MCVRBC脆性灵敏度特异度广州医科大学教育技术中心课件.ppt

1、2023-1-101医学检验系2005届李蔼文 指导老师：孙筱放 李少英 广州市第二人民医院妇产科研究室 毕业论文2 目的目的 探讨红细胞的MCV，MCH，MCHC，RDW等血液学指标、红细胞脆性、HB电泳，对地中海贫血患者及缺铁性贫血的诊断价值。方法 健康对照组30例;地中海贫血患者100例(其中地中海贫血患者60例，地中海贫血患者40例)，缺铁性贫血30例。全部用血细胞计数仪仪血常规测定、红细胞脆性的检测、血红蛋白电泳仪进行血红蛋白电泳分析、地贫基因检测、血清铁蛋白检测。结果 病人组血红蛋白电泳HBA，HBA2，HBF异常，其MCV，红细胞脆性均降低，与正常对照组比较有显著差异（P0.05

2、），MCV，RBC脆性对地贫的灵敏度和特异度分别为为98%，93%及77%，80%。HBA2对地贫，地贫灵敏度分别为83.3%,95%。而RDW基本正常,灵敏度为73%，但缺铁性贫血的RDW升高，灵敏度为70%。结论 1.MCV，血红蛋白电泳，红细胞脆性应用对地贫有诊断意义，可作为其简单，方便，快速，较准确的筛查方法；2.对于缺铁性贫血，RDW可作为先于血清铁蛋白的初筛试验，值得推广应用。3地中海贫血；MCV；MCH；RDW；红细胞脆性；血红蛋白电泳 4英文摘要 Abstract ObjectiveAbstract Objective TO study the value of mean co

3、rpuscular volume(MCV),mean corpuscular hemoglobin(MCH),mean corpuscular Hemoglobin concentration(MCHC),red blood cell volume distribution width(RDW),red cell osmotic fragility test(RCOF)and Hemoglobin electrophoresis for the diagnosis of thalassemia and to comepare with IDA.MethodsMethods 30samples

4、of the healthy people without IDA or orther anemia,and 60samples of-thalassemia,40 samples of-thalassemia,30 samples of IDA,were detected by hermoatology analyzer,red cell osmotic fragility and Hb electrophoresis,genes test of thalassemia.5 Result By the Hb electrophoresis,patientsHbA,HbA2,HbF were

5、changed,MCV,RCOF were also decending,having obvious diffenerce compared with healthy people(P60%.113.血红蛋白电泳：取EDTA或肝素抗凝全血2ML，采用美国HELENA LABORATORIES公司spife3000型全自动电泳仪进行血红蛋白电泳分析。正常参考值成人男女HBA22.53.5%,HbA95%,HbF2%,没有异常血红蛋白带出现。4血清铁蛋白检测：取空腹不抗凝血3ML采用固相放免法，正常参考值成人男性15-200微克每升，成人女性12-150微克每升。5地贫的基因诊断：提取外周血白细

6、胞DNA后，珠蛋白基因分析采用深圳益生堂生物试剂，应用单管四重PCR扩增后再行琼脂糖电泳检测。珠蛋白基因分析采用深圳益生堂生物试剂，用膜反向杂交技术，采用24条探针，同时检测中国人群常见的8个位点和9个少见的位点突变（41-42，654，28，71-72，17，31，27/28点突变）。121314-地贫基因膜杂交结果判定地贫基因膜杂交结果判定 15三、数据检测分析：1.根据全国临床检验操作规程，血液学指标中的MCV临界值为82fl，RBC脆性的临界值为60,因此，表5，6中的MCV阳性数和敏感数均为82fl,阴性数和不敏感数均为82，RBC脆性阳性数和敏感数均为60,阴性数和不敏感数均为60

7、。2.诊断检测评价指标：灵敏度=a/(a+c)*100%,特异度=d/(b+d)*100%,其中a为检测方法检测地贫患者的阳性数，b为检测方法正常组的阳性数，c为检测方法检测地贫患者的阴性数，d检测方法正常组的阴性数。3.卡方检验公式：X2=（AD-BC）2*（A+B+C+D）/（A+B）（C+D）（A+C）（B+D），若B+C0.05无显著性差异，P14.6 11.6RDW14.6 合计地中海贫血 23 77 100缺铁性贫血 21 9 30 21表4 HBA2单项检测地贫的结果 组别 3.5合计 正常对照组 1 26 3 30 -地中海贫血 50 10 0 60 -地中海贫血 0 2 38

8、 40 22表5 MCVRBC脆性单项检测地贫的结果 MCV RBC脆性 灵敏度 特异度 组别总例数 阳性数 阴性数 阳性数 阴性数 MCV 脆性 MCV 脆性 地贫组 100 98（a）2(c)77(a)23(c)正常组 30 2（b）28(d)8(b)24(d)98%77%93%80%23表6 MCVRBC脆性对100例地贫的各自诊断价值 RB C 脆 性 MCV +-合计 2 P +77（A）21(B)98 -0(C)2(D)2 合计 77 23 100 19 0.00 24 小细胞低色素贫血是由于珠蛋白合成障碍（血红蛋白病）或缺铁不足引起血红蛋白合成障碍（缺铁性贫血）所致，地贫与缺铁性

9、贫血均属小细胞低色素贫血。在我国地贫主要分布于海南，广东，广西，湖南，湖北，江西，四川，贵州，云南等省，是现阶段我国南方地区常见的遗传性疾病之一。地贫是由于珠蛋白基因缺失或突变导致珠蛋白肽链合成障碍，或链失衡的遗传性血红蛋白病。除HB成分改变外，幼红细胞利用铁也发生障碍，呈小细胞低色素性,地贫MCV，MCH均降低，但RDW多为正常，这与同是小细胞低色素贫血的缺铁性贫血性不同。另外，由于多余的珠蛋白链沉附于胞膜内面，使红细胞变得僵硬，故红细胞对渗透溶解的抵抗性增加（即脆性降低）。血 红 蛋 白 电 泳 作 进 一 步 分 析，若H B A23.5%可作基因分析了解类型。25 近年来由于全自动血细

10、胞分析仪的推广应用，国内外学者对MCV及RDW的认识不断加深，MCV,RDW用于IDA的筛查屡有文章报道7，1983年Bassmen1,2等报道MCV，RDW对不同病因所致的贫血可进行新的形态学分类，该法根据MCV，RDW二个参数实验结果将贫血分为小细胞均一性，小细胞不均一性等六项6。用此分类法分类：地贫属于小细胞均一性贫血（MCV/RDW正常），IDA属小细胞不均一性贫血（MCV/RDW）3。从表1可看出缺铁性贫血MCV（P0.05）RDW(P0.05）。因此地贫可从外周血血液指标与缺铁性贫血鉴别。而RDW对缺铁的灵敏度为70%,可作为先于血清铁蛋白对缺铁的初筛指标，为病人省下不少的抽血麻烦

11、。26 从表1看MCH，MCHC，RDW，对地贫的筛选与正常比较没有显著性差异（P0.05），敏感性不十分理想。而MCV，红细胞脆性测定值与正常比较有明显的显著性差异（P0.01），HBA2的P值在0.01-0.05之间，也存在一定的差异。因此，结合MCV，RBC脆性与血红蛋白电泳的三项检查可减少漏诊，而且MCV对地贫的灵敏度为96%，特异度为93%，（见表5）所以MCV降低是地贫患者的特征之一。且目前国内外已较普遍应用MCV为首选筛查地贫携带者4,9，它的结果在血细胞分析时可一次获取，符合出筛的指标。27 分析表2结果中发现，1地贫杂合子从血液学检查MCV，MCH，MCHC结果看，均有不同程

12、度的降低，且有显著性差异，静止型地贫由于只有一个基因缺失，从外观上难以发现，通过MCV，MCH可以看出降低，但MCHC属于正常范围下限特异性不高，HBA2不太明显，与正常人比较没有显著性差异。HBH病由于缺失三个基因，贫血严重，M C V，M C H，M C H C 均 明 显 降 低，HBA23.5%,MCV，MCH均降低有显著差异。从表4看出，HBA2对地贫,地贫的诊断灵敏度分别为83.3%,95%，-地贫的诊断价值较高。28 RBC脆性试验操作简单且经济，考虑医院经济影响，在某些基层单位缺乏血细胞分析仪的情况下不失为一种筛查方法。然而，从表5可看出RBC脆性对地贫的灵敏度为77%，特异度

13、为80%，低于MCV对地贫的灵敏度与特异度，通过表6卡方检验可显著地发现MCV的诊断价值优于RBC脆性（卡方检验得P0.001,且在贫血严重的标本由于溶血产生的红细胞碎片或网织红细胞增加8，或标本不新鲜影响RBC脆性的结果，且是手工操作，易产生假阴性60，使一部分地贫携带者没被检查出来，会导致地贫患儿的出生造成严重的后果，因此建议在婚检中取消RBC脆性。29 从上面表1，2可看出过去人们一直把MCV，MCH，MCHC三项指数作为贫血类型的分类（大细胞贫血，正细胞贫血，小细胞贫血），但实践证明MCHC的意义不大，不能全面反映红细胞的病理变化。也有文章报道MCV，血红蛋白电泳，红细胞脆性联合检测地

14、贫11，但从表3，4，5，6可看出MCV，HBA2各自对地贫的灵敏度颇高，单独作为对地贫的诊断有一定的价值。而在小细胞低色素贫血中，缺铁性贫血RDW一般升高，有助于缺铁的快速筛选及与地贫的比较。血清铁蛋白是早期缺铁性贫血实验诊断的金指标，但再抽血，需要放免仪器或生化仪器，许多基层无法开展。所以用RDW是一个廉价，快速而又灵敏度较高的指标，应在基层给予推广。因此临床医生特别是从事妇幼保健工作的医务人员对此要有进一步的认识，除对我国南方地贫高发区的人群做好婚前该方面的检查外，对孕妇应常规进行血常规的MCV，RDW，血红蛋白电泳（地贫筛查）检查，必要时进行地贫基因检测，以尽可能地减少地贫的漏诊与误诊

15、，作好优生工作，提高人口质量。301 Bassmen J,et al.Improved Classification of Anemia by MCV and RDWJ.Am J Clin Patrhol,1983;80:322.2McDonold ME.Evaluation of the concept of the classification of anemias by use the RDW/MCV Blood,1984,645:45.3Monzon CM.Evaluation of erythrocyte disorders with MCV and RDW.Clin pediatr

16、,1987,26:632.4 邓捷,刘新质,刘颖琳,等.应用平均红细胞体积测定法及红细胞脆性一管定量法筛查地中海贫血.中华妇产科杂志,2000,35:610-612.5 曾溢涛.血红蛋白的诊断与治疗J.中华血液学杂志,1996;17(8);393.6 丛玉隆.今日临床检验学M.第一版.北京:中国科学技术出版社,1997;32(2):81.7 林琳华,任景慧,曾彩兰,等.检测红细胞体积和红细胞分布宽度在妊娠合并缺铁性贫血诊断中的价值J.中华妇产科杂志,1997;32(2):81.8 陈林立,吴振安.MCV及RDW对溶血性贫血的价值的探讨J.湖南医科大学学报.1998;23(2):203.9 梁昕，潘丽珍，等血液学指标在育龄人群地贫筛查中的诊断价值.中国优生与遗传杂志,2003,11:129-132.10李泽松，李建新，张文，等.多重聚合酶链反应在-地中海贫血诊断中的应用.中华检验医学杂志，2005，28：247-250.11何雅军，杨小华，马福广，等红细胞平均体积和脆性及血红蛋白电泳联合检测在地中海贫血诊断中的价值。中华检验医学杂志,2005,03:244-246.12何政贤.地中海贫血的预防与治疗C.中山医科大学附属第三医院儿科教研室.1997:35.31