1、高考生物专题微生物的培养与应用真题跟踪练(限时:40分钟)1(2019临沂模拟)莠去津是一种含氮农药,在土壤中不易降解,为修复被其污染的土壤,可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答:(已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明) (1)由图推断,从A瓶到C瓶液体培养的过程称为_,目的是_。(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行_,将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和_法,从图中看本实验采用的是_(填“前者”或“后者”)。(3)一段时间后,培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落,我们筛选的目的菌是菌落中_的细菌,该菌落生长所需的氮元素主要来自_。(4
2、)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,应如何设置对照组?_。解析:(1)图中从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养,目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度。(2)将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种,由图中固体培养基上的菌落分布可知,该接种方法是稀释涂布平板法,包括梯度稀释操作和涂布平板操作。(3)根据题目信息“莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明”可知,能够降解莠去津的目的菌分解莠去津,使菌落周围出现透明圈,因此可以选择菌落周围存在透明圈的细菌。由于培养基中只有莠去津一种氮源,因此分解莠去津的微生物所需的氮元素主要由莠
3、去津提供。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,应设置灭菌后不接种菌种的培养基,与实验组放在相同条件下培养,若培养基上无菌落出现,则非目的菌落一定来自C瓶菌种,若培养基上出现菌落,则说明非目的菌落可能来自培养基。答案:(1)选择培养初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度(2)梯度稀释稀释涂布平板后者(3)有透明圈莠去津(4)配制的培养基灭菌后不接种菌种,与实验组放在相同条件下培养2微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图,请据图回答有关问题:(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之
4、一,它称为_,若用该培养基培养大肠杆菌,除考虑营养条件外,还要考虑_、_和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作顺序是AB_(用字母和箭头表示);找出图乙中两处错误的操作_、_(用字母表示)。解析:(1)上图甲所示的实验操作步骤之一为倒平板,若用该培养基培养大肠杆菌,还要考虑温度、氧气、pH和无菌操作等一系列相关条件。(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染,因此要设置对照实验,对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养
5、基上是否有菌落产生,若有则说明培养基已被污染,应重新配制培养基进行实验。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作顺序是ABGFECDH;图乙中两处错误的操作是C未在酒精灯火焰旁进行操作,D将第五区域内的划线与第一区相连。答案:(1)倒平板温度(氧气)pH(无菌)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(3)GFECDHCD3(2018全国卷)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具_(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法
6、或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是_。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能_。在照射前,适量喷洒_,可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过_(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是_。解析:(1)干热灭菌是指将物品放入干热灭菌箱内,在160170 条件下加热12 h。耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可采用干热灭菌的方法。(2)巴氏消毒法是在7075 条件下煮30 min或在80 条件下煮15 min,可以杀
7、死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养物质损失较少。(3)接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线照射30 min,紫外线能破坏微生物的DNA结构,以杀死物体表面或空气中的微生物。在照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以强化消毒效果。(4)自来水通常是用氯气进行消毒的。(5)在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是锅内原有的冷空气没有排尽。答案:(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽4(2019赤峰模拟)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中
8、筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。请回答下列问题:(1)实验过程立采用无菌技术,防止培养物被微生物污染及_被微生物感染,操作者的双手需要进行清洁和_处理。(2)、号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是_。(3)号培养基中的碳源为_。若号培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是_。(4)部分嗜热菌的菌落周围形成透明圈,应挑出透明圈_(填“大”或“小”)的菌落接种到号培养基,该过程的目的是_目的菌;下次划线时接种环上的菌种来源于_。解析:(1)微生物培养时,为了防止培养物被微生物污染及操作者自身被微生物感染,应采用无菌技术,对操作者的双手需要进行清洁和消毒处理。(2)
9、培养基配制时,应先调节pH,然后灭菌处理。(3)从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,应以淀粉作为碳源。若涂布平板时培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是菌液浓度过高(或稀释不够)。(4)嗜热菌的菌落周围形成透明圈,透明圈越大,则表明该菌能更高效利用淀粉。号培养基上采用平板划线法接种,是为了纯化目的菌,下次划线时接种环上的菌种来源于上次划线末端。答案:(1)操作者自身消毒(2)先调节pH,后灭菌(3)淀粉菌液浓度过高(或稀释不够)(4)大纯化上次划线末端5(2018江苏卷)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又
10、可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的_,及时对培养基进行分装,并进行_灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤中将温度约_(在25 、50 或80 中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有_。a为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌b划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落c挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含
11、量d可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和_供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用2516型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上_色细胞的个数应不少于_,才能达到每毫升3109个活细胞的预期密度。解析:(1)配制培养基时,进行计算、称量、溶化后,需先调pH再分装到锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌。(2)倒平板时的培养基温度约为50 ,冷凝后倒置培养。(3)平板划线时,接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌,以免造成杂菌污染,a正确;划线时不能划破培养基表面,否则
12、不能形成正常菌落,b正确;挑取菌落时,应挑取多个不同的菌落,分别测定酵母细胞中蛋白质含量,c错误;逐步提高培养基中甲醇的浓度,能筛选出其中的耐受菌,获得耐受高甲醇的菌株,d正确。(4)酵母是兼性厌氧型真菌,在有氧条件下可大量繁殖。酵母扩大培养时,需保证充足的营养和氧气等条件。由题中信息“经等体积台盼蓝染液染色”可知,计数室中培养液容积实际只有0.120.05 mm3。设5个中方格中无色(活细胞不能被台盼蓝染色)的细胞数目为x个,则3109x/5251 0001 0000.05,解得x30(个)。答案:(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50 (3)a、b、d(4)氧气无306(2019陕西五校一模
13、)下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况,乙图表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系,请据图回答:(1)乙图中a、b、c三条曲线依次表示甲图_号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。(2)研究发现,青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物,请设计实验,利用改变培养基成分等培养条件,将酵母菌和硝化细菌分离出来。主要步骤:a分别配制不含_的培养基(A)和加入_的培养基(B),分别灭菌。b分别接种混合液放在适宜条件下培养。c观察结果:结果:在A培养基上生存的是_,在B培养基上生存的是_。(3)微生物培养过程中,获得纯净培养
14、物的关键是_。(4)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是_。解析:从甲图试管中微生物的分布和数量分析,乳酸菌分布在缺氧的下层,酵母菌在缺氧的底部和氧含量高的上层均匀分布,而硝化细菌主要分布在上层,因此可以判断出a、b、c曲线表示3、2、1号试管中的微生物增殖速度。青霉素破坏细菌的细胞壁,而酵母菌属于真菌,青霉素不能起到杀灭的作用,硝化细菌属于自养生物,不需要添加葡萄糖作为能源物质和碳源。答案:(1)3、2、1(2)有机碳源青霉素硝化细菌酵母菌(3)防止杂菌污染(无菌技术)(4)稀释涂布平板法7(2019玉溪模拟)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截
15、平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。细菌鉴定:实验流程如图所示。(1)挑选可疑菌落制片后,用_观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。(2)对配制的液体培养基等需采取_灭菌;实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。(3)接种可疑菌落后,35培养24 h,液体培养基变浑浊,原因是_,对照组试管中应加入_,与实验组同时培养6 h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫
16、苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有_和_。解析: (1)炭疽杆菌是原核生物,为单细胞生物,观察它的结构应借助显微镜。(2)微生物培养基需采用高压蒸汽灭菌。实验所用培养基的碳源应为有机碳,因为炭疽杆菌为异养型微生物。(3)35培养24 h,细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊,对照组不能含有细菌,根据等量原则故应该加入等量的生理盐水,实验组加入噬菌体液后,由于噬茵体能够使炭疽杆菌死亡,故实验组液体培养基的浑浊度比对照组低。(4)抗体是由体液免疫过程产生,参与体液免疫的细胞有T细胞、B细胞、吞噬细胞、浆细胞等。答案:(1)显微镜(2)高压蒸汽有机碳(3)细菌大量繁殖等量生理盐水低(4)吞噬细胞浆细胞
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