高考生物二轮复习-专题十六-微生物的利用和植物有效成分的提取课件.ppt

1、专题16微生物的利用和植物有效成分的提取答案速填：答案速填：酚红指示剂酚红指示剂 尿素尿素 刚果红染色法刚果红染色法稀释涂布平板法稀释涂布平板法 显微镜直接计数法显微镜直接计数法计算计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐 琼脂琼脂煮沸消毒法、巴氏消毒法等煮沸消毒法、巴氏消毒法等灭菌灭菌灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌平板划线法平板划线法考点一考点一微生物的分离和培养微生物的分离和培养【知识【知识方法方法】1.1.微生物培养的微生物培养的“4”4”种基本技术：种基本技术：(1)(1)培养基的制备：计算培养基的制备：计算

2、称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板。倒平板。(2)(2)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。无菌技术：主要包括消毒和灭菌。(3)(3)倒平板操作：平板冷却后要倒置，防止皿盖上的冷倒平板操作：平板冷却后要倒置，防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。凝水落入培养基，造成污染。(4)(4)接种操作：如稀释涂布平板法、平板划线法。接种操作：如稀释涂布平板法、平板划线法。2.“2”2.“2”种微生物的分离与计数：种微生物的分离与计数：(1)(1)筛选微生物的筛选微生物的“2”2”种选择培养基。种选择培养基。以尿素为唯一氮源的培养基：选择培养尿素分解菌。以尿素为唯一氮源的培养基：选择培养尿素分解菌。富含纤维素的培

3、养基：选择培养纤维素分解菌。富含纤维素的培养基：选择培养纤维素分解菌。(2)(2)鉴别微生物的鉴别微生物的“2”2”种鉴别培养基。种鉴别培养基。添加酚红指示剂的培养基：尿素分解菌可使该培养添加酚红指示剂的培养基：尿素分解菌可使该培养基变红。基变红。添加刚果红的培养基：纤维素分解菌的菌落周围产添加刚果红的培养基：纤维素分解菌的菌落周围产生透明圈。生透明圈。(3)(3)微生物计数的微生物计数的“2”2”种方法。种方法。直接计数法：需用血细胞计数板借助显微镜观察，直接计数法：需用血细胞计数板借助显微镜观察，实验结果偏大。实验结果偏大。间接计数法：稀释涂布平板法，计数结果偏小。间接计数法：稀释涂布平板

4、法，计数结果偏小。【易错【易错警示警示】1.1.为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养基培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。养基培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。2.2.利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：数：C/VC/VM(M(稀释倍数稀释倍数)。3.3.平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生物计数。物计数。4.4.观察菌落需用固体

5、培养基，因此培养基要添加琼脂。观察菌落需用固体培养基，因此培养基要添加琼脂。5.5.菌种用甘油管藏法长期保存，保存时菌液中常添加菌种用甘油管藏法长期保存，保存时菌液中常添加一定量的甘油。一定量的甘油。6.6.振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可使振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。【典例【典例1 1】(2016(2016全国卷全国卷T39)T39)某同学用新鲜的泡某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而

6、不透明，乳酸菌产生的乳体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：(1)(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用分离纯化乳酸菌时，首先需要用_对泡菜滤对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_。(2)(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有有_和和_。分离纯化时。分离纯化时应挑选出应挑选出_的菌落作为候选菌。的菌落作为候选菌。(3)(3)乳酸菌在乳酸菌在-20-20长期保存时，菌液中常需要加入一长期保存时，菌液中常需要加入一

7、定量的定量的_(_(填填“蒸馏水蒸馏水”“”“甘油甘油”或或“碳酸碳酸钙钙”)。答案：答案：(1)(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落很难分离得到单菌落(2)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳鉴别乳酸菌中和产生的乳酸酸(或酸或酸)具有透明圈具有透明圈(3)(3)甘油甘油【解题技法【解题技法】逻辑推理法逻辑推理法1.1.点睛：点睛：(1)(1)关键知识：分离纯化菌种、菌种的长期保存。关键知识：分离纯化菌种、菌种的长期保存。(2)(2)题干关键词：题干关键词：“分离纯化所用固体培养基中因含有分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产

8、生的乳酸能溶解培养基中碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙的碳酸钙”。2.2.答题分析：答题分析：第第(1)1)小题：为防止杂菌污染，分离纯化乳酸菌时，首小题：为防止杂菌污染，分离纯化乳酸菌时，首先需要用先需要用_对泡菜滤液进行对泡菜滤液进行_稀释；为达到分稀释；为达到分离纯化的目的，需得到单菌落，进行离纯化的目的，需得到单菌落，进行_稀释的理由稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成_。无菌水无菌水梯度梯度梯度梯度单个菌单个菌落落第第

9、(2)(2)小题：题干中已给出信息：小题：题干中已给出信息：“乳酸菌产生的乳酸乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙能溶解培养基中的碳酸钙”，在分离纯化所用的培养，在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有基中加入碳酸钙的作用有_和和_；分离纯化时应挑；分离纯化时应挑选出在平板上有选出在平板上有_的菌落作为候选菌。的菌落作为候选菌。中和乳酸菌代谢过程中产生中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸的乳酸利于乳酸菌的鉴别和分离利于乳酸菌的鉴别和分离透明圈透明圈第第(3)(3)小题：需要长期保存的小题：需要长期保存的菌种，可以采用菌种，可以采用_的方法，所以乳酸菌在的方法，所以乳酸菌在-20-20长期保存时，

10、菌液中常需长期保存时，菌液中常需要加入一定量的要加入一定量的_。甘油管藏甘油管藏甘油甘油【母题探究【母题探究】借题猜押其他命题点借题猜押其他命题点押题点押题点1 1：若要：若要测定泡菜滤液中乳酸菌的数目，应选测定泡菜滤液中乳酸菌的数目，应选用用_法接种。法接种。押题点押题点2 2：要从泡菜滤液中分离出乳酸菌，需得到单：要从泡菜滤液中分离出乳酸菌，需得到单菌落，所以选用的培养基需添加菌落，所以选用的培养基需添加_。稀释涂布平板稀释涂布平板琼脂琼脂【题组过关【题组过关】1.(1.(新题预测新题预测)下图为微生物的实验室培养的有关操作，下图为微生物的实验室培养的有关操作，据图分析回答问题：据图分析回

11、答问题：(1)(1)图中的接种工具的名称是图中的接种工具的名称是_。(2)(2)解释步骤解释步骤和和的操作：的操作：步骤步骤中，为何要将接种工具灼烧至变红？中，为何要将接种工具灼烧至变红？_。步骤步骤中，为何要将接种工具冷却？中，为何要将接种工具冷却？_。(3)(3)图中接种方法的目的是图中接种方法的目的是_。(4)(4)分别用三个平板培养基培养三种细菌分别用三个平板培养基培养三种细菌(E.coliE.coli、S.albusS.albus、B.subtilisB.subtilis)，然后在培养基上打出直径为，然后在培养基上打出直径为3 mm3 mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过的

12、孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径致。测量清晰区的直径(如图如图所示所示)，数据如下表。，数据如下表。细菌细菌不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径(mm)(mm)5g/mL5g/mL7.5g/mL7.5g/mL10g/mL10g/mL15g/mL15g/mL20g/mL20g/mLE.coliE.coli7 71010141416161616S.albusS.albus5 58 813131717B.subti

13、lisB.subtilis5 57 79 914141919比较比较10g/mL10g/mL甲抗生素和甲抗生素和20g/mL20g/mL甲抗生素在控制甲抗生素在控制E.coliE.coli和和S.albusS.albus方面的效用：方面的效用：_。(5)(5)在控制在控制S.albusS.albus方面，甲抗生素具有抑菌作用的最方面，甲抗生素具有抑菌作用的最低浓度是多少？低浓度是多少？_。(6)(6)有人感染有人感染B.subtilisB.subtilis而患病。举出三项理由，解释而患病。举出三项理由，解释为什么用为什么用25g/mL25g/mL甲抗生素治疗该病人是不明智的做甲抗生素治疗该病人

14、是不明智的做法。法。_；_；_。【解析【解析】(1)(1)图中的接种工具是接种环。图中的接种工具是接种环。(2)(2)灼烧接种环的目的是灭菌，杀死微生物，防止污染灼烧接种环的目的是灭菌，杀死微生物，防止污染菌种和培养基。灼烧后接种环温度高，冷却是避免烫菌种和培养基。灼烧后接种环温度高，冷却是避免烫伤菌种。伤菌种。(3)(3)图中接种方法是平板划线法，目的是将聚集的菌种图中接种方法是平板划线法，目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经培养后获得单个菌逐步稀释分散到培养基的表面，经培养后获得单个菌落。落。(4)(4)由题表中数据可知：在控制由题表中数据可知：在控制S.albusS.albu

15、s方面，方面，20g/mL20g/mL甲抗生素的效用约是甲抗生素的效用约是10g/mL10g/mL甲抗生素的一甲抗生素的一倍；在控制倍；在控制E.coliE.coli方面，方面，10g/mL10g/mL和和20g/mL20g/mL甲抗生甲抗生素的效用没有明显差异。素的效用没有明显差异。(5)(5)表格显示：在控制表格显示：在控制S.albusS.albus方面，甲抗生素具有抑方面，甲抗生素具有抑菌作用的最低浓度是菌作用的最低浓度是7.5g/mL7.5g/mL。(6)(6)表中数据没有显示表中数据没有显示25g/mL25g/mL甲抗生素的效用，不甲抗生素的效用，不能确定能确定25g/mL25g/

16、mL甲抗生素的效用比甲抗生素的效用比20g/mL20g/mL甲抗生素甲抗生素的高；的高；高浓度的抗生素可能有严重的副作用；高浓度的抗生素可能有严重的副作用；滥滥用抗生素可能会加速大量细菌种类产生抗生素抗性。用抗生素可能会加速大量细菌种类产生抗生素抗性。答案：答案：(1)(1)接种环接种环(2)(2)杀灭接种环上可能引起污染的微生物避免烫伤菌杀灭接种环上可能引起污染的微生物避免烫伤菌种种(3)(3)使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落(4)(4)在控制在控制S.albusS.albus方面，方面，20g/mL20g/mL甲抗生素的效用约甲抗生素的效用约是是10

17、g/mL10g/mL甲抗生素的一倍；在控制甲抗生素的一倍；在控制E.coliE.coli方面，方面，10g/mL10g/mL和和20g/mL20g/mL甲抗生素的效用没有明显差异甲抗生素的效用没有明显差异(5)7.5g/mL(5)7.5g/mL(6)(6)没有证据显示没有证据显示25g/mL25g/mL甲抗生素的效用比甲抗生素的效用比20g/mL20g/mL甲抗生素的高甲抗生素的高高浓度的抗生素可能有严高浓度的抗生素可能有严重的副作用重的副作用滥用抗生素可能会加速大量细菌种类产生抗生素抗滥用抗生素可能会加速大量细菌种类产生抗生素抗性性2.(20162.(2016郑州二模郑州二模)临床实验表明，

18、服用乳酸菌及其临床实验表明，服用乳酸菌及其制品具有减少人体血清胆固醇含量、降低心脑血管发制品具有减少人体血清胆固醇含量、降低心脑血管发病率的功效。下面是从酸奶中筛选出高效降低胆固醇病率的功效。下面是从酸奶中筛选出高效降低胆固醇的乳酸菌的实验，请回答下列问题：的乳酸菌的实验，请回答下列问题：(1)(1)制备固体培养基制备固体培养基(MRS)(MRS)：在普通的液体培养基中添：在普通的液体培养基中添加碳酸钙和加碳酸钙和_，加热使其熔化，然，加热使其熔化，然后转移到锥形瓶中。经后转移到锥形瓶中。经_法处理后，待其冷却法处理后，待其冷却至至5050左右，在酒精灯火焰附近倒平板。左右，在酒精灯火焰附近倒

19、平板。(2)(2)将少量酸奶制成将少量酸奶制成110110稀释液，再将梯度稀释到稀释液，再将梯度稀释到1010-6-6的稀释液涂布于添加了碳酸钙的乳酸菌培养基的稀释液涂布于添加了碳酸钙的乳酸菌培养基(MRS(MRS培养基培养基)平板上，在平板上，在_(_(填填“有氧有氧”或或“无氧无氧”)条件下条件下3737恒温培养恒温培养72 h72 h。挑取。挑取_(_(填填“有有”或或“无无”)溶钙圈溶钙圈(或透明圈或透明圈)的菌落，用的菌落，用_法接种在法接种在MRSMRS培养基上反复纯化至纯种备用。培养基上反复纯化至纯种备用。(3)(3)在普通的在普通的MRSMRS液体培养基中添加适量液体培养基中添

20、加适量_并用超声波振荡乳化并用超声波振荡乳化20 min20 min，调，调pHpH至至7.07.0，然后将纯化，然后将纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后用特定显色剂分光光度法离心测定上清液中时间后用特定显色剂分光光度法离心测定上清液中_的含量，以的含量，以_作为对照，测作为对照，测定菌株降低胆固醇的能力，筛选出目的菌株。定菌株降低胆固醇的能力，筛选出目的菌株。【解析【解析】(1)(1)在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。培养基应使用高压蒸汽灭菌法。琼脂固体培养基。培养基应使

21、用高压蒸汽灭菌法。(2)(2)乳酸菌是厌氧微生物，需在无氧条件下培养。乳酸乳酸菌是厌氧微生物，需在无氧条件下培养。乳酸菌发酵产物为乳酸，乳酸溶解碳酸钙，产生透明圈，菌发酵产物为乳酸，乳酸溶解碳酸钙，产生透明圈，所以能产生透明圈的菌落为乳酸菌菌落，挑取后，用所以能产生透明圈的菌落为乳酸菌菌落，挑取后，用平板划线法接种纯化培养。平板划线法接种纯化培养。(3)(3)要从酸奶中筛选出高效降低胆固醇的乳酸菌，需在要从酸奶中筛选出高效降低胆固醇的乳酸菌，需在培养基中添加适量的胆固醇，接种培养后测定胆固醇培养基中添加适量的胆固醇，接种培养后测定胆固醇的含量，并与未接种的高胆固醇培养液比较，测定菌的含量，并与

22、未接种的高胆固醇培养液比较，测定菌株降低胆固醇的能力，筛选出目的菌株。株降低胆固醇的能力，筛选出目的菌株。答案：答案：(1)(1)琼脂高压蒸汽灭菌琼脂高压蒸汽灭菌(2)(2)无氧有平板划线无氧有平板划线(3)(3)胆固醇胆固醇未接种的高胆固醇培养液胆固醇胆固醇未接种的高胆固醇培养液【加固训练【加固训练】(2016(2016潍坊二模潍坊二模)高温淀粉酶在大规模工业生产中有高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示：效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示：(1)(1

23、)进行进行过程的目的是过程的目的是_，过程所使用过程所使用的接种方法是的接种方法是_法。法。(2)(2)从用途上来说，从用途上来说，号培养基属于号培养基属于_培养基，培养基，配制时仅以配制时仅以_作为唯一碳源；从物理状态上来作为唯一碳源；从物理状态上来说，说，号培养基属于固体培养基，配制时应加入号培养基属于固体培养基，配制时应加入_作为凝固剂。作为凝固剂。(3)(3)、号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pHpH的先的先后顺序是后顺序是_。一般对配制的培养基采用。一般对配制的培养基采用_法灭菌。法灭菌。(4)(4)培养一段时间后，应从培养一段时间后，应从号培养基上挑

24、出号培养基上挑出_的菌落，接种到的菌落，接种到号培养基上。号培养基上。【解析【解析】(1)(1)分析题图可知，分析题图可知，过程是梯度稀释，目的过程是梯度稀释，目的是对样品进行稀释；是对样品进行稀释；过程是用稀释涂布平板法进行过程是用稀释涂布平板法进行接种。接种。(2)(2)本题实验的目的是筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热本题实验的目的是筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，从用途上来说，菌，从用途上来说，号培养基属于选择培养基；本号培养基属于选择培养基；本培养基以淀粉为唯一碳源；从物理状态上来说，培养基以淀粉为唯一碳源；从物理状态上来说，号号培养基属于固体培养基，配制时应加入琼脂作为凝固培养基属于固体

25、培养基，配制时应加入琼脂作为凝固剂。剂。(3)(3)培养基配制和灭菌时应先调节培养基配制和灭菌时应先调节pHpH，然后再进行灭，然后再进行灭菌。如果先灭菌再调节菌。如果先灭菌再调节pHpH，在调节，在调节pHpH时又会污染培养时又会污染培养基；一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭基；一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。菌。(4)(4)能分解淀粉的嗜热菌在能分解淀粉的嗜热菌在号培养基上生长时可释号培养基上生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越强，所以要从中挑明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越

26、强，所以要从中挑出透明圈大的菌落，接种到出透明圈大的菌落，接种到号培养基上。号培养基上。答案：答案：(1)(1)稀释稀释涂布平板稀释稀释涂布平板(2)(2)选择淀粉琼脂选择淀粉琼脂(3)(3)先调节先调节pHpH，后灭菌高压蒸汽灭菌，后灭菌高压蒸汽灭菌(4)(4)透明圈大透明圈大3.(3.(新题预测新题预测)我国粮产区产生大量的作物秸秆，科技我国粮产区产生大量的作物秸秆，科技工作者研究出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流工作者研究出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流程为程为(以玉米秸秆为例以玉米秸秆为例)：(1)(1)玉米秸秆预处理后，应该选用特定的酶进行水解，玉米秸秆预处理后，应该选用特定的

27、酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。从以下哪些微生物中使之转化为发酵所需的葡萄糖。从以下哪些微生物中可以提取到上述的酶可以提取到上述的酶()A.A.酿制果醋的醋酸菌酿制果醋的醋酸菌B.B.生长在腐木上的霉菌生长在腐木上的霉菌C.C.制作酸奶的乳酸菌制作酸奶的乳酸菌D.D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌生产味精的谷氨酸棒状杆菌(2)(2)若要从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的若要从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为培养基为_(_(按功能分按功能分)，培养基中的碳源为，培养基中的碳源为_。(3)(3)某同学对这种微生物培养液进行数量测定，在稀释某同学对这种微生物培养液进行数量测定，

28、在稀释倍数为倍数为10105 5时，对应的培养基中测得平板上菌落数的平时，对应的培养基中测得平板上菌落数的平均值为均值为23.423.4，那么每毫升样品中的菌落数是，那么每毫升样品中的菌落数是_(_(涂涂布平板时所用稀释液的体积为布平板时所用稀释液的体积为0.2 0.2 mLmL)。(4)(4)上述流程图中，发酵阶段需要的菌种是上述流程图中，发酵阶段需要的菌种是_，生产酒精要控制的必要条件是生产酒精要控制的必要条件是_。【解析【解析】(1)(1)玉米秸秆的主要成分是纤维素，应用纤维玉米秸秆的主要成分是纤维素，应用纤维素酶处理，使之转化为葡萄糖，生长在腐木上的霉菌素酶处理，使之转化为葡萄糖，生长

29、在腐木上的霉菌可合成纤维素酶。可合成纤维素酶。(2)(2)分离微生物应用选择培养基，目的菌为纤维素分解分离微生物应用选择培养基，目的菌为纤维素分解菌，培养基应以纤维素为唯一的碳源。菌，培养基应以纤维素为唯一的碳源。(3)(3)利用计算公式估算菌样中的活菌数：利用计算公式估算菌样中的活菌数：C/VC/VM(M(稀释稀释倍数倍数)。(4)(4)发酵的产物为酒精，故菌种应为酵母菌；酵母菌无发酵的产物为酒精，故菌种应为酵母菌；酵母菌无氧呼吸产物为酒精，所以生产酒精要控制的必要条件氧呼吸产物为酒精，所以生产酒精要控制的必要条件是无氧。是无氧。答案：答案：(1)B(1)B(2)(2)选择培养基纤维素选择培

30、养基纤维素(3)1.17(3)1.1710107 7(4)(4)酵母菌无氧酵母菌无氧(密封、密闭密封、密闭)【加固训练【加固训练】(2016(2016南昌二模南昌二模)在调查和分离湖水中耐盐细菌的实在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将验中，先将1010升湖水水样浓缩至升湖水水样浓缩至1010毫升，然后各取浓毫升，然后各取浓缩水样缩水样1 1毫升，涂布到多个培养基中培养。请回答：毫升，涂布到多个培养基中培养。请回答：(1)(1)可以通过提高培养基中可以通过提高培养基中_的浓度，筛选被调的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为查细菌，这种培养基被称为_培养基。培养基。(2)(2)要提高实验结果

31、的可靠性，排除培养基未彻底灭菌要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是的可能性，应该设置的对照组是_。为检验。为检验(1)(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是中筛选方法的效果，可以设置的对照组是_。(3)(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是的方法是_。为防止冷凝水影。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿响细菌的生长，需将培养皿_培养。在培养基培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_。【解析【解析】(1)(1)筛选耐盐细菌，需在培养基中添加高浓

32、度筛选耐盐细菌，需在培养基中添加高浓度的的NaClNaCl，这种人为提供有利于目的菌株生长的条件，这种人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基称为选择培同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基称为选择培养基。养基。(2)(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置未接种的培养基作为对照组，若的可能性，应该设置未接种的培养基作为对照组，若对照组产生菌落，则培养基未彻底灭菌，反之，灭菌对照组产生菌落，则培养基未彻底灭菌，反之，灭菌合格。为检验合格。为检验(1)(1)中筛选方法的效果，可以设置未加高中筛选方

33、法的效果，可以设置未加高浓度盐的培养基作为对照组，若对照组产生菌落比实浓度盐的培养基作为对照组，若对照组产生菌落比实验组多，则培养基有选择作用，反之，没有。验组多，则培养基有选择作用，反之，没有。(3)(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。为防止冷凝水影响细菌的的方法是高压蒸汽灭菌法。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养。一定区域内同种生物的生长，需将培养皿倒置培养。一定区域内同种生物的全部个体，称为一个种群。全部个体，称为一个种群。答案：答案：(1)(1)盐盐(或或NaClNaCl)选择选择(2)(2)

34、未接种的培养基未接种的培养基(空白培养基空白培养基)未加高浓度盐的培未加高浓度盐的培养基养基(3)(3)高压蒸汽灭菌法倒置种群高压蒸汽灭菌法倒置种群4.(20164.(2016佛山三模佛山三模)我国规定每升饮用水中大肠杆菌我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过不能超过3 3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如甲，伊红美蓝培养基杆菌含量进行检测，操作简图如甲，伊红美蓝培养基配方如乙。配方如乙。回答下列相关问题：回答下列相关问题：(1)(1)图甲中滤膜的孔径应图甲中滤膜的孔径应_(_(填填“大于大于”或或“小小于于”)大肠杆菌。受此

35、启发，对某些不耐高温的试剂可大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？以怎样除菌？_。(2)(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入外，还应加入_(_(一种营养成分一种营养成分)，以及，以及_。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于_培养基。培养基。(3)(3)该小组通过统计该小组通过统计_的数目，计算出单位的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比实体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比

36、实际值际值_(_(填填“偏高偏高”或或“偏低偏低”)，理由，理由是是_。【解析【解析】(1)(1)由图甲可知滤膜的孔径应小于大肠杆菌。由图甲可知滤膜的孔径应小于大肠杆菌。受此启发，可以用滤膜过滤的方法对试剂除菌。受此启发，可以用滤膜过滤的方法对试剂除菌。(2)(2)培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐，乳糖可培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐，乳糖可提供碳源，还应加入氮源，加入凝固剂琼脂后，制成提供碳源，还应加入氮源，加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。该培养基可以筛选大肠杆菌，属于琼脂固体培养基。该培养基可以筛选大肠杆菌，属于鉴别培养基。鉴别培养基。(3)(3)培养基表面生长的一个黑色菌

37、落，来源于样品中的培养基表面生长的一个黑色菌落，来源于样品中的一个活大肠杆菌，可以通过统计黑色菌落数目，计算一个活大肠杆菌，可以通过统计黑色菌落数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，当两个或多个大肠出单位体积样品中大肠杆菌数目，当两个或多个大肠杆菌细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，杆菌细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，因此统计值比实际值偏低。因此统计值比实际值偏低。答案：答案：(1)(1)小于用滤膜过滤除菌小于用滤膜过滤除菌(2)(2)氮源琼脂鉴别氮源琼脂鉴别(3)(3)黑色菌落偏低两个或多个大肠杆菌细胞连在一黑色菌落偏低两个或多个大肠杆菌细胞连在一起时，平板上只能观察到一个

38、菌落起时，平板上只能观察到一个菌落5.(20165.(2016全国卷全国卷)空气中的微生物在重力等作用下，空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：物的分布情况。实验步骤如下：配制培养基配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、成分：牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、X X、H H2 2O)O)；制作无菌平板；制作无菌平板；设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作

39、；将各组平板置于将各组平板置于3737恒温箱中培养一段时间，统计恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：回答下列问题：(1)(1)该培养基中微生物所需的氮来源于该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤。若要完成步骤，该培养基中的成分，该培养基中的成分X X通常通常是是_。(2)(2)步骤步骤中，实验组的操作是中，实验组的操作是_。(3)(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为3636个个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了平板，而空白对照组的一个平板上出现了6 6个菌个菌落，这种结果说

40、明在此次调查中出现了落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。现象。若将若将30(30(即即36-6)36-6)个个/平板作为本组菌落数的平均值，该平板作为本组菌落数的平均值，该做法做法_(_(填填“正确正确”或或“不正确不正确”)。【解题指导【解题指导】解答本题需要注意两点：解答本题需要注意两点：(1)(1)明确培养基中营养成分的来源。明确培养基中营养成分的来源。(2)(2)理解实验目的与实验操作的对应关系。理解实验目的与实验操作的对应关系。【解析【解析】本题主要考查微生物培养。本题主要考查微生物培养。(1)(1)微生物的生长需要碳源、氮源等营养物质，培养基微生物的生长需要碳源、氮源等营养物

41、质，培养基中的牛肉膏、蛋白胨为微生物的生长既提供了碳源，中的牛肉膏、蛋白胨为微生物的生长既提供了碳源，也提供了氮源。微生物培养通常采用的培养基是固体也提供了氮源。微生物培养通常采用的培养基是固体培养基，故题中培养基，故题中X X应是琼脂，在培养基中起凝固剂的作应是琼脂，在培养基中起凝固剂的作用。用。(2)(2)本实验的目的是了解教室内不同高度空气中微生物本实验的目的是了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况，应选择不同的高度放置平板，使之暴露的分布情况，应选择不同的高度放置平板，使之暴露在空气中一段时间，以利于空气中微生物的沉降。在空气中一段时间，以利于空气中微生物的沉降。(3)(3)空白对照

42、实验的设计是不接触空气，不应出现菌落。空白对照实验的设计是不接触空气，不应出现菌落。产生了菌落说明在此次实验中平板被污染。用实验组产生了菌落说明在此次实验中平板被污染。用实验组获取的菌落数的平均值减去污染产生的菌落数作为实获取的菌落数的平均值减去污染产生的菌落数作为实验的结果，这种做法不正确，应在防止污染的情况下验的结果，这种做法不正确，应在防止污染的情况下重新实验，以获得较准确的数据。重新实验，以获得较准确的数据。答案：答案：(1)(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

43、开盖暴露一段时间(3)(3)污染不正确污染不正确6.(20146.(2014全国卷全国卷)为了调查某河流的水质状况，某为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：细菌分离等工作。回答下列问题：(1)(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将；然后，将1 1 mLmL水样稀释水样稀释

44、100100倍，在倍，在3 3个平板上个平板上用涂布法分别接入用涂布法分别接入0.1 0.1 mLmL稀释液；经适当培养后，稀释液；经适当培养后，3 3个个平板上的菌落数分别为平板上的菌落数分别为3939、3838和和3737，据此可得出每升，据此可得出每升水样中的活菌数为水样中的活菌数为_。(2)(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是的是_。(3)(3)示意图示意图

45、A A和和B B中，中，_表示的是用稀释涂表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。布平板法接种培养后得到的结果。(4)(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_ _ _的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。的利用率。【解题

46、指导【解题指导】(1)(1)题干关键词：题干关键词：“先行培养先行培养”“”“振荡培振荡培养养”。(2)(2)隐含信息：隐含信息：A A图中菌落是采用平板划线法培养的结图中菌落是采用平板划线法培养的结果，果，B B图中菌落分布相对均匀，为稀释涂布平板法接种图中菌落分布相对均匀，为稀释涂布平板法接种培养的结果。培养的结果。(3)(3)关键知识：稀释涂布平板法检测细菌含量、平板划关键知识：稀释涂布平板法检测细菌含量、平板划线法分离细菌。线法分离细菌。【解析【解析】本题考查微生物培养、细菌分离的相关知本题考查微生物培养、细菌分离的相关知识。识。(1)(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一

47、为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：M(M(稀释倍数稀释倍数)=100100=3.8=3.810107 7/L/LCV接种计数结果平均值接种体积380.1 mL(2)(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目时，总是从上一次划

48、线的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。逐渐减少，以便得到单个菌落。(3)(3)根据示意图根据示意图A A和和B B中生长出的菌落形态，判定中生长出的菌落形态，判定B B图中图中为稀释涂布平板法接种培养的结果为稀释涂布平板法接种培养的结果(菌落分布相对均菌落分布相对均匀匀)。(4)(4)振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量，促进振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量，促进好氧型微生物的生长；另外振荡培养还可以使菌体与好氧型微生物的生长；另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养

49、物质的利用率。培养液充分接触，提高营养物质的利用率。答案：答案：(1)(1)检测培养基平板灭菌是否合格检测培养基平板灭菌是否合格3.83.810107 7(2)(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(3)B(4)(4)溶解氧营养物质溶解氧营养物质考点二考点二传统发酵技术的应用传统发酵技术的应用【知识【知识方法方法】1.“4”1.“4”种传统发酵技术：种传统发酵技术：食品食品菌种菌种呼吸类型呼吸类型原理原理温度温度果酒果酒酵母菌酵母菌无氧无氧无氧呼吸产生无氧呼吸产生酒精酒精18182525果醋果醋醋酸菌醋酸菌有氧有氧糖糖(酒酒)醋酸醋酸30

50、303535食品食品菌种菌种呼吸类型呼吸类型原理原理温度温度腐乳腐乳毛霉毛霉有氧有氧蛋白酶、脂肪蛋白酶、脂肪酶水解蛋白质、酶水解蛋白质、脂肪脂肪15151818泡菜泡菜乳酸菌乳酸菌无氧无氧无氧呼吸产生无氧呼吸产生乳酸乳酸2.2.控制杂菌的控制杂菌的“四大措施四大措施”：(1)(1)通过发酵条件控制杂菌。通过发酵条件控制杂菌。无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。殖。(2)(2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。(3)(3)利用酒精控制杂菌：如果