1、海参（Sea Cucumber）总总RNA的提取的提取TRIzol法法 RT-PCR结果 二次PCR结果RT-PCR割胶回收及菌落PCR结果SjCa保守区测序结果保守区测序结果SjCa保守区的BLASTX长度为443 bp的产物5 RACE实验3 RACE实验SjCa3 RACE PCR结果结果3RACE 割胶回收及菌落PCR结果SjCa 3 RACE测序结果测序结果使用试剂盒：使用试剂盒：5-Full RACE Kit（TaKaRa）5 RACE PCR结果结果5RACE 割胶回收及菌落PCR结果SjCa 5 RACE测序结果 53mRNAAAAATTTTTTTTAAAATTTT5 33ad
2、aptor outer primerPCR反应双链DNA直接测序已知序列特异性引物Gsp1 Gsp23adaptor primer inner primer5 m7G-P-P-PAAA 35 m7G-P-P-PAAA 3AAA 3TAPHO-P5adaptorRTAAA 355Gsp1 已知序列特异性引物 5outer primermRNAcDNARandom 9 mers使用5RACE方法扩增5端序列3 完整的RNA不完整的RNA33PP去磷酸化酶（CIAP）去“帽子”酶（TAP）P5RACE AdaptorTAP()反应：检验去磷酸化的反应不彻底造成假阳性3 完整的RNA不完整的RNA33PP去磷酸化酶（CIAP）去“帽子”酶（TAP）5RACE AdaptorM-MLV()反应：检测染色体反应：检测染色体DNA造成的假阳性造成的假阳性3 完整的RNA不完整的RNA33PP反转录酶反转录酶M-MLVP5RACE Adaptor
