细菌培养基课件.ppt

1、a1=细菌培养基细菌培养基2011562 赵健乔2011563 苟 强a2 一 基本理论 二 培养基的分类 三 培养基的主要成分及其作用 四 培养基配制原则 五 培养基使用注意事项 六 常用培养基及制备方法a3一 基本理论 培养基的定义：培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需要的各种营养物质，由人工配制而成的营养基质，它专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存用。培养基的用途：主要用于繁殖及分离纯化细菌、传代和保存菌种、鉴别细菌种属、研究细菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制剂等。a4二 培养基的分类按用途分类按用途分类按物理性状分类按物理性状分类按成分分类按成分分类a51.按用

2、途分类基础培养基营养培养基增菌培养基选择性培养基鉴别培养基显色培养基a6选择性培养基加入青霉素等抗生素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基：分离杂交瘤细胞a72.按物理性状分类液体培养基流体培养基半固体培养基固体培养基a8 液体培养基液体培养基：不含凝固剂，利于菌体的快速繁殖、代谢和积累产物 流体培养基流体培养基：含0.05-0.07%琼脂粉，可降低空气中氧进入培养基的速度，利于一般厌氧菌的生长繁殖 半固体培养基半固体培养基：含0.2-0

3、.8%琼脂粉，多用于细菌的动力观察、菌种传代保存及贮运细菌标本材料 固体培养基固体培养基：含1.5-2%琼脂，用于细菌的分离、鉴定、菌种保存及细菌疫苗制备等多方面a93.按成分分类合成培养基天然培养基半合成培养基a10三 培养基的主要成分及其作用 营养营养 物质物质水分水分 凝固凝固 物质物质 抑制剂抑制剂 指示剂指示剂主要成分：主要成分：a11主要营养物质 蛋白胨 牛肉浸液 糖醇类 血液 鸡蛋和动物血清 生长因子 无机盐类a12四四 培养基配制原则培养基配制原则2.营养要协调：注意营养要协调：注意各种营养物质的浓各种营养物质的浓度和比例。度和比例。3.pH要适宜：各种微生物适要适宜：各种微生

4、物适宜生长的宜生长的pH范围不同。范围不同。1.目的要明确：根目的要明确：根据微生物的种类、据微生物的种类、培养目的等确定配培养目的等确定配制培养基的种类，制培养基的种类，因为不同的微生物因为不同的微生物对培养物质的需求对培养物质的需求不同。不同。a13五 培养基使用注意事项 配制培养基所用的化学药品，均应化学纯净。配制培养基时各种成分应准确称量。培养基的酸碱度，必须准确测定，特别对含有指示剂的培养基；测定酸碱度须于冷却后测定为准。制备的培养基必须保持澄清，以便细菌生长后，容易观察。液体培养基沉淀法和滤纸法；固体培养基可用脱脂棉花滤清。a14 培养基必须达到完全无菌的目的。要注意有些培养基高压

5、灭菌的磅数不可过高，时间不可过长，否则能使培养基变质。如乳糖高压灭菌磅数过高，可能分解为葡萄糖。制备的培养基不宜保存过久，以少量勤做为宜。平板及少量分装的试管培养基均宜保存于4冰箱内。培养基所用的一切玻璃器皿，必须是中性硬料，否则能影响培养基酸碱度。a15 配制培养基的容器，不宜用铜或铁。含铜大于0.3mol/L时，细菌不易生长；含铁大于0.14mol/L妨碍细菌产生毒素。培养基分装时不宜超过容器的2/3，以免灭菌时溢出。a16六 常用培养基及制备方法牛肉膏牛肉膏 0.3克克蛋白胨蛋白胨 1.0克克NaCl 0.5克克水水 100毫升毫升pH 7.07.2在烧杯中加水，称取在烧杯中加水，称取牛

6、肉膏、蛋白胨和牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，加热溶化后，调节调节pH值至值至7.07.2。分装，加棉塞，高压分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。常用蒸汽灭菌即成。常用于培养细菌。于培养细菌。ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.1.营养肉汤培养基营养肉汤培养基 a17六 常用培养基及制备方法牛肉膏牛肉膏 0.3克克蛋白胨蛋白胨 1.0克克NaCl 0.5克克水水 100毫升毫升pH 7.07.2在营养肉汤培养基中增在营养肉汤培养基中增加加20克琼脂即成。常克琼

7、脂即成。常用于培养细菌。用于培养细菌。ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.2.营养琼脂培养基营养琼脂培养基a18六 常用培养基及制备方法蛋白胨蛋白胨20g琼脂琼脂25-30gNaCl5g乳糖乳糖(CP)10g胆盐胆盐(3号胆盐或牛胆酸号胆盐或牛胆酸钠钠)5g1%中性红水溶液中性红水溶液5ml蒸馏水蒸馏水1 000ml除去中性红水溶液外，其余各成分混合于锅内加热溶解。调pH值到7.07.2，煮沸，以脱脂棉过滤。加入1中性红水溶液，摇匀，灭菌15分钟，待冷却至 50

8、时，倾倒平皿。待平皿内培养基凝固后，置温箱内烤干表面水分即可用。保存于冰箱内（4）。现有厂家专门配制、出售麦糠凯琼脂干粉剂，用时，加水溶解，灭菌后即成。3.麦糠凯（麦糠凯（Macconkey）琼脂培养基琼脂培养基 a19六 常用培养基及制备方法可溶性淀粉可溶性淀粉 2克克K2HPO4 0.05克克MgSO47H2O 0.05克克KNO3 0.1克克NaCl 0.05克克FeSO4 0.001克克琼脂琼脂 2克克水水 100毫升毫升pH 7.27.4在烧杯中加水在烧杯中加水95毫升，加热至毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉沸腾，取可溶性溶粉2克，克，用用5毫升水调成糊状，倒入毫升水调成糊状，倒入沸水

9、中和匀。再称取其它药沸水中和匀。再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品溶解后，再加入第二种药品）。待全部药品溶解种药品）。待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，后，停止加热，补足失水，调调pH值至值至7.27.4。分装后，。分装后，高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌。本培养基常用于培养放线菌。本培养基常用于培养放线菌。4.高氏一号培养基高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）（淀粉琼脂培养基）a20常用于培养酵母菌。常用于培养酵母菌。六 常用培养基及制备方法马铃薯马铃薯 200克克蔗糖蔗糖 10克克琼脂琼脂 20克克水水 1000毫升毫升自然自然pH称取称取200克马铃薯片，加克马铃薯片，加水水1000毫升，煮沸半小毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足时，用纱布过滤，补足失水。在上述滤汁中加失水。在上述滤汁中加入入10克蔗糖、克蔗糖、20克琼脂，克琼脂，加热使琼脂熔化。分装加热使琼脂熔化。分装后，高压蒸汽灭菌。后，高压蒸汽灭菌。5.马铃薯蔗糖培养基马铃薯蔗糖培养基 a21伊红美蓝培养基（伊红美蓝培养基（E、M、B培养基）培养基）麦芽汁培养基麦芽汁培养基 明胶培养基明胶培养基葡萄糖蛋白胨水培养基葡萄糖蛋白胨水培养基察氏培养基察氏培养基 豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）培养基豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）培养基 培养基培养基其他培养基：其他培养基：a22