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一定体积的痰1.5倍体积的USP溶液,震荡30-40s10-15ml蒸馏水,室温放置5-10min5000g室温离心10-15min,弃上清500ul无菌0.05%Tween80溶解或重悬20000g室温离心10-15min,弃上清加入5倍10%chelex-100,混匀,90温育40min20000g室温离心5min取5ul用于PCR扩增50ul痰6000g离心10分钟,弃上清加入裂解液50ul,60温育30min90温育30min加入Tris-HCl中和以上反应混合物取5ul用于PCR检测乳汁标本离心6000rpm,5min,弃上清脂质和沉淀用750ul裂解液重悬重悬液移入含100mg玻璃珠离心管搅拌煮沸5min,离心14000rpm,3min650ul上清转移到另一离心管中,等体积异丙醇沉淀70%乙醇洗涤沉淀,干燥50ul Tris-EDTA溶解沉淀即可用于PCR扩增谢谢!谢谢!
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