ABC转运载体及其对药动学影响-Mr解析课件.ppt

1、 ABCABC类转运体：类转运体：ATPATP结合盒结合盒(ATP-binding cassetteATP-binding cassette，ABC)ABC)类物质外排转运载体。类物质外排转运载体。底物：如糖、氨基酸、金属离子、多肽、蛋白质以及各底物：如糖、氨基酸、金属离子、多肽、蛋白质以及各种脂溶性物质。种脂溶性物质。ABCABC类载体是许多生命过程必须的，缺陷可以引起多种类载体是许多生命过程必须的，缺陷可以引起多种疾病或与多种疾病有关如囊性纤维化、神经系统疾病、疾病或与多种疾病有关如囊性纤维化、神经系统疾病、视网膜变性、胆固醇和胆汁转运缺失、贫血症和药物反视网膜变性、胆固醇和胆汁转运缺失、

2、贫血症和药物反应异常等。应异常等。特点：特点：与与ATPATP结合，利用结合，利用ATPATP跨膜转运物质。底物分子转运是跨膜转运物质。底物分子转运是单向的，通常是泵出细胞外。单向的，通常是泵出细胞外。结构上：结构上：ATP-ATP-结合域结合域,称之为核苷结合包称之为核苷结合包(NBF)(NBF)和跨和跨膜膜(TM)(TM)域，后者一般由域，后者一般由6 6个个-螺旋段组成。典型的螺旋段组成。典型的ABC ABC 载体有两个载体有两个NBF NBF 和两个和两个TMTM域域,NBF,NBF 存在于胞浆侧。存在于胞浆侧。发现发现48 48 个个ABC ABC 载体载体,这些基因根据区域的构成和

3、氨基这些基因根据区域的构成和氨基酸的同组关系分成酸的同组关系分成7 7个亚型。个亚型。许多许多ABCABC载体在脂质层的功能维持、脂肪酸转运和类载体在脂质层的功能维持、脂肪酸转运和类固醇类转运方面有重要的作用。固醇类转运方面有重要的作用。ABCABC药物转运载体（三大类型）药物转运载体（三大类型）ABCABC家族药物转运载体二级结构（家族药物转运载体二级结构（三大类三大类）NBDNBD：ATPATP核苷结合点核苷结合点三类三类ABCABC转运载体在极性细胞中的定位转运载体在极性细胞中的定位 一、一、P-P-糖蛋白糖蛋白(P-glycoprotein(P-glycoprotein：P-GP)P-

4、GP)，ABCB1/MABCB1/MDR1DR1 人人MDR1MDR3药物药物药物，脂质药物，脂质MDR基因基因MDR基因基因mdr1a/mdr1bmdr2 药物药物药物，脂质药物，脂质大鼠大鼠先与先与ATPATP结合，再水解是药物转运必需的。结合，再水解是药物转运必需的。不同的底物转运需要的不同的底物转运需要的ATPATP分子是不同的，分子是不同的，每转运一个药物分子出细胞每转运一个药物分子出细胞,需要需要0.3-30.3-3个个分子的分子的ATPATP。P-gpP-gp 催化循环催化循环P-GPP-GP转运柔红霉素转运柔红霉素(DNR)(DNR)跨膜两步过程跨膜两步过程。环孢素。环孢素A

5、A(CsA(CsA),XR9576(XR),XR9576(XR)和长春碱和长春碱 (VL)(VL)在细胞浆侧面阻断在细胞浆侧面阻断,维拉帕米维拉帕米(VER)(VER)在细胞外侧阻断在细胞外侧阻断(优先占领优先占领).).P-GP P-GP 底物底物 底物有秋水仙碱、阿霉素、长春碱、脂质、类固醇、底物有秋水仙碱、阿霉素、长春碱、脂质、类固醇、化学异物和多肽等，似乎无共性。化学异物和多肽等，似乎无共性。多数底物是两性分子。多数底物是两性分子。化合物脂溶性和氢键的数目决定底物与化合物脂溶性和氢键的数目决定底物与P-GPP-GP亲和力亲和力的重要参数。的重要参数。脂溶性大或脂溶性大或氢键数目多，氢键

6、数目多，P-GPP-GP的亲的亲和性高。和性高。电子供体基团间距离有一定范围是识别电子供体基团间距离有一定范围是识别P-GPP-GP结合点结合点必需的，至少其中一个必需的，至少其中一个2.5 2.5 0.3 0.3，另一个为，另一个为4.6 4.6 0.6 0.6 。P-GP P-GP 底物药物底物药物P-GP 抑制剂抑制剂 P-GPP-GP分布分布 与功能与功能肿瘤细胞：肿瘤细胞：多药耐药多药耐药正常体内：生理性屏障正常体内：生理性屏障 肠上皮肠上皮（药物吸收）（药物吸收）脑血管内皮细胞脑血管内皮细胞（药物转运）（药物转运）胆小管上皮细胞胆小管上皮细胞（药物排泄）（药物排泄）胎盘合胞体滋养细

7、胞胎盘合胞体滋养细胞（药物转运）（药物转运）血脑屏障血脑屏障（药物转运）（药物转运）在脑血管内皮细胞腔侧面表达丰富的在脑血管内皮细胞腔侧面表达丰富的P-GP,P-GP,成为许多药物难以通过血脑屏障的原因。成为许多药物难以通过血脑屏障的原因。l顽固性癫痫与顽固性癫痫与P-GPP-GP高表达有关，抑制高表达有关，抑制P-GP P-GP 的过度表达逆转癫痫耐药（氟桂的过度表达逆转癫痫耐药（氟桂利嗪）。利嗪）。l炎症下调炎症下调P-GPP-GP表达导致血脑屏障的通表达导致血脑屏障的通透性增加。透性增加。Fig.Western blot showed expression of P-gp from th

8、e cerebral cortex of normal rats and PTZ-kindled rats.n=3.(*p0.01 vs Normal)Fig.P-gp functional activity in hippocampus and cerebral cortex of normal rats and PTZ-kindled rats.Samples of 60min after a single dose of 0.2mg/kg Rh123.n=4.(*p0.05,*p0.01 vs Normal)Fig.Distribution of PB in brain tissues

9、of normal rats,kindled rats and kindled rats treated with CsA(5 mg/kg).Samples of 60min after a single dose of 10mg/kg PB.Data were expressed as ratio values as meanSD(n=4).(*p0.05,*p0.01 vs normal rats,#p0.05,#p0.01 vs kindled rats).肠上皮细胞肠上皮细胞（药物吸收）（药物吸收）保护机制保护机制 防止毒物由胃肠道进入体内。防止毒物由胃肠道进入体内。肠上皮细胞中肠上皮

10、细胞中P-GPP-GP分泌功能成为许多药分泌功能成为许多药物生物利用度低的原因之一物生物利用度低的原因之一,成为药物口成为药物口服吸收的障碍。服吸收的障碍。野生型小鼠灌胃野生型小鼠灌胃 50 mg/kg 50 mg/kg 紫衫醇约有紫衫醇约有95%95%的药物原型从粪中排泄的药物原型从粪中排泄.同时口服同时口服P-GPP-GP抑制剂抑制剂 环孢素环孢素A(50 mg/kg)A(50 mg/kg)32.4%,32.4%,PSC 833(50 mg/kg)PSC 833(50 mg/kg)12.5%,12.5%,GF120918(25 mg/kg)GF120918(25 mg/kg)6.2%,6.

11、2%,LY335979(80mg/kg)LY335979(80mg/kg)34.9%34.9%或或R101933(80 mg/kg)R101933(80 mg/kg)73.6%73.6%。在在mdr1a/1bmdr1a/1b基因敲除小鼠，粪中原型排基因敲除小鼠，粪中原型排泄分数只有泄分数只有6%6%。l P-P-gPgP介导的药物外排，符合载体转运的特点，存在介导的药物外排，符合载体转运的特点，存在饱和特性饱和特性某些底物的某些底物的M-MM-M常数常数化合物 标本 表观Km（mol/l）环孢素 Caco-2(净B-A)3.8 地高辛 Caco-2(净B-A)58 大鼠空肠片(净-向A)81

12、大鼠回肠片(净-向A)74 大鼠结肠片(净B-A)51 人结肠片(净B-A)59 依托甙 Caco-2(净B-A)213 大鼠空肠片(净B-A)94 大鼠结肠片(净B-A)119 维拉帕米 大鼠空肠片(净B-A)31 大鼠回肠片(净B-A)29 大鼠结肠片(净B-A)4.4 长春碱 Caco-2(净B-A)19，27 大鼠回肠片(净B-A)48 大鼠结肠片(净B-A)100 对不同底物和剂量肠道对不同底物和剂量肠道P-GPP-GP作用不同作用不同 地高辛通常剂量是地高辛通常剂量是0.50.5到到1mg1mg，肠内的浓度不到，肠内的浓度不到1010 mol/lmol/l，低于，低于Km 58 K

13、m 58 mol/lmol/l。P-P-GpGp 在吸收方面在吸收方面有重要的意义，可能是该药物吸收程度地和变异大有重要的意义，可能是该药物吸收程度地和变异大的主要原因。的主要原因。剂量大于剂量大于50mg50mg，肠内药物浓度达到肠内药物浓度达到mmolmmol/l/l 水平水平，可能超过可能超过相应药物的相应药物的Km Km 值值，P-GPP-GP的活性处于饱和，的活性处于饱和，P-GPP-GP对药物吸收的贡献不大。对药物吸收的贡献不大。IndinavirIndinavir：P-GPP-GP的底物，剂量高达的底物，剂量高达 800mg800mg，肠内，肠内浓度超过浓度超过 1 mmol1

14、mmol/L,/L,远远大于远远大于Km 140 Km 140 mol/Lmol/L，p-p-GPGP的作用对的作用对贡献不大，仍然有好的生物利用度。贡献不大，仍然有好的生物利用度。一些药物如一些药物如环孢素（环孢素（200200700mg700mg）、紫杉醇、紫杉醇（100100200 mg200 mg），尽管剂量很高，由于），尽管剂量很高，由于这些这些药物的溶解度和释放度低，肠内的浓度低于药物的溶解度和释放度低，肠内的浓度低于KmKm值，但值，但P-GPP-GP对吸收的影响仍然很大。对吸收的影响仍然很大。某些药物吸收程度随剂量增加而增加如某些药物吸收程度随剂量增加而增加如(S S)-)-(

15、)-talinolol)-talinolol计量校正的计量校正的AUC AUC 由由 12.5 12.5 mg mg 剂量剂量的的18 18 g.g.h/lh/l 增加到增加到 200 mg 200 mg 剂量的剂量的3636 g.g.h/lh/l。图图6.6.人肠中不同部位人肠中不同部位P-gpP-gp和和villinvillin IOD ratio IOD ratio比值平均和变比值平均和变异异.1/2.1/2代表十二指肠代表十二指肠/近端空肠，近端空肠，3/4,5/6,3/4,5/6,和和7/8 7/8 分别代表分别代表中段至远端空肠，近端回肠支远端回肠。中段至远端空肠，近端回肠支远端回

16、肠。肠不同部位肠不同部位P-GPP-GP的表达不同的表达不同 胎盘屏障胎盘屏障 （药物转运）（药物转运）P-GP P-GP 存在于胎盘合胞体滋养层顶侧面膜，类似于血存在于胎盘合胞体滋养层顶侧面膜，类似于血脑屏障，防止有毒物质从母体进入胎儿。脑屏障，防止有毒物质从母体进入胎儿。在在P-GPP-GP缺陷或基因敲除动物，缺陷或基因敲除动物，avermectinavermectin,地高辛地高辛,saquinavirsaquinavir和和紫杉醇紫杉醇通透性增加通透性增加10102020倍。倍。对于多数治疗药物而言，在胎盘上的低通透性当然是对于多数治疗药物而言，在胎盘上的低通透性当然是需要的，但在有些

17、情况下，成为治疗上的障碍。如对需要的，但在有些情况下，成为治疗上的障碍。如对于于HIVHIV治疗，希望在婴儿出生前，有一个合适的治疗，希望在婴儿出生前，有一个合适的“负负荷剂量荷剂量”，降低在出生过程中，降低在出生过程中母母-婴婴H HIVIV感染频率。感染频率。二、多药耐药相关蛋白二、多药耐药相关蛋白（muitidrugmuitidrug resistance-associated protein,MRP resistance-associated protein,MRP）MRPMRP特点特点 研究发现研究发现9 9种亚型，其中前种亚型，其中前3 3种亚型研究较多。种亚型研究较多。为有机阴离

18、子转运载体，多数底物为为有机阴离子转运载体，多数底物为相代谢产物如葡萄糖相代谢产物如葡萄糖醛酸结合物或硫酸结合物。醛酸结合物或硫酸结合物。MRP1MRP1分布于肿瘤细胞分布于肿瘤细胞/血脑屏障，丙磺舒、磺吡酮、苯溴马血脑屏障，丙磺舒、磺吡酮、苯溴马隆为其抑制剂；隆为其抑制剂；MRP2MRP2主要分布于影响药物代谢动力学行为主要分布于影响药物代谢动力学行为的组织中，如肝细胞的胆管侧面、小肠上皮细胞的腔侧面、的组织中，如肝细胞的胆管侧面、小肠上皮细胞的腔侧面、肾近曲小管的腔侧面、脑血管内皮细胞的腔侧面等。其抑制肾近曲小管的腔侧面、脑血管内皮细胞的腔侧面等。其抑制剂主要有丙磺舒、环孢素、磺吡酮等。剂

19、主要有丙磺舒、环孢素、磺吡酮等。MRP3MRP3在肝、脑、肾、在肝、脑、肾、小肠等上皮细胞均有表达，丙磺舒、吲哚美辛、苯溴马隆等小肠等上皮细胞均有表达，丙磺舒、吲哚美辛、苯溴马隆等为其抑制剂。为其抑制剂。对药物吸收对药物吸收/排泄排泄/中枢转运均有影响。中枢转运均有影响。MRP MRP对药物吸收影响对药物吸收影响BergerBerger通过通过Caco2Caco2细胞证实小肠粘膜细胞证实小肠粘膜MRP2MRP2的存在，的存在，产生对产生对ochratoxinochratoxin A A（赭曲毒素）的外排作用而影（赭曲毒素）的外排作用而影响其吸收。响其吸收。ItagakiItagaki等研究发现

20、在小肠粘膜上皮细胞存在等研究发现在小肠粘膜上皮细胞存在MRP2MRP2的表达，丙磺舒对其表达有逆转作用，且能抑制的表达，丙磺舒对其表达有逆转作用，且能抑制phenolsulfonphthaleinphenolsulfonphthalein（酚磺酞）及（酚磺酞）及p-p-aminohippuricaminohippuric acid acid（对氨马尿酸）在小肠的分泌。（对氨马尿酸）在小肠的分泌。MRP MRP对药物排泄影响对药物排泄影响 Dietrich CGDietrich CG等报道，与正常等报道，与正常WistarWistar相比，在相比，在mrp2mrp2缺乏的大鼠，缺乏的大鼠，静脉注

21、射静脉注射PhIPPhIP后，胆汁中原药与代谢产物的量下降后，胆汁中原药与代谢产物的量下降4 4倍，而肝倍，而肝组织中药物浓度是正常大鼠的组织中药物浓度是正常大鼠的1.71.7倍，提示倍，提示MRP2MRP2可能介导了可能介导了该药的胆道排泄。该药的胆道排泄。抗癌药抗癌药CPT-11CPT-11的活性代谢产物可经胆汁排泄进入肠腔，从而的活性代谢产物可经胆汁排泄进入肠腔，从而引起胃肠道的毒副作用，该过程主要由引起胃肠道的毒副作用，该过程主要由MRPMRP介导，丙磺舒则介导，丙磺舒则能抑制该排泄过程，从而减轻其胃肠道的不良反应能抑制该排泄过程，从而减轻其胃肠道的不良反应1717。吲哚美辛、氯磺丙脲

22、、甲氨蝶呤、萘普生、酮洛芬、更昔洛吲哚美辛、氯磺丙脲、甲氨蝶呤、萘普生、酮洛芬、更昔洛韦、甲磺酸培氟沙星、双环顺铂等药物与丙磺舒合用时，由韦、甲磺酸培氟沙星、双环顺铂等药物与丙磺舒合用时，由于竞争于竞争MRPMRP载体，导致肾排泄减缓，血药浓度升高而产生不载体，导致肾排泄减缓，血药浓度升高而产生不良反应。如丙磺舒可减少培氟沙星自肾小管分泌约良反应。如丙磺舒可减少培氟沙星自肾小管分泌约5050，可，可使更昔洛韦使更昔洛韦AUCAUC增加约增加约5050，肾清除率降低约，肾清除率降低约2020等。等。MRPMRP对药物中枢转运影响对药物中枢转运影响 PotschkaPotschka等应用微透析技术

23、在耐药性癫痫动物模型上发现，等应用微透析技术在耐药性癫痫动物模型上发现，MRPMRP抑制剂丙磺舒可明显提高卡马西平、苯妥英钠在大鼠脑抑制剂丙磺舒可明显提高卡马西平、苯妥英钠在大鼠脑组织细胞外液中的药物浓度。组织细胞外液中的药物浓度。ClinckerClincker等发现等发现MRPMRP可阻止多种抗癫痫药物进入脑内，抗癫可阻止多种抗癫痫药物进入脑内，抗癫痫药物奥卡西平局部海马灌注抗惊厥效应较强，但全身给药痫药物奥卡西平局部海马灌注抗惊厥效应较强，但全身给药却无明显作用，但加用丙磺舒后，抗癫痫效应很快显示出来，却无明显作用，但加用丙磺舒后，抗癫痫效应很快显示出来，提示奥卡西平可能为提示奥卡西平可

24、能为MRPMRP底物，全身给药时难于透过血脑屏底物，全身给药时难于透过血脑屏障进入脑内。障进入脑内。ScismScism等在兔模型中亦发现，丙戊酸与丙磺舒联用较丙戊酸单等在兔模型中亦发现，丙戊酸与丙磺舒联用较丙戊酸单独静脉滴注，其脑细胞外液及脑实质丙戊酸浓度均有明显提独静脉滴注，其脑细胞外液及脑实质丙戊酸浓度均有明显提高。单独使用丙戊酸，脑实质细胞内外浓度比为高。单独使用丙戊酸，脑实质细胞内外浓度比为2.82.80.280.28，合用丙磺舒后其浓度比提升为合用丙磺舒后其浓度比提升为 4.24.20.44260.4426。乳腺癌耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistan

25、ce protein,BCRP,ABCG2）BCRP 只有一个NBF 和TM域，为半ABC 载体。特点特点 BCRP BCRP 首先是从乳腺癌细胞中分离得到的，称之为乳首先是从乳腺癌细胞中分离得到的，称之为乳腺癌耐药蛋白。腺癌耐药蛋白。第一次在第一次在耐阿霉素的耐阿霉素的MCF7MCF7乳腺癌细胞株乳腺癌细胞株(MCF-(MCF-7/AdrVp)7/AdrVp)中克隆到中克隆到BCRPBCRP。鼠类命名为鼠类命名为Bcrp1Bcrp1 BCRP BCRP 是细胞株对丝裂霉素、阿霉素和柔红霉素抗癌是细胞株对丝裂霉素、阿霉素和柔红霉素抗癌药物等产生耐药的主要原因。药物等产生耐药的主要原因。BCRP

26、BCRP主要在细胞膜上，存在于细胞的顶侧面上主要在细胞膜上，存在于细胞的顶侧面上.BCRP BCRP 的底物与的底物与P-GPP-GP,MRP1,MRP1和和MRP2MRP2的底物间有较的底物间有较大的重叠性。大的重叠性。细胞株对丝裂霉素细胞株对丝裂霉素,拓朴替康拓朴替康,9-,9-氨基喜树碱氨基喜树碱,柔红霉柔红霉素素,吲哚咔唑吲哚咔唑,SN-38,flavopiridol,SN-38,flavopiridol,拓朴酶抑制剂拓朴酶抑制剂(NB-506(NB-506 和和 J-107088),J-107088),细胞染料如罗丹明细胞染料如罗丹明123,123,LysotrackerLysotr

27、acker绿绿 ,BBR3390,BBR3390以及以及荧光素荧光素-BODIPY-BODIPY-prazosinprazosin耐药。耐药。对长春新碱对长春新碱,紫杉醇和顺铂等抗癌药无耐药性。紫杉醇和顺铂等抗癌药无耐药性。不同药物诱导表达的结果往往存在差异。某不同药物诱导表达的结果往往存在差异。某些些药物诱导药物诱导表达表达B BCRPCRP细胞株细胞株对蒽醌类有很高对蒽醌类有很高的耐药性的耐药性,而另一些药物诱导而另一些药物诱导B BCRPCRP表达的细表达的细胞株胞株,相对丝裂霉素而言，则对蒽醌类几乎没相对丝裂霉素而言，则对蒽醌类几乎没有耐药性。有耐药性。有些诱导表达有些诱导表达BCRP

28、BCRP细胞株对拓朴替康的耐药细胞株对拓朴替康的耐药性相当高性相当高,但另一些诱导表达但另一些诱导表达BCRPBCRP细胞株的细胞株的耐药很低。耐药很低。BCRP/Bcrp1 BCRP/Bcrp1 抑制剂抑制剂 GF120918 GF120918：BCRP/P-GPBCRP/P-GP抑制剂抑制剂;fumitremorginfumitremorgin C(FTC)C(FTC)：有效：有效的的BCRP-BCRP-抑制剂；抑制剂；某些某些HIV HIV 蛋白酶抑制剂：强效的蛋白酶抑制剂：强效的BCRPBCRP抑制剂抑制剂.如如ritonavirritonavir，saquinavirsaquinav

29、ir 和和nelfinavirnelfinavir ；植物酚类化合物植物酚类化合物 ：5,7-5,7-二羟黄酮二羟黄酮(ChrysinChrysin)和和biochaninbiochanin A A，silymarinsilymarin,橙皮素（橙皮素（hesperetinhesperetin）,栎精（栎精（quercetinquercetin）,黄豆黄豆苷（苷（daidzeindaidzein）,stilbene resveratrol,stilbene resveratrol；香豆霉素抗生素：新生霉素；香豆霉素抗生素：新生霉素；酪氨酸激酶抑制剂酪氨酸激酶抑制剂 ：STI-571(imati

30、nib mesylate),ZD1839 STI-571(imatinib mesylate),ZD1839(Iressa;gefitinib(Iressa;gefitinib)和和 N-4-(3-N-4-(3-溴苯溴苯)胺胺-6-6-喹唑啉喹唑啉-2-2-丁胺丁胺 (EKI-785)(EKI-785)。BCRP/Bcrp1 BCRP/Bcrp1 组织分布组织分布l BCRP BCRP 在胎盘合胞体滋养层膜的母体侧、在肝细胞在胎盘合胞体滋养层膜的母体侧、在肝细胞的胆管侧、肠的腔面侧膜，与的胆管侧、肠的腔面侧膜，与MDR1 P-GPMDR1 P-GP的定位的定位相似。相似。BCRP BCRP 也

31、存在与乳腺的小叶和排泄管的顶侧也存在与乳腺的小叶和排泄管的顶侧面。面。lBCRPBCRP 在脑血管内皮细胞高度表达在脑血管内皮细胞高度表达,表达量高于表达量高于MDRMDR和和MRP1MRP1.l 在人中，在人中，BCRPBCRP表达与鼠相类似，在干细胞中有较表达与鼠相类似，在干细胞中有较高的表达，而在起源细胞表达降低，只有在自然高的表达，而在起源细胞表达降低，只有在自然杀伤细胞和成红血球细胞表达，而在其他分化的杀伤细胞和成红血球细胞表达，而在其他分化的细胞中没有表达细胞中没有表达 。BCRP/Bcrp1 BCRP/Bcrp1功能：功能：类似类似P-GPP-GP 胃肠道的保护机制胃肠道的保护机

32、制 血脑屏障的重要组成部分之一血脑屏障的重要组成部分之一 BCRP/BCRP/Bcrp1Bcrp1高表达可能是各种干细胞的一高表达可能是各种干细胞的一般特性般特性.阻止从胃肠吸收毒物吸收，促进排泄阻止从胃肠吸收毒物吸收，促进排泄 脱镁叶绿脱镁叶绿(甲酯甲酯-)-)酸酸 A A（PHAPHA）是是叶绿素一种降解产物叶绿素一种降解产物，为一种光毒性成分。为一种光毒性成分。PHAPHA在体内外排转运是在体内外排转运是BCRPBCRP介介导的，为导的，为ABCG2ABCG2的特异性底物。的特异性底物。一项研究显示一项研究显示Bcrp1Bcrp1/小鼠对的小鼠对的PHAPHA光毒敏感性是的光毒敏感性是的

33、野生鼠野生鼠100 100 倍以上，在敏感性增加的同时，伴随随高倍以上，在敏感性增加的同时，伴随随高的血药浓度。与正常食物比较，喂养含的血药浓度。与正常食物比较，喂养含PHAPHA 或含或含20%20%紫花苜蓿食物后，血药浓度分别增加紫花苜蓿食物后，血药浓度分别增加1717和和2424倍，倍，而野生鼠喂养任何食物，血浆中而野生鼠喂养任何食物，血浆中PHAPHA浓度都在检测浓浓度都在检测浓度以下度以下.血脑屏障保护作用血脑屏障保护作用 与野生型鼠比较与野生型鼠比较,mdr1amdr1a缺陷小鼠和野生型小鼠缺陷小鼠和野生型小鼠,长春长春碱脑摄取增加碱脑摄取增加2 2倍倍,但哌唑嗪、丝裂霉素摄取不变

34、。但哌唑嗪、丝裂霉素摄取不变。合合用用GF120918GF120918使哌唑嗪和丝裂霉素转运增加使哌唑嗪和丝裂霉素转运增加2.12.1和和3 3倍倍,但但GF120918GF120918不影响长春碱的转运。不影响长春碱的转运。在野生型鼠，在野生型鼠，PSC833PSC833增加长春碱的脑摄取增加长春碱的脑摄取,但不影响但不影响哌唑嗪和丝裂霉素的摄取。哌唑嗪和丝裂霉素的摄取。合用合用GF120918GF120918使哌唑嗪和使哌唑嗪和丝裂霉素摄取分别增加丝裂霉素摄取分别增加1.51.5和和2 2倍倍,GF120918,GF120918也使长春也使长春碱的摄取增加。碱的摄取增加。“傍细胞群傍细胞群

35、”（side populationside population，SPSP）中作用）中作用 从骨髓中分离到一类细胞从骨髓中分离到一类细胞，这类细胞用这类细胞用Hoechst Hoechst 3334233342染色，结合双波长荧光显示浅红色和浅蓝色荧染色，结合双波长荧光显示浅红色和浅蓝色荧光，用维拉帕米预处理，浅着色细胞消失。这类细胞光，用维拉帕米预处理，浅着色细胞消失。这类细胞称之为傍细胞群。称之为傍细胞群。浅着色提示浅着色提示细胞内细胞内Hoechst 33342Hoechst 33342浓度低，研究显示浓度低，研究显示在在SPSP细胞中表有细胞中表有BCRP/Bcrp1BCRP/Bcrp

36、1，促进，促进Hoechst 33342Hoechst 33342外外排所致排所致.S SP P中富含未分化的干细胞，而在分化的干细胞系中中富含未分化的干细胞，而在分化的干细胞系中BCRP/Bcrp1BCRP/Bcrp1表达低或缺乏。表达低或缺乏。类似类似SPSP也出现在骨骼肌和也出现在骨骼肌和胚胎等其他组织干细胞胚胎等其他组织干细胞,伴随伴随Bcrp1 Bcrp1 的高表。的高表。BCRP/BCRP/Bcrp1Bcrp1高表达可能是各种干细胞的一般特性。高表达可能是各种干细胞的一般特性。P-GP,MRP1P-GP,MRP1和和 MRP 2 MRP 2 的协同转运的协同转运 许多许多ABCAB

37、C载体能同时转运多种不同底物，载体能同时转运多种不同底物，可能存在协同转运，增加转运效率。可能存在协同转运，增加转运效率。MRP1MRP1转运长春新碱和依托甙需要还原型转运长春新碱和依托甙需要还原型GSHGSH参与。参与。GSH GSH 促进促进 MRP1MRP1依赖性的依托甙或长春依赖性的依托甙或长春新碱转运，长春新碱和依托甙也刺激新碱转运，长春新碱和依托甙也刺激MRP1-MRP1-依赖性的依赖性的GSHGSH。不同物质对不同物质对MRP2MRP2转运雌二醇转运雌二醇-17-17-葡萄糖醛酸甙葡萄糖醛酸甙作用不同作用不同 1)1)刺激摄取：刺激摄取：sulfanitransulfanitra

38、n,pantoprazolepantoprazole,奥米拉唑奥米拉唑,laneoprazolelaneoprazole,丙磺舒、丙磺舒、squinavirsquinavir,醋氨酚醋氨酚-葡萄糖葡萄糖醛酸甙醛酸甙,青霉素青霉素 G;G;2 2）低浓度刺激转运低浓度刺激转运，高浓度刺激作用降低：利尿高浓度刺激作用降低：利尿磺胺磺胺，苯磺唑酮苯磺唑酮，吲哚美辛吲哚美辛，glibenclamideglibenclamide,牛磺牛磺胆酸和甘胆酸胆酸和甘胆酸；3 3）抑制摄取：抑制摄取：GSSG,GS-DNPGSSG,GS-DNP；4)4)无影响：无影响：MTXMTX和和 GSHGSH。P-GP P

39、-GP 有两个不同的正相协同的结合点和转运有两个不同的正相协同的结合点和转运点。一个倾向于模型底物点。一个倾向于模型底物Hoechst 33342Hoechst 33342，另，另一个倾向于一个倾向于罗丹明罗丹明 123123。一些化合物一些化合物(不是所有的不是所有的)根据他们的刺激根据他们的刺激罗丹罗丹明明 123 123 转运和抑制转运和抑制HoechstHoechst转运能力大小归为转运能力大小归为Hoechst(“H”)Hoechst(“H”)类或类或罗丹明罗丹明 (“R”)(“R”)类。类。BQ102 BQ102 促进促进P-GP P-GP 转运柔红霉素和阿霉素转运柔红霉素和阿霉素

40、,这这种促进可以被维拉帕米抑制。对不同的底物种促进可以被维拉帕米抑制。对不同的底物作用不同作用不同,由于由于BQ102 BQ102 促进物质转运促进物质转运,降低细降低细胞对某些底物的毒性。胞对某些底物的毒性。维拉帕米抑制维拉帕米抑制QB102QB102促进细胞外排罗丹明促进细胞外排罗丹明123123作用作用.(a a)维拉帕米对抗维拉帕米对抗QB102-QB102-介导细胞内罗丹明介导细胞内罗丹明123123浓度降低浓度降低 (b)(b)罗丹明罗丹明123 123 消失曲线消失曲线QB102 QB102 对不同对不同P-GP P-GP 底物的敏感性的影响底物的敏感性的影响.KB8-5-11K

41、B8-5-11细胞在有细胞在有1010 mol/l mol/l 或没有或没有QB102QB102存在情况下存在情况下,与与受试药物共培养受试药物共培养3 3天天,测定测定ICIC5050.结果为结果为ICIC5050变化情况。变化情况。化合物间交叉刺激或抑制有时是很复杂的化合物间交叉刺激或抑制有时是很复杂的,药药物转运刺激程度有时相当大。当刺激剂同时服用物转运刺激程度有时相当大。当刺激剂同时服用时时,由于促进药物转运，由于促进药物转运，可能会改变相应药物的可能会改变相应药物的药理作用，尤其是药物在肠上皮、血脑屏障、胎药理作用，尤其是药物在肠上皮、血脑屏障、胎盘屏障上的转运。盘屏障上的转运。因此研究是否存在交叉激活因此研究是否存在交叉激活现象很有意义，现象很有意义，一方面肠中一方面肠中MRP2MRP2、P-GPP-GP的转的转运激活，可能导致药物的口服利用度降低，从而运激活，可能导致药物的口服利用度降低，从而降低疗效，降低疗效，另一方面促进有毒物质的排泄。另一方面促进有毒物质的排泄。研究研究ABCABC转运载体的前景与意义转运载体的前景与意义促进药物研发促进药物研发 吸收、生物利用度吸收、生物利用度改善临床治疗效果改善临床治疗效果 逆转肿瘤多药耐药逆转肿瘤多药耐药 逆转癫痫耐药逆转癫痫耐药 延长有效浓度时间延长有效浓度时间探索药物相互作用机制探索药物相互作用机制谢谢大家！谢谢大家！