埃博拉出血热采样及标本运送课件.ppt

1、埃博拉出血热的采样与防护埃博拉出血热的采样与防护埃博拉出血热采样及标本运送1一、基本情况一、基本情况u潜伏期潜伏期2-212-21天天,一般为一般为5-125-12天。天。u传播途径：接触传播、传播途径：接触传播、气溶胶传播气溶胶传播。u临床表现：突然发病，各器官出血，肌肉疼临床表现：突然发病，各器官出血，肌肉疼痛，痛，DICDIC（弥散性血管内凝血）等（弥散性血管内凝血）等u90%90%的死亡患者在发病后的死亡患者在发病后1212天内死亡天内死亡(7-14天)。u病死率高，病死率高，可达可达50%-90%。尚无特效药和疫苗。尚无特效药和疫苗。u埃博拉出血热是最严重的出血热埃博拉出血热是最严重

2、的出血热埃博拉出血热采样及标本运送2一、基本情况一、基本情况 型别型别 扎伊尔型扎伊尔型（Ebola-Zare）：毒力强，人感染后病死率高。苏丹型苏丹型（Ebola-Sudan）：科特迪瓦科特迪瓦（Ebola-Cte dIvoire）：对黑猩猩有致死性,对人的毒力较弱。雷斯顿型雷斯顿型（Ebola-Reston）：在非人灵长类中有致死性,人感染不发病。抵抗力抵抗力 埃博拉病毒在室温下稳定，60 1小时大部分病毒被灭活,对紫外线、射线、甲醛、次氯酸、酚类等消毒剂和脂溶剂均敏感。埃博拉出血热采样及标本运送3二、临床表现及诊断二、临床表现及诊断u 1、流行病学：来自疫区，或流行病学：来自疫区，或3

3、3周内有疫区旅行史，或与患者、周内有疫区旅行史，或与患者、感染动物接触。感染动物接触。u 2 2、临床表现：急性起病，发热伴极度乏力、牙龈出血、鼻出、临床表现：急性起病，发热伴极度乏力、牙龈出血、鼻出血、黏膜出血、瘀点和紫斑、血便等及其他症状（头痛、肌痛、血、黏膜出血、瘀点和紫斑、血便等及其他症状（头痛、肌痛、咽痛、恶心、呕吐咽痛、恶心、呕吐)。u 3 3、实验室检测：、实验室检测：（1 1）病毒抗原阳性）病毒抗原阳性 （2 2）血清特异性）血清特异性IgMIgM抗体阳性抗体阳性 （3 3）恢复期血清）恢复期血清IgGIgG比急性期有比急性期有4 4倍升高倍升高 （4 4）核酸阳性）核酸阳性

4、（5 5）分离到埃博拉病毒）分离到埃博拉病毒u 疑似病例：疑似病例：1+21+2u 确诊病例：疑似病例确诊病例：疑似病例+3+3中任一检测阳性中任一检测阳性埃博拉出血热采样及标本运送4三、标本采集三、标本采集-生物安全防护生物安全防护u1 1、所有样本的采集或处理应遵守、所有样本的采集或处理应遵守医院感染管理医院感染管理规范规范和和病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例等相关生物安全规定，在标准预防的基础上等相关生物安全规定，在标准预防的基础上的预防措施。的预防措施。u2 2、样本采集时，应严格按照、样本采集时，应严格按照实验室规定做实验室规定做好个人防护。应穿戴医用

5、防护服、可遮盖口鼻的医好个人防护。应穿戴医用防护服、可遮盖口鼻的医用防护口罩用防护口罩(N95)(N95)、双层乳胶手套、护目镜、头部、双层乳胶手套、护目镜、头部面部保护罩、专用橡胶靴等。面部保护罩、专用橡胶靴等。埃博拉出血热采样及标本运送5三、标本采集三、标本采集-生物安全防护生物安全防护u3 3、采血场所应在相对独立的场所，应符合、采血场所应在相对独立的场所，应符合要求。要求。如果不具备上述条件，可用相邻的房间提供足够的安全如果不具备上述条件，可用相邻的房间提供足够的安全空间，备有除了病人常规护理的材料外应具备手套、防空间，备有除了病人常规护理的材料外应具备手套、防护服和防护面具等，同时要

6、装备有洗手的设施和装有消护服和防护面具等，同时要装备有洗手的设施和装有消毒液的桶。毒液的桶。u4 4、采样人员应由经过、采样人员应由经过的人员执行，的人员执行，采血时应采血时应在场。在场。埃博拉出血热采样及标本运送6四、标本采集与保存四、标本采集与保存1 1、标本采集时间、标本采集时间 初次送检：目前检测方法中主要是核酸检测，埃博拉出血初次送检：目前检测方法中主要是核酸检测，埃博拉出血热患者发病后热患者发病后3 3天内的血标本，病毒核酸阳性的可能性很天内的血标本，病毒核酸阳性的可能性很小，因此小，因此送检。送检。再次送检：如果留观再次送检：如果留观/疑似病例发病疑似病例发病7272小时后血标本

7、实验小时后血标本实验室检测阴性，但临床表现比较典型的患者，可在室检测阴性，但临床表现比较典型的患者，可在再次采集血标本送检。再次采集血标本送检。解除隔离治疗送检：确诊病例解除隔离治疗前采集血标本解除隔离治疗送检：确诊病例解除隔离治疗前采集血标本进行复检。进行复检。埃博拉出血热采样及标本运送7四、标本采集与保存四、标本采集与保存 2 2、标本采集方法、标本采集方法 .用用采集静脉血，每管采集静脉血，每管3mL3mL，标记后，标记后44保存保存。并。并填写标本采集登记表（填写标本采集登记表（附表附表1 1）.标本采集数量标本采集数量采集采集4 4管，其中管，其中2 2管送省疾控中管送省疾控中心进行

8、埃博拉病毒检测，心进行埃博拉病毒检测，2 2管保存于本单位，待排除管保存于本单位，待排除埃博拉病毒感染后用于其他病原体的筛查；埃博拉病毒感染后用于其他病原体的筛查；采集恢复期血标本，送国家疾控中心病毒采集恢复期血标本，送国家疾控中心病毒病所进行检测。病所进行检测。埃博拉出血热采样及标本运送8埃博拉出血热采样及标本运送9四、标本采集与保存四、标本采集与保存3 3、标本保存方法、标本保存方法 .未分离血清的全血标本应未分离血清的全血标本应44保存，并尽快分离血清；保存，并尽快分离血清；.血清标本长期保存应置于血清标本长期保存应置于-70-70以下以下；.标本保存不超过标本保存不超过1 1周可置周可

9、置-20-20。4 4、标本信息收集（填写埃博拉出血热、标本信息收集（填写埃博拉出血热流行病学个案调查表流行病学个案调查表）病例一般信息：姓名、性别、年龄、国籍病例一般信息：姓名、性别、年龄、国籍 来自疫区国名、入境时间，发病日期，发病前来自疫区国名、入境时间，发病日期，发病前2121天的疫区居住史，旅行史、天的疫区居住史，旅行史、类似病例接触史等。类似病例接触史等。主要临床症状：发热、严重乏力、头痛、肌痛、呕吐、腹泻、出血表现等主要临床症状：发热、严重乏力、头痛、肌痛、呕吐、腹泻、出血表现等 标本详细信息：采样时间、种类、标本量等。标本详细信息：采样时间、种类、标本量等。送样信息：负责送检的

10、联系人姓名、联系电话、送检时间等送样信息：负责送检的联系人姓名、联系电话、送检时间等埃博拉出血热采样及标本运送10标本容器标本容器第一层第一层2mL,2mL,可离心有垫圈可离心有垫圈第二层第二层15mL,15mL,封口膜封口封口膜封口易标记易标记埃博拉出血热采样及标本运送11埃博拉出血热采样及标本运送12五、标本包装与运输五、标本包装与运输1 1、包装方式：、包装方式：A A类包装（类包装（UN2814UN2814要求）按照三重包装系统包装：要求）按照三重包装系统包装：第一层包装（可密封样本袋、第一层包装（可密封样本袋、50mL50mL离心管）；离心管）；第二层安全壳容器（防水、防漏）；第二层

11、安全壳容器（防水、防漏）；第三层外层运输包装。第三层外层运输包装。样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中，为降样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中，为降低破碎或泄漏的风险，用吸水纸等填充物固定标本袋。低破碎或泄漏的风险，用吸水纸等填充物固定标本袋。安全壳容器和外包装放冰袋。安全壳容器和外包装放冰袋。埃博拉出血热采样及标本运送13埃博拉出血热采样及标本运送14五、标本包装与运输五、标本包装与运输2 2、运输方式：、运输方式：全血采用冷藏运输，血清可采用冷冻运输全血采用冷藏运输，血清可采用冷冻运输不要打开采集管或分装样本。不要打开采集管或分装样本。专人专车。专人专车。埃博拉出血热采样及标本运送1

12、5六、实验室检测六、实验室检测u 凡涉及埃博拉病毒的分离、培养和动物实验，需在生物安全凡涉及埃博拉病毒的分离、培养和动物实验，需在生物安全4 4级（级（BSL-4/ABSL-4BSL-4/ABSL-4）实验室内进行。）实验室内进行。u 涉及未经培养有感染性材料的实验活动，需在涉及未经培养有感染性材料的实验活动，需在BSL-3BSL-3实验室内实验室内进行。进行。u 血清学检测应在血清学检测应在BSL-3BSL-3实验室内，且标本需先实验室内，且标本需先601601小时灭活后，小时灭活后，再进行后续实验操作。再进行后续实验操作。u 核酸检测时核酸检测时,需在需在BSL-3BSL-3实验室内加入核

13、酸提取裂解液实验室内加入核酸提取裂解液,完成病完成病毒毒RNARNA提取，并对装有病毒提取，并对装有病毒RNARNA样品管的外表面进行彻底消毒后，样品管的外表面进行彻底消毒后，可在可在BSL-3BSL-3实验室以外进行扩增检测。实验室以外进行扩增检测。埃博拉出血热采样及标本运送16六、实验室检测六、实验室检测1 1、病原学检测：、病原学检测：核酸检测：主要检测方法。发病后核酸检测：主要检测方法。发病后3 3天内，血标本中埃天内，血标本中埃博拉病毒核酸检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒博拉病毒核酸检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染。发病后感染。发病后3 31010天血标本病毒核酸检出率高

14、，检测天血标本病毒核酸检出率高，检测阴性可排除埃博拉病毒感染。阴性可排除埃博拉病毒感染。病毒抗原检测：用酶联免疫法检测埃博拉病毒核蛋白病毒抗原检测：用酶联免疫法检测埃博拉病毒核蛋白抗原。病毒抗原检测阳性可确诊。发病后抗原。病毒抗原检测阳性可确诊。发病后3 3天内，血标天内，血标本中埃博拉病毒抗原检出率低，检测阴性不能排除埃博本中埃博拉病毒抗原检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染，发病后拉病毒感染，发病后3 31010天血标本病毒抗原检出率高。天血标本病毒抗原检出率高。埃博拉出血热采样及标本运送17六、实验室检测六、实验室检测2.2.血清学检测：血清学检测：血清特异性血清特异性IgMIgM抗

15、体：采用捕获法抗体：采用捕获法ELISAELISA方法检测。方法检测。IgMIgM抗体阳性可确诊。抗体阳性可确诊。血清特异性血清特异性IgGIgG抗体：目前采用间接法抗体：目前采用间接法ELISAELISA检测检测IgGIgG抗体。单份血清埃博拉病毒抗体。单份血清埃博拉病毒IgGIgG抗体阳性提示曾感染抗体阳性提示曾感染埃博拉病毒，双份血清埃博拉病毒埃博拉病毒，双份血清埃博拉病毒IgGIgG抗体阳转或恢抗体阳转或恢复期滴度较急性期复期滴度较急性期4 4倍或者以上增高者可确诊。倍或者以上增高者可确诊。埃博拉出血热采样及标本运送18七、样本保存和销毁七、样本保存和销毁u 实验室检测埃博拉病毒阳性血

16、标本，应根据相关生物安全规定保存在实验室检测埃博拉病毒阳性血标本，应根据相关生物安全规定保存在-70-70以下，实行以下，实行“双人双锁双人双锁”管理和取样管理和取样“审批审批”制度。制度。u 实验室检测埃博拉病毒阴性血标本，应所采集疑似患者或密切接触者实验室检测埃博拉病毒阴性血标本，应所采集疑似患者或密切接触者完全排除埃博拉病毒感染后，转入其他血清库保存或销毁。完全排除埃博拉病毒感染后，转入其他血清库保存或销毁。u 所有血清销毁时，均应在冰箱内取出后，在生物安全柜内，待其自然所有血清销毁时，均应在冰箱内取出后，在生物安全柜内，待其自然融化后，置于含有效消毒剂（融化后，置于含有效消毒剂（0.5

17、%0.5%有效氯）内浸泡，然后高压灭活。有效氯）内浸泡，然后高压灭活。u 所有销毁样本均应在相应数据库清单内标明，销毁的时间和操作人，所有销毁样本均应在相应数据库清单内标明，销毁的时间和操作人，阴性样本销毁记录保存阴性样本销毁记录保存1 1年以后可以清除，阳性样本的销毁记录应保年以后可以清除，阳性样本的销毁记录应保存存5 5年以上。年以上。埃博拉出血热采样及标本运送19八、注意事项八、注意事项u1 1、标本采集时要加强个人面部防护、标本采集时要加强个人面部防护u2 2、标本标记清晰，并完整收集标本信息、标本标记清晰，并完整收集标本信息u3 3、标本采集后不要在、标本采集后不要在P3P3实验室外打开标本分实验室外打开标本分装或灭活装或灭活u4 4、标本运输时低温冷藏，避免反复冻融，专、标本运输时低温冷藏，避免反复冻融，专人专车人专车埃博拉出血热采样及标本运送20埃博拉出血热采样及标本运送21