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1、植物组织培养试题库一、名词外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性

2、反应的苗木。灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。微尖嫁接：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。主要程序：无菌砧木培养茎尖准备嫁接嫁接苗培养移栽。植物细胞全能性：一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化再生成一个完整的植株。人工种子：将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提

3、供养分的胶囊里，再在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似自然种子的结构。试管苗驯化：植物组织培养中获得的小植株，长期生长在试管或三角瓶内，体表几乎没有保护组织，生长势弱，适应性差，要露地移栽成活，完成由“异养”到“自养”的转变，需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养：植物的根、茎、叶、花器（包括花药、子房）和幼小果实的无菌培养。微体嫁接：指将0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗，嫁接到由试管中培养出来的无菌实生砧木上，继续进行试管培养，愈合成为完整的的植株。快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养,并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁

4、殖方法.脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化.原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象.愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组织诱导,生长和发育的一门技术驯化：试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼310d，让试管苗接受自然光的照射，感受自然温度的昼夜温差现象，使其壮实，然后再开瓶移植，经过较低温、湿度的处理，以适应自然温、湿度条件。褐变：是指外植体在

5、培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。二、填空题1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器 、空调机、天平 、显微镜 、 蒸馏水发生器等。3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源 ，而且还能维持培养基渗透压 4、培养基灭菌一般在 108 kPa的压力下，锅内温度达 121 ，维持 20-30 min。5、在离体叶培养中，6-BA和KT利于芽 的形成；2,4-D利于愈伤组织 的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养中，茎和

6、芽的分化主要有4个途径：直接产生不定芽、由愈伤组织产生不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒 。8、花药培养前的预处理:低温冷藏 是最常用的方法。1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段 、 奠基阶段 和 快速发展和应用阶段 。2、培养基最常用的碳源是 蔗糖，使用浓度在1%-5% 常用 3 %。3、培养基的种类按其态相不同分为 固体培养基 与 液体培养基 ，其灭菌方法一般采用 湿热消毒 灭菌方法。4、pH的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pH大于6.0时，培养基将会 变硬 ，低于5.0时，琼脂 不能很好地凝固 。5、一般情况

7、下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于 根的形成和愈伤组织 的形成；比值低，有利于 芽 的形成。6、选择外植体时应选择 选择优良的种质、选健壮的植株 、选最适的时期 和选取适宜的大小 。7、花药和发粉培养的共同特点是利用花粉 (小孢子)染色体数目的单倍性，培育出单倍体植株。8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。1、组织培养植株再生的途径： 体细胞胚胎发生途径 和 器官发生途径 。2、培养基的主要成分包括无机营养成分（大量元素、微量元素和铁盐）、有机营养成分（包括维生素、氨基酸等）、植物生长调节物质、碳水化合物、其它物质。3、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的 凝固剂和支持物 ，一般

8、用量为 6-10gL 之间。4、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于 根的形成和愈伤组织 的形成；比值低，有利于 芽 的形成。5、试管苗的生态环境： 高温且恒温 、 高湿 、 弱光 、 无菌 。6、愈伤组织的形态发生方式主要有 不定芽方式 和 胚状体 方式。7、无病毒苗的保存分：隔离保存和长期保存两种方法。8、压片染色法是检测划分发育时期的简便有效方法，常用染色剂为醋酸洋红。三、单项选择题 1、1974年我国朱至清等设计了（ B ）培养基，目前广泛应用在花药培养中。A、马铃薯-2号 B、N6 C、W14 D、c172、组培室应建立在安静、清洁，并且在该地长年主风向的（ A ）方向。A

9、、上风 B、下风 C、左风 D、右风3、制作每升固体培养基常用琼脂的用量为（ B ）克。A、46 B、610 C、1015 D、15204、下列培养类型不属于液体培养的是( D )A、旋转培养 B、纸桥培养 C、振荡培养 D、看护培养5 、进行茎尖培养脱毒时，通常以带 1-3 个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。则茎尖的长度约为（ B ）。 A 、 0.1-0.3mm B 、 0.3-0.5mm C 、 0.4-0.6mm D 、 0.6-0.8mm6、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（ C ）。A、污染 B、褐变 C、黄化 D、玻璃化7、超低温种质保存的温度为（ C ）。 A、01

10、5；B、-80； C、-196； D、-2808、在植物组织培养表面灭菌时，常用的酒精浓度为（ A ）。A、70%-75% B、80%-85% C、90%-95% D、100%9、一般来说，在愈伤组织培养时，幼年细胞和组织比成年细胞和组织（ B ）。A、困难 B、容易 C、一样 D、不一定10、利用花粉或花药培养，进行单倍体育种选育一个新品种只需（ C ）年。A、1-3 B、2-4 C、3-5 D、4-61、细胞工程、（ B ）、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。A、蛋白质工程 B、基因工程 C、微生物工程 D、生化工程2、配制（ B ）溶液时应先用10%的HCl溶解，再加蒸馏水定容。A、

11、2,4-D B、BA C、GA3 D、IAA3、炼苗的环境开始时和（ A ）相似，后期类似于田间栽培条件。A、培养室条件 B、无菌界室条件 C、缓冲间条件 D、准备室条件4、离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是（ A ）。A、生长素 B、细胞分裂素 C、脱落酸 D、乙烯5、植物组织培养实验室需要定期用（ A ）进行熏蒸。A、高锰酸钾和甲醛 B、酒精和洗液 C、高锰酸钾和酒精 D、高锰酸钾和洗液6、进行无菌操作前，工作人员可以不必（ A ）。A、洗脸 B、换拖鞋 C、穿工作服 D、洗手7、电子天平的感量一般在（ C ）范围。A、0.1g或0.01g B、0.01g或0.001g C、0.0

12、01g或0.0001g D、0.1g或0.0001g8、进行干热灭菌时，应在150时保持（ B ）分钟。A、30 B、60 C、90 D、1209、适合双子叶植物花药培养的培养基是（ A ）。 A 、 MS 培养基 B 、 B 5 培养基 C 、 N 6 培养基 D 、 White 培养基 10、下列不属于原生质体培养的是（ D ）A 、平板培养 B 、液体浅层培养 C 、悬滴培养 D 、糖培养 1、为了减少污染，一般选择培养材料的大小，在（ A ）之间。A、0.1-0.5cm B、0.5-1.0cm C、1.0-1.5cm D、1.5-2.0cm2、世界上首次提出植物细胞具有全能性的理论概念

13、的科学家是（ B ）。 A、 Morel B、Haberlandt C、 Schleiden D、 White3、在植物组织培养表面灭菌时，常用的氯化汞浓度为（ A ）。A、0.1-1% B、0.2-2% C、0.3-3% D、0.4-4%4 、在细胞悬浮液成批培养过程中，细胞数目会不断发生变化，其中细胞数目迅速增加，增长速率保持不变的是（ C ）。 A 、减慢期 B 、延迟期 C 、对数生长期 D 、静止期 5、下列不属于原生质体培养的是（ D ）A 、平板培养 B 、液体浅层培养 C 、悬滴培养 D 、糖培养 6、在愈伤组织培养时，一般双子叶植物比单子叶植物诱导愈伤组织（ B ）。A、困难

14、 B、容易 C、一样 D、不一定7、在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是（B ）。 A 、成熟花粉粒 B 、单核花粉期 C 、二核花粉期 D 、三核花粉期 8、植物组织培养中大多数植物都适用的培养基是（ A ）培养基。A、MS B、N6 C、White D、B59、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（ C ）。A、污染 B、褐变 C、黄化 D、玻璃化10、配制微量元素母液时，浓缩了200倍保存在1升容量瓶内，当制作4升培养基时，应取用铁盐母液（ D ）ml。A、50 B、40 C、30 D、20四、单或多项选择题 1. 下列不属于细胞分裂素类的植物激素是_AC_。 A B

15、A； B NAA； C ZT； D KT2. 植物组织培养的特点是_A_：A培养条件可人为控制；B生长周期短，繁殖率高；C管理方便；D产量大、诱导试管苗生根，培养基的调整应BD A加大生长素的浓度 B加大分裂素的浓度 C加活性炭 D 降低盐的浓度4. 下列不属于大量元素的盐是_B_。 A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O5. 培养休眠的植物材料时必需加入的激素是： A GA； B IAA； C NAA； D ZT五、判断题1、PH增高不利于原生质体的再生。（ ）2、剥离法是植物离体培养中花粉分离的一种方法。（ ）3、茎尖培养一般采用半固体培养基，

16、也可使用液体培养基。（ ）4、培养基的营养成分越复杂、营养成分越丰富，植板细胞的临界密度越低。（ ）5、晴天下午取材在一定程度上可以减轻污染。（ ）6、细胞悬浮培养的培养基中氧浓度低于临界水平时，利于根的形成。（ ）7、植物组织培养有利于快速繁殖稀有植物并挽救濒临灭绝得植物。（ ）8、培养室的试管苗瓶内湿度在80%左右。（ ）9、愈伤组织继代培养中铵态氮的含量一般不能高于8mmol/L。（ ）10、“脱毒苗”是指不含该种植物的主要危害病毒。（ ）1、叶柄和叶脉的切口处不能形成愈伤组织和分化成苗（ ）。2、在植物组织培养过程中，所用外植体是指植物体上的根、茎、叶、花、果、种子。（ ）3、植物组织

17、培养的培养基使用前须经过高压灭菌。（ ）4、离体叶培养中，消毒后的叶片应整理切割成55mm大小。（ ）5、一般来说单叶子植物的愈伤组织培养比双子叶植物容易。（ ）6、连续培养是植物脱毒的常用方法。（ ）7、试管苗与常规苗相比，茎、叶绿色，光合作用更强。（ ）8、茎尖培养主要用于消除病毒，也可消除植物体中其他病原菌，包括类病毒、类菌质体、细菌和真菌。（ ）9、细胞悬浮培养的培养基中氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体。（ ）10、漂浮释放法是植物离体培养中花粉分离的一种方法。（ ）1、植物组织培养属于有性繁殖范畴。( )2、茎尖分生组织主要是指对茎尖长度不超过0.1mm的茎尖进行培养。（ ）3、

18、外植体是指用于组培接种用的离体植物材料。( )4、悬浮培养属固体培养的一种。（ ）5、植物离体培养中细菌污染的特点是污染部分长有不同颜色的霉菌。（ ）6、试管苗的茎叶呈绿色，光合作用弱。（ ）7、大多数植物组织培养要求的PH范围是4.0-7.0。（ ）8、植株进行一次病毒鉴定未发现病毒，就可确定该植株不带病毒。（ ）9、大多数外植体组织培养的温度要求在252。（ ）10、IAA/KT高，利于芽分化。（ ）1一般将微量元素母液均配制成100倍，在配制培养基时，使用量为10ml/L。2 细胞分裂素/生长素的比值较高时，有利于愈伤组织芽的诱导。3 对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物，要是组织培养繁

19、殖的植株保持原有的园艺价值，只能通过茎尖和侧芽培养。4植物生长调节物质使用不当时，材料也容易褐变，细胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。5. 利用茎尖分生组织进行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。6.某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。7.无病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，体内营养和生理状况发生改变，因而对其他病毒和病原体的侵染更为敏感，因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植。8. 微繁不定芽的产生有两个途径，一是不定芽不通过愈伤组织由外植体直接产生，二是外植体诱导产生愈伤组织，由愈伤组织上产生不定芽。前一途径相对较为优越，因为通过愈伤组织会出现一些突变。9. 细胞

20、的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程得以体现。10培养基中的铁盐，常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。简答1.无病毒苗培育的意义？答：从根本上消除只靠种苗传播的病毒病的危害。无病毒栽培可改善果树品质，提高丰产性，抗逆性及利用砧木的优良性状减少农药的使用，降低生产成本，减少或避免对环境的污染。2. 组培苗基质选配的原则？答：需具有良好的物理特性，通气性好。需具有良好的化学特性，不含有对植物和人类有毒的成分，不与营养液中的盐类发生化学反应而影响苗正常生长。需对盐类要有良好的缓冲能力，维持稳定，适且植物生长的PH值。选用基质还需物美价廉，便于就地取

21、材。3. 褐化现象的产生原因和预防措施各是什么？答：褐变的主要原因：植物品种；生理状态；培养基成分；培养条件不当。预防措施：选择合适的外植体；合适的培养条件；使用抗氧化剂；连续转移。 4. 在植物组织培养中，造成组培材料污染的因素都有哪些？如何采取相应的措施防止或降低污染？答：造成污染的原因：培养基灭菌不彻底；外植物体表面消毒灭菌不彻底；操作不当。防止污染的措施是：培养基正确灭菌，外植体冲洗充分，消毒灭菌彻底，严格无菌操作。5.花药和花粉培养在育种学方面的作用是什么?答：花药培养和花粉培养使单个花粉粒发育成完整的单倍体植株，经过染色体的加倍处理成为正常结实的二倍体植株，其后代属于真正的纯系。可

22、以大大缩短育种年限。MS固体培养基的制作步骤如下: 母液取出。适量蒸馏水放入加热容器，接通电源加热。加入称量好的琼脂至完全溶化，称取相应量的蔗糖至溶解，将母液混合液加入混匀，最后用蒸馏水定容至所需体积。测试培养基溶液的PH值(5.8-6.0)，调整。2.简述通过小叶嫁接法鉴定草莓病毒的操作步骤。从被鉴定的草莓采集长成不久的新叶，除去两边的小叶，中央的小叶带11.5cm的叶柄，把它削成楔形作接穗。将指示植物除去中间的小叶，在叶柄的中央用刀切入11.5cm，再插入接穗，用线把接合部位包扎好。为了防止干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。观察。约经2周时间，撤去塑料袋。若带有病毒，嫁接后12个月，在新展

23、开的叶、匍匐茎或老叶上会出现病症。3、制作配方为MS+6-BA0.5mg/ L的培养基2L (大量元素母液为10，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100，激素母液浓度为1mg/ml)(1)按配方移取各母液：大量元素母液为200ml，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为20ml，6-BA激素母液为1ml。(2)定容：用蒸馏水定容至2L。(3)称量蔗糖和琼脂：蔗糖5060g，琼脂1416g。(4)培养基熬制：加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琼脂全部融化。 (5) 调PH值：先用PH计或PH试纸测量后再用0.1MNaOH或HCl调PH值为5.86.0。(6)二次定容：当培养基熬制后总体积

24、少于2L时要定容至2L。(7)分装并扎瓶口：趁热分装，100ml的三角瓶约装入3040ml, 35瓶/L。(8)高压灭菌：及时灭菌，121-123条件下保持2030分钟。(9)冷却：待接种。1、在植物组织培养中，通过哪些途径可以得到完整的植株？答:（1）外植体愈伤组织根、芽试管苗（2分） （2）外植体胚状体试管苗（2分） （3）外植体根、芽试管苗（2分）2、母液配制意义是什么？ 答：（1）在植物组织培养中，配制培养基是日常必备的工作。（3分） （2）为简便起见，通常先配制一系列母液。（3分） 3、茎段培养与茎尖培养有什么主要区别? 答: 茎尖培养是指带有顶芽的器官培养，可用于脱毒和快繁；（2分

25、） 茎段培养指不带芽和带1个以上定芽或不定芽的，包括块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。（2分） 茎段培养的主要目的是快速繁殖,茎尖培养的主要目的是脱毒。（2分） 4、简述茎段培养基本过程？ 答:选健壮的枝梢,去叶片用自来水冲洗(1分)75酒精浸1min（1分）0.1%Hgcl2浸泡510min（1分）用无菌水冲洗4-5次接种（1分）培养（1分） 5、培育无病毒苗常用的方法及其优缺点？答：（1）茎尖培养脱毒：脱毒率高，但成本较高。（1.5分） （2）愈伤组织培养脱毒：脱毒率较高，但成本高。（1.5分） （3）微尖嫁接脱毒：适合于难生根树种，但方法繁琐，技术要求高。 （1.5分） （4）高温处理

26、脱毒：方法简单、易操作，适合于生产，但易伤害植物。 （1.5分）五、计算题（每题5分，共5分）1、培养基的配方是MSBA2NAA0.530g/L糖，要配制400mL， MS母液的浓度分别是：大量元素20倍，微量元素200倍，铁盐100倍，有机物50倍。要吸取各种母液各多少mL？糖称取多少克？答：大量元素：20mL (2分)微量元素：2mL (2分)铁盐 ：4mL (2分)有机物 ：8mL (2分) 糖 ：12g (2分) 六、论述题（共15分）1、某地区的一种马铃薯经多年的种植后，植株变的矮小，产量和品质都下降，怀疑是由病毒所至。请你设计一个脱毒的技术方案。 （每题10分，共10分）答：无病毒

27、苗培养： （1） 取材：从田间切取6-8cm顶芽，放入培养箱中生长2-3周，除去顶芽促 进腋芽生长，剪取腋芽1-2cm。（2分）（2）消毒：在自来水下冲洗干净，无菌条件下先用70的酒精消毒30秒，再 用0.1%氯化汞消毒数7-8分钟，最后用无菌水冲洗材料4-5次。（2分）（3）剥去茎尖与接种：在电子显微镜下剥去茎尖，接种在MS+0.1mg/L (NAA)+0.2mg/L （2分）(GA3)+0.5mg/L (6-BA)+2%蔗糖+PH5.8液体培养基上。（4）培养 温度：21-25 光照度：2000-3000lx 光照时间：12小时/天（1分）（5）生根培养 生根培养基：MS+0.3mg/L(

28、NAA)+0.1%活性炭（2分）（6）炼苗移栽（1分）2、试论述组培实验室的基本构造及其主要设备？（每题5分，共5分）答：（1）准备室（0.5分） 主要设备：高压灭菌锅（0.3分）；器皿干燥箱（0.3分）；冰箱（0.3分）； 小推车（0.3分）； （2）缓冲室（0.5分） 主要设备：衣服架（0.3分）； 鞋架（0.3分）； （3）接种室（0.5分） 主要设备：超净工作台（0.3分） （4）培养室（0.5分） 主要设备：培养架（0.3分）； 空调（0.3分） 除湿机（0.3分）1、试论述原生质体分离的过程？（每题5分，共5分）若用叶片作为材料，取已展开的生活叶片，用053次氯酸钠和70酒精进行表

29、面灭菌，然后切成2cm见方。(2分)把4g叶组织置于含有200ml不加蔗糖和琼脂的培养基500ml三角瓶中。(1分)在4黑暗条件下培养1624h，以后叶片转入含有纤维素酶、果胶酶、无机盐和缓冲液的混合液中，pH值为56，然后酶液真空渗入叶片组织。(1分)在28条件下，每分钟40转的旋转式转床上培养4h后，叶片组织可完全分离。(1分)七、论述题1.请阐明大花蕙兰通过组织培养技术生产的过程是什么？培养基的配方的确定：诱导培养基： MS+BA4-10mg/L+NAA0.1-1mg/L （花梗） MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L （种子萌发）增殖培养基： MS+BA3mg/L+NAA1.

30、0mg/L 生根培养基：1/2MS+IBA1.5mg/L +2%蔗糖操作步骤：.选材 ： 选择健壮无病虫害、性状优良、生长120天以上、未开裂的蝴蝶兰蒴果。 .灭菌：蝴蝶兰蒴果 流水冲洗 75%酒精浸泡2030秒0.1%升汞810分钟 无菌水冲洗35遍 用无菌滤纸吸干水分。 .接种与初代培养：把灭过菌蝴蝶兰蒴果放在无菌培养皿中，并用解剖刀切开果皮使种子散出，放入种子萌发培养基中培养。60天后，种子萌发成4高、 23片真叶的无菌苗。 继代培养：取无菌苗接种到诱导培养基中，30天后长出愈伤组织，继续培养形成原球体。 . 增殖培养：将原球体切割成小块，接种到增殖培养基中，40天后，每个原球体形成1315个原球茎芽，然后再切割培养，周而复始的进行。 .生根培养 ：将增殖培养中的健壮芽接种到生根培养基中，20天后芽基小根，40天后根变得健壮生根率95%以上。 .驯化和移栽 选择基质：苔藓或树皮。 驯化：置于炼苗室内自然光下培养1周。 移栽：洗根，用500倍托布津水溶液浸泡苗根数秒后移栽到苔藓或树皮基质中。 移栽后管理：注意温、光、湿度（89%）、肥、水和防病虫害的管理。