血液分析仪检验参数和临床应用课件.ppt

1、 数据散点图直方图报警WBC异常异常 WBC Abn Scattergram WBC散点图异常 NRBC Abn Scattergram NRBC散点图异常 Neutropenia 嗜中性粒细胞减少 Neutrophilia 嗜中性粒细胞增加 Lymphopenia 淋巴细胞减少 Lymphocytosis 淋巴细胞增加 Monocytosis 单核细胞增加 Eosinophilia 嗜酸性粒细胞增加 Basophilia 嗜碱性粒细胞增加 Leukocytopenia 白细胞减少 Leukocytosis 白细胞增加 NRBC present 有核红细胞增加 Blasts?原始细胞 Imma

2、ture Gran?未成熟粒细胞 Left Shift?左移 Atypical Lympho?不典形淋巴细胞 Abn Lympho/L-Blasts?异常淋巴/原始淋巴 NRBC 有核红细胞 RBC Lyse resistance 红细胞溶解不全 RBC Abn Distribution 红细胞粒子分布异常 Dimorphic Population 双峰红细胞 RET Abn Scattergram RET 散射图异常 Reticulocytosis RET增加 Anisocytosis 红细胞大小不均 Microcytosis 小红细胞症 Macrocytosis 大红细胞症 Hypochr

3、omia 低血红蛋白症 Anemia 贫血 Erythrocytosis 红细胞增多症 RBC Agglutination 红细胞凝聚 Turbidity/HGB Interference?乳糜/HGB Iron Deficiency?缺铁性贫血 HGB Defect?HGB异常 Fragments?碎片 PLT异常异常:PLT Abn Scattergram 血小板散射图异常 PLT Abn Distribution 血小板直方图异常 Thrombocytopenia 血小板减少 Trombocytosis 血小板增加PLT怀疑怀疑:PLT Clumps?血小板凝集 PLT Clumps(S

4、)血小板凝集 (+)表示超出检测范围(-)表示仪器不能辨别和分类(*)表示受干扰因素影响,结果可信度降低(&)表示结果受到修正(WBC&/PLT&)()表示超出线性范围 一般报警项目 当WBC0.10X109/L时,不显示WBC五分类结果 当WBC 40.0g/dL and MCH 40pg and RBC 40.0g/dL and MCH 40pg实例讲解实例讲解原因:MCHC 365g/L (22.8mmol/L)可能原因:溶血 HCT 假性减低 建议重新采血 脂血 HGB 假性增高.1:5稀释标本 RBC冷凝集 HCT 轻度假性减低 加温 37 C 实例讲解实例讲解MCHC 310g/L

5、 and MCV 15.0%RDW-CV 15.0%and MCV 75flHGB 异常异常实例讲解实例讲解原因原因:RBC抗溶抗溶实例讲解实例讲解原因:乳糜微滴实例讲解实例讲解原因:有核红细胞和淋巴细胞/影细胞边界区域数目大于设定值实例讲解实例讲解原因:1.界标上的细胞数量超限2.该细胞群在 WBC/BASO 散点图上无法分开。3.5 分类无法计算 WBC (Ly#+Mo#+Eo#+Baso#)100%80(研究参数)2.DIFF-IG%0.8%(研究参数)实例讲解实例讲解原因原因:1.DIFF_Left Shift#2002.DIFF_Left Shift%4%Ne/EoLy/Ne 2Ly

6、m/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/EoLS实例讲解实例讲解原因原因:Atyp.Lymph 区域区域 100Atyp.Lymph 区域区域 1%实例讲解实例讲解Abn Lympho/L-Blast?异淋/原始淋巴细胞？原因:Ly/Mo 2 交接面细胞数量过多 若若“Blast?”出现出现,“ABN Lympho/Blast?”不显示不显示.Ne/EoLym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo实例讲解实例讲解1.PL(%)10%2.PU(%)40%3.PDW-SD 无法计算4.PDW 20fl5.P-LCR 45%an

7、d MPV 13fl and PU 24fl6.PU 20%PLPU100%20%10 fl20 fl30 fl40 fl12 fl原因:WBC-碎片#20:PLT 值无效原因:1.PLT#60 x109/L 且 PDW 20 fl 或 PL(%)9%或 PU(%)20%或 P-LCR 45%and MPV 13fl and PU24fl 当当 PLT-Clumps?出现时出现时,PLT-Clumps(s)?不提示不提示.PLT-I 由 PLT-DC 直方图获得PLT-IPLT-OPLT-O 由RET(PLT-O)散点图获得出现碎片和大血小板的标本，直方图曲线发生变化，PLT-UD异常在RET

8、散点图中，RBC和 PLT-O 散点图上区分不清楚转换条件转换条件1、RL(%)10%2、PL(%)9%3、PU(%)39%4、PU23fland PU(%)20%5、存在细胞碎片6、存在红细胞聚集7、PU%13%and PLT35fl45%and PLT-I#80 x109/L8、PLT-I115%PLT-IPLT-O在WBC 碎片或大血小板病例中:PLT-IPLT-O在RBC 碎片病例中：PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT 计数无效PLT-I报告PLT-O报告NoNoYesYes异型淋巴细胞异型淋巴细胞实例讲解实例讲解异型淋巴细胞异型淋巴细胞异型淋巴细胞异型淋巴细胞实例讲解实例

9、讲解CML实例讲解实例讲解CML实例讲解实例讲解AML-M2实例讲解实例讲解AML-M2实例讲解实例讲解AML-M4实例讲解实例讲解AML-M4实例讲解实例讲解280g/L410g/L60fL120fL一、血液分析仪校准及性能评估一、血液分析仪校准及性能评估稀释效应：线性分析总重复性批内精密度批间精密度携带污染可比性准确性标本老化(sample ageing):静脉采血后，观察随时间增加测定结果变化量干扰试验参见参见CNAS-GL19医学实验室质量和能力认可准则在临床血液学检验领域的指南进行实例讲解实例讲解 实验方案实验方案：选取一份接近预期上限的高值全血样本选取一份接近预期上限的高值全血样本

10、（H），分别按），分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例的比例进行稀释，每个稀释度重复测定进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。将实测次，计算均值。将实测值与理论值作比较（偏离应小于值与理论值作比较（偏离应小于10%），计算），计算 y=ax+b，验证线性范围。验证线性范围。合格要求：合格要求：a值在值在10.05范围内，相关系数范围内，相关系数r0.975实例讲解实例讲解HGB稀释度第一次第二次第三次均值理论值20%54535353.33 52.27 40%99989898.33 104.53 60%151151150150.67 156.80 80%2042042052

11、04.33 209.07 100%260261263261.33 261.33 a0.9987 r0.9991 实例讲解实例讲解 试验方案：取低、中、高三份标本，每份标本连续测定20次，算CV值参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT判定标准CV3.0%1.5%1.0%1.5%1.0%4.0%实例讲解实例讲解 实验方案：根据ICSH的血细胞分析仪评价指南，取高浓度血液样本，混合均匀后连续测定三次，测定值分别为H1、H2、H3；再取低浓度血液样本，连续测定3次，测定值分别为L1、L2、L3。按公式计算携带污染率（L1L3）（H3L3）携带污染率 =100%参数WBCRBCHGBHCTPLT要求要

12、求1.0%1.0%1.0%1.0%1.0%实例讲解实例讲解 实验方案：准备10份新鲜血样本，浓度覆盖生物参考区间，整个实验应该在样本老化之前完成。在基准仪器和比对仪器上检测这10份样本，计算比对仪器和基准仪器之间的结果偏差百分比比对的偏差范围在下表的范围内（比对的偏差范围在下表的范围内（1/2CLIA88)为满足要求，为满足要求，10份标本中份标本中8份满足要求为比对合格。份满足要求为比对合格。参数参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT偏差偏差%7.50%3.00%3.00%3.00%3.00%12.50%实例讲解实例讲解 试验方案：校准物:SCS-1000 LOT NO:73240525

13、EXP.DATE:2007.12.24 校准物（测6至11次，取第一次结果）的均值与定值间的偏差应达到表中的偏差要求（此偏差要求是卫生部临检中心之规定），否则调校准系数或调整仪器，再做校准实验确认实例讲解实例讲解参数参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT单位单位（109/L）（1012/L）g/LL/L（fL）（109/L）定值定值6.7574.717143.441.587.66185.0 16.81 4.69 143 41.2 87.8 182 26.72 4.74 141 41.6 87.8 183 36.64 4.68 142 41.1 87.8 180 46.57 4.70 142

14、41.3 87.9 182 56.63 4.71 142 41.4 87.9 185 66.78 4.73 143 41.5 87.7 180 MEAN(均值均值)6.69 4.71 142.17 41.4 87.8 182.0 SD0.094 0.023 0.753 0.187 0.075 1.897 CV1.40%0.49%0.53%0.45%0.09%1.04%偏差（偏差（%）（均值（均值-定值）定值）100/定值定值0.97%0.18%0.86%0.36%0.18%1.62%偏差要求偏差要求1.50%1.00%1.00%2.00%1.00%3.00%结论结论(是否需要校准是否需要校准)

15、不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准校准系数（定值校准系数（定值/均值）均值）100.98%100.18%100.87%100.36%99.84%101.65%仪器原有校准系数仪器原有校准系数107097898.81041000970 新的校准系数新的校准系数1070 978 98.81041000970 说明说明实例讲解实例讲解 标本老化（sample ageing）是指随着静脉标本采集后时间的增加，测定结果的变化量。应采集10份标本，其中5份为正常个体，5份为影响各种分析参数的异常个体。标本分别贮存在室温和4，并在0、30min、

16、1h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72h内检测。以百分率或以绝对值-时间作图，观察被检测参数的变化。项目内容（1992年，NCCLS发布NCCLS-H20文件）计数方法每张血涂片应计数200个白细胞，如白细胞减少，应同时增加血片数量血片检查限定量检验人员每天按每张涂片分类计数200个细胞计，不超过1525张考核用血片标本标本1：含分叶核中性粒细胞、杆状核中性粒细胞、正常淋巴细胞、异型淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞标本2：含少量有核红细胞标本3：含少量未成熟白细胞评价方案标本制备、比较分类计数不准确度和不精密度、临床灵敏度、统计学方法（一

17、）、质量保证包括：检验分析前、中、后3个阶段。患者、医师、护士、工勤、检验5方面人员的交接配合。仪器、试剂和报告发送传输的多项硬件条件。技术人员的要求：有合格检验人员 仪器安装条件：有合适的检测环境 仪器的验收、仪器的校准、仪器的比对：有合格的血液分析仪及合格的配套试剂 校准物、质控物和标本的要求：有合格的检测标本及配套试剂 仪器参考值的设置 各种标准操作程序(standard operation procedure,SOP)分析前分析前分析前的质量控制具体措施分析前的质量控制具体措施1.1.人员培训与考核人员培训与考核2.2.静脉抗凝血。静脉抗凝血。EDTA2K 150g/L 10ulEDT

18、A2K 150g/L 10ul抗凝抗凝0.5-1.0ml0.5-1.0ml血，细胞血，细胞2424小时，分类小时，分类6 6小时，形态小时，形态2 2小时内稳定。小时内稳定。3.3.不能放冰箱，最好真空管采血不能放冰箱，最好真空管采血4.4.使用厂家配套试剂使用厂家配套试剂5.5.周围环境对仪器的影响。温度、湿度、电、空气周围环境对仪器的影响。温度、湿度、电、空气污染等污染等6.6.仪器校正。最好的校正液是经仪器校正。最好的校正液是经ICSHICSH推荐参考方法推荐参考方法定值的新鲜人血液。如定值的新鲜人血液。如SYSMEX SCS-1000.7.7.质控液是一种用于常规工作中与被测标本一起测

19、质控液是一种用于常规工作中与被测标本一起测定，以核查分析过程（或仪器）准确性的物质，一定，以核查分析过程（或仪器）准确性的物质，一般是人工微粒制品或醛化的人血细胞。般是人工微粒制品或醛化的人血细胞。分析前分析前分析前分析前分析前分析前分析前分析前分析前分析前 仪器使用 室内质控 标本检测 仪器保养分析中分析中分析中质控具体措施分析中质控具体措施1.1.仪器开机，本底测试通过仪器开机，本底测试通过2.2.质控物通过质控物通过:Westgard多质控规则判断多质控规则判断3.3.标本检测：标本检测：X-BX-B分析（分析（MCV、MCH、MCHC)4.4.参加室间质控参加室间质控:如每年的卫生部使

20、间质评活动如每年的卫生部使间质评活动5.5.人工对可疑标本进行复检。学会分析直方图、人工对可疑标本进行复检。学会分析直方图、散点图以及数据与临床、影响因素等。散点图以及数据与临床、影响因素等。6.6.复核标准参见复核标准参见CoulterCoulter或或XE-2100XE-2100协作小组协作小组2323条标准条标准 分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中分析中 2005年，国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准P113-114 2008年我国制定23条显微镜复检规则分析中分析中涂片镜检阳性：发现异常形态细胞涂片镜检阳性：发现异常形态细胞涂片

21、镜检阳性：发现异常类型细胞涂片镜检阳性：发现异常类型细胞红细胞形态异常：红细胞形态异常：2/中等量或更多；或发中等量或更多；或发现疟原虫现疟原虫原始细胞：原始细胞：1个个血小板形态异常（巨大血小板）：血小板形态异常（巨大血小板）：2/中等中等量或更多量或更多晚幼粒细胞：晚幼粒细胞：2个个血小板凝块：偶见或时而可见血小板凝块：偶见或时而可见中幼粒中幼粒/早幼粒细胞：早幼粒细胞：1个个Dhle 小体：小体：2/中等量或更多中等量或更多非典型淋巴细胞：非典型淋巴细胞：5个个中毒颗粒：中毒颗粒：2/中等量或更多中等量或更多有核红细胞：有核红细胞：1个个空泡：空泡：2/中等量或更多中等量或更多浆细胞：浆

22、细胞：1个个分析中分析中(1)超过检测线性：超过检测线性：WBC440109/L、RBC8.01012/L、Hb250g/L、PLT1000109/L、Ret23%或或Ret#0.72109/L (2)WBC、RBC、Hb、PLT：无结果或结果不全：无结果或结果不全 (3)WBC：3.0109/L或或30.0109/L (4)PLT：80109/L或或1000109/L，或血小板直方图异常或与以往相差太大，手工记数，或血小板直方图异常或与以往相差太大，手工记数 (5)Hb：70g/L或或180g/L (6)MCV：75fl或或105fl（成人）（成人）(7)MCHC：380g/L(8)MCHC

23、：300g/L,且且MCV80fl(9)RDW：首次结果：首次结果22%(10)DC：无结果或结果不全：无结果或结果不全(11)Neut#：1.0109/L或或20.0109/L (12)Lym#：5.0109/L(13)Monp#：1.5109/L(14)Eos#：2.0109/L(15)Baso#：0.5109/L(16)IP Message：白细胞异常散点图：白细胞异常散点图(17)IP Message：未成熟粒细胞：未成熟粒细胞 (18 IP Message：核左移：核左移(19)IP Message：异形淋巴细胞？异常淋巴细胞或原始细胞：异形淋巴细胞？异常淋巴细胞或原始细胞(20)I

24、P Message：原始细胞：原始细胞(21)IP Message：有核红细胞：有核红细胞 (22)CBC+DC：新生儿标本：新生儿标本(23)CBC+DC：血液病标本：血液病标本分析中分析中分析中分析中分析中分析中 实验室内结果分析 临床情况作相关分析 定期临床对话 记录和报告难以解释的检测结果 分析后分析后全血质控物：e-Check或5C.具体参照CNAS-GL19医学实验室质量和能力认可准则在临床血液学检验领域的指南进行 中国合格评定国家认可委员会（英文缩写：CNAS）。实例讲解实例讲解 质控品的选择：推荐使用配套质控品，使用非配套质控品时需评价其质量和适用性。质控品的浓度水平：至少使用

25、2 个浓度水平（正常和异常水平）的质控品。质控项目：申报认可的所有检测项目均需开展室内质量控制。实例讲解实例讲解 质控频度：需通过检测质控物，检查血常规检验的精密性，宜根据实验室检验标本的数量定期实施，质控最少次数，仪器每次开始运转时做1次正常和异常水平的质控，结果在2s以内，才可检测标本；超过3s为失控，不可检测标本。质控方法：宜使用Levey-Jennings 质控图。实例讲解实例讲解 检测质控品的时间范围 质控图的中心线和控制界线 仪器/方法名称 质控品的名称、浓度水平、批号和有效期 试剂名称和批号 每个数据点的日期 操作人员的记录实例讲解实例讲解 血常规检查的质控物测定宜在每天的不同时

26、段，一般上午测4次，下午测4次，至少检测3 天，至少使用10 个检测数据，求其均值为质控图的中心线靶值。标准差的确定：通过一段时间的反复检测确定室内质量控制的标准差，标准差的计算方法参见GB/T20468-2006。一般用上月的实测SD为本月SD.首月用连续20天实测的数据算出SD値。实例讲解实例讲解 失控报告：包括失控情况的描述、核查方法、原因分析、纠正措施及纠正效果的评价等内容。月质控分析报告：质控数据的管理原则上每月统计1 次，至少保存二年 记录的检查：血液学检验部门的负责人（或由负责人指定的授权人）宜至少每月对室内质量控制的记录进行检查并签字。实例讲解实例讲解 分析各类误差的性质分析各

27、类误差的性质 随机误差随机误差 固有的，无法消除。固有的，无法消除。系统误差系统误差 影响实验结果准确性频率最高的误差。影响实验结果准确性频率最高的误差。抗凝剂、比率、试剂、仪器、操作者等。抗凝剂、比率、试剂、仪器、操作者等。过失误差过失误差 系统误差的特殊形式，主要是人为因素。系统误差的特殊形式，主要是人为因素。实例讲解实例讲解原因：更换试剂，标本质量，样本混匀，微孔半堵孔原因：更换试剂，标本质量，样本混匀，微孔半堵孔实例讲解实例讲解连续连续5个点为失控，系统误差。个点为失控，系统误差。实例讲解实例讲解 浮动均值法浮动均值法 Dr.Bull分析分析1767家医院的大量血液分析结果得家医院的大

28、量血液分析结果得出出 原理原理 临床每临床每20份随机样本的份随机样本的MCV、MCH、MCHC三个参三个参数的浮动均值，是围绕某一个靶值上下波动，波动数的浮动均值，是围绕某一个靶值上下波动，波动范围不超过范围不超过3%的概率在的概率在95%以上。以上。当质量点连续超出当质量点连续超出3%的范围时，即提示仪器出现系的范围时，即提示仪器出现系统误差。统误差。X-B用途：用途：检测标本时可以实时监视质量检测标本时可以实时监视质量实例讲解实例讲解 MCV 89.9fL MCH 30.5pg MCHC 339g/L 浮动允许范围浮动允许范围 3%实验室自建实验室自建X-B质控方案：质控方案：每天随机取

29、每天随机取20个病人的个病人的MCV、MCH、MCHC，连续，连续20天获天获得得400个结果计算均值即为靶值，然后取均值的个结果计算均值即为靶值，然后取均值的3%为为SD建建立立X-B质控图。质控图。分析及意义：若该日的MCHC的在2SD之外为失控。MCHC可作为仪器失控的评定指标，MCHC一次超出2SD不必做失控处理。只有连速3次超过2SD才做失控处理。MCV、MCH失控不能草率地定义为仪器故障，如果冲洗小孔问题解决，说明是由于小孔堵塞引起。实例讲解实例讲解 何谓医学检验学、临床基础检验学、细胞计数、全血、何谓医学检验学、临床基础检验学、细胞计数、全血、血浆、血清、抗凝、抗凝剂、网织红细胞

30、、红细胞比血浆、血清、抗凝、抗凝剂、网织红细胞、红细胞比容、点彩红细胞、豪周氏小体、卡波氏环、血小板、容、点彩红细胞、豪周氏小体、卡波氏环、血小板、白细胞分类计数、白细胞分类计数、Dohle body、auer body、核左、核左移、核右移、移、核右移、Coulter原理、中毒颗粒、血沉、异型淋原理、中毒颗粒、血沉、异型淋巴细胞、直方图原理、巴细胞、直方图原理、MCV、MCHC、MCH、红细胞、红细胞体积分布宽度、体积分布宽度、RET、DHSS概念？概念？毛细血管、静脉采血的注意事项？毛细血管、静脉采血的注意事项？改良计数板的结构及应用、计数的注意事项、计数误差的分析？改良计数板的结构及应用

31、、计数的注意事项、计数误差的分析？常用抗凝剂的应用？常用抗凝剂的应用？血涂片制备的要求及方法？血涂片制备的要求及方法？简述瑞氏染色的原理？简述瑞氏染色的原理？氰化高铁血红蛋白法的原理及评价？氰化高铁血红蛋白法的原理及评价？三种红细胞平均值的含义和计算公式？三种红细胞平均值的含义和计算公式？简述魏氏法测定血沉的影响因素？简述魏氏法测定血沉的影响因素？外周血白细胞正常形态特征和异常形态特征以及红细胞异常形态？外周血白细胞正常形态特征和异常形态特征以及红细胞异常形态？试述血液分析仪库尔特检测原理？试述血液分析仪库尔特检测原理？试述试述VCS分析技术分析技术检测原理检测原理？流式细胞流式细胞-电阻抗电阻抗-射频射频-核酸染色法的检测原理核酸染色法的检测原理？MAPSS法概念，其原理如何？法概念，其原理如何？试述平均血小板体积的应用？试述平均血小板体积的应用？试述试述RET分析原理分析原理贫血的贫血的MCV/RDW分类分类?