1、第7章 细菌感染的检测方法与防治原则细菌学诊断细菌学诊断标本的采集和送检六原则标本的采集和送检六原则避免杂菌污染避免杂菌污染不同期不同标本不同期不同标本用抗生素以前用抗生素以前采集病变明显部位采集病变明显部位运送注意保存运送注意保存标本必须新鲜标本必须新鲜致病菌的检验程序致病菌的检验程序药物敏感试验药物敏感试验直接涂片检查直接涂片检查分离培养分离培养生化试验生化试验血清学试验血清学试验动物试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断分子生物学技术分子生物学技术其他检测技术其他检测技术n(一一)细菌形态与结构检查细菌形态与结构检查n(1)显微镜放大法)显微镜放大法 :普通光镜普通光镜,电子显微镜
2、等电子显微镜等细菌分离培养(I)稀释法细菌分离培养(II)划线分离法细菌分离培养(III)菌落细菌培养法n普通培养n二氧化碳培养n微需氧培养n厌氧培养细菌的生化反应(I)IMViC细菌生化反应(II)脲酶试验、硝酸盐还原、氧化酶试验、触酶试验原理原理血清学诊断血清学诊断 双份血清标本,恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高4倍者方有意义种类种类 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断。(抗原未知抗体)标本标本凝集试验:沉淀试验:补体结合试验:中和试验:肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等梅毒VDRL、RPR试验等抗“O”
3、试验等Q热柯克斯体抗体检测等免疫检测技术(I)基本原理免疫检测技术(II)凝集和沉淀免疫检测技术(III)ELISA免疫检测技术(IV)免疫荧光法分子生物学技术(1)杂交技术分子生物学技术(III)PCR 第二节 细菌感染的特异性预防获得性免疫产生的方式 主动免疫 自然免疫 患病、隐性感染 人工免疫 疫苗、类毒素 被动免疫 自然免疫 胎盘、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球人工免疫:采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体,以增强宿主体的抗病能力生物制品:人工免疫的免疫原、免疫血清、细胞制剂及诊断 制剂的生物性制剂 将疫苗或类毒素接种于人体,使机体产生获得性免疫力的
4、一种防治微生物感染的措施。作用:预防人工主动免疫人工主动免疫artificial active immunity主要生物制品死疫苗活疫苗类毒素亚单位疫苗DNA重组疫苗核酸疫苗治疗性疫苗免疫制剂比较(免疫制剂比较(1)保存期短、必须冷藏接种次数多、剂量大、注射局部和全身反应较重缺点在体内吸收缓慢、能长期刺激机体,增强免疫效果只需接种一次、剂量较小、副反应小、免疫效果优于死菌,易于保存优点在类毒素中加入适量磷酸铝活氢氧化铝等吸附佐剂减毒或无毒力的活病原体制成,接种后在体内有一定生长繁殖能力免疫源性强的病原微生物 人工大量培养 用理化方法灭活制作方法类毒素活菌(疫)苗:死菌(疫)苗:回复突变的可能。
5、免疫制剂比较(免疫制剂比较(2)潜在致癌作用,可能诱导自身免疫性疾病缺乏有效的免疫原新性缺点诱导替液免疫和细胞免疫。无回复突变的可能,去除引起毒副反应的物质,无潜在致癌作用。优点将重组质粒DNA直接注射入宿主化学提取或人工合成,重组疫苗制作方法核酸疫苗:亚单位疫苗:抗毒素人工被动免疫人工被动免疫 artificial passive immunity 注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等免疫制剂,使机体即刻获得特异性免疫,作用及时。作用:治疗,紧急预防主要生物制品丙种球蛋白(麻疹、甲肝、脊髓灰质炎)细胞免疫制剂治疗或紧急预防治疗或紧急预防预防预防主要用途主要用途短,短,23周周长,数年长,数年数月数月免疫维持时间免疫维持时间快,立即快,立即慢,慢,24周周免疫出现时间免疫出现时间抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等抗原抗原免疫物质免疫物质人工被动免疫人工被动免疫人工主动免疫人工主动免疫区别要点区别要点人工主动免疫与人工被动免疫的区别