天然药化第5章黄酮类化合物a课件.ppt

1、第一节第一节 概述概述规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OO12345678OO12345786123456黄酮的含义黄酮的含义:以前是以二苯基色原酮(2-phenyl-chromone)为基本母核衍生的一类化合物的总称，由于该类化合物大多呈淡黄色或黄色，且分子中多具酮基，因此称为黄酮。基本结构基本结构OOABC12345678234561OOABC12345678234561OOABCR 狭义的黄酮，即狭义的黄酮，即2 2苯基色原酮（

2、苯基色原酮（2-2-苯基苯并苯基苯并吡喃酮）吡喃酮）OOABCOHOOOHOH（luteolin）（Apigenin）（）槲皮素 R=H （）芦丁 R=芸香糖（R）OOOHOHOOOHOHOROOABCOHR 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOABCOHHOOOOCH3OOHOHOHR OOOHHOOHOHOHOOOHHOOHOHHO如橙皮中的橙皮素和橙皮苷；甘草中的甘草素和甘草苷。如满山红叶中的二氢槲皮素和槲皮素共存，桑枝中的二氢

3、桑色素和桑色素共存。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOOOHOHOHglcOH黄柏素-7-O-葡萄糖苷OOABCOHOOABCOH母核为母核为3-3-苯基色原酮苯基色原酮的结构，即的结构，即B B环连接在环连接在C C环的环的3 3位位上。上。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检

4、查OOABCOR3R2OR1豆科植物葛根中所含有的大豆素、大豆苷、大豆素-7，4-二葡萄糖苷、葛根素和葛根素木糖苷均属于异黄酮类化合物。紫檀素 OOOOCH3OOOOOCH3OCH3O鱼藤酮二氢异黄酮类可看作是异黄酮类C2和C3双键被还原成单键的一类化合物。如中药广豆根中的紫檀素就属于二氢异黄酮的衍生物。毛鱼藤中所含有的鱼藤酮也属于二氢异黄酮的衍生物，具有较强的杀虫和毒鱼作用。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查麦冬高异黄酮A(ophio

5、pogonone A)4 高异黄酮homoisoflavonesOOOOOOHOHO和异黄酮相比，其B环和C环之间多了一个CH2 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查结构特点为结构特点为二氢黄酮二氢黄酮C C环的环的1、2位键断裂位键断裂生成的开环衍生物，生成的开环衍生物，即即三碳链不构成环三碳链不构成环。OOABC12345678234561OH-H+OHO123456234561红花苷OHO123456234561OHOglcHOHO

6、OHOOHOglcHOHOOOOHOglcHOHOOOOHOglcHOO新红花苷(Neocarthamin)红花苷(Carthamin)红花醌苷(Carthaone)梨根苷（phloridzin）OHOHOHOOglcOHO123456234561二氢查耳酮在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷。（aurones）OCHO1234567123456AB黄酮的黄酮的C C环分出一个碳原子变成五元环环分出一个碳原子变成五元环，其余部位不变，其余部位不变，是黄酮的同分异构体，属于苯骈呋喃的衍生物，又名是黄酮的同分异构体，属于苯骈呋喃的衍生物，又名噢哢噢哢。规范及指导原则适用于

7、食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查（Sulphuretin）OCHOHOOHOH黄花波斯菊 OOHOHHOR1R2OH规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOHOOHOH规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经

8、营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOHOHHOOHOHHH OOHOHHOOHHHOHOOHHOOHOHOHHOH无色矢车菊素规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOxanthones规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查异芒果素OOHOHOOHOHHOC

9、H2OHHOOH常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物当中，如：存在于石苇、芒果叶和知母叶中具有止咳去痰作用的异芒果素。OOOHCH3OOCH3OOOHHOOHOOOHHOHNCH3榕碱OOOHOOHOHOCH3CH2OHOH水飞蓟素 类别 特点与区别 组内区别黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH （C2-C3双键）二氢黄酮和 2-苯基色原酮 3-OH二氢黄酮醇 （C2-C3单键）异黄酮和二氢异黄酮 3-苯基色原酮 C2-C3双键和单键查耳酮和二氢查耳酮 C环开环 3碳链为双键和单键橙酮 C环为五元环花色素和黄烷醇 无4位羰基 离子和分子其他类 均有色原酮结构规范及指导原则适用于食品药品监管部门

10、对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批

11、发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查（二）连接位置（二）连接位置 黄酮苷中糖的连接位置与苷元的结构类型有关，黄酮苷中糖的连接位置与苷元的结构类型有关，黄酮醇类黄酮醇类:常形成常形成3-3-、7-7-、3-3-、4-4-单糖苷，单糖苷，或或3 3、7-7-，33、4-4-及及7 7、4-4-双糖苷等双糖

12、苷等.花色苷类花色苷类:多在多在3OH3OH连糖或形成连糖或形成3 3、55二糖苷二糖苷除除O苷外还有苷外还有C苷苷OOOHHOOOHOHOOOHOHOOHCH2ORHO牡荆素（牡荆素（Vitexin）R=H 葛根素葛根素R=Xylose葛根黄素木糖苷葛根黄素木糖苷规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 A环来自三个丙二酰辅酶环来自三个丙二酰辅酶A B环来自桂皮酰辅酶环来自桂皮酰辅酶A 黄酮类的基本骨架是由桂皮酸途径（黄酮类的基本骨架是由桂

13、皮酸途径（B环）环）与与AAMA途径（莽草酸途径和乙酸途径（莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径）丙二酸途径）（A环）生物合成的。环）生物合成的。黄酮类化合物生物合成的基本途径黄酮类化合物生物合成的基本途径规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 多为结晶性固体，多为结晶性固体，少数苷为无定形粉末。少数苷为无定形粉末。游离的苷元中游离的苷元中二氢黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）、黄烷黄烷 (醇醇 )（），其余则无光学活性。其余则无光学活性。规范及指导原则适

14、用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OOOHOOOOOOOH色原酮：无色色原酮：无色黄酮（醇）：灰黄黄酮（醇）：灰黄-黄色黄色异黄酮：微黄色异黄酮：微黄色二氢黄酮（醇）：无色二氢黄酮（醇）：无色呈色因素：结构中有无交叉共轭体系，助色团呈色因素：结构中有无交叉共轭体系，助色团 （-OH，-OCH3）数目及位置。）数目及位置。OOOHHOOH74规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类

15、医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 游离苷元：游离苷元：游离黄酮：有极性（含氧基团）；游离黄酮：有极性（含氧基团）；难溶或不溶于水，难溶或不溶于水，易溶于易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚 等等有机溶剂以及稀碱液（具有酸性）有机溶剂以及稀碱液（具有酸性）不溶于石油醚不溶于石油醚。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械

16、批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查溶解度稍大溶解度稍大 O OO OH HR R23规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 O+X-或HO-

17、规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 376673OHOOHOOOHOHglcglcOOOHOOOHOHHOOOHOHp 酸性的来源：酸性的来源：p 影响酸性强弱的因素：影响酸性强弱的因素：羟基的数目、位置综合起作用羟基的数目、位置综合起作用 7,47,4-二二OH OH 7-OH7-OH或或4 4-OH-OH 一般一般Ar-OHAr-OH 5-OH5-OH 5%NaHCO5%NaHCO3 3 5%Na5%Na2 2COCO3 3 0.2

18、%NaOH0.2%NaOH 4%4%NaOHNaOH OOOHHOOH74 PH PH梯度萃取梯度萃取 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OOHClOOH+Cl规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含

19、变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查区别区别类类二氢黄酮类二氢黄酮类/EtOH2NaBH4/MeOH 浓浓HCl 红红紫色紫色NaBH4是对是对二氢黄酮类化合物二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂专属性较高的一种还原剂规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 络合应具备的条件络合应具备的条件 OHOHOOH45OOHO34OOOHOHOHOH规范及指导原则适用于食品

20、药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOOOOOOOAlAlOOAl ClCl2Cl22 2 铅盐反应铅盐反应 醋酸铅反应醋酸铅反应与与1%1%醋酸铅或碱式醋酸铅，可生成醋酸铅或碱式醋酸铅，可生成 黄黄红色沉淀红色沉淀l 醋酸铅：醋酸铅：邻二酚羟基，或兼有邻二酚羟基，或兼有3-OH3-OH，4-C=O4-C=O 5-OH 5-OH，4-C=O4-C=Ol 碱式醋酸铅：碱式醋酸铅：一般酚羟基类一般酚羟基类 此方法也可应用于提取分离此方法也可应用于提取分离规范及指导

21、原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OH2 黄酮黄酮2%ZrOCl2规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查ClH2OOHOOHOHOHOOZrO543OHOOOHOHOORutinoseZr OClH2O543规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变

22、更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 鉴别鉴别 6.FeCl3反应：反应：Ar-OH显色剂显色剂硼酸络合反应硼酸络合反应OOHOBOOOOOH H+H H3 3BOBO4 4OOOHOHOOH5-5-羟基黄酮羟基黄酮 2-2-羟基查耳羟基查耳酮酮 草酸存在下，显黄色并带绿色荧光草酸存在下，显黄色并带绿色荧光 枸橼酸丙酮存在下则显

23、黄色而无荧光枸橼酸丙酮存在下则显黄色而无荧光OOOHOHOHOOHOCH3OCH3OHOHHOHO-H+1 1、日光及、日光及UVUV下，通过纸斑反应，样品用碱性试剂处理后下，通过纸斑反应，样品用碱性试剂处理后颜色变化来鉴定黄酮类化合物。颜色变化来鉴定黄酮类化合物。常用碱性试剂：氨蒸汽，常用碱性试剂：氨蒸汽，NaNa2 2COCO3 3水溶液水溶液 氨蒸汽处理后的色变，置空气中随即褪去，氨蒸汽处理后的色变，置空气中随即褪去，NaNa2 2COCO3 3水溶液则不褪色水溶液则不褪色 2 2、利用碱性试剂反应鉴别分子中某些结构特征、利用碱性试剂反应鉴别分子中某些结构特征 2 2）黄酮醇类在碱液中呈

24、黄色，通人）黄酮醇类在碱液中呈黄色，通人空气变为空气变为棕色棕色,可与其可与其他黄酮类区别他黄酮类区别 OHOH1 1）二氢黄酮在碱性中开环转为异构体）二氢黄酮在碱性中开环转为异构体-查耳酮，显橙黄色查耳酮，显橙黄色橙皮素橙皮素 橙皮查耳酮橙皮查耳酮OOOHOHOHOOHOCH3OCH3OHOHHOHO-H+规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）

25、的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 溶剂法溶剂法 溶剂的选择溶剂的选择 提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业

26、的各类监督检查适于适于苷苷类的精制类的精制 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查：规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查常用分离工艺：常用分离工艺：原料的提取浓缩液（水溶液）原料的提取浓缩液（水溶液）依次以石油醚、乙醚、依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取乙酸乙酯、水饱和正丁

27、醇萃取石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水饱和正丁醇水饱和正丁醇 母液母液（脂溶性杂质）（脂溶性杂质）（水溶性杂质（水溶性杂质)回收回收 回收回收 减压回收减压回收 苷元苷元 单糖苷单糖苷 多糖苷多糖苷 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各

28、类监督检查酚、醌、硝基化合酚、醌、硝基化合物物氢键吸附氢键吸附 吸 附 洗 脱 剂 解 吸 附 HO+HOCH3OOOCNHOH2CCH2H2CCH2H2CCONHHCH3HOCH3OCNHH2CCH2H2CCH2H2CCONHHOOO规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查（先（先后顺序）后顺序）规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案

29、后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查：OOHOOHOHOHOOHOOHOHOHOH规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OOOHOHHOOHOHOOOHOHHOOHOOOHOHHOOHOOHOOHOHOH规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OOHOOHOHOCH3OHO

30、CH3OHOHOOH规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 OOHOOHOHOHOOHOOHOHOHOCH3OOHOOHOHOHOHOOHOOHOHOHHOOOOOHOHOHrha-glcABCDE聚酰胺柱色谱聚酰胺柱色谱 洗脱顺序：洗脱顺序：E B A C DE B A C D规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及

31、医疗器械经营企业的各类监督检查 类型：类型：Sephadex G型型 （亲水性凝胶）（亲水性凝胶）Sephadex LH-20型型 (羟丙基葡聚糖凝胶，水及极性有机溶剂均可羟丙基葡聚糖凝胶，水及极性有机溶剂均可)规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查

32、原理：原理：“双重色谱双重色谱”原理原理 分子筛作用分子筛作用 吸附原理吸附原理 （按分子大小分离）（按分子大小分离）（按极性大小分离）（按极性大小分离）应用：黄酮苷及苷元的分离应用：黄酮苷及苷元的分离 苷元的分离苷元的分离 洗脱顺序：分子由大到小被洗脱洗脱顺序：分子由大到小被洗脱 极性由小到大被洗脱极性由小到大被洗脱叁糖苷叁糖苷 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5-OH黄酮黄酮 黄酮类化合物在黄酮类化合物在Sephadex-LH 20Sephadex-LH 20柱上的分离（甲醇为洗脱剂）柱上的分离（甲醇为洗脱剂）黄酮类化合物黄酮类化合物取代情况取

33、代情况Ve/VoVe/VoA A 芹菜素芹菜素5,7,4-5,7,4-三三OHOH5.35.3B B 木犀草素木犀草素5,7,3,4-5,7,3,4-四四OHOH6.36.3C C 槲皮素槲皮素3,5,7,3,4-3,5,7,3,4-五五OHOH8.38.3D D 杨梅素杨梅素3,5,7,3,4,5-3,5,7,3,4,5-六六OHOH9.29.2E E 山萘酚山萘酚-3-3-半乳鼠李糖基半乳鼠李糖基-7-7-鼠李糖鼠李糖苷苷三糖苷三糖苷3.33.3F F 槲皮素槲皮素-3-3-芸香糖苷芸香糖苷双糖苷双糖苷4.04.0G G 槲皮素槲皮素-3-3-属李糖苷属李糖苷单糖苷单糖苷4.94.9葡聚糖

34、凝胶（葡聚糖凝胶（Sephadex gelSephadex gel）柱层析柱层析 VeVe为洗脱样品时需要溶剂总量或洗脱体积，为洗脱样品时需要溶剂总量或洗脱体积，VoVo为柱子空体积，为柱子空体积，Ve/VoVe/Vo越小，越小，化合物越容易洗脱。化合物越容易洗脱。从表中可以看出，首先洗脱下来的是苷类成分，按照分从表中可以看出，首先洗脱下来的是苷类成分，按照分子筛原理分离，然后是游离黄酮类成分，按照吸附原理分离。子筛原理分离，然后是游离黄酮类成分，按照吸附原理分离。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售

35、经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查高效液相色高效液相色谱谱法（法（HPLC）适用于各种黄适用于各种黄酮类酮类化合物的分离化合物的分离原理：反相柱色原理：反相柱色谱谱（黄（黄酮类酮类化合物极性大）化合物极性大）固定相：固定相：ODS 流流动动相：水相：水-乙晴不同比例乙晴不同比例规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的

36、现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第

37、二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查分离与鉴定分离与鉴定弱极性弱极性黄酮类黄酮类规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可

38、（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 O-OO-OO规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 带带(nm)(nm)带带(nm)(nm)规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门

39、对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查1 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗

40、器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查取代基：取代基：OHOH等，为助色团等，为助色团 依红移规律推断取代基团依红移规律推断取代基团 黄酮（醇）：黄酮（醇）：带带 II、带、带I均强均强母核光谱特征母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带强、带I弱弱 母核的推断母核的推断 （甲醇）（甲醇）查耳酮、橙酮：带查耳酮、橙酮：带 II弱、带弱、带I强强 将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息

41、。可获得有关结构信息。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查（1 1）母核光谱特征）母核光谱特征：母核结构（交叉共轭系统）是产生紫外吸收的基础母核结构（交叉共轭系统）是产生紫外吸收的基础，其中，其中:由苯甲酰系统的电子跃迁产生的吸收峰为带由苯甲酰系统

42、的电子跃迁产生的吸收峰为带II 220II 220280nm280nm 由桂皮酰系统电子跃迁产生的吸收峰为带由桂皮酰系统电子跃迁产生的吸收峰为带I 300I 300400nm400nm。不同母核的黄酮类化合物由于共轭系统（交叉共轭不同母核的黄酮类化合物由于共轭系统（交叉共轭系统）的不同，由交叉共轭系统产生的带系统）的不同，由交叉共轭系统产生的带I I或带或带IIII的峰的峰位、峰形、吸收峰的强度也不相同，因此，据此可用于位、峰形、吸收峰的强度也不相同，因此，据此可用于黄酮母核类型的判断。黄酮母核类型的判断。规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和

43、延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查黄酮类化合物母核黄酮类化合物母核UVUV吸收特征吸收特征母核类型母核类型 带带II II（nmnm）带带I I（nmnm）备注备注黄酮黄酮 250250280280（强）（强）304304350350（强）（强）典型的交叉共轭系统典型的交叉共轭系统黄酮醇（黄酮醇（3-OH3-OH取代）取代）328 328357357（强）（强）3-OH3-OH供电减弱供电减弱黄酮醇（黄酮醇（3-OH3-OH游离）游离）358 358385385（强）（强）3-OH3-OH供电共轭供电共轭，带，带1 1红移

44、红移 异黄酮异黄酮 245245270270（强）（强）(sh)(sh)桂皮酰系统破坏桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇）270270295295（强）（强）(sh)(sh)查耳酮查耳酮 220220270270（弱）（弱）340340390390（强）（强）橙酮橙酮 220220270270（弱）（弱）370370430430（强）（强）规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 异黄酮异黄酮 245245278278（强）（强）(s

45、h)(sh)桂皮酰系统破坏桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇）270270295295（强）（强）(sh)(sh)查耳酮查耳酮 220220270270（弱）（弱）340340390390（强）（强）橙酮橙酮 220220270270（弱）（弱）370370430430（强）（强）规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查OOBOORAB 二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇）异黄酮（二氢）异黄酮（二氢）由由B B环产生的桂皮酰系统不存在，带环产

46、生的桂皮酰系统不存在，带I I弱，带弱，带IIII强强规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查

47、，以及医疗器械经营企业的各类监督检查规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查黄酮黄酮 、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带I I、带、带IIII）的位移规律）的位移规律诊断试剂诊断试剂 位移规律位移规律 归归 属属NaOMe NaOMe 带带I I红移红移40-60nm40-60nm，强度不降，强度不降 示有示有4-OH 4-OH 带带I I红移红移50-60nm50-60nm，强度下降，强度下降 示有示有3-OH

48、3-OH、但无、但无4-OH4-OHNaOAc NaOAc 带带IIII红移红移5-20nm 5-20nm 示有示有7-OH7-OH2.2.加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义中的意义（见下表）（见下表）规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 诊断试剂诊断试剂 位移规律位移规律 归归 属属NaOAc/HNaOAc/H3 3BOBO3 3 带带I I红移红移12-30nm 12-30nm 示示B

49、 B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基 带带IIII红移红移5-10nm 5-10nm 示示A A环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基 （不包括（不包括5 5，6-6-邻二酚羟基）邻二酚羟基）AlClAlCl3 3及及 AlClAlCl3 3/HCl/HCl谱图谱图=AlCl=AlCl3 3谱图谱图 示无邻二酚羟基示无邻二酚羟基AlClAlCl3 3/HCl AlCl/HCl AlCl3 3/HCl/HCl谱图谱图AlClAlCl3 3谱图谱图 示有邻二酚羟基示有邻二酚羟基 带带I I紫移紫移30-40 nm 30-40 nm 示示B B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基 规范及指导原则适用于食品药品监管部门对第

50、三类医疗器械批发/零售经营企业经营许可（含变更和延续）的现场核查，第二类医疗器械批发/零售经营企业经营备案后的现场核查，以及医疗器械经营企业的各类监督检查 诊断试剂诊断试剂 位移规律位移规律 归归 属属 带带I I紫移紫移50-65 nm 50-65 nm 示示A A、B B环均可能有邻二酚羟基环均可能有邻二酚羟基 AlClAlCl3 3/HCl/HCl谱图谱图=MeOH=MeOH谱图谱图 示无示无3-3-及及/或或5-OH5-OH AlCl AlCl3 3/HCl/HCl谱图谱图MeOHMeOH谱图谱图 示可能有示可能有3-3-及及/或或5-OH5-OH 带带I I红移红移35-55 nm