酶工程学第十一十二周分子修饰教学课件.ppt

1、酶工程学第十一十二周分子修饰文档ppt第六章 酶分子修饰通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。酶分子侧链基团的化学修饰：使酶分子的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。定义：定义：酰化试剂可被修饰的氨基酸残基侧链例如：丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS烷基化试剂可被修饰的氨基酸残基侧链R X：2，4二硝基氟苯，DNFB2，4二硝基氟苯，DNFB多肽序列分析法：Sanger N-端序列分析法，1945年核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修饰核糖核酸酶四、大分子化学修饰的优点右旋糖酐-SOD：t1/2=7h右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗

2、糖聚合物、聚氨基酸等丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS酶工程学第十一十二周分子修饰文档pptO2-+O2-+2H+=H2O 2+O2很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构象得到保护。2，4二硝基氟苯，DNFB通过修饰降低或消除酶的抗原性聚乙二醇-SOD：t1/2=35h246三硝基苯酚246三硝基苯酚SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构象得到保护。大分子化学修饰是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一Na2S4O6：连四硫

3、酸钠可被修饰的氨基酸残基侧链多肽序列分析法：Sanger N-端序列分析法，1945年Na2S4O6：连四硫酸钠四硝基甲烷二硫二硝基苯甲酸二硫二硝基苯甲酸4，4二硫二吡啶二硫二吡啶对氯汞苯甲酸对氯汞苯甲酸2氯汞氯汞4硝基苯酚硝基苯酚N-乙基马来酰亚胺乙基马来酰亚胺过氧化氢氧化过氧化氢氧化氨基的化学修饰氨基的化学修饰乙酸酐乙酸酐246三硝基苯酚三硝基苯酚24二硝基氟苯二硝基氟苯碘代乙酸碘代乙酸还原烷基化还原烷基化丹磺酰氯丹磺酰氯碳二亚胺碳二亚胺硼氟化三甲锌盐硼氟化三甲锌盐酯化酯化焦炭酸二乙酯焦炭酸二乙酯碘乙酸碘乙酸碘化反应碘化反应胍基的化学修饰胍基的化学修饰丁二酮丁二酮12环己二酮环己二酮苯乙二

4、醛苯乙二醛RNADNA2OH脱氧腺苷酸脱氧腺苷酸2，4二硝基氟苯，DNFBSOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。246三硝基苯酚SOD作用：保护DNA，蛋白质和细胞膜2，4二硝基氟苯，DNFB四、大分子化学修饰的优点Na2S4O6：连四硫酸钠Na2S4O6：连四硫酸钠四、大分子化学修饰的优点四、大分子化学修饰的优点多肽序列分析法：Sanger N-端序列分析法，1945年右旋糖酐-SOD：t1/2=7h2氯汞4硝基苯酚丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS四、大分子化学修饰的优点很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构

5、象得到保护。SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。四、大分子化学修饰的优点SOD作用：保护DNA，蛋白质和细胞膜举例：超氧化物岐化酶（SOD）二、常用的修饰剂右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等右旋糖酐肝素聚蔗糖聚赖氨酸聚乙二醇三、修饰方法修饰酶四、大分子化学修饰的优点四、大分子化学修饰的优点1.1.通过修饰提高酶的活性通过修饰提高酶的活性核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修饰核糖核酸酶 1 ：2.25胰凝乳蛋白酶 Vs 右旋糖酐修饰胰凝乳蛋白酶 1 ：5.12.2.通过修饰增强酶的稳定性通过修饰增强

6、酶的稳定性酶的半衰期t1/2：酶的活力降低到原来活力一半时所经过的时间。很多修饰剂分子具有多个活性基团，常与酶形成多点交联，使酶的空间结构稳定，特别是使酶活性中心的构象得到保护。举例：超氧化物岐化酶（举例：超氧化物岐化酶（SODSOD）O2-+O2-+2H+=H2O 2+O2SOD作用：保护DNA，蛋白质和细胞膜SOD药用：类风湿性关节炎，白内障，膀胱炎，皮肤炎，红斑狼疮等。SOD静脉注射：t1/2=630min右旋糖酐-SOD：t1/2=7h聚乙二醇-SOD：t1/2=35h3.3.通过修饰降低或消除酶的抗原性通过修饰降低或消除酶的抗原性当外源蛋白非经口进入人或动物体内后，体内血清中就可能出

7、现与此外源蛋白特异性结合的物质，这些物质称为抗体，能引起体内产生抗体的物质称为抗原。大分子化学修饰是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一2，4二硝基氟苯，DNFB246三硝基苯酚酶分子侧链基团的化学修饰：使酶分子的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。1 ：2.通过修饰降低或消除酶的抗原性四、大分子化学修饰的优点核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修饰核糖核酸酶右旋糖酐-SOD：t1/2=7h聚乙二醇-SOD：t1/2=35h2，4二硝基氟苯，DNFB可被修饰的氨基酸残基侧链1 ：5.SOD静脉注射：t1/2=630min2，4二硝基氟苯，DNFB丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS四、大分子化学修饰的优点246三硝基苯酚2，4二硝基氟苯，DNFB乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid)配位键：猪肝尿酸酶用白蛋白修饰猪肝尿酸酶用白蛋白修饰:最适最适pH由天然酶的由天然酶的10.5,下降到下降到7.48.5谢谢观看！