别写出这三种菌落的基因型

26、,基因a和b之间的重组率是多少?加入a物质:a-b+a+b+40加入b物质:a+b-a+b+20基础培养基:a+b+10Hfr a+b+strs F-a-b-strra和 b基因重组频率=基因b先进入,a后进入。重组体基因型:a+b+;a+b-;a-b+;a+b+a+b-a+b-a+b+a-b+a+b-F因子:整合到E.Coli染色体上的F 因子环出时偶尔不够准确,携带了E.Coli的一些基因,这种F 因子称为F因子。性导:接合时由F因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。9.F 因子与性导10.转化的概念转化:细菌通过细胞膜摄取周围外源DNA片段,通过同源重组将其整合到自己染色体的过

27、程。转化的主要步骤 双链DNA分子与细胞表面感受位点进行可逆性结合。供体DNA片断被吸入受体细胞。进入受体细胞的供体DNA转为单链,其中一条链被降解。未被降解的一条链部分或整个插入受体细胞的DNA中,代替受体染色体同源部分,形成杂合的异源双链。杂合的DNA经复制可以形成亲代类型和重组类型的DNA,导致转化细胞的形成。莱德伯格等用枯草杆菌进行转化和重组试验:DNA 片段与受体染色体重组,紧密连锁的两个基因有较多的机会同时整合到受体染色体中。11.转化作图trp-tyr 的重组率的重组率RF转化生成的转化子及重组率计算重组片段连锁片段重组率越低,并发转化频率越高连锁越紧密 196+328 196+

28、328+36710058.8%供体菌株 trp+his+tyr+受体菌株 trp-his-tyr-基因 转化子类别trp+-+his+-+-+tyr+-+-11940366068541826001071180基因间的重组亲本型(+)重组型(+-和-+)重组值(重组数/总数)trp-his11940+1180=131202600+107+3660+4186785/19905=0.34trp-tyr11940+107=120472600+1180+3660+6858125/20172=0.40his-tyr11940+3660=15600418+1180+685+1072390/17990=0.1

29、3133440trphistyr例题:12.细菌的转导与作图以噬菌体为媒介,把一个细菌的遗传物质导入另外一个细菌的的过程。13.普遍性转导与作图供体 leu+thr+azis 受体 leu thr azir实验 选择基因 未选择基因(并发转导率)1 leu+50 azir,2 thr+2 thr+3 leu+,0 azir 3 leu+thr+0 azi razi thrleu结论 leu azi 较近 thr leu 相邻 azi 在边上 利用并发转导频率测定基因的连锁关系:习题:在以P1噬菌体进行的普遍性转导系统中,供体菌株的基因型为purnadpdx,受体菌为purnadpdx。转导后,

30、首先以供体基因pur为选择基因,然后针对其他等位基因对其中50个pur转导子进行筛选,结果如下基因型 菌落数nad pdx 3nad pdx 10nad pdx 24nad pdx 13 pur+和nad+基因的并发转导频率是多少?pur+和pdx-的并发频率是多少?在其他两个座位中哪一个距离pur最近?(3+10)/50=26%(10+13)/50=46%pdxF+和Hfr的相同点是:(10+13)/50=46%(2)supC+trpA+pyrF-114A b2维持型甲基转移酶,需以半甲基化的双链 DNA 为模板,指导新合成的链甲基化;pur+和nad+基因的并发转导频率是多少?性导:接合时

31、由F因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。A C C T C A C错配修复:GA*TC基因型 噬菌斑数MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约1925nt的非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3UTR区完全或部分互补,剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因的表达。未携带F因子的菌株为受体菌或雌性,用F表示。以噬菌体为媒介,把一个细菌的遗传物质导入另外一个细菌的的过程。核外遗传的概念和特点2 thr+3 leu+,0 azir2)F+F的后代常为F+,而HfrF的后代为F;凡是能够刺激机体的免疫系统产生抗体,并且能够和相应的抗体发生特

32、异性结合反应的物质重组现象:用两种突变型噬菌体同时感染同一宿主菌,两个噬菌体DNA可以发生交换,产生基因重组。习题:从A到E为源于同一大肠杆菌F菌株的5个Hfr株,括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F受体菌所需的时间按功能分为主要组织相容性抗原和次要组织相容性抗原。T2噬菌体的两个rII不同突变体,不能存活大肠杆菌K()转化子类别这个杂交的并发系数是?它意味什么?以S(rr)作母本与五种可育个体杂交结果用不同的rII突变型成对组合同时去感染大肠杆菌K()supC-trpA-pyrF-母性影响的性状受母本核基因控制,有持久性的,也有短暂性的。当顺式有功能,而反式没有功能时,突变位点突变位点

33、在同一顺反子内;缺失(deletion)大肠杆菌 供体 trpA+supC+pyrF+受体 trpA-supC-pyrF-P1噬菌体作为载体进行转导,supC+为选择标记,得到转导子类型和数目如下:(1)supC+trpA+pyrF+36(2)supC+trpA+pyrF-114 (3)supC+trpA-pyrF+0(4)supC+trpA-pyrF-453supC+和trpA+共转导频率?supC+和pyrF+共转导频率?为啥(3)的数目为0?例题(1)supC+trpA+pyrF+36(2)supC+trpA+pyrF-114 (3)supC+trpA-pyrF+0(4)supC+trp

34、A-pyrF-453supC+trpA+pyrF+supC-trpA-pyrF-双交换双交换supC+trpA+pyrF+频率最低的转导子3个基因中,两边的应为供体基因,中间的为受体基因。supC+trpA+pyrF+supC-trpA-pyrF-双交换双交换supC+trpA+pyrF-supC+trpA+pyrF+supC-trpA-pyrF-四交换四交换supC+trpA-pyrF+supC+trpA+pyrF+supC-trpA-pyrF-双交换双交换supC+trpA-pyrF-supC+和和trpA+共转导频率共转导频率 36+114/603=0.25supC+和和pyrF+共转导

35、频率共转导频率 36/603=0.06比较接合、性导、转化、转导的异同 相同之处是:都是细菌的遗传物质DNA在不同的细菌细胞之间传递,从而使受体细胞遗传物质发生重组。不同之处是:接合:是由于F因子的整合产生Hfr菌株,在F因子进行转移时,供体菌遗传物质也被带入受体菌,实现重组。性导:是Hfr菌株中F因子的错误环出,产生了携带有供体菌遗传物质的因子,接合时随 因子的转移而使供体菌遗传物质导入到受体菌中。转化:是裸露的DNA直接与处于感受态的细胞之间的互作,进入受体细胞,发生重组。转导:是细菌的一段染色体被错误地包装在噬菌体的蛋白质外壳内,并通过感染而转移到另一个受体菌内。转化接合性导转导是否有性

36、因子无FF无是否需要载体无无无噬菌体细菌之间是否需要接触否需要需要否吸收DNA的方式单链吸收边转移边复制的滚环模式边转移边复制的滚环模式噬菌体直接注入菌体的状态受体菌感受态供体:Hfr,受体F-供体:F;受体F-噬菌体侵染范围是否形成部分二倍体外源DNA不复制的单链会会会是否整合到自身染色体上是是是是第十五章 病毒的遗传分析噬菌体概念和分类;Benzer的重组测验原理和基本过程;互补测验的原理和方法1.噬菌体:感染细菌并以细菌为宿主的病毒。根据噬菌体与宿主的关系,将噬菌体分为:烈性噬菌体:感染宿主细胞后就进入裂解反应,使宿主细胞裂解,如大肠杆菌T噬菌体系列。温和噬菌体:感染宿主细胞后具有裂解和

37、溶源两种发育途径,如P1和噬菌体。2.重组现象:用两种突变型噬菌体同时感染同一宿主菌,两个噬菌体DNA可以发生交换,产生基因重组。根据子代出现重组子数量,可进行噬菌体的重组分析。rIIA1 mutantrIIA2 mutant单独感染E.coli K()单独感染E.coli K()混合感染E.coli B能正常生长不能正常生长不能正常生长 K()T2噬菌体的两个rII不同突变体,不能存活大肠杆菌K()3.Benzer的重组测验赫尔希.本兹尔(S.Benzer)用T2突变型进行了重组研究。T2中有两种突变型。rx+ry E.coli B板接种B板 K()板 计数两种r突变类型:(rx+)和(+r

38、y)rx+、+ryrxry、+均能生长 唯一生长混合感染+rx +ry +只有野生型能在K()板生长突变型和野生型能在B板生长rxry的数量与+相同,计算时+噬菌体数2重组值 100重组噬菌斑数 总噬菌斑数 100在K()上生长的噬菌斑数2在B上生长的噬菌斑数重组子:rxry;+亲本:(rx+)和(+ry)重组值计算:例题:有两个T4噬菌体的rII突变体,用时感染大肠杆菌B后裂解,将其裂解液稀释成为6x107倍之后,感染E.coli B后做成平板,产生18个斑;另一种将其裂解液稀释6x105倍之后,感染E.coli K后,做成平板得到14个斑,计算两个基因的重组值?100在K()上生长的噬菌斑

39、数2在B上生长的噬菌斑数例题:用T4病毒的两个品系感染大肠杆菌,一个品系是小噬菌斑(m)、快速溶菌(r)和噬菌斑浑浊(tu)的突变型;另外一个品系对这三个标记都是野生型(+)。将上述感染的溶菌产物涂平板,结果如下:基因型基因型 噬菌斑数噬菌斑数m r tu 3467+3729m r +853m +tu 162m +520+r tu 474+r +172+tu 965 10342测定m-r,r-tu,m-tu的连锁距离 3个基因的连锁顺序这个杂交的并发系数是?它意味什么?RF(m-r)=162+172+520+474/10342=12.84%RF(r-tu)=162+172+520+474/10

40、342=20.81%RF(m-tu)=853+965+520+474/10342=33.6%并发系数=实际双交换/理论双交换实际双交=162+172/10342=3.22%理论双交换=12.84%*20.81%=2.67%并发系数=1.21用不同的rII突变型成对组合同时去感染大肠杆菌K()4.互补测验的原理和方法rII突变型ArII突变型B突变型在同一基因突变型在不同基因大肠杆菌K()A b1 A b2 a1 BA b2相 依 为 命!同病相连同病相连 互惠互利互惠互利无 能 为 力!互补测验原理两个致死突变位于不同基因两个致死突变位于同一基因免疫球蛋白:具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球

41、蛋白;(ade+lac+)+(ade+lac)2390/17990=0.以噬菌体为媒介,把一个细菌的遗传物质导入另外一个细菌的的过程。ade+lac点突变(point mutation)烈性噬菌体:感染宿主细胞后就进入裂解反应,使宿主细胞裂解,如大肠杆菌T噬菌体系列。正交和反交的遗传表现不同,F1通常只表现母本的性状;由细胞质中附加体或共生体决定的性状,其表现往往类似病毒的转导或感染,即可传递给其它细胞;2)杂交时都要通过接合管和受体菌连接;顺式(cis):两个突变同时排在一条“染色体”上,而另一条“染色体”上两个位点均正常;S(rr)不育N(rr)可育 S(rr)不育A C C N C A C形态、生化、致死、渗漏、中性突变不同基因座 同一基因座 功能互补效应具有 不具有 突变位点 处于 顺式(cis):两个突变同时排在一条“染色体”上,而另一条“染色体”上两个位点均正常;反式(trans):两个突变分别位于两条“染色体”上;顺反测验:指将两个突变分别处于顺式和反式,根据其表型确定两个突变是否是同一基因的试验。顺式测验反式测验突变位点在同一顺反子内突变位点不在同一顺反子内+当顺式有功能,而反式没有功能时,突变位点突变位点在同一顺反子内;当顺式有功能,而反式也有功能时,突变位点突变位点在不同顺反子内。谢谢观看!

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