第十九章流感Influenza与禽流感AvianInfluenza课件.ppt

1、流感流感 Influenza与与禽流感禽流感Avian Influenza流感流感侵入人体的魔鬼侵入人体的魔鬼“Influenza”“被魔鬼侵入被魔鬼侵入”据据WHO提供的材料，目前得到确证的第提供的材料，目前得到确证的第1次流感大流行是次流感大流行是在在1918年的欧洲大陆。年的欧洲大陆。1915年春，英格兰就发现了零星的流感病人。到年春，英格兰就发现了零星的流感病人。到1917年，欧年，欧洲大陆也发现少量流感患者。洲大陆也发现少量流感患者。1918年美国被卷入战争。大年美国被卷入战争。大批运输船将美国士兵从大西洋彼岸运到欧洲。在批运输船将美国士兵从大西洋彼岸运到欧洲。在1个多月个多月的海上

2、航行期间，流感病毒在美军士兵中肆虐。幸存的士的海上航行期间，流感病毒在美军士兵中肆虐。幸存的士兵又将流感病毒带到欧洲战场，引发了欧洲乃至世界的流兵又将流感病毒带到欧洲战场，引发了欧洲乃至世界的流感大流行。感大流行。全世界在这次流感大流行中死亡人数高达全世界在这次流感大流行中死亡人数高达4-54-5千万千万 西班牙西班牙流感流感流感流感 Influenza 此后，流感又有此后，流感又有2 2次世界性大流行次世界性大流行:19571957年年 1958 1958年年 香港香港 亚洲亚洲流感流感 200200万万 19681968年年 1969 1969年年香港香港 香港流感香港流感 100万万 此

3、外，在不同国家和地区，流感还有较小的流行。此外，在不同国家和地区，流感还有较小的流行。急性呼吸道传染病急性呼吸道传染病:骤发高热、头痛、全身酸痛、乏力及骤发高热、头痛、全身酸痛、乏力及轻微呼吸道症状。轻微呼吸道症状。流感病毒尤其是甲型流感病毒，易发生变异，而且传染性流感病毒尤其是甲型流感病毒，易发生变异，而且传染性强，传播迅速，易引起流行强，传播迅速，易引起流行epidemic及大流行及大流行pandemic。流感病毒经流感病毒经空气飞沫空气飞沫传播，人群普遍易感。传播，人群普遍易感。流感病毒属正粘病毒科，病毒颗粒呈球形，直径为流感病毒属正粘病毒科，病毒颗粒呈球形，直径为80-12080-12

4、0nmnm。病毒。病毒基因组是分节段的基因组是分节段的（甲，乙型毒株含（甲，乙型毒株含8 8个节段，而丙型仅含个节段，而丙型仅含7 7个节段，少一个编码神经氨酸个节段，少一个编码神经氨酸酶蛋白的节段），酶蛋白的节段），-ssRNA。根据病毒粒根据病毒粒核蛋白（核蛋白（NPNP）和膜蛋白（和膜蛋白（MPMP）抗原特性及抗原特性及其基因特性其基因特性不同，流感病毒分为甲、乙、丙三型。不同，流感病毒分为甲、乙、丙三型。乙、丙乙、丙型只感染人型只感染人类。类。甲型流感病毒可甲型流感病毒可感染人及其他感染人及其他物种。又可以分成物种。又可以分成H H1-15 1-15 N N1-91-9亚型。理论上甲型

5、流感可分为亚型。理论上甲型流感可分为135135种之多。种之多。流感流感病毒病毒 Influenza virusn19181918年年 西班牙流感西班牙流感 H H1 1N N1 1n19571957年年 香港流感香港流感 H H2 2N N2 2n19681968年年 香港流感香港流感 H H3 3N N2 2侵入人体的魔鬼侵入人体的魔鬼流感流感 流感病毒不耐热流感病毒不耐热,在在5656以上的环境中数以上的环境中数minmin即失即失去致病力去致病力,酸、乙醚、甲醛、紫外线和各种消毒剂酸、乙醚、甲醛、紫外线和各种消毒剂如酒精、石炭酸和漂白粉等均可使病毒灭活。如酒精、石炭酸和漂白粉等均可使病

6、毒灭活。甲型流感病毒命名法甲型流感病毒命名法：型别型别/宿主宿主/分离地点分离地点/毒株序号（指采样时标本毒株序号（指采样时标本号）号）/分离年代（血凝素和神经氨酸酶亚型），如分离年代（血凝素和神经氨酸酶亚型），如:A/A/马马/黑龙江黑龙江/1/98/1/98（H3N8H3N8）致病机制致病机制 感染鼻黏膜的纤毛上皮细胞感染鼻黏膜的纤毛上皮细胞侵犯气管、支气管侵犯气管、支气管遇到以往抗体；遇到以往抗体；若不同，若不同，V V进入细胞进入细胞进行性感染，进行性感染，12 d内引起呼吸道炎症内引起呼吸道炎症细胞细胞病变病变坏死、崩解；坏死、崩解；炎症反应有助于血液成分外渗（免疫细胞、抗体等）灭活

7、炎症反应有助于血液成分外渗（免疫细胞、抗体等）灭活V或破坏感染或破坏感染的细胞的细胞缩短病程；缩短病程；发病初期发病初期13 d鼻咽分泌物中含大量病毒鼻咽分泌物中含大量病毒传染性最强，病程数天；传染性最强，病程数天；少数患者病毒向下呼吸道扩散少数患者病毒向下呼吸道扩散间质性肺炎；间质性肺炎；流感引起的死亡多为继发性细菌感染或体质弱并患其它慢性疾病。流感引起的死亡多为继发性细菌感染或体质弱并患其它慢性疾病。特异性免疫特异性免疫体液免疫体液免疫HAHA抗体结合并覆盖病毒吸附位点；（抗体结合并覆盖病毒吸附位点；（NA抗体抑制抗体抑制V释放）释放）细胞免疫细胞免疫CTLCTL 流感病毒的变异流感病毒的

8、变异 抗原飘移抗原飘移 antigenic drift 编码表面抗原（编码表面抗原（HA、NA）基因点突变累积导基因点突变累积导致抗原位点的改变，属量变，变异幅度小。致抗原位点的改变，属量变，变异幅度小。epidemic 抗原转变抗原转变 antigenic shift 由于基因组重排导致新的亚型出现，由于基因组重排导致新的亚型出现，属质变，变异幅度大属质变，变异幅度大流感病毒的变异流感病毒的变异pandemicA H1N1预防预防措施措施n减少与禽类接触减少与禽类接触 n养成养成良好良好个人卫生个人卫生习惯习惯 n切勿切勿食用食用未烹煮的未烹煮的肉类肉类 n减少减少出入公共出入公共场所场所

9、n均衡饮食，适当运动，提升自身免疫力均衡饮食，适当运动，提升自身免疫力n出现出现疑似症狀，疑似症狀，依依指示戴口罩指示戴口罩就医就医2008年年11月月2-3日在北京召开日在北京召开 甲型甲型H1N1流感预防流感预防禽流感禽流感(Avian Influenza)Avian Influenza Virus(AIV)n禽类禽类的病毒性流行性感冒的病毒性流行性感冒 n由由A A型流感病毒引起型流感病毒引起禽类的一种从禽类的一种从呼吸呼吸系统到系统到严重严重全身全身败败血症等多血症等多中中症狀的症狀的传染病，禽类传染病，禽类在感染在感染后后死亡率很高死亡率很高 n禽流感的禽流感的病症及发病病症及发病初

10、期，都初期，都与与一般流感一般流感类类似，但似，但发烧发烧可高至可高至4141度，且度，且较较一般流感容易一般流感容易影响影响肝功能，也肝功能，也较较易引致淋巴細胞減少及呼易引致淋巴細胞減少及呼吸衰竭，甚至多器官功能衰竭而死亡吸衰竭，甚至多器官功能衰竭而死亡兽医焚烧已感染禽流感鸡鸭的尸体兽医焚烧已感染禽流感鸡鸭的尸体 法国让泽农民在一家农场检查鸡法国让泽农民在一家农场检查鸡 美国疾病控制和预防中心公布的一张未标明日期的彩美国疾病控制和预防中心公布的一张未标明日期的彩色电子显微照片。它显示出色电子显微照片。它显示出H5N1型禽流感病毒（金型禽流感病毒（金黄色）在黄色）在MDCK细胞（绿色）培养液

11、中的活动状态细胞（绿色）培养液中的活动状态放大放大15万倍的万倍的H5N1型禽流感病毒电镜照片型禽流感病毒电镜照片国际国际疫情疫情地区地区(时间时间)感染数感染数死亡数死亡数越南越南1061065252泰国泰国30302020柬埔寨柬埔寨7 77 7埃及埃及50502222阿塞拜疆阿塞拜疆8 85 5香港香港20207 7印尼印尼137137112112 土耳其土耳其12124 4人人全球全球 387人感染人感染 死死245人人（从（从20032008/9）中国大陆中国大陆 25人人 17人人禽流感病毒禽流感病毒于环于环境中存活情形境中存活情形 WHOWHO研究指出研究指出禽流感病毒禽流感病毒

12、能能长长期存活在期存活在受感染的禽受感染的禽类粪类粪便、水和便、水和纸纸巾中，且在巾中，且在低温环境低温环境中存活中存活时间时间更久，如更久，如在水中在水中于于2222可生存可生存4d4d，00以下生存以下生存30d30d；在冰在冰冻物品冻物品中更可中更可无无限期生存限期生存。NATURE|2003(6 MAR):422H5N1H3N2 H1N1基因转变禽禽人人(H5N1 具具人体人体接受器接受器)猪猪传染途径传染途径 n消化消化道、呼吸道、道、呼吸道、皮肤损伤皮肤损伤和眼和眼结膜等途径结膜等途径，主要主要经经由呼吸道由呼吸道粘液或粪便直接接触传染粘液或粪便直接接触传染或或间间接由污染的水及接

13、由污染的水及饲料饲料等等传传播播。n有有专家认为专家认为主要是主要是通过粪便通过粪便中大量的病毒粒中大量的病毒粒子污染子污染空气而传播空气而传播，人，人员员和车辆和车辆往來是往來是传播传播禽流感的重要因素，另外吸血昆禽流感的重要因素，另外吸血昆虫可传虫可传播病播病毒，毒，带带毒的毒的种种蛋可進行蛋可進行垂直传播垂直传播。n水棲候水棲候鸟鸟在自然界中在自然界中携携帶帶H H5 5N N1 1病毒最多病毒最多。禽流感禽流感潜伏潜伏期期 n感染禽流感感染禽流感临床症状潜临床症状潜伏期伏期从几从几小時到小時到几几天不等天不等n一般一般发发病率高、死亡率低病率高、死亡率低n但在高致病力毒株感染但在高致病

14、力毒株感染时，发时，发病率和死病率和死亡率可亡率可达达100%100%禽流感禽流感症状症状n人类人类患上禽流感患上禽流感后后，潜伏期一般为，潜伏期一般为7(1-4)d以內，以內，早期早期症状与症状与其它流感非常相似，主要其它流感非常相似，主要表现为发热表现为发热、流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头头痛、全身不痛、全身不适时适时，部分患者可有部分患者可有结结膜炎、膜炎、恶恶心、腹痛、心、腹痛、腹泻腹泻、稀水、稀水样便样便等消化道症狀，等消化道症狀，通常通常27d內会自然痊愈內会自然痊愈n年龄较年龄较大、大、治疗过迟治疗过迟的患者的患者病情病情会会迅速迅速发展成进发展成进行性行性肺

15、炎、急性呼吸窘迫肺炎、急性呼吸窘迫综合征综合征、肺出血、胸、肺出血、胸腔腔积积液、全血細胞減少、液、全血細胞減少、肾肾衰竭、衰竭、败败血症休克及血症休克及Reye综综合征等合征等多种并发多种并发症而死亡症而死亡 禽流感的治禽流感的治疗疗n以下抗病毒以下抗病毒药剂药剂可抑制流感病毒，使症狀可抑制流感病毒，使症狀减轻减轻病程病程缩短，应在缩短，应在发病发病初期初期24-48h服用，服用，方能有效控制病情方能有效控制病情n金刚胺金刚胺(amantadine):仅对仅对A型流感有效，型流感有效，会会产生神经及肠胃产生神经及肠胃系統副作用，抗系統副作用，抗药药性高，使性高，使用需注意用需注意nRiman

16、tadine:仅对仅对A型流感有效，抗型流感有效，抗药药性高性高n克流感克流感(tamiflu):副作用副作用较较低低食品安全食品安全n一般只要以一般只要以56加热加热3h、60加热加热30min或或100加热加热1min均可均可杀灭杀灭病毒病毒;n只要只要将鸡肉将鸡肉、鸡、鸡蛋等食品蛋等食品确实确实煮熟食用煮熟食用，且充分且充分加热加热就可以就可以减少减少被感染的被感染的几率。几率。n禽流感病毒致病力的变化范围很大。流感病禽流感病毒致病力的变化范围很大。流感病毒感染引发的疾病可能是不明显的或是温和毒感染引发的疾病可能是不明显的或是温和的一过性的综合征，甚至是的一过性的综合征，甚至是100%发

17、病率和发病率和/或死亡率的疾病。或死亡率的疾病。n疾病的症状可能表现在呼吸道、肠道或生殖疾病的症状可能表现在呼吸道、肠道或生殖系统，并随病毒种类、动物种别、龄期、并系统，并随病毒种类、动物种别、龄期、并发感染、周围环境及宿主免疫状态的不同而发感染、周围环境及宿主免疫状态的不同而不同。不同。n禽流感病毒的毒力主要决定于病毒粒子的复禽流感病毒的毒力主要决定于病毒粒子的复制速率和血凝素蛋白裂解位点附近的制速率和血凝素蛋白裂解位点附近的。Avian Influenza Virus,(AIV)检测检测（1）高致病性禽流感：爆发时家禽大批急性）高致病性禽流感：爆发时家禽大批急性死亡，产蛋停止，呼吸道症状，

18、头部、颜面死亡，产蛋停止，呼吸道症状，头部、颜面部和颈部浮肿，无毛部皮肤（冠肉髯、脚部）部和颈部浮肿，无毛部皮肤（冠肉髯、脚部）发绀、肿、出血、坏死，白绿色下痢。发绀、肿、出血、坏死，白绿色下痢。（2）低致病性禽流感：无症状急性感染，死）低致病性禽流感：无症状急性感染，死亡率为亡率为5%15%，产蛋率下降，产蛋率下降5%50%，呼吸道病变、气管水肿、干酪样渗出物、气呼吸道病变、气管水肿、干酪样渗出物、气囊炎，肾脏肿大、尿酸盐沉着。囊炎，肾脏肿大、尿酸盐沉着。禽流感病毒禽流感病毒检测检测 仅根据临诊症状及剖检病变，很仅根据临诊症状及剖检病变，很难确诊，必须进行实验室诊断。难确诊，必须进行实验室诊

19、断。（1）病毒分离）病毒分离（2）血清学检测）血清学检测（3）病毒定型及定性）病毒定型及定性（4）致病性（毒力）的测定）致病性（毒力）的测定（5）基因诊断）基因诊断 （1）病毒分离）病毒分离 喉头、气管、肺、气囊、肝、脾、脑及直肠喉头、气管、肺、气囊、肝、脾、脑及直肠内容物等。（置于加有青霉素内容物等。（置于加有青霉素10000 U/ml，链霉素链霉素10000 U/ml组织培养液或组织培养液或50%葡萄糖磷酸盐缓冲液葡萄糖磷酸盐缓冲液中中4保存或运输，不超过保存或运输，不超过48h。）。）用上述溶液将病料制成用上述溶液将病料制成10%乳剂乳剂-70保存保存或或3000 rpm离心离心5min

20、，取上清液用取上清液用0.2-0.45um的滤的滤膜过滤除菌，取滤液膜过滤除菌，取滤液0.3ml，尿囊腔接种尿囊腔接种9-11日龄日龄SPF鸡胚，每份样品至少接种鸡胚，每份样品至少接种5个鸡胚。个鸡胚。实验室诊断实验室诊断（1）病毒分离）病毒分离 374d(剔除接种后剔除接种后24h内死亡鸡胚内死亡鸡胚)，置于，置于4 612h杀死鸡胚，吸取尿囊液，同时采取绒毛尿囊膜。杀死鸡胚，吸取尿囊液，同时采取绒毛尿囊膜。尿囊液中若含有尿囊液中若含有AIV时，时，HA试验呈阳性。试验呈阳性。若初代尿囊液若初代尿囊液HA试验呈阴性，需再传一代，试验呈阴性，需再传一代，取尿囊液取尿囊液1:10稀释接种稀释接种

21、0.3ml/胚，再呈阴性则判断为胚，再呈阴性则判断为阴性反应；若呈阳性，用阴性反应；若呈阳性，用ND抗血清进行抗血清进行HI试验，若试验，若呈阴性反应时再结合以下血清学诊断可初步判定为呈阴性反应时再结合以下血清学诊断可初步判定为AIV感染。感染。禽流感病毒禽流感病毒检测检测n利用利用AGP(琼脂凝胶扩散试验琼脂凝胶扩散试验)、ELISA方法可检测方法可检测A型流感病毒共有的特异性抗体或抗原，已鉴定的型流感病毒共有的特异性抗体或抗原，已鉴定的标准标准AIV制备的抗原可用检测可疑鸡群的血清抗体制备的抗原可用检测可疑鸡群的血清抗体（此步骤可在病毒分离前进行）。（此步骤可在病毒分离前进行）。n将上述病

22、毒分离时采用的鸡胚尿囊膜用将上述病毒分离时采用的鸡胚尿囊膜用PBS（pH=7.2）洗净，排尽囊中液体，研磨乳剂，反复冻融洗净，排尽囊中液体，研磨乳剂，反复冻融3次，次，3000rpm离心离心10min，取上清液，用终浓度取上清液，用终浓度0.1%的福尔马林经的福尔马林经3736h灭活，即可用作灭活，即可用作AGP抗抗原（原（3个膜可制做约个膜可制做约1ml抗原）。用已知的标准抗抗原）。用已知的标准抗血清与其进行血清与其进行AGP试验，鉴定分离病毒。试验，鉴定分离病毒。nH和和N亚型：确定亚型需用已定型（亚型：确定亚型需用已定型（H1H5，N1 N9）的一系列单特异性抗血清做的一系列单特异性抗血清做HI(血凝抑制血凝抑制)试验，因此应交专门机构进行。试验，因此应交专门机构进行。nHPAIV的判定标准（美国家畜卫生协会）的判定标准（美国家畜卫生协会）利用利用PCR方法直接检出病毒的基因，较常规的病毒方法直接检出病毒的基因，较常规的病毒分离法速度快，特异性高，而且可克服因野外取分离法速度快，特异性高，而且可克服因野外取料混有其他病毒造成的误诊。料混有其他病毒造成的误诊。检测检测