第九章维生素类药物的分析名师编辑课件-资料.ppt

1、第九章第九章 维生素类药物的分析维生素类药物的分析概概 述述一、定义一、定义 维生素维生素是维持人体正常代谢功能所是维持人体正常代谢功能所必需的微量生物活性物质，主要用于必需的微量生物活性物质，主要用于机体的能量转移和代谢调节，体内不机体的能量转移和代谢调节，体内不能自行合成，必须从食物中摄取。能自行合成，必须从食物中摄取。VitA VitA、D D2 2、D D3 3、E E、K K1 1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 VitB VitB族族 (B(B1 1、B B2 2、B B6 6、B B1212)VitC VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺、叶酸、烟酸、烟酰胺VitMVitMVitPPVi

2、tPP二、分类二、分类 三、分析方法三、分析方法 本类药物的分析方法很多，有生本类药物的分析方法很多，有生物法、微生物法、化学法和物理化学物法、微生物法、化学法和物理化学法，多依据其生物特性及理化性质进法，多依据其生物特性及理化性质进行，但目前常用的分析方法是行，但目前常用的分析方法是化学法化学法或或物理化学法物理化学法。第一节第一节 维生素维生素A A（Vitamin AVitamin A）维生素维生素A A包括有维生素包括有维生素A1A1（视黄醇）、去（视黄醇）、去氢维生素氢维生素A A（维生素（维生素A2 A2）和去水维生素）和去水维生素A A（维生素维生素A3A3）等，其中）等，其中维

3、生素维生素A1A1活性最高活性最高，维，维生素生素A2A2的生物活性是维生素的生物活性是维生素A1A1的的30-40%30-40%，维生素维生素A3A3的生物活性是维生素的生物活性是维生素A1A1的的0.4%0.4%，故通常所说的维生素故通常所说的维生素A A系指维生素系指维生素A1A1。CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3-H 维生素维生素A A醇醇-COCH3 维生素维生素A A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 维生素维生素A A棕榈酸酯棕榈酸酯R:一、结构和性质一、结构和性质1 1、为一个具有为一个具有共轭多烯侧链共轭多烯侧链的的环己烯环己烯v （1 1）具有）具有UVUV吸收吸收v

4、（2 2）存在多种立体异构化合物）存在多种立体异构化合物v （3 3）易发生脱氢、脱水、聚合反应）易发生脱氢、脱水、聚合反应酸酸醛醛环氧化物环氧化物、氧化剂、氧化剂紫外线、紫外线、VitAVitAVitAOO2v 或有金属离子存在时更易氧化或有金属离子存在时更易氧化2 2、不稳定性、不稳定性3 3、与三氯化锑发生呈色反应、与三氯化锑发生呈色反应紫紫红红蓝蓝色色3SbClVitACHCl34 4、溶解性、溶解性不溶于水不溶于水易溶于有机溶剂和植物油等易溶于有机溶剂和植物油等1 1、三氯化锑反应、三氯化锑反应紫紫红红蓝蓝色色 3SbClVitACHCl3二、鉴别试验二、鉴别试验 维生素维生素A A

5、在在饱和无水三氯化锑饱和无水三氯化锑的无的无醇氯仿溶液中呈现不稳定的蓝色，再变醇氯仿溶液中呈现不稳定的蓝色，再变为紫红色。为紫红色。反应条件：反应条件：要求要求无水无水，如存在水可能产生氯化，如存在水可能产生氯化氧锑（氧锑（SbSbOOClCl ）。）。配制所用的氯仿不能含醇（应用配制所用的氯仿不能含醇（应用无无醇醇氯仿）和光气（氯仿）和光气（COCOClCl2 2）。）。三氯化锑有腐蚀性。三氯化锑有腐蚀性。2 2、紫外吸收光谱、紫外吸收光谱 维生素维生素A A分子中含有分子中含有5 5个共轭双键，个共轭双键，其无水乙醇液在其无水乙醇液在326nm326nm波长处有最大吸波长处有最大吸收。当在

6、盐酸催化下加热，即发生脱水收。当在盐酸催化下加热，即发生脱水反应生成去水维生素反应生成去水维生素A A（A3A3）。去水维）。去水维生素生素A A比维生素比维生素A A多一个共轭双键，其最多一个共轭双键，其最大吸收波长向红移，在大吸收波长向红移，在340340390nm390nm波波长间出现长间出现3 3个最大吸收峰。个最大吸收峰。3 3、薄层色谱、薄层色谱三、含量测定三、含量测定 1 1、紫外分光光度法、紫外分光光度法 利用利用维生素维生素A A醇醇和其和其醋酸酯醋酸酯分子中分子中具多烯共轭体系结构，在具多烯共轭体系结构，在325325328nm328nm处有选择性吸收峰，故可进行含量测处有

7、选择性吸收峰，故可进行含量测定。定。立体异构体立体异构体氧化产物及光照产物氧化产物及光照产物合成中间体合成中间体去氢维生素去氢维生素A A（VitAVitA2 2）去水维生素去水维生素A A（VitAVitA3 3）均对测定均对测定有干扰，有干扰，故采用故采用三三点校正法点校正法 三点校正法三点校正法（1 1）条件：）条件：杂质的吸收在杂质的吸收在310340nm310340nm波长范围波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；度减小；物质对光的吸收具有物质对光的吸收具有加和性加和性。（2 2）波长的选择：）波长的选择：1 1 VitA VitA的的 ma

8、xmax（328nm328nm）2 2 3 3 分别在分别在 1 1的两侧各选一点的两侧各选一点（3 3）测定方法：）测定方法：第一法（直接测定法）第一法（直接测定法）3403163283282523AAA.A 校校正正测定对象测定对象 VitAVitA醋酸酯醋酸酯 第二法（皂化法）第二法（皂化法）：用醇制氢氧化：用醇制氢氧化钾加热皂化（水解），用乙醚提取，挥钾加热皂化（水解），用乙醚提取，挥干溶剂，残渣用异丙醇溶解，测定含量。干溶剂，残渣用异丙醇溶解，测定含量。334310325325260455528156A.A.A.A 校校正正测定测定对象对象 VitAVitA醇醇 第一法第一法 第二法

9、第二法测定对象测定对象 维生素维生素A A醋酸酯醋酸酯 维生素维生素A A醇醇方法方法 直接取样，测定直接取样，测定 皂化提取，测定皂化提取，测定溶剂溶剂 环己烷环己烷 异丙醇异丙醇 max 328 nm 325 nm 328 nm 325 nm测定波长测定波长 5 5个个 4 4个个换算因数换算因数 1900 18301900 1830第一法与第二法的区别第一法与第二法的区别（二）三氯化锑比色法（二）三氯化锑比色法 维生素维生素A A可与三氯化锑的氯仿溶液作可与三氯化锑的氯仿溶液作用，产生蓝色，在用，产生蓝色，在618618620nm620nm波长处有波长处有最大吸收。最大吸收。可用于维生素

10、可用于维生素A A的比色测定。的比色测定。要求在要求在5 51010秒内测定。本法缺点多，已秒内测定。本法缺点多，已被被UVUV法取代。法取代。（三）高效液相色谱法（三）高效液相色谱法NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+氨基嘧啶环氨基嘧啶环CHCH2 2噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)HClCl-维生素维生素B B1 1（盐酸硫胺）（盐酸硫胺）第二节第二节 维生素维生素B B1 1的分析的分析（1 1）溶解性）溶解性易溶于水易溶于水水溶液呈酸性水溶液呈酸性（2 2）UVUV共轭双键共轭双键max=246nm（一）结构与性质（一）结构与性质嘧啶环嘧啶环 伯氨伯氨噻唑环噻唑环 季铵季铵1

11、 1、可与酸成盐、可与酸成盐2 2、与生物碱、与生物碱3 3、含量测定、含量测定 非水碱量法非水碱量法 蓝色荧光蓝色荧光硫色素硫色素正丁醇正丁醇 OOH（3 3）硫色素反应硫色素反应（4 4）碱性碱性荧荧光光消消失失蓝蓝色色荧荧光光硫硫色色素素正正丁丁醇醇）（环环合合 HCNFeKOHNaOHVitB6321O OH（二）鉴别试验（二）鉴别试验1 1、硫色素反应、硫色素反应（VitBVitB1 1的的专属反应）专属反应）VitB1 4242HgIHBHgIK 淡淡黄黄H+2KIIIHIB2 红红色色H+白白色色硅硅钨钨酸酸 H+OH4WO12OHSiOB23222 白白色色扇扇形形苦苦酮酮酸酸

12、 H+2 2、沉淀反应、沉淀反应1 1、非水溶液滴定法、非水溶液滴定法（药典用于测定原料药）（药典用于测定原料药）v 原理：利用噻唑环上季铵和嘧啶环上氨基原理：利用噻唑环上季铵和嘧啶环上氨基的弱碱性，在非水溶液中用高氯酸液滴定。的弱碱性，在非水溶液中用高氯酸液滴定。（三）含量测定（三）含量测定2 2、UVUV分光光度法分光光度法（药典用于测定片剂、注（药典用于测定片剂、注射剂）射剂）（1 1）原理：维生素）原理：维生素B1B1分子中具有共轭双键结分子中具有共轭双键结构，具有紫外吸收特征，可在其最大吸收波构，具有紫外吸收特征，可在其最大吸收波长下测定吸收度，根据取样量计算含量。长下测定吸收度，根

13、据取样量计算含量。（2 2）方法）方法荧荧光光硫硫色色素素异异丁丁醇醇铁铁氰氰化化钾钾 VitBNaOH（三）硫色素荧光法（三）硫色素荧光法（1 1）激发波长激发波长365nm365nm发射波长发射波长435nm435nm+NaOH+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾 +异丁醇异丁醇+NaOH+NaOH+异丁醇异丁醇+NaOH+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾 +异丁醇异丁醇+NaOH+NaOH+异丁醇异丁醇SdAb%WWdSbA%VitB1001 稀稀释释度度稀稀释释度度样样对对对照液对照液供试液供试液灵敏度高，线性范围宽灵敏度高，线性范围宽代谢产物不干扰，适用于体液分析代谢产物不干扰，适用于体液分析65

14、4321OOHHOO C OHHCH2OHL L抗坏血酸抗坏血酸第三节第三节 维生素维生素C C的分析的分析 易溶于水易溶于水 水溶液呈酸性水溶液呈酸性(一）结构与性质一）结构与性质1 1、溶解性、溶解性OOHHOO C OHHCH2OH123456C C3 3OHOH的的pKa=4.17pKa=4.17C C2 2OHOH的的pKa=11.57pKa=11.572 2、酸性、酸性一元酸一元酸二烯醇结构二烯醇结构二酮基结构二酮基结构二烯醇结构二烯醇结构OOHOHCCOOCC3 3、强还原性、强还原性L(+)L(+)抗坏血酸抗坏血酸活性最强活性最强手性手性C C（C C4 4、C C5 5）4

15、4、光学活性、光学活性OOHHOO C OHHCH2OH123456*显显色色糠糠醛醛衍衍生生物物糠糠醛醛酚酚类类脱脱水水 H糖类的显色反应糖类的显色反应蓝蓝色色糠糠醛醛吡吡咯咯脱脱水水 HVitC50结构与糖类相似结构与糖类相似5 5、具糖的性质、具糖的性质nmnmmaxOHmaxH 6 6、UVUV特征特征去去氢氢抗抗坏坏血血酸酸OVitC（二）鉴别试验（二）鉴别试验OHOO C OHHCH2OHHOCH2OHOOOO C OHH O（银镜）（银镜）黑黑 AgAgNOVitC1 1、与、与AgNOAgNO3 3反应反应2 2、与、与2 2，6-6-二氯靛酚反应二氯靛酚反应(ChP2000)

16、(ChP2000)无无色色二二氯氯靛靛酚酚，VitC62氧化型氧化型玫瑰红色玫瑰红色 H还原型还原型蓝色蓝色 OHOH(ChP2000)(ChP2000)红红碱碱性性酒酒石石酸酸铜铜 OCuVitC3 3、与碱性酒石酸铜反应、与碱性酒石酸铜反应USPUSP4 4、与、与KMnOKMnO4 4反应反应 MnKMnOVitC5 5、糖类的反应、糖类的反应6 6、紫外分光光度法、紫外分光光度法（三）杂质检查（略）（三）杂质检查（略）1 1、溶液的澄清度与颜色检查、溶液的澄清度与颜色检查2 2、铁、铜离子的检查：原子吸收分光光度、铁、铜离子的检查：原子吸收分光光度 IIVitCH去氢抗坏血酸去氢抗坏血

17、酸2指示剂指示剂 淀粉指示液淀粉指示液原理原理（1 1）1 1、碘量法、碘量法（四）含量测定（四）含量测定 取本品约取本品约0.2g0.2g，精密称定，加新沸，精密称定，加新沸过的冷水过的冷水100ml100ml与稀醋酸与稀醋酸10ml10ml使溶解，使溶解，加淀粉指示液加淀粉指示液1ml1ml，立即用碘滴定液，立即用碘滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在）滴定，至溶液显蓝色，在3030秒内不褪。每秒内不褪。每1ml1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg8.806mg的的C C6 6H H8 8OO6 6（2 2）方

18、法）方法 酸性环境酸性环境 d.HCl d.HCl 新沸冷新沸冷H H2 2OO减慢减慢VitCVitC被被OO2 2氧化速度氧化速度（3 3）讨论）讨论 立即滴定立即滴定 减免水中减免水中OO2 2的干扰的干扰减少减少OO2 2的干扰的干扰（二）（二）2 2，6-6-二氯靛酚钠滴定法二氯靛酚钠滴定法酚酚亚亚胺胺二二氯氯靛靛酚酚，VitCUSPUSPJPJP原理原理（1 1）空空样样二氯靛酚液二氯靛酚液空白空白样品样品VVHAcHPO 3自身指示终点法自身指示终点法蓝蓝色色玫玫瑰瑰红红 OHH无无色色还还原原（2 2）方法）方法快速滴定快速滴定 2min2min内内 酸性环境酸性环境 HPOH

19、PO3 3-HAc -HAc 稳定稳定VitCVitC防止其他还原性物质干扰防止其他还原性物质干扰剩余比色测定剩余比色测定 AVitC测测二二氯氯靛靛酚酚（定量过量）（定量过量）（测剩余染料）（测剩余染料）（3 3）讨论）讨论（4 4）缺点）缺点 需经常标定需经常标定贮存贮存一周一周不稳定不稳定干扰多干扰多 氧化力较强氧化力较强（三）高效液相色谱法（三）高效液相色谱法 维生素维生素D D是一类抗佝偻病维生素的总称。目是一类抗佝偻病维生素的总称。目前已知的维生素前已知的维生素D D类物质至少有十种之多，它们类物质至少有十种之多，它们都是甾醇的衍生物。中国药典主要收载有维生素都是甾醇的衍生物。中国

20、药典主要收载有维生素D D2 2、D D3 3原料药；维生素原料药；维生素D D2 2胶丸和注射剂；维生素胶丸和注射剂；维生素D D，注射剂。注射剂。USP(24)USP(24)收载有片剂、胶囊、口服液等收载有片剂、胶囊、口服液等剂型。剂型。BP(2000)BP(2000)收载的剂型有片剂、口服液、注收载的剂型有片剂、口服液、注射液以及钙与维生素射液以及钙与维生素D D2 2、D D3 3制成的复方片剂制成的复方片剂。第四节第四节 维生素维生素D D的分析的分析(一一)结构结构 维生素维生素D D2 2为为9 9，10-10-开环麦角甾开环麦角甾5 5，7 7，10(19)10(19)，22-

21、22-四烯四烯3 3-醇，又名醇，又名骨化醇骨化醇或或麦角骨化醇麦角骨化醇。维生素维生素D D3 3为为9 9，10-10-开环胆甾开环胆甾-5-5，7 7，10(19)10(19)三烯三烯-3-3-醇，又名醇，又名胆骨化醇胆骨化醇。两者的化学结构十分相似，其差别仅是维两者的化学结构十分相似，其差别仅是维生素生素D D2 2比维生素比维生素D D3 3在侧链上多一个双键，在侧链上多一个双键，C C2424上上多一个甲基。多一个甲基。一、结构与性质一、结构与性质HHCH2CH3CH3CH3CH3CH3HHOVD2CH3CH3HCH2CH3CH3HHOH222324VD3(二二)性质性质 1 1、

22、性状、性状 维生素维生素D D2 2、D D3 3均为无色针状结晶或白色结晶均为无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。2 2、溶解性、溶解性 维生素维生素D D2 2在氯仿中极易溶解，在乙醇、丙在氯仿中极易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶；维生素酮或乙醚中易溶；维生素D D3 3在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。3 3、不稳定性、不稳定性 维生素维生素D D2 2、D D3 3因含有多个烯键，所以极因含有多个烯键，所以极不稳定，

23、遇光或空气及其他氧化剂均发生氧化而变质，使不稳定，遇光或空气及其他氧化剂均发生氧化而变质，使效价降低，毒性增强。本品对酸也不稳定。效价降低，毒性增强。本品对酸也不稳定。4 4、旋光性、旋光性 维生素维生素D D2 2具有具有6 6个手性碳原子，而维生素个手性碳原子，而维生素D D3 3有有5 5个手性碳原子，所以二者均具有旋光性。个手性碳原子，所以二者均具有旋光性。5 5、显色反应、显色反应 本品的氯仿溶液，加醋酐与硫酸，初本品的氯仿溶液，加醋酐与硫酸，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后变为绿色。显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后变为绿色。本反应为甾类化合物的共有反应。本反应为甾类化合物

24、的共有反应。6 6紫外吸收特性紫外吸收特性 取本取本品品，加无水乙醇溶解并定量，加无水乙醇溶解并定量稀稀释释制成每制成每10ml10ml中中约约含含10ug10ug的溶液。照分光光度法，的溶液。照分光光度法，在在265nm265nm的波的波长处测长处测定吸收度，定吸收度，维维生素生素D D2 2的吸收系数的吸收系数为为460-490460-490；维维生素生素D D3 3的吸收系数的吸收系数为为465-495465-495。(一一)显显色反色反应应 1 1、与醋与醋酐酐浓浓硫酸反硫酸反应应 取取维维生素生素D2D2或或D3D3约约0.5mg，加加氯氯仿仿5m15m1溶解后，加醋溶解后，加醋酐酐

25、0.3ml与硫酸与硫酸0.1ml，振，振摇摇，维维生生素素D2D2初初显显黄色，黄色，渐变红渐变红色，迅即色，迅即变为变为紫色，最后成紫色，最后成绿绿色。色。维维生素生素D3D3初初显显黄色，黄色，渐变红渐变红色，迅即色，迅即变为变为紫色、紫色、蓝绿蓝绿色，色，最后最后变为绿变为绿色。色。2 2、与三与三氯氯化化锑锑反反应应 取本取本品品适量适量(约约10001000单单位位)，加，加1 1，2-2-二二氯氯乙乙烷烷1m11m1溶解，加三溶解，加三氯氯化化锑试锑试液液4ml4ml，溶液即，溶液即显显橙橙红红色，逐色，逐渐变为渐变为粉粉红红色。色。3 3、其它其它显显色反色反应应 维维生素生素D

26、 D与三与三氯氯化化铁铁反反应应呈橙黄色，呈橙黄色，与二与二氯氯丙醇和乙丙醇和乙酰氯试剂酰氯试剂反反应显绿应显绿色，均可用于鉴别，但色，均可用于鉴别，但专属性不强。专属性不强。二、鉴别试验二、鉴别试验(二二)比旋度鉴别比旋度鉴别 取维生素取维生素D2D2，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每成每1m11m1中含中含40mg40mg的溶液，依法测定，比旋度为的溶液，依法测定，比旋度为+102.5+102.5。至至+107.5+107.5。；维生素；维生素D3D3加无水乙醇溶解并定量稀释制成每加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml1ml中含中含5mg5mg的

27、溶液，依法测定，比旋度为十的溶液，依法测定，比旋度为十105105。至至+112+112。(二二者均应于容器开启后者均应于容器开启后30min30min内取样，并在溶液配制后内取样，并在溶液配制后30min30min内测定内测定)。(三三)其他鉴别方法其他鉴别方法 维生素维生素D2D2、D3D3可用薄层色谱法、可用薄层色谱法、HPLCHPLC法和制备衍生物测法和制备衍生物测熔点进行鉴别。此外，亦可通过其紫外、红外吸收光谱的熔点进行鉴别。此外，亦可通过其紫外、红外吸收光谱的特征加以鉴别。特征加以鉴别。(四四)维生素维生素D D2 2、D D3 3的区别反应的区别反应 取维生素取维生素D10mgD

28、10mg，溶于，溶于9696乙醇乙醇10ml10ml中。取此液中。取此液0.1m10.1m1，加乙醇，加乙醇1ml1ml和和8585硫酸硫酸5ml5ml。维生素。维生素D D2 2显显红色红色，在在570nm570nm波长处有最大吸收；维生素波长处有最大吸收；维生素D D3 3显显黄色黄色，在，在495nm495nm波长处有最大吸收。波长处有最大吸收。此反应也用于此反应也用于D D2 2和和D D3 3的含量测定。的含量测定。(一一)麦角甾醇的检查麦角甾醇的检查(二二)前维生素前维生素D D的光照产物的光照产物三、杂质检查（略）三、杂质检查（略）(一一)维生素维生素D D测定法测定法（二）讨论

29、（二）讨论四、含量测定四、含量测定（略）（略）维生素维生素D D的含量测定方法各国药典各异。的含量测定方法各国药典各异。USP(24)USP(24)关于维生素关于维生素D D的测定方法有化学法、色谱法和微生物的测定方法有化学法、色谱法和微生物法；法；BP(2000)BP(2000)有化学法、光谱法和色谱法；而中国有化学法、光谱法和色谱法；而中国药典采用药典采用正相高效液相色谱法正相高效液相色谱法测定。测定。维生素维生素E E（消旋（消旋-生育酚醋酸酯）生育酚醋酸酯）苯并二氢吡喃醇苯并二氢吡喃醇OHO第五节第五节 维生素维生素E E的分析的分析OR1HOR2CH3名名 称称R R1 1R R2

30、2相对活性相对活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚CHCH3 3CHCH3 3H HH HCHCH3 3H HCHCH3 3H H1.01.00.50.50.20.20.10.1*生物效价生物效价 右旋体右旋体 ：消旋体消旋体 =1.4=1.4：1010（天然品）（天然品）（合成品）（合成品）CH3COOCH3CH3CH3CH3CH3CH3H3CH3COdldl生育酚醋酸酯生育酚醋酸酯（一）结构与性质（一）结构与性质苯环苯环 +二氢吡喃环二氢吡喃环 +饱和烃链饱和烃链1 1、易溶于有机溶剂，不溶于水、易溶于有机溶剂，不溶于水2 2、UVUV3 3、酯键、酯键 易水解易水

31、解 OorOHHVitE醌醌型型化化合合物物生生育育酚酚1 1、硝酸反应、硝酸反应 OHNO3VitE生生育育红红生生育育酚酚7515橙红色橙红色（二）鉴别（二）鉴别2 2、三氯化铁联吡啶反应、三氯化铁联吡啶反应红红色色生生育育醌醌对对生生育育酚酚联联吡吡啶啶 2FeKOHFeVitE3O3 3、紫外光谱法、紫外光谱法4 4、薄层色谱法、薄层色谱法5 5、其他方法、其他方法（三）杂质检查（三）杂质检查1 1、酸度、酸度2 2、生育酚生育酚 硫酸铈滴定液（硫酸铈滴定液（0.01mol/L0.01mol/L）二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫）生生育育醌醌对对生生育育酚酚 3422CeCe（1 1

32、）原理：原理：利用游离生育酚的利用游离生育酚的还原性还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈将硫酸铈还原成硫酸亚铈（2 2）试剂）试剂（四）含量测定（四）含量测定1 1、GCGC法法（1 1）选择性好选择性好灵敏度高灵敏度高速度快速度快分离效能好分离效能好挥发性低、不稳定、挥发性低、不稳定、极性强极性强衍生化易衍生化易受样品蒸气压限制受样品蒸气压限制本本 章章 小小 结结1 1、VitAVitA：掌握：掌握三氯化锑鉴别反应的原理、三氯化锑鉴别反应的原理、UVUV法含量测定的原理及两种测定方法的法含量测定的原理及两种测定方法的区别区别。3 3、VitB1VitB1：掌握硫色素反应（鉴别及含量：掌握硫色素反应（鉴别及含量测定）的原理。测定）的原理。3 3、VitCVitC：掌握其结构特征（还原性）、掌握其结构特征（还原性）、碘量法含量测定的原理及操作注意事项。碘量法含量测定的原理及操作注意事项。4、VitE：掌握硝酸反应的原理。：掌握硝酸反应的原理。