《常用药效筛选试验》课件.ppt

1、常见药效筛选试验常见药效筛选试验 解表药主要药理作用解表药主要药理作用：1.发汗发汗 2.解热解热 3.镇痛镇痛 4.抗病原微生物抗病原微生物 5.抗炎抗炎 6.影响免疫功能影响免疫功能常用药常用药：麻黄、桂枝、：麻黄、桂枝、柴胡、葛根、荆芥、柴胡、葛根、荆芥、菊花、防风等。菊花、防风等。清热药主要药理作用清热药主要药理作用：1.抗病原微生物抗病原微生物 2.解热解热 3.抗炎抗炎 4.影响免疫功能影响免疫功能 5.抗自由基抗自由基 6.抗肿瘤抗肿瘤 常用药：黄芩、黄连、常用药：黄芩、黄连、知母、赤芍、银花、知母、赤芍、银花、连翘、板蓝根、穿心连翘、板蓝根、穿心莲、决明子、地骨皮莲、决明子、地

2、骨皮等。等。考察解表药考察解表药发汗作用发汗作用n汗法是中医治疗表证的重要方法之一，可以利用汗法是中医治疗表证的重要方法之一，可以利用：汗液着色法、汗腺上皮组织形态观察法和汗液汗液着色法、汗腺上皮组织形态观察法和汗液定量测定法定量测定法并并结合皮肤电生理技术结合皮肤电生理技术研究解表药对研究解表药对汗腺分泌、汗腺活动及汗液分泌量的影响。汗腺分泌、汗腺活动及汗液分泌量的影响。考察考察解热作用解热作用n方法：方法：常采用菌苗或内毒素等引起的感染性发热常采用菌苗或内毒素等引起的感染性发热以及用松节油和二硝基苯酚等引起的非感染性发以及用松节油和二硝基苯酚等引起的非感染性发热观察受试药物的退热作用。通过

3、对实验性发热热观察受试药物的退热作用。通过对实验性发热大鼠体温调节中枢温度敏感神经元放电频率及发大鼠体温调节中枢温度敏感神经元放电频率及发热动物脑脊液中热动物脑脊液中PGE、cAMP含量的影响，含量的影响，分析分析解表药解表药作用机制和部位。作用机制和部位。观察清热药的解热作用观察清热药的解热作用发热是里热证的重要表现，研究清热药应发热是里热证的重要表现，研究清热药应首选首选以内毒素所致的发热反应以内毒素所致的发热反应，其次如酵母性发热、，其次如酵母性发热、角叉菜胶所致发热及二硝基酚性发热也可选用，角叉菜胶所致发热及二硝基酚性发热也可选用，还可选用内生致热原生成及致热试验、微量还可选用内生致热

4、原生成及致热试验、微量PGE脑室内或下丘脑注射致热试验等用于研究清热药脑室内或下丘脑注射致热试验等用于研究清热药的解热作用。的解热作用。n家兔：家兔：IVIV伤寒、副伤寒联合菌苗、内毒素致热伤寒、副伤寒联合菌苗、内毒素致热n大鼠：鲜酵母液皮下注射致热大鼠：鲜酵母液皮下注射致热n方法：随机分组后，先测量各动物给药前正常方法：随机分组后，先测量各动物给药前正常体温，给药后体温，给药后3030分钟造模，于致热物质注射后分钟造模，于致热物质注射后的的5 5、3030、6060、9090、120120、240min240min时间点测量动时间点测量动物的体温，计算体温升高的百分率。物的体温，计算体温升高

5、的百分率。（三）观察抗炎、抗过敏作用（三）观察抗炎、抗过敏作用n炎症是表证证候的主要病理过程。抗炎是解表治炎症是表证证候的主要病理过程。抗炎是解表治疗的主要对症措施。解表药物对疗的主要对症措施。解表药物对炎症的早、中、炎症的早、中、晚期均有作用晚期均有作用，但考虑表证的特点，解表药的抗，但考虑表证的特点，解表药的抗炎作用评价应以渗出、肿胀、白细胞游走或毛细炎作用评价应以渗出、肿胀、白细胞游走或毛细血管通透性增强等急性炎症过程为主要观察指标血管通透性增强等急性炎症过程为主要观察指标，观察受试药物的抗炎作用。，观察受试药物的抗炎作用。观察清热药的抗炎作用观察清热药的抗炎作用n 清热药主要用于急性传

6、染、感染性炎性疾病，其清热药主要用于急性传染、感染性炎性疾病，其抗炎作用的主要特点是抗炎作用的主要特点是以抑制早期炎症为强以抑制早期炎症为强，对对中、晚期炎症作用相对较弱或无，中、晚期炎症作用相对较弱或无，这与其在临床这与其在临床能较快解除以红、热、肿、痛为特点的能较快解除以红、热、肿、痛为特点的“热证热证”相吻相吻合，以感染初期的炎性渗出、毛细血管通透性亢合，以感染初期的炎性渗出、毛细血管通透性亢进为主要观察指标，研究清热药的抗炎作用。进为主要观察指标，研究清热药的抗炎作用。抗过敏试验抗过敏试验n变态反应临床分为变态反应临床分为、型。其中型。其中型型变态反应的发病机制较为清楚，多数试验方法反

7、变态反应的发病机制较为清楚，多数试验方法反映映型变态反应的发病机制，包括被动皮肤过敏型变态反应的发病机制，包括被动皮肤过敏反应试验（反应试验（passive cutaneous anaphylaxis，PCA）、过敏性支气管痉挛试验、）、过敏性支气管痉挛试验、Schultz-Dale反应试反应试验、抗过敏介质试验及肥大细胞试验等。验、抗过敏介质试验及肥大细胞试验等。小鼠耳廓肿胀法小鼠耳廓肿胀法：致炎物质有巴豆油、二甲苯：致炎物质有巴豆油、二甲苯n 大鼠足跖肿胀法大鼠足跖肿胀法：致炎物有蛋清、角叉菜胶、甲：致炎物有蛋清、角叉菜胶、甲醛等。醛等。n 血管通透性实验血管通透性实验：静脉注射伊文氏兰，

8、观察染料：静脉注射伊文氏兰，观察染料在皮下组织的渗出量。在皮下组织的渗出量。n 肉芽组织增生实验肉芽组织增生实验：手术皮下置入固定量棉球，：手术皮下置入固定量棉球，一段时间后，取出棉球称重。比较给药与不给药组一段时间后，取出棉球称重。比较给药与不给药组动物身上取出棉球重量的差异。动物身上取出棉球重量的差异。n佐剂型关节炎佐剂型关节炎：免疫性关节炎病理模型。：免疫性关节炎病理模型。佐剂的制备佐剂的制备：取冻干卡介苗：取冻干卡介苗50mg，80C，1小时灭小时灭活，混入灭菌石蜡油、羊毛脂（活，混入灭菌石蜡油、羊毛脂（1：1）12.5ml，制，制成完全佐剂。成完全佐剂。造模方法造模方法：无菌条件下足

9、趾皮下注射：无菌条件下足趾皮下注射0.1ml，19天后天后开始给药。开始给药。观察指标观察指标：体重、足趾厚度、致炎后：体重、足趾厚度、致炎后12天开始观察天开始观察继发性全身关节病变程度，计算关节炎指数。电镜继发性全身关节病变程度，计算关节炎指数。电镜观察关节滑膜组织细胞有无肿胀、变性、坏死。观察关节滑膜组织细胞有无肿胀、变性、坏死。n高迁移率族蛋白高迁移率族蛋白B1（HMGB1）：）：是一种是一种DNA结合蛋白，作结合蛋白，作为细胞因子参与炎症反应。该为细胞因子参与炎症反应。该后期致炎因子后期致炎因子可导致败血症，可导致败血症，是抗炎治疗的一种新的靶分子。是抗炎治疗的一种新的靶分子。n肿瘤

10、坏死因子（肿瘤坏死因子（TNF）：是重要的早期一过性释放的致炎因）：是重要的早期一过性释放的致炎因子。子。n白介素白介素1（IL-1）、白介素）、白介素6（IL-6）、白介素）、白介素10（IL-10）、）、白介素白介素8（IL-8）n前列腺素（前列腺素（PGE2）、白三烯）、白三烯nMIP-1、MIP-1：巨噬细胞炎症蛋白：巨噬细胞炎症蛋白 毒损肺络毒损肺络 (与呼吸道疾病相关与呼吸道疾病相关)血栓性疾病血栓性疾病(组织缺血所致炎症级连反应组织缺血所致炎症级连反应)毒损脑络毒损脑络(脑病相关脑病相关)“清热解毒清热解毒”功效功效抑制炎症反应抑制炎症反应注意：注意：不同疾病检测部位和指标有所区

11、别不同疾病检测部位和指标有所区别 非选择性抗炎作用（角叉菜胶足肿胀、非选择性抗炎作用（角叉菜胶足肿胀、二甲苯耳肿胀）不是主要。二甲苯耳肿胀）不是主要。退退 热热抗抗 炎炎 抗肺纤维化抗肺纤维化 抗多脏衰竭作用抗多脏衰竭作用抑制病原体抑制病原体改善症状改善症状治疗呼吸道病毒感染的研究内容治疗呼吸道病毒感染的研究内容急性呼吸窘迫综合症多器官功能障碍综合征 流感病毒所致小鼠流感病毒所致小鼠肺炎的保护肺炎的保护抑制呼吸道炎症抑制呼吸道炎症血清、肺组织与炎症有关血清、肺组织与炎症有关 细胞因子细胞因子急性期：急性期：NO、EOS、IL-1、IL-4、IFN-Y、TNF-A等等 感染中后期：感染中后期：T

12、NF-A（感染后（感染后12小时达峰）小时达峰）碱性迁移蛋白（感染后碱性迁移蛋白（感染后72小时小时达峰）达峰）（）（）（）（）5HPETE脑水肿脑水肿PGG2脑缺血脑缺血/再灌注再灌注CaCa2+2+相关第二信使传导系统激活相关第二信使传导系统激活内皮小胶质神经元释放内皮小胶质神经元释放IL-1 TNF-、IL-10IL-10等炎性因子等炎性因子激活第二信使系统激活第二信使系统 蛋白激酶蛋白激酶 磷酸酶磷酸酶NF-B、STAT等等转录因子激活转录因子激活黏附分子、黏附分子、趋化因子表达增加趋化因子表达增加白细胞浸润白细胞浸润分泌分泌MMP BBBMMP BBB破坏破坏神经元损伤坏死或凋亡神经

13、元损伤坏死或凋亡磷脂磷脂外周外周NSE增高增高AA释放增加释放增加PGH2PGD2PGE2TXA2等等5-LOXCOX脑脑缺缺血血再再灌灌注注损损伤伤的的炎炎症症代代谢谢网网络络磷脂酶磷脂酶A2LTA4LTB4CYsTsLTA4H神经元特异性神经元特异性烯醇化酶烯醇化酶（四）观察镇痛（四）观察镇痛、镇静作用镇静作用肌肉酸痛、烦躁是表证主要症状之一，镇痛、镇静试验是考肌肉酸痛、烦躁是表证主要症状之一，镇痛、镇静试验是考核解表药对症治疗作用的常用方法。核解表药对症治疗作用的常用方法。n致痛方法有物理性致痛方法有物理性（热、电、机械热、电、机械）和化学性和化学性（醋酸、钾离醋酸、钾离子、缓激肽、催产

14、素等子、缓激肽、催产素等）两类，常用动物为小鼠、大鼠、豚两类，常用动物为小鼠、大鼠、豚鼠、家兔或犬等。鼠、家兔或犬等。n常用评价指标为嘶叫、舔足、甩尾、挣扎或皮肤及肌肉抽动常用评价指标为嘶叫、舔足、甩尾、挣扎或皮肤及肌肉抽动等。等。n镇静试验镇静试验：观察受试药物对动物一般行为观察受试药物对动物一般行为（非条件行为非条件行为）的的影响，判断是否有中枢抑制影响，判断是否有中枢抑制（或兴奋或兴奋）作用，记录方法有直作用，记录方法有直接观察接观察（行为分级行为分级）和仪器记录两类。和仪器记录两类。检测指标：痛阈值、痛阈提高百分率。冰醋酸、冰醋酸、酒石酸锑钾酒石酸锑钾常用动物：小白鼠、大白鼠常用动物：

15、小白鼠、大白鼠考察镇静、催眠作用考察镇静、催眠作用自发活动自发活动观察：吊笼法、旷野法、活动仪观察：吊笼法、旷野法、活动仪睡眠睡眠实验：观察指标有潜伏期、睡眠时间实验：观察指标有潜伏期、睡眠时间（翻正反射消失时间）、睡眠发生率（翻正反射消失时间）、睡眠发生率观察抗菌、抗病毒作用观察抗菌、抗病毒作用里热证的病因多为病原微生物感染，因而需进行清热药的里热证的病因多为病原微生物感染，因而需进行清热药的抗菌、抗病毒研究，抗菌、抗病毒研究，n中药对急性感染具有中药对急性感染具有“广谱广谱”的特点，宜选用较广泛的菌的特点，宜选用较广泛的菌株进行体外抗菌试验，选用敏感菌株进行感染动物的保护株进行体外抗菌试验

16、，选用敏感菌株进行感染动物的保护试验。并注意对细菌感染过程各阶段的影响，如对细菌于试验。并注意对细菌感染过程各阶段的影响，如对细菌于粘膜表面的粘附能力的影响；对细菌耐药性的影响等。粘膜表面的粘附能力的影响；对细菌耐药性的影响等。n抗病毒体外实验抗病毒体外实验：通常采用病毒鸡胚接种法或组织细胞培通常采用病毒鸡胚接种法或组织细胞培养法，测定病毒生长情况及观察细胞病变情况，评价药物养法，测定病毒生长情况及观察细胞病变情况，评价药物对病毒增殖的抑制作用。体内实验是将病毒接种于易感动对病毒增殖的抑制作用。体内实验是将病毒接种于易感动物体内造成病毒感染，给予中药（在感染前或物体内造成病毒感染，给予中药（在

17、感染前或/和感染后给和感染后给药）进行干预，以动物存活率、存活时间或以动物器官病药）进行干预，以动物存活率、存活时间或以动物器官病变程度等指标来判断药物抗病毒作用。由于清热药的多成变程度等指标来判断药物抗病毒作用。由于清热药的多成分干扰，抗菌、抗病毒作用应以体内研究为主。分干扰，抗菌、抗病毒作用应以体内研究为主。抗菌实验（清热药）抗菌实验（清热药）n体外：管碟法、平皿法（抑菌圈直径、最体外：管碟法、平皿法（抑菌圈直径、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度）低抑菌浓度和最低杀菌浓度）n体内：整体动物感染细菌（最低致死浓度体内：整体动物感染细菌（最低致死浓度感染），观察死亡率。感染），观察死亡率。抗细菌毒素

18、抗细菌毒素观察清热药的抗内毒素作用观察清热药的抗内毒素作用n内毒素（内毒素（endotoxin）是革兰氏阴性菌的细胞壁成分）是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，在细菌死亡自溶或粘附在其他细胞时，才表现其，在细菌死亡自溶或粘附在其他细胞时，才表现其毒性。内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂毒性。内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。成分。n清热药抗内毒素作用研究主要有四个方面：增强机清热药抗内毒素作用研究主要有四个方面：增强机体对内毒素的解毒能力；改善机体对内毒素的反应体对内毒素的解毒能力；改善机体对内毒素的反应性；消除肠源性内毒素池及直接使内毒素解毒。性；消除肠源性内毒素池及直接使内毒素解毒。n

19、实验方法实验方法：采用给动物静脉注射大肠杆菌或伤寒杆采用给动物静脉注射大肠杆菌或伤寒杆菌的内毒素形成内毒素血症，或夹闭大鼠的肠上动菌的内毒素形成内毒素血症，或夹闭大鼠的肠上动脉造成肠源性的内毒素池观察药物对模型动物的体脉造成肠源性的内毒素池观察药物对模型动物的体温变化、白细胞数量、血液流变学、微循环及死亡温变化、白细胞数量、血液流变学、微循环及死亡率等指标的影响。率等指标的影响。观察清热药对血液系统及微循环的影响观察清热药对血液系统及微循环的影响n 发热失水可致血液浓缩，病原体及其毒素可以激发热失水可致血液浓缩，病原体及其毒素可以激活血小板、内外凝血系统继而出现血凝活性异常，活血小板、内外凝血

20、系统继而出现血凝活性异常，呈现呈现“热瘀互结热瘀互结”、“气血两燔气血两燔”、“耗血动血耗血动血”。微循环障碍不仅造成局部的。微循环障碍不仅造成局部的“缺血缺氧缺血缺氧”环境而环境而损伤机体抗感染防御能力，也给药物的多种疗效带损伤机体抗感染防御能力，也给药物的多种疗效带来困难。来困难。n针对针对清热凉血药清热凉血药可从抑制血小板聚集、抗血栓形成可从抑制血小板聚集、抗血栓形成、改善血液流变性等方面开展研究。、改善血液流变性等方面开展研究。理气药、芳香化湿药、泻下药、消食药理气药、芳香化湿药、泻下药、消食药-主要作用于消化系统主要作用于消化系统n泻下药主要药理作用：泻下、利尿、抗病原微生泻下药主要

21、药理作用：泻下、利尿、抗病原微生物、抗炎、抗肿瘤。物、抗炎、抗肿瘤。n芳香化湿药主要药理作用：对消化道的调节作用芳香化湿药主要药理作用：对消化道的调节作用、抗病原微生物作用。、抗病原微生物作用。n理气药的主要药理作用：对消化道的双向调节作理气药的主要药理作用：对消化道的双向调节作用、利胆、松弛支气管平滑肌、心血管系统影响用、利胆、松弛支气管平滑肌、心血管系统影响、对子宫的作用等。、对子宫的作用等。观察泻下作用及致泻机理的研究观察泻下作用及致泻机理的研究n 常采用肠管动力实验法观察此类药物的泻下作用常采用肠管动力实验法观察此类药物的泻下作用，研究泻下作用部位、作用方式。，研究泻下作用部位、作用方

22、式。n可采用失水便秘模型、地芬诺酯模型、次炭酸鉍可采用失水便秘模型、地芬诺酯模型、次炭酸鉍大鼠便秘模型、实热型便秘模型大鼠便秘模型、实热型便秘模型等等重点观察药物重点观察药物的通便作用及肠道水分吸收的影响。的通便作用及肠道水分吸收的影响。对胃肠运动的影响对胃肠运动的影响n检测小鼠胃内容物中甲基橙光密度来考察药物对小检测小鼠胃内容物中甲基橙光密度来考察药物对小鼠胃排空机能的影响；鼠胃排空机能的影响；n采用胃肠内标记物葡聚糖蓝采用胃肠内标记物葡聚糖蓝-2000在胃内色素相对在胃内色素相对残留率及小肠推进比，观察药物对胃排空及肠推进残留率及小肠推进比，观察药物对胃排空及肠推进的影响；的影响；n采用胃

23、肠动力障碍模型，观察药物对肠蠕动减缓的采用胃肠动力障碍模型，观察药物对肠蠕动减缓的拮抗效应。拮抗效应。n体外观察药物对动物离体胃、肠平滑肌活动的影响体外观察药物对动物离体胃、肠平滑肌活动的影响，并可观察药物对乙酰胆碱、阿托品（，并可观察药物对乙酰胆碱、阿托品（M阻断）、阻断）、六烃季胺（六烃季胺（N阻断）、心得安（阻断）、心得安（阻断）、酚妥拉阻断）、酚妥拉明（明（阻断）等胃肠作用的影响，初步了解其作用阻断）等胃肠作用的影响，初步了解其作用机制机制芬氟拉明致胃动力障碍模型，盐酸芬氟拉明致胃动力障碍模型，盐酸多巴胺致胃排空延迟模型，多巴胺致胃排空延迟模型，L-Arg（左旋精氨酸）致胃动力障碍模型

24、（左旋精氨酸）致胃动力障碍模型胃泌素几乎对整个胃肠道均有作用，它可胃泌素几乎对整个胃肠道均有作用，它可促进促进胃肠道的胃肠道的分泌分泌功能；促进胃窦，胃体收缩，增加胃肠道的运动，功能；促进胃窦，胃体收缩，增加胃肠道的运动，同时同时促进幽门括约肌收缩促进幽门括约肌收缩，故其整体综合作用是，故其整体综合作用是延缓胃延缓胃排空排空而不是促进胃排空；促进胃及上部肠道粘膜细胞的而不是促进胃排空；促进胃及上部肠道粘膜细胞的分裂增殖；促进分裂增殖；促进胰岛素胰岛素和和降钙素降钙素的释放。的释放。胃动素是一种多肽，在空肠粘膜的浓度最高，有强烈刺激胃动素是一种多肽，在空肠粘膜的浓度最高，有强烈刺激上消化道的机械

25、运动和生理性肌电活动的作用。上消化道的机械运动和生理性肌电活动的作用。抗腹泻作用（理气药）抗腹泻作用（理气药）n甲硫酸甲硫酸新斯的明新斯的明造成小鼠小肠痉挛模型，观察药造成小鼠小肠痉挛模型，观察药物对小肠痉挛的拮抗作用。物对小肠痉挛的拮抗作用。n番泻叶与蓖麻油番泻叶与蓖麻油引起腹泻的小鼠模型，观察药物引起腹泻的小鼠模型，观察药物对腹泻潜伏期、腹泻率、腹泻级数及腹泻指数的对腹泻潜伏期、腹泻率、腹泻级数及腹泻指数的影响。影响。在体肠实验在体肠实验 1、肠管悬掉法、肠管悬掉法 2、肠内应变片法（放应变片）或内压法（球、肠内应变片法（放应变片）或内压法（球囊）。应变片法：将半导体应变片缝置在胃肠浆囊）

26、。应变片法：将半导体应变片缝置在胃肠浆膜上，通过压力传感箱，将收缩活动记录下来。膜上，通过压力传感箱，将收缩活动记录下来。一个电阻元件，将应变片用粘合剂粘贴在被测试件的表面一个电阻元件，将应变片用粘合剂粘贴在被测试件的表面上，随着试件受力变形，应变片的敏感栅也获得同样的变上，随着试件受力变形，应变片的敏感栅也获得同样的变形，其电阻随之发生变化，电阻变化转换为电压或电流变形，其电阻随之发生变化，电阻变化转换为电压或电流变化，记录下来，可反映被测试件应变量的大小。化，记录下来，可反映被测试件应变量的大小。助消化、助吸收的作用（理气药、消食药）助消化、助吸收的作用（理气药、消食药）n对胃分泌功能的影

27、响：胃酸含量及胃蛋白酶活性对胃分泌功能的影响：胃酸含量及胃蛋白酶活性n小肠葡萄糖吸收功能：右旋木糖吸收试验，小肠葡萄糖吸收功能：右旋木糖吸收试验，3H-葡葡萄糖吸收试验萄糖吸收试验n胰液分泌功能：检测胰液分泌量及胰蛋白含量胰液分泌功能：检测胰液分泌量及胰蛋白含量n对脾虚模型动物影响：一般症状和体征的影响，对脾虚模型动物影响：一般症状和体征的影响，并重点从胃液分泌、胃肠运动、胃肠激素及胃肠并重点从胃液分泌、胃肠运动、胃肠激素及胃肠黏膜的病理形态改变等评价其作用及机制。黏膜的病理形态改变等评价其作用及机制。观察观察泻下药泻下药抗感染、抗肠粘连作用抗感染、抗肠粘连作用 n 泻下药不仅可增强肠蠕动，还

28、可从抗病原微生物、泻下药不仅可增强肠蠕动，还可从抗病原微生物、抗炎解热、改善血液循环，促进肠腔渗出液吸收，抗炎解热、改善血液循环，促进肠腔渗出液吸收，改善肠粘连和肠缺血入手考察本类药物对急腹症的改善肠粘连和肠缺血入手考察本类药物对急腹症的治疗作用。治疗作用。n建立套叠性肠梗阻模型观察药物促进肠套叠还纳，建立套叠性肠梗阻模型观察药物促进肠套叠还纳，解除肠梗阻的作用；利用缺血性肠梗阻模型考察药解除肠梗阻的作用；利用缺血性肠梗阻模型考察药物对缺血性梗阻肠管血循环作用；通过观察药物对物对缺血性梗阻肠管血循环作用；通过观察药物对细菌性肠粘连模型的影响，研究药物对肠粘连及炎细菌性肠粘连模型的影响，研究药物

29、对肠粘连及炎性渗出等作用。性渗出等作用。芳香化湿药芳香化湿药n还可以进行相关抗炎、镇痛作用研究。还可以进行相关抗炎、镇痛作用研究。n探讨其作用机制，可以测定血清和组织中胃动素和探讨其作用机制，可以测定血清和组织中胃动素和胃泌素，以及胃泌素，以及P P物质、血管活性肠肽的含量变化，考物质、血管活性肠肽的含量变化，考察对内分泌激素和脑肠肽的影响；察对内分泌激素和脑肠肽的影响；n测定胃肠道组织超氧化歧化酶活性、丙二醛含量，测定胃肠道组织超氧化歧化酶活性、丙二醛含量，考察抗氧化活性。考察抗氧化活性。考察抗溃疡作用考察抗溃疡作用考察药物利胆作用考察药物利胆作用理气药、泻下药理气药、泻下药n观察胆汁分泌量

30、并通过分析胆汁中胆固醇、胆红观察胆汁分泌量并通过分析胆汁中胆固醇、胆红素、胆汁酸以及无机离子等含量，研究药物对胆素、胆汁酸以及无机离子等含量，研究药物对胆汁分泌、排泄和代谢的影响；汁分泌、排泄和代谢的影响；n通过胆囊运动及胆道括约肌紧张度实验，研究药通过胆囊运动及胆道括约肌紧张度实验，研究药物对胆囊压力、胆囊排空的影响；物对胆囊压力、胆囊排空的影响；n建立胆道感染、胆结石及胰腺炎病理实验模型，建立胆道感染、胆结石及胰腺炎病理实验模型，观察药物的治疗作用。观察药物的治疗作用。化学性肝损伤化学性肝损伤改善神经精神活动作用改善神经精神活动作用理气药理气药n功能性消化不良是抑郁证的共病之一，通过调节胃

31、功能性消化不良是抑郁证的共病之一，通过调节胃肠功能可改善抑郁症患者的神经精神症状。肠功能可改善抑郁症患者的神经精神症状。抑郁症抑郁症的动物模型主要可分为两类：一类属于药物诱发的的动物模型主要可分为两类：一类属于药物诱发的模型，包括育亨宾模型，模型，包括育亨宾模型，5-HTP诱发甩头行为，利诱发甩头行为，利血平致单胺类递质耗竭模型等；另一类为改变环境血平致单胺类递质耗竭模型等；另一类为改变环境条件诱发的抑郁模型，如束缚、隔离、疲劳应激、条件诱发的抑郁模型，如束缚、隔离、疲劳应激、行为绝望、慢性不可预知应激、慢性温和应激等。行为绝望、慢性不可预知应激、慢性温和应激等。此外，还有脑损伤致抑郁症模型（

32、如嗅球切除模型此外，还有脑损伤致抑郁症模型（如嗅球切除模型）以及）以及90年代以来出现的基因选择的大鼠行为抑郁年代以来出现的基因选择的大鼠行为抑郁模型如游泳低活性模型、模型如游泳低活性模型、FSL（Flinders sensitive line，遗传行为抑郁大鼠）大鼠模型等。，遗传行为抑郁大鼠）大鼠模型等。温里药药理作用温里药药理作用n对消化系统作用：增加胃肠动力，促进消化对消化系统作用：增加胃肠动力，促进消化、抗溃疡、抗溃疡n对心血管系统作用：强心、抗心肌缺血、抗对心血管系统作用：强心、抗心肌缺血、抗休克休克n对内分泌系统作用：促进激素的合成、分泌对内分泌系统作用：促进激素的合成、分泌，抗炎

33、、增加产热、抗寒冷。，抗炎、增加产热、抗寒冷。n休克模型：休克模型：失血性休克失血性休克模型模型 内毒素诱导感染性休克内毒素诱导感染性休克模型模型 烧伤引起休克模型烧伤引起休克模型 家兔肠系膜上动脉闭塞性家兔肠系膜上动脉闭塞性休克休克模型模型 n心源性休克心源性休克可用物理或化学方法损伤心肌，冠状动脉可用物理或化学方法损伤心肌，冠状动脉阻塞法（结扎、栓塞等），诱发心源性休克，观察其阻塞法（结扎、栓塞等），诱发心源性休克，观察其药理作用。药理作用。n可采用血压测定仪或生理记录仪测定动物正常血压及可采用血压测定仪或生理记录仪测定动物正常血压及低血压状态的血压，观察低血压状态的血压，观察药物对低血压

34、状态的影响药物对低血压状态的影响以以判断该药是否具有抗休克作用。判断该药是否具有抗休克作用。n可对休克模型血流动力学、微循环、细胞超微结构以可对休克模型血流动力学、微循环、细胞超微结构以及代谢、体液因子和毒素等方面的改变进行研究。及代谢、体液因子和毒素等方面的改变进行研究。考察强心作用考察强心作用n采用心衰模型观察药物对心肌收缩率、心率和心输出量采用心衰模型观察药物对心肌收缩率、心率和心输出量的影响；的影响；n结合不同模型进行心肌病理、超微结构观察，检测血中结合不同模型进行心肌病理、超微结构观察，检测血中神经内分泌相关指标研究药物治疗心衰的作用机制神经内分泌相关指标研究药物治疗心衰的作用机制n

35、体外培养心肌细胞实验法可以对心肌兴奋性、不应性、体外培养心肌细胞实验法可以对心肌兴奋性、不应性、自动节律等指标定量观察，还可以观察中药对心肌细胞自动节律等指标定量观察，还可以观察中药对心肌细胞搏动频率和收缩力的影响，进而分析作用原理。搏动频率和收缩力的影响，进而分析作用原理。n离体心脏实验离体心脏实验抗心肌缺血缺氧作用抗心肌缺血缺氧作用n采用心肌缺血模型、心肌缺血再灌注损伤模型、心采用心肌缺血模型、心肌缺血再灌注损伤模型、心肌缺血缺氧模型，通过心脏功能，血流动力学，血肌缺血缺氧模型，通过心脏功能，血流动力学，血液流变学试验，心肌耗氧量试验，扩张外周血管及液流变学试验，心肌耗氧量试验，扩张外周血

36、管及微循环试验，定量分析药物对心肌损伤程度、心脏微循环试验，定量分析药物对心肌损伤程度、心脏功能的影响。功能的影响。n考察对血小板活性和微循环的影响、抗氧自由基作考察对血小板活性和微循环的影响、抗氧自由基作用、调节细胞释放用、调节细胞释放NONO的影响、心肌酶的影响、心肌的影响、心肌酶的影响、心肌细胞凋亡的影响，探讨药物抗心肌缺血的作用机制细胞凋亡的影响，探讨药物抗心肌缺血的作用机制。血液系统实验（止血药、活血化瘀药）血液系统实验（止血药、活血化瘀药）n止血止血：出血时间、血浆复钙时间、凝血时间、凝血：出血时间、血浆复钙时间、凝血时间、凝血因子的影响。因子的影响。n补血补血：RBCWBCPLT

37、HB,骨髓造血系统（骨髓骨髓造血系统（骨髓造血干造血干/祖细胞的增殖和分化，抑制凋亡祖细胞的增殖和分化，抑制凋亡n活血活血：血液流变学（浓、粘、凝、聚指标）、动力：血液流变学（浓、粘、凝、聚指标）、动力学（血管照影）、微循环指标改善（微血管、微血学（血管照影）、微循环指标改善（微血管、微血流、毛细血管通透性）流、毛细血管通透性）血液黏度、血液的触变性，黏弹性、红细胞血液黏度、血液的触变性，黏弹性、红细胞压积等；红细胞类指标如红细胞聚集性，红细压积等；红细胞类指标如红细胞聚集性，红细胞变形性、红细胞膜的微黏度、红细胞电泳等，胞变形性、红细胞膜的微黏度、红细胞电泳等，血小板类指标：如血小板聚集性、

38、血小板黏附血小板类指标：如血小板聚集性、血小板黏附性、血栓弹力度、体外血栓的形成与测定等；性、血栓弹力度、体外血栓的形成与测定等；血浆类指标：如血浆黏度、血浆纤维蛋白原等血浆类指标：如血浆黏度、血浆纤维蛋白原等对凝血系统和纤溶系统功能的影响对凝血系统和纤溶系统功能的影响n股动脉切口试验及小鼠剪尾试验检测药物对出血时间股动脉切口试验及小鼠剪尾试验检测药物对出血时间及出血量的影响；监测凝血时间、活化部分凝血活酶及出血量的影响；监测凝血时间、活化部分凝血活酶时间分析药物对内源性凝血途径的影响；监测凝血酶时间分析药物对内源性凝血途径的影响；监测凝血酶原时间（原时间（PT），分析药物对外源性凝血系统的影

39、响），分析药物对外源性凝血系统的影响；监测凝血酶时间（；监测凝血酶时间（thrombin time，TT）研究药物）研究药物对凝血、抗凝及纤维蛋白溶解系统功能影响；对凝血、抗凝及纤维蛋白溶解系统功能影响；n监测血浆纤维蛋白原、纤维蛋白肽监测血浆纤维蛋白原、纤维蛋白肽A（FPA）、凝血）、凝血酶原片段酶原片段F1+2、组织因子、可溶性纤维蛋白单体复、组织因子、可溶性纤维蛋白单体复合物、因子合物、因子IX-35、IX-9、因子、因子X-52、X-15肽片段研肽片段研究药物对凝血系统的影响。究药物对凝血系统的影响。对血小板功能的影响对血小板功能的影响n检测血小板黏附功能：玻璃珠法、玻璃纤维法、检测血

40、小板黏附功能：玻璃珠法、玻璃纤维法、灌注小室法；灌注小室法；n检测血小板聚集功能：比浊法、比值法；检测血小板聚集功能：比浊法、比值法；n检测血小板释放功能：检测血小板释放功能：-血小板球蛋白（血小板球蛋白（-TG）、血小板活化因子、血小板活化因子4（PF4）、）、5-HT、血浆、血浆颗粒颗粒膜糖蛋白膜糖蛋白-140（GMP-140）等）等n血小板与红细胞、白细胞及内皮细胞之间的相互血小板与红细胞、白细胞及内皮细胞之间的相互作用也是血小板参与凝血过程的机制之一，因此作用也是血小板参与凝血过程的机制之一，因此，检测他们之间的相互作用有重要意义。，检测他们之间的相互作用有重要意义。对血流动力学影响对

41、血流动力学影响-止血、活血止血、活血n体外实验：采用离体器官血管灌流法（兔耳、下肢、肝、体外实验：采用离体器官血管灌流法（兔耳、下肢、肝、肾、肠系膜血管）、离体主动脉条实验法等研究药物对血肾、肠系膜血管）、离体主动脉条实验法等研究药物对血管的舒缩作用。管的舒缩作用。n对心肌缺血和脑缺血模型动物的改善。对心肌缺血和脑缺血模型动物的改善。n体内可通过在体局部血管阻力测定法和通过检测血管活性体内可通过在体局部血管阻力测定法和通过检测血管活性物质观察药物作用。检测平均动脉血压、总外周阻力、每物质观察药物作用。检测平均动脉血压、总外周阻力、每搏输出量、组织器官血流量、心脏指数、动脉顺应性。搏输出量、组织

42、器官血流量、心脏指数、动脉顺应性。n血管造影（图像分析）考察整体动物动力学改变。血管造影（图像分析）考察整体动物动力学改变。抗血栓形成抗血栓形成n针对血管内皮损伤：血管内皮细胞进行体外培养，分别测定针对血管内皮损伤：血管内皮细胞进行体外培养，分别测定内皮细胞释放的活性物质，如前列腺素、内皮细胞释放的活性物质，如前列腺素、vWF因子、内皮素和因子、内皮素和内皮细胞松弛因子等；内皮细胞松弛因子等；n针对血小板功能异常：血小板黏附性测定法、血小板聚集功针对血小板功能异常：血小板黏附性测定法、血小板聚集功能测定法及测定血小板释放反应活性物质，如能测定法及测定血小板释放反应活性物质，如5-HT、TXA2

43、、ADP和血小板第四因子和血小板第四因子(PF4)等，综合评价血小板功能；等，综合评价血小板功能；n针对凝血活性增高：运用凝血时间测定方法、凝血因子活力针对凝血活性增高：运用凝血时间测定方法、凝血因子活力或含量测定方法，如血浆复钙时间、凝血酶原时间、部分凝血或含量测定方法，如血浆复钙时间、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间的测定和纤维蛋白溶解试验等。活酶时间的测定和纤维蛋白溶解试验等。n体外血栓形成法：按照体外血栓形成法：按照Chandler法，在体外旋转环内模拟体内法，在体外旋转环内模拟体内血液流动状态，形成血栓；血液流动状态，形成血栓；n体内血栓形成法：动脉血栓形成法，有实验性动体内血栓形成法

44、：动脉血栓形成法，有实验性动-静脉旁路血静脉旁路血栓形成法、电刺激颈总动脉血栓形成法、脑动脉血栓形成法、栓形成法、电刺激颈总动脉血栓形成法、脑动脉血栓形成法、冠状动脉血栓形成、实验性肺栓塞和药物引起血栓法及下腔静冠状动脉血栓形成、实验性肺栓塞和药物引起血栓法及下腔静脉血栓形成法等。脉血栓形成法等。高脂血症动物模型高脂血症动物模型n血管内皮细胞功能：血管内皮细胞功能：选择性通透作用选择性通透作用（引起胆固醇在血管壁沉淀，（引起胆固醇在血管壁沉淀，动脉硬化）动脉硬化）抗血栓性抗血栓性（健康的血管内腔面，不引起血小板（健康的血管内腔面，不引起血小板粘附、聚集，释放粘附、聚集，释放PGI2）血管紧张的

45、调节血管紧张的调节：血管舒张因子（：血管舒张因子（EDRF)和血和血管收缩因子（管收缩因子（EDCF）来实现。）来实现。毛细血管形成毛细血管形成：血管内皮细胞生长及形成毛细：血管内皮细胞生长及形成毛细血管的过程与糖尿病增殖症、网膜症和实体癌症的血管的过程与糖尿病增殖症、网膜症和实体癌症的增殖、慢性炎症、动脉粥样硬化等疾病的发生发展增殖、慢性炎症、动脉粥样硬化等疾病的发生发展密切相关。密切相关。产生血细胞粘接因子产生血细胞粘接因子：血管内皮细胞表面因各：血管内皮细胞表面因各种炎症因子和变性的种炎症因子和变性的LDL的刺激，可产生各种细的刺激，可产生各种细胞间粘附分子，引起白细胞、单核细胞、和血小

46、胞间粘附分子，引起白细胞、单核细胞、和血小板等于血管内皮细胞粘附，导致白细胞的血管外板等于血管内皮细胞粘附，导致白细胞的血管外浸润和动脉粥样硬化的初期病变。浸润和动脉粥样硬化的初期病变。n血管内皮舒张因子血管内皮舒张因子n血管内皮收缩因子血管内皮收缩因子n内皮素内皮素分泌活性物质的测定，包分泌活性物质的测定，包括血管内皮细胞括血管内皮细胞分泌功能分泌功能的相关基因表达的相关基因表达分析。分析。血管血管平滑肌平滑肌细胞研究细胞研究1、血管壁生长控制、血管壁生长控制 平滑肌细胞的复制增加，平滑肌细胞的复制增加，DNA合成增强，内皮合成增强，内皮完整性破坏，在平滑肌细胞增殖、完整性破坏，在平滑肌细胞

47、增殖、AS形成中起重形成中起重要作用。要作用。2、血管内皮细胞对平滑肌细胞功能的调节保护；、血管内皮细胞对平滑肌细胞功能的调节保护；分泌物质（分泌物质（EDRF、PGI2、EDCF）调节平滑肌）调节平滑肌细胞的收舒功能。细胞的收舒功能。PGI2）：升高细胞内）：升高细胞内cGMP浓度，激活蛋白浓度，激活蛋白激酶激酶A，使肌球蛋白脱磷酸化，舒张血管平滑肌。，使肌球蛋白脱磷酸化，舒张血管平滑肌。关于关于ASAS血管平滑肌细胞在抗血管平滑肌细胞在抗ASAS药物研究中的应用药物研究中的应用通过对合成型细胞分化诱导通过对合成型细胞分化诱导成收缩型平滑肌细胞，抑制成收缩型平滑肌细胞，抑制平滑肌细胞的增殖和

48、游走。平滑肌细胞的增殖和游走。开发：能使平滑肌细胞形态开发：能使平滑肌细胞形态转换的药物。转换的药物。降压实验降压实验降压试验检测指标降压试验检测指标n血压：血压直接测定法、间接测定法（非创伤）血压：血压直接测定法、间接测定法（非创伤）n离体血管环灌流离体血管环灌流n心肌肥厚形态学指标观察：左心室重与体重的比值，心肌肥厚形态学指标观察：左心室重与体重的比值，左室壁厚度等。左室壁厚度等。n心室胶原含量和浓度测定：求心室胶原含量和浓度测定：求羟脯氨酸羟脯氨酸含量。含量。1克羟克羟脯氨酸相当于脯氨酸相当于8.2克胶原蛋白。克胶原蛋白。n循环循环-内分泌系统的指标：血浆降钙素基因相关肽、内分泌系统的指

49、标：血浆降钙素基因相关肽、内皮素、心钠素内皮素、心钠素n肾素肾素-血管紧张素血管紧张素-醛固酮系统指标醛固酮系统指标nNOS、NO 检测、血清细胞因子检测（检测、血清细胞因子检测（TNF、IL-1、IL-2等）等）呼吸系统实验（化痰止咳平喘药）呼吸系统实验（化痰止咳平喘药）n化痰试验化痰试验：酚红排泌法：酚红排泌法 原理：酚酞和进入的酚酞和进入的OH-发生络合反应，生发生络合反应，生成有红色的物质成有红色的物质。用碳酸氢钠冲洗气管段，。用碳酸氢钠冲洗气管段，若酚红排泌多，冲洗处的液体颜色深，比若酚红排泌多，冲洗处的液体颜色深，比色后统计吸光度的差异。色后统计吸光度的差异。止咳实验止咳实验：氨水

50、引咳：氨水引咳平喘试验平喘试验：支气管灌流、离体气管条：支气管灌流、离体气管条中枢神经系统药物实验中枢神经系统药物实验（安神药、平肝熄风药）（安神药、平肝熄风药）自发活动自发活动观察：吊笼法、旷野法、活动仪观察：吊笼法、旷野法、活动仪睡眠睡眠实验：观察指标有潜伏期、睡眠时间实验：观察指标有潜伏期、睡眠时间（翻正反射消失时间）、睡眠发生率（翻正反射消失时间）、睡眠发生率抗惊厥抗惊厥实验：观察指标有潜伏期、惊厥程度实验：观察指标有潜伏期、惊厥程度（半定量）、惊厥发生率、死亡率（半定量）、惊厥发生率、死亡率造模物质：苯丙胺、造模物质：苯丙胺、回苏灵、戊四氮、回苏灵、戊四氮、咖啡因、烟碱等。咖啡因、烟