1、 实验一:实验一:使用高倍显微镜观察几种细胞使用高倍显微镜观察几种细胞 一、一、实验目的:实验目的: 1、学会如何使用显微镜观察细胞; 2、了解细胞的结构; 3、学会制作临时装片。 二、二、实验材料:实验材料:(实验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装片 三、实验用具:三、实验用具: 载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜(物镜 5X、10X、40X) 四、四、方法步骤:方法步骤: 1、制作松针的临时切片: (1)取干净的载玻片一个平置于试验台上,用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 (2)将土豆切成条状(截面约:0.5X0.5cm)取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间,用
2、 刀片削成尽量薄的薄片,削时,手腕不动,靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取 较薄的切片,置于载玻片的水滴上。 (3)从一侧轻轻盖上盖玻片,不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴,即完 成临时切片的制作。 2、观察切片: (1)取出显微镜,置于试验台上靠左的位置,打开光源。 (2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置,使盖玻片对准光源。 (3)使用 5X 物镜观察切片,使松针切片在视野中心,换成 10X 物镜,观察松针叶面横切结 构。 (4)换成 40X 物镜观察,注意细胞及细胞内物质结构,画图。 3、 动物血液临时装片的制作及观察(除了不用切片,其他类似)
3、4、 动物神经细胞永久装片的观察。 五、考点提示五、考点提示: 1、松针的叶面结构是什么样的? 2、动物细胞的结构是什么样的?与植物细胞又什么不同? 3、显微镜的物镜倍数愈大,视野的亮度如何?物体的大小如何? 4、如何调节焦距? 5、如何才能使切片尽量的薄?切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。 实验实验二二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一一、实验目的:实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理颜色反应,识记和区 分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合 物的基本方法,学会描述实
4、验现象,掌握 NaOH 溶液和 CuSO4 溶液的使用方法。 二二、实验原理:实验原理: 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的 分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖还原糖;蔗糖分子内没有,为非 还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶 性非还原糖。 可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的 Cu 2O 沉淀。如: 葡萄糖葡萄糖 + + 2 2CuCu 2+2+ + 4 + 4OHOH 加热加热 葡萄糖
5、酸葡萄糖酸 + Cu+ Cu 2 2OO(砖红色)(砖红色)+ H+ H 2 2O O 即 Cu 2+被还原成 Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色沉淀砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色蓝色(直链)(直链)或或紫(红)色(支链)紫(红)色(支链)。 2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不 溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或 与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染
6、色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染 色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹,苏丹,苏丹黑及油红 O 等。脂 肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂 质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37 -60)对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。 脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹染液染成红色),胆脂素呈淡 红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性
7、 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu 2+作用,产生紫色反应。) 三三、实验材料实验材料: 1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因 为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜。 2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 34 小时(也可用蓖麻种子)。 3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 4、淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。 四、实验用具:四、实验用具:双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小量 筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉
8、网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 五五、实验试剂、实验试剂: 1 斐林试剂斐林试剂 (包括甲液: 质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液: 质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液) 2苏苏丹丹或苏丹或苏丹染液染液 3双缩脲试剂双缩脲试剂(包括 A 液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和 B 液:质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4溶液) 4体积分数为体积分数为 50%50%的酒精溶液的酒精溶液 5碘液碘液 6蒸馏水蒸馏水 六六、方法步骤:、方法步骤: 一、可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 (去皮、
9、切块、研磨、过滤) 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高,因苹果多酚氧化酶含量高, 组织液很易被氧化成褐色,组织液很易被氧化成褐色, 将产生的颜色掩盖。将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管,向试管内注 入 2mL 组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的 斐林试剂,振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、 乙液 分别分别配制、 储存, 使用前使用前才将甲、 斐林试剂很不稳定,斐林试剂很不稳定, 甲、 乙甲、 乙 液混合保存时,生成的液混合保存时,生成的 Cu Cu 乙液等量混匀成斐林试剂; 切勿切勿将甲液、 乙液分别加入苹果 组织样液中进行检测。 ( OH )( OH ) 2 2
10、在在 7070 9090 0 0C C 下分解 下分解 成黑色成黑色 CuOCuO 和水;和水; 甲、 乙液分别加入时可能会甲、 乙液分别加入时可能会 与组织样液发生反应,无与组织样液发生反应,无 Cu OHCu OH 生成。生成。 4. 试管放在盛有 50-65 0C 温 水的大烧杯中,加热约 2 分 钟,观察到溶液颜色:浅蓝浅蓝 色色 棕色棕色 砖红色砖红色(沉(沉 淀)淀) 最好用试管夹夹住试管上部, 使 试管底部不触及烧杯底部, 试管 口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内的溶液冲出试防止试管内的溶液冲出试 管,造成烫伤;管,造成烫伤; 缩短实验时间。缩短实验时间。
11、 二、脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴 中,用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡 34 小 时,新花生的浸泡时 间可缩短。 因为浸泡时间短,不易切片因为浸泡时间短,不易切片; 浸泡时间过长,组织较软,切浸泡时间过长,组织较软,切 片不易成形。切片要尽可能薄片不易成形。切片要尽可能薄 些,便于观察。些,便于观察。 在子叶薄片上滴23滴苏丹苏丹或苏或苏 丹丹染液染液,染色 1 分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用 50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮酒精用于洗去浮色,不洗去
12、浮 色,会影响对橘黄色脂肪滴的色,会影响对橘黄色脂肪滴的 观察。同时,酒精是脂溶性溶观察。同时,酒精是脂溶性溶 剂,可将花生细胞中的脂肪颗剂,可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴。粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上 12 滴蒸馏水,盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处,可看到细胞中有染成橘黄色橘黄色 或或红色红色圆形小颗粒圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长,油滴会溶解在乙醇时间一长,油滴会溶解在乙醇 中。中。 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 (浸泡、去皮
13、研磨、过滤。) 黄豆浸泡黄豆浸泡 1 1 至至 2 2 天,容易研天,容易研 磨成浆,也可购新鲜豆浆以磨成浆,也可购新鲜豆浆以 节约实验时间。节约实验时间。 鉴定。加样液约 2ml 于试管 中, 加入双缩脲试剂 A, 摇匀; 再加入双缩脲试剂 B 液 34 滴,摇匀,溶液变紫色。 A 液和 B 液也要分开配制, 储 存。鉴定时先加先加 A A 液后加液后加 B B 液液。 CuSOCuSO4 4溶液不能多加溶液不能多加。 先加先加 NaOHNaOH 溶液,为溶液,为 CuCu 2+2+与蛋 与蛋 白质反应提供一个碱性的环白质反应提供一个碱性的环 境。境。A A、B B 液混装或同时加入,液混装
14、或同时加入, 会导致会导致 CuCu 2+2+变成 变成 Cu ( OH ) Cu ( OH ) 2 2 沉淀,而失效。沉淀,而失效。 否则否则 CuSOCuSO4 4的蓝色会遮盖反的蓝色会遮盖反 应的真实颜色。应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够,在实验中蛋如果稀释不够,在实验中蛋 清粘在试管壁,与双缩脲试清粘在试管壁,与双缩脲试 剂反应后会剂反应后会粘固在试管内壁粘固在试管内壁 上,使反应不容易彻底,并上,使反应不容易彻底,并 且试管也不易洗干净。且试管也不易洗干净。 附:淀粉的检测和观察 用试管取 2ml 待测组织样液, 向试管内滴加 2 滴碘液,观 察颜色变
15、化。 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察以免影响颜色观察 七、考点提示:七、考点提示: 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些? 答:答:葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、 蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 2、还原性糖植物组织取材条件? 答:答:含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。 3、 研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响? 答:答: 加石英砂是为了使研磨更充 分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用? 答:答:混合后使用;产 生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。
16、5、还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为? 答:答:浅蓝色 棕色 砖红色。 6、花生种子切片为何要薄? 答:答:只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。 7、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是 什么? 答:答:切片的厚薄不均匀。 8、脂肪鉴定中乙醇作用? 答:答:洗去浮色。 9、双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用?先加 A 液的目的怎样通过对比看颜色变化? 答:答: 不能混合;先加 A 液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三:观察实验三:观察 DNADNA 和和 RNARNA 在细胞中的分布在细胞中的分布 一、
17、一、实验原理:实验原理: 1、真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内,RNA 主要分布在细胞质中。 2、 甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同, 甲基绿对 DNA 亲和力强, 使 DNA 显现出绿色,而吡罗红对 RNA 的亲和力强,使 RNA 呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染 色剂将细胞染色,可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。 3、盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离,便于 DNA 与染色剂的结合 二、实验材料:二、实验材料:人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具:三、实验用具
18、:大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四四、方法步骤:、方法步骤: 1、取材 滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液; 刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; 涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2、水解 解:将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解; 保:将小烧杯放入装有 30温水的大烧杯中保温 5 分钟。 3、冲洗涂片 冲:用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟; 吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分。
19、 4、染色 染:用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色 5 分钟; 吸:吸去多余染色剂; 盖:盖上盖玻片。 5、观察 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、考点提示:五、考点提示: 1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 2、取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞; 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗; 4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载 玻片均匀受热,以免破裂; 5、烘烤后
20、的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却 1 分钟。 实验四实验四:体验制备细胞膜的方法体验制备细胞膜的方法 一、实验原理:一、实验原理:细胞膜的流动性和半透性 二、实验材料:二、实验材料:猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释液(血液加适量的生理盐水) 三、实验用具:三、实验用具:蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤:四、方法步骤: 1、用试管吸取少量红细胞稀释液,滴一小滴在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片 2、在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水 纸小心吸引,注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行,并持续观察
21、细胞的变化。 可以看到近水的部分红细胞发生变化;凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物流 出。 五、考点提示:五、考点提示: 1、选择动物细胞进行实验的原因:动物细胞无细胞壁。 2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众 多的细胞器(膜),可以得到较纯净的细胞膜。 3、细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜:将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细 胞膜。 4、如何获得植物细胞膜:先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体;再将原 生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;最后经过离心分离得到植物细胞膜。 5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因
22、:稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。用 生理盐水是为了保持渗透压,防止在稀释的时候就发生细胞破裂。 实验五:用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体实验五:用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 一、实验原理:一、实验原理: 1、叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显 微镜下观察它的形态。 2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿 色。 通过染色, 可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、 圆球状、 线形、哑铃形等。 二、实验材料:二、实验材料:新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为 1%的健那
23、 绿染液 (将 0.5g 健那绿溶解于 50mL 生理盐水中,加温到 30-40 摄氏度,使其充分溶解) 三、实验用具:三、实验用具:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签 四、方法步骤:四、方法步骤: 1、观察叶绿体 低倍镜下找到叶片细胞低倍镜下找到叶片细胞高倍镜下观察。 2、观察线粒体 染色制片低倍镜下找到口腔上皮细胞高倍镜下观察。 五、考点提示:五、考点提示: 1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因:藓类属于低等植物,叶片是绿色的单层细胞,不需加 工即可进行观察。 2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因:保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞 质基质中,否则,细胞失水收缩,将影响细胞器
24、形态的观察。 实验六:实验六:植物细胞的吸水和失水植物细胞的吸水和失水 一、一、实验目的:实验目的: 1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原。 (与前面的知识:显微镜的使用联系) 2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响,掌握此种方法的具体应用。 3、通过观察植物细胞的吸水和失水,明确渗透系统的组成以及具体应用。 二、二、实验原理:实验原理: 1、成熟的植物细胞放到一定浓度的溶液中构成一个渗透系统。当细胞大量失水时原生质层 与细胞壁的伸缩程度不同,导致原生质层和细胞壁分离。 2、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界 溶液中,通过渗透作用失水;由于
25、细胞壁和原生质层的伸缩性不同,细胞壁伸缩性较小,而 原生质层性较大,从而使二者分开;反之,外界溶液浓度大于细胞液浓度,则细胞通过渗透 作用吸水,分离后的质和壁又复原。 三、实验材料:三、实验材料:紫色特别深的洋葱外表皮、质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液、清水 四、实验用具:四、实验用具:显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸 五、方法步骤:五、方法步骤: 1、用刀片在洋葱鳞片叶的外表面划一个小方块,用镊子撕取这一小块洋葱表皮,在洋葱的 外表皮上,用刀片划一些方块,用镊子轻轻撕取一小块(撕取的仅仅是外表皮,不要撕得太 厚,仍然作为一个问题留给学生) 。在取标本时,可以将洋葱的内表
26、皮朝外,外表皮朝里进 行对折,不要太用力,然后取其外表皮作为材料,将它平展地放在载玻片中央的清水滴中, 并盖上盖玻片。 2、用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小,以及原生质层的位置。 3、从盖玻片的一侧滴入 0.3g/ml 的蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复 几次,洋葱表皮细胞就侵润在蔗糖溶液中。注意重复 3-4 次。 4、再用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小,以及原生质层的位置。 5、从盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引,这样重复几次,洋葱表皮 细胞就侵润在清水中。 6、还用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小,以及原生质层的位置。 六
27、、实验结论:六、实验结论: 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时, 水分会由细胞液中渗出到外界溶液中, 通过渗透作用失 水;由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同,细胞壁伸缩性较小,而原生质层性较大,从而使 二者分开;反之,当外界溶液浓度低于细胞液浓度时,则细胞通过渗透作用吸水,分离后的 质和细胞壁又复原。 实实验七:比较过氧化氢在不同条件下的分解验七:比较过氧化氢在不同条件下的分解 一、实验一、实验目的:目的: 通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢,了解过氧化氢酶的作用和意义 二、二、实验原理:实验原理: 新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,根据酶的专一性,可知其可以催化过氧化氢分解成水和氧。 三、实验材料:
28、三、实验材料: 质量分数为 20%的猪肝研磨液,新配制的体积分数为 3%的过氧化氢溶液,质量分数为 3.5% 的 FeCl3溶液 四、实验用具:四、实验用具: 量筒,试管,滴管,试管夹,试管架,卫生香,火柴,酒精灯,大烧杯,石棉网,温度计 五、方法步骤:五、方法步骤: 1、取 4 支洁净试管,分别编号 1,2,3,4,向试管内分别加入 2ml 过氧化氢溶液。 2、将 2 号试管放在 90左右的水浴中加热,观察气泡情况,并与 1 号试管作比较。 3、向 3 号试管内滴入 2 滴 FeCl3溶液,向 4 号试管内滴入 2 滴肝脏研磨液,观察哪支试管 产生的气泡多。 4、2 至 3min 后,将点燃
29、的卫生香分别放在 3、4 号试管内液面的上方,观察哪支试管中的 卫生香燃烧更猛烈。 六、实验结论:六、实验结论: 1、加热能促进 H2O2的分解,提高反应速率; 2、酶有催化作用,与无机催化剂相比,酶具有高效性。 实实验八:验八:影响酶活性的条件影响酶活性的条件 一、实验一、实验目的:目的: 1、初步学会探索影响酶活性条件的方法。 2、探索过氧化氢酶在不同温度和 PH 下催化过氧化氢水解的情况。 二、二、实验原理:实验原理: 淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。麦芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫蓝色的复合物,但能 与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 三、实验材料:三、实验材料: 质
30、量分数为 2%的新配置的淀粉酶溶液,新鲜的质量分数为 20%的猪肝研磨液, 质量分数为 3%的可溶性淀粉溶液,新配制的体积分数为 3%的过氧化氢溶液, 质量分数为 5%的盐酸,质量分数为 5%的氢氧化钠溶液,蒸馏水,冰水,热水, 碘液,斐林试剂 四、实验用具:四、实验用具:量筒,试管,滴管,试管夹,三脚架,火柴,酒精灯,小烧杯,大烧杯, 石棉网,温度计, 五、方法步骤:五、方法步骤: 一、温度对酶活性的影响一、温度对酶活性的影响 1、取三支洁净的试管,编上号 1,2,3,并分别注入 2ml 可溶性淀粉液。 2、分别向 1,2,3 号三支试管中各注入 1ml 新鲜的淀粉酶溶液,摇匀,依次放入沸水
31、,37 左右的热水,冰水中,维持各自的温度 5 分钟。 3、分别向 1,2,3 号三支试管中各滴入一滴碘液,然后摇匀。观察并记录这三只试管中, 溶液颜色的变化情况。 二、二、p pH H 对酶活性的影响对酶活性的影响 1、取三支洁净的试管,编上号 1,2,3,并分别注入 1ml 的新鲜的淀粉酶溶液。 2、依次向 1 号,2 号,3 号试管中注入蒸馏水,氢氧化钠溶液,稀盐酸各 1ml 并摇匀。 3、分别向 1 号,2 号,3 号试管中各注入 2ml 可溶性淀粉溶液,震荡摇匀。 4、将三支试管的下半部浸到 37左右的温水中,保温 5 分钟。 5、向三支试管中各加入 2ml 斐林试剂,震荡摇匀。 六
32、、实验现象:六、实验现象: 一、温度对酶活性的影响一、温度对酶活性的影响 1 号试管中的液体未变蓝,2 号和 3 号试管中的液体变蓝,且 2 号试管蓝色比 3 号试管深。 二、二、p pH H 对酶活性的影响对酶活性的影响 2 号和 3 号试管中的液体未变蓝,1 号试管中的液体变蓝。 七、实验结论:七、实验结论: 1、在最适宜的温度和最适宜的 ph 条件下,酶的活性最高。 2、温度和 ph 偏高或偏低,酶的活性明显下降。 实验九:叶绿体中色素的提取和分离实验九:叶绿体中色素的提取和分离 一、实验一、实验目的:目的: 1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 2、探索叶绿体中有几种色素。 二、
33、二、实验原理:实验原理: 1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机溶剂,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙 酮可提取叶绿体中色素。 2、色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶 解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。 三、实验材料:三、实验材料: 新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶),无水乙醇,层析液(由 20 份在 6090下分馏出来的石油 醚、2 份乙醇和 1 份苯混合而成。93 号汽油也可代用),二氧化硅和碳酸钙。 四、实验用具:四、实验用具: 干燥的定性滤纸,试管,棉塞,试管架,研钵,玻璃漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,药
34、勺, 量筒(10ml),天平。 五、方法步骤:五、方法步骤: (1)称取 5g 绿色叶片并剪碎 提取色素 研钵研磨漏斗过滤 (2)加入少量 SiO2、CaCO3和 5ml 丙酮 收集到试管内并塞紧管口 (1)将干燥的滤纸剪成 6cm 长,1cm 宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同时 到达滤液细线) 制滤纸条 (2)在距剪角一端 1cm 处用铅笔画线 (1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 (2)干燥后重复划 2-3 次 (1)向烧杯中倒入 3ml 层析液(以层析液不没及滤液细线为准) 纸上层析 (2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中 (3)用培
35、养皿盖盖上烧杯 观察结果:滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图) 最宽:叶绿素 a; 最窄:叶绿素 b; 相邻色素带最近:叶绿素 a 和叶绿素 b; 相邻色素带最远:胡萝卜素和叶黄素。 六、考点提示:六、考点提示: 1、二氧化硅:为了使研磨充分;碳酸钙:保护色素免受破坏;丙酮:色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素(橙黄色) ,扩散最慢的是叶绿素 b(黄绿色) 。 3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种,它们在层析液中的溶解度不同,随层 析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。 4、裁取定性滤纸时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 5、制备滤纸条时,要将滤纸
36、条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于 观察实验结果。 6、根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯 1cm ,高出的部分做直角弯折。 7、滤纸上的滤液细线如果触到层析液,细线上的色素就会溶解到层析液中,就不会在滤纸 上扩散开来,实验就会失败。 8、画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中 9、研磨要迅速、充分。a.因为丙酮容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的 色素;c.叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。 实验十:实验十:细胞大小与物质运输的关系细胞大小与物质运输的关系 一、一、实验实验目的:目的: 通过探究细胞大小,即细胞的表面积与体积
37、之比(即细胞的相对表面积) ,与物质运输效率 之间的关系,探讨细胞不能无限长大的原因 二、二、实验原理:实验原理:NaOH 和酚酞相遇,呈紫红色。 三、实验材料:三、实验材料:3cm3cm6cm 的含酚酞的琼脂块,质量分数为 0.1%的 NaOH 溶液。 四、实验用具:四、实验用具:塑料餐刀,防护手套,毫米尺,塑料勺,纸巾,烧杯。 五、方法步骤:五、方法步骤: 1、用塑料餐刀将琼脂块切成三块边长分别为 3cm、2cm、1cm 的正方体 2、将三块琼脂块放在烧杯内,加入 NaOH 溶液,将琼脂块淹没,浸泡 10min。用塑料勺不时 翻动琼脂块。注意:不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面 3、戴上手
38、套,用塑料勺将琼脂块从 NaOH 溶液中取出,用纸巾把它们擦干,用塑料刀把琼脂 块切成两半。观察切面,测量每一块上 NaOH 扩散的深度。纪录测量结果。注意:每两次操 作之间必须把刀擦干 4、根据测量结果进行计算,并填写下表 琼 脂 块 的 边长/cm 表面积 /cm2 体积 /cm3 相对表面积 NaOH扩散的深 度 比值(NaOH 扩散的体 积/整个琼脂块的体 积) 3 2 1 六、实验结论:六、实验结论: 琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小; NaOH 扩散的体积与整个琼脂块体积 之比随着琼脂块的增大而减小 七、考点提示:七、考点提示: 1、 你认为细胞生长到一定程度时,采取
39、什么办法可保证细胞代谢需要呢?答:答: 细胞生长到一 定程度,将停止生长,转而进行细胞的分裂,这就摆脱了细胞生长带来相对表面积减小带来的 困境,也是细胞增殖的原因之一。 2、除此以外,限制细胞长大的因素还有?答:答:有核质比(细胞核与细胞质的体积比),外界的 温度和营养物质的供应等条件 3、细胞为什么要分裂?或细胞为什么这么小?答:答:(1)增大细胞膜表面积与体积比,有利于物 质的运输(营养吸收与废物排出)以保证细胞正常生命代谢需要。(2)保证适宜的核质关系, 使细胞质能在细胞核的控制范围内。 4、卵细胞是一种特殊的细胞,因为它含有许多供胚胎发育的营养物质卵黄,而使细胞 体积增大了许多倍。但卵
40、细胞一般与外界交换物质少,故表面积与体积的比例特殊。 实验十一:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验十一:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的:一、实验目的: 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 2、观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的时 间长短。 3、绘制植物细胞有丝分裂简图。 二、二、实验原理:实验原理: 3、细胞核内的染色体易被碱性染料(如龙胆紫)染成深色。 三、实验材料:三、实验材料:洋葱(可用葱.蒜代替) ,质量分数为 15%的盐酸,体积分数为 95%的酒精, 质量浓度为 0.01g/ml 或 0.02g/ml 的龙胆紫溶液(将龙胆紫溶解在
41、质量分数 2%的醋酸溶液 中配制而成)或醋酸洋红液,洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。 四、实验用具:四、实验用具:显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪子,镊子,滴管。 五、方法步骤:五、方法步骤: 1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的 3-4 天,取洋葱一个,放在广口瓶上。瓶内装满清水, 让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约 5cm,取生长 健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作 制作流程为:解离漂洗染色制片 过程 方 法 时 间 目 的 解离 上午 10 时至下午 2 时,剪去洋葱根尖 2-3mm, 立即放入盛入有盐酸和酒精混合液(1:1)的 玻璃皿中,在温室
42、下解离。 3-5min 用药液使组织中的细胞 相互分离开来 漂洗 待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛入清水的 玻璃皿中漂洗。 约 10min 洗去药液,防止解离过度 染色 把根尖放进盛有质量浓度为 0.01g/ml 或 0.02g/ml 的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)的玻 璃皿中染色。 3-5min 染料能使染色体着色。 制片 用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,加 一滴清水,并用镊子尖把根尖能碎,盖上盖玻 片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇 指轻轻的按压载玻片。 使细胞分散开来,有利于 观察 3、观察 a 低倍镜观察:找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂 b
43、高倍镜观察:在低倍镜观察的基础上换高倍镜,直到看清细胞的物象为止 c 仔细观察:先到中期,再找其余各期,注意染色体的特点 d 移动观察:慢慢移动装片,完整地观察各个时期(如果自制装片效果不太理想,可以观察 洋葱根尖固定装片) 4、绘图 5、记录 六、实验结论:六、实验结论: 前期:出现染色体核膜核仁消失纺锤丝出现 中期:着丝粒位于赤道面纺锤体明显 后期:染色体分裂成两组子染色体向相反两极运动 末期:纺锤体出现核膜核仁出现 实验十二:性状分离实验十二:性状分离的模拟的模拟 1、高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。 2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同,可用高倍显微镜根据各个时期 内
44、染色体的变化情况,识别该细胞处于那个时期。 一、一、实验目的实验目的: 1、理解等位基因在形成配子时发生分离、受精时雌、雄配子随机结合的过程。 2、认识和理解基因的分离和随机结合与生物性状之间的数量关系。 二、二、实验原理实验原理: 进行有性生殖的生物, 等位基因在减数分裂形成配子时会彼此分离, 形成两种比例相等的配 子。受精作用时,比例相等的两种雌配子与比例相等的两种雄配子随机结合,机会均等。随 机结合的结果是后代的基因型有三种;其比为 1:2:1,表现型有两种,其比为 3:1。由于 此实验直接用研究对象进行不可能, 就用模型代替研究对象进行实验, 模拟研究对象的实际 情况,获得对研究对象的
45、认识(此实验方法称模拟实验) 。3实验材料小塑料桶 2 个,2 种 色彩的小球各 20 个(球的大小要一致,质地要统一,手感要相同,并要有一定重量) 。 三、实验用具:三、实验用具:小桶 2 个,分别标记甲、乙;两种不同颜色的彩球各 20 个,一种彩球标 记 D,另一种彩球标记 d;记录用的笔和纸。 四、四、方法步骤方法步骤: 1、分装、标记小球取甲、乙两个小桶,每个小桶内放有两种色彩的小球各 10 个,并在不同 色彩的球上分别标有字母 D 和 d。甲桶上标记雌配子,乙桶上标记雄配子,甲桶中的 D 小球 与 d 小球,就分别代表含基因 D 和含基因 d 的雌配子;乙桶中的 D 小球与 d 小球
46、,就分别代 表含基因 D 和含基因 d 的雄配子。 2、混合小球分别摇动甲、乙小桶,使桶内小球充分混合。 3、随机取球找三个学生:一个记录,两个分别从两个小桶内随机抓取一个小球,组合在一 起,记录下两个小球的字母组合,这表示雌配子与雄配子随机结合成合子的过程。 4、重复实验将抓取的小球放回原来的小桶,摇动小桶中的彩球,使小球充分混合后,再按 上述方法重复做 50100 次(重复次数越多,模拟效果越好) 。记录时,可将三种基因型写 好, 以后每抓一次, 在不同基因型后以“正”字形式记录 (如下表) : 基因型 次数 总计 百 分比 DD Dd dd 5、统计小球组合统计小球组合为 DD、Dd 和
47、 dd 的数量分别是多少,并记录下来。 (6)计算 小球组合计算小球组合为 DD、Dd 和 dd 之间的数量比值是多少,计算小球组合为 DD 和组合 为 dd 的数量比值是多少,并记录下来。 (7)实验结论分析实验结果,在实验误差允许的范 围内,得出合理的结论(可将全班每一小组结果综合统计,进行对比)。 五、考点提示:五、考点提示: 1、选择小球大小要一致、质地要统一、抓摸时手感要相同,以避免人为误差。 2、选择盛放小球的容器最好采用小桶或圆柱形容器,而不要采用方形容器,以便摇动小球 时能充分混匀。 3、桶内小球的数量必须相等,D、d 基因的小球必须 1:1,且每次抓出的两个小球必须统计 后各
48、自放回各自的小桶,以保证机率的准确。 4、不要看着桶内的小球抓,要随机去摸,且顺便搅拌一下,以增大其随机性,用双手同时 去两个桶内各抓一个。 5、记录时,可先将 DD、Dd、dd 三种基因型按竖排先写好,然后每抓一次在不同基因型后以 “正”字形式记录。 6、每做完一次模拟实验,小球放回后要摇匀小球,然后再做下次模拟 实验十三:观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片实验十三:观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片 一、实验目的一、实验目的: 通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片, 识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、 位置和 数目,加深对减数分裂过程的理解。 二、实验用具:二、实验用具: 蝗虫精母细胞减数分
49、裂固定装片,显微镜。 三、三、方法步骤:方法步骤: 1、在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别初级精母细胞、次级精母细胞和 精细胞。 2、先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞, 再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。 3、根据观察结果,尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图 实验十四:实验十四:低温诱导植物染色体数目的变化低温诱导植物染色体数目的变化 一一、实验目的:实验目的: 1、学习低温诱导植物染色体数目变化的方法 2、理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制 二、实验原理:二、实验原理: 1、进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分
侵权处理QQ:3464097650--上传资料QQ:3464097650
【声明】本站为“文档C2C交易模式”,即用户上传的文档直接卖给(下载)用户,本站只是网络空间服务平台,本站所有原创文档下载所得归上传人所有,如您发现上传作品侵犯了您的版权,请立刻联系我们并提供证据,我们将在3个工作日内予以改正。