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14章棒状杆菌检验课件.ppt

1、种类 白喉棒状杆菌(C.diphtheriae)假白喉棒状杆菌(C.pseudodiphtheriticum)干燥棒状杆菌(C.xerosis)化脓棒状杆菌(C.pyogenes)溃疡棒状杆菌(C.ulcerans)假结核棒状杆菌(C.pseudotuberculosis)溶血棒状杆菌(C.haemolyticum)J-K 群棒状杆菌(C.jeikeium-CDC group JK)第14章 棒状杆菌属?致病物质 1、白喉外毒素?毒力强?抗原性强?编码外毒素的tox基因-棒状杆菌噬菌体 一、临床意义 第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae 作用机制:作用机制:-影响蛋白质的合成 作用

2、特点:?作用于多种细胞,心肌、神经细胞均有毒素受体?肿瘤细胞对此毒素敏感 2、索状因子 细菌表面的一种糖脂,能破坏细胞的线粒体,影响细胞的呼吸与磷酸化 3、K抗原?细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白?抗吞噬?有利于细菌在黏膜表面的定植?所致疾病所致疾病 白喉(急性呼吸道传染病)传染源:患者及带菌者 传播途径:飞沫或污染的物品 临床表现:?局部炎症:炎性渗出,坏死,纤维蛋白 假膜窒息?全身中毒症状?外周N-N炎:膈肌麻痹-呼吸困难 声带麻痹-声音嘶哑 咽肌麻痹-吞咽困难?心肌-心肌炎 白喉假膜白喉假膜?感染后机体可获得牢固的免疫力?机体还可通过其它方式获得免疫力:?六月以下婴儿-母亲?成人-隐性感染、

3、人工主动免疫?易感者:?24岁儿童?成人-也有可能?免疫性:免疫性:二、生物学特性二、生物学特性 形态与染色:?G+细长微弯的杆菌?一端或两端膨大呈棒状?常排列呈V、L、X等文字形?异染颗粒形态上的鉴别特征?无荚膜、无芽胞、无鞭毛 白喉棒状杆菌异染颗粒 1000 培养特性?营养要求高?吕氏(Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面:?形成灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落 BAP中菌落 BAP(血琼脂平板)(血琼脂平板)?菌落灰白色、光滑型,直径12mm、有狭窄溶血环(轻型)?多次传代后菌体变为球形 亚碲酸钾BAP(选择鉴别培养基)?黑色菌落鉴别依据?根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为:重

4、型、中间型、轻型?不同菌型还原能力不同,呈现黑色或灰黑色菌落 白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落 三、微生物学检验三、微生物学检验 检验程序 见图14-3 标本采集 分泌物,取双份 直接涂片染色镜检:?23张涂片革兰染色、异染颗粒染色 镜检初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”早期诊断?用无菌棉拭子浸以动物血清,采集标本,3710h,涂片染色镜检提高阳性率 分离培养与鉴定分离培养与鉴定 1、分离培养、分离培养?吕氏血清斜面:吕氏血清斜面:37、812h 涂片染色镜检涂片染色镜检-检出率要比直接涂片高,有助于快速诊断检出率要比直接涂片高,有助于快速诊断?亚碲酸钾亚碲酸钾BAP:37、2448h,黑色

5、菌落,黑色菌落?BAP:轻型有轻型有溶血环,应注意与溶血环,应注意与溶血性链球菌溶血性链球菌鉴鉴别别 2、鉴定?形态染色、菌落特点、生化反应?糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 鉴别棒状杆菌属不同的种 3、毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据)、毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据)?体外法:?琼脂平板毒力试验(Elek平板毒力测定)?SPA协同凝集试验?对流电泳?体内法:用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验 对流免疫电泳 琼脂平板毒力试验-Elek平板 白喉抗毒素 待测菌 白喉抗毒素 标准产毒株 阴性菌(-)待测菌(+)待测菌(-)(五)免疫力测定 1、锡克试验(Schick test)白喉外毒素皮内试验?调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力?根据外毒素与抗毒素中和的原理,以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素?缺点观察时间长、操作繁琐,不易进行广泛测试 2、致敏红细胞凝集试验、致敏红细胞凝集试验?测定血清中抗毒素水平?0.1ml血清,倍比稀释+外毒素致敏红细胞,37、1h后观察结果?敏感度可达10-4单位,简便快速

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