1、酶的催化功能受多种酶的催化功能受多种条件的影响条件的影响第三章 第二节 第2课时酶的概述酶的概述酶的概念：酶是酶的概念：酶是活细胞活细胞产生的具有产生的具有生物催化作用生物催化作用的的有机物有机物酶的来源酶的来源酶的功能酶的功能酶的本质酶的本质绝大数是蛋白绝大数是蛋白质，少数是质，少数是RNARNA降低反应降低反应的活化能的活化能酶催化作用的特点：酶催化作用的特点：高效性、专一性高效性、专一性3实验中的相关变量实验中的相关变量自变量含义：在实验中人为改变的变量实例：过氧化氢分解的不同条件（催化剂的种类）因变量无关变量以“探究酶催化的高效性”为例：含义：随自变量变化而变化的变量实例：过氧化氢的分
2、解速率含义：除自变量以外影响实验结果的变量实例：底物（过氧化氢）的浓度、反应温度等4实验中应遵循的原则实验中应遵循的原则对照性原则对照性原则：在实验设计中，为排除无关条件的干扰，常常要设立对照实验，以消除或减少实验误差。空白对照：不给对照组任何处理因素。条件对照：给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的实验因素。相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。自身对照：对照和实验都在同一研究对象上进行。5实验中应遵循的原则实验中应遵循的原则单一变量原则单一变量原则：控制实验中自变量唯一，观察其对实验结果的影响。平行重复原则平行重复原则：在同一条件下，进行多次重复实验，避免偶然性，进而得出可靠
3、的实验结果。科学性原则科学性原则：在实验设计时，必须要有充分的科学依据，选材要科学，因变量的检测要科学等。等量性原则等量性原则：实验过程中控制无关变量相同且适宜6探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响 唾液淀粉酶进入胃后还具有催化作用吗？胃蛋白酶进入小肠后还能继续发挥作用吗？不同部位消化液内所含酶种类不一样，其意义是什么？资料资料1 1：不同消化液的pH不一样。唾液的pH为6.27.4，胃液的pH为0.91.5,小肠液的pH为7.6。唾液淀粉酶会随唾液流入胃，胃蛋白酶会随食糜进入小肠。7目的要求：说明PH对酶活性的影响，探究过氧化氢酶的最适PH材料：新鲜的肝匀浆（过氧化氢酶溶液），3%过
4、氧化氢溶液，缓冲液（PH5.0、PH6.0、PH7.0、PH8.0）利用所提供的材料，如何探究PH对酶活性的影响？小组讨论出实验思路。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响8材料用具：新鲜的肝匀浆（过氧化氢酶溶液），3%过氧化氢溶液，缓冲液（PH5.0、PH6.0、PH7.0、PH8.0），清水，滤纸片，水槽，量筒，培养皿，记号笔，反应小室，吸管，镊子，试管架等。过氧化氢酶 2H2O2 2H2O+O2实验原理：氧气怎样收集？探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响9 1.水槽加水至快满为止。2.取大小相同的12片滤纸片放在盛有新鲜肝脏匀浆的培养皿中（肝脏匀浆中含有过氧化氢酶）浸泡1
5、min，然后用镊子夹起滤纸片，贴靠在培养皿壁上，使多余的匀浆流尽。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：10 3.将3片含有酶的滤纸片小心放入反应小室的一侧内壁上，使滤纸片粘在内壁上。注意:放入滤纸片时，滤纸片不要碰到反应小室的瓶口。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：11 4将反应小室稍立起，使贴有滤纸片的一侧在上面，小心加入pH5.0的缓冲液2 mL，然后再加入2 mL 3%的过氧化氢溶液。将小室塞紧。注意:加入溶液时，切勿使溶液接触贴在内壁上的滤纸片。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：12 5将25 mL量筒横放于水槽中使之灌满水，若
6、有气泡，将其轻轻倾斜，小心排出气泡。然后将量筒倒立，使筒口一直处于水中。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：13 6将反应小室小心平放在水槽的水里，然后将量筒移至反应小室口上伸出的玻璃管上方。实验过程中，小组的一个成员要一直扶着量筒，保证量筒的位置不动。注意:此时反应小室贴有滤纸片的内壁应在上面。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：14 7将反应小室小心旋转180，使过氧化氢溶液接触滤纸片，同时开始计时。每隔30s读取量筒中水平面的刻度一次，共进行4次，记录结果。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：15 8该实验完成后，反复冲洗反应小室，再
7、重复上述实验过程，测量在pH6.0、pH7.0、pH8.0下过氧化氢在酶的催化下所释放的气体量。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：16 注意:所有的实验都要保证实验用品不混淆，不应该有上一次反应后的剩余溶液。每次实验后，先用水充分冲洗反应小室，然后用相应缓冲液再冲洗一遍。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：17酶的概述酶的概述18 1.水槽加水至快满为止。2.取大小相同的8片滤纸片放在盛有新鲜肝脏匀浆的培养皿中（肝脏匀浆中含有过氧化氢酶）浸泡1 min，然后用镊子夹起滤纸片，贴靠在培养皿壁上，使多余的匀浆流尽。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响培
8、养皿培养皿+滤纸片滤纸片水槽水槽实验步骤：19 3.将2片含有酶的滤纸片小心放入反应小室的一侧内壁上，使滤纸片粘在内壁上。注意:放入滤纸片时，滤纸片不要碰到反应小室的瓶口。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：防止滤纸片（过氧化氢酶）过早的与底物（过氧化氢）结合20 4将反应小室稍立起，使贴有滤纸片的一侧在上面，小心加入pH5.0的缓冲液2mL，然后再加入2mL3%的H2O2溶液。将小室塞紧。注意:加入溶液时，切勿使溶液接触贴在内壁上的滤纸片。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：防止滤纸片（过氧化氢酶）过早的与底物（H2O2）结合21 5将25 mL量筒横放于
9、水槽中使之灌满水，若有气泡，将其轻轻倾斜，小心排出气泡。然后将量筒倒立，使筒口一直处于水中。6将反应小室小心平放在水槽的水里，然后将量筒移至反应小室口上伸出的玻璃管上方。实验过程中，小组的一个成员要一直扶着量筒，保证量筒的位置不动。注意:此时反应小室贴有滤纸片的内壁应在上面。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：22 7将反应小室小心旋转180，使H2O2溶液接触滤纸片，同时开始计时。每隔30s读取量筒中水平面的刻度一次，共进行4次，记录结果。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响实验步骤：23 8该实验完成后，反复冲洗反应小室，再重复上述实验过程，测量在pH6.0、pH
10、7.0、pH8.0下过氧化氢在酶的催化下所释放的气体量。探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响 注意:所有的实验都要保证实验用品不混淆，不应该有上一次反应后的剩余，每次实验后，先用水充分冲洗反应小室，然后用相应的缓冲液再冲洗一遍。实验步骤：24缓冲液PH5.0PH6.0PH7.0PH8.0 收集的气体体积（ml)30S 60S 90S 120S 探究探究PHPH对酶活性影响的实验记录表对酶活性影响的实验记录表探究探究PHPH对酶活性的影响对酶活性的影响 过氧化氢酶的最适pH在6-8之间,为测定其最适pH,应该怎样做？25实验原理：探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响 注意：不能用
11、本尼迪特试剂检测是淀粉水解产生的还原糖，因为本尼迪特试剂与还原糖的反应需要水浴加热，进而会改变实验的条件（温度），所得实验结果不可靠。（1）淀粉淀粉酶淀粉酶麦芽糖碘液碘液变蓝色无蓝色出现碘液碘液（2）温度影响酶的活性，从而影响淀粉水解，滴加碘液后，根据是否出现蓝色以及蓝色的深浅判断酶的活性。2627水温不超过水温不超过6060加酶洗衣粉加酶洗衣粉探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响28实验目的：探究温度对酶活性的影响特点材料：（1）新配制的质量分数为2%的淀粉酶溶液,质量分数为3%的可溶性淀粉溶液 （2）新鲜的质量分数为20%的肝脏（如猪肝、鸡肝）研磨液，体积分数为3%的过氧化氢溶液
12、从上述两组实验材料中选择合适的实验材料，并讨论出实验思路。探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响29实验原理：淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖等还原性糖；淀粉遇碘液变蓝；本尼迪特试剂可以与还原糖反应，产生红黄色沉淀。即可以利用碘液检测淀粉是否水解，或者利用本尼迪特试剂鉴定是否有还原糖产生（即淀粉是否发生水解）。但由于本尼迪特试剂检测还原糖需要水浴加热，从而影响实验结果，因此选用碘-碘化钾检测淀粉是否发生水解。探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响 1.取3只试管，编号A、B、C，加入2mL淀粉溶液；另取3支试管，编号为A、B、C，分别加入1 mL新鲜的淀粉酶溶液。取材，分组，编号加
13、相同：探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响实验步骤：2.将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入冰块、温水（约37）和沸水保温适宜时间。AA B B C C可溶性淀粉2ml新鲜淀粉溶液2mlABCABC冰块（0）温水（37）沸水（100）保温适宜时间32ABCABC冰块（0）温水（37）沸水（100）保温适宜时间 3.分别将淀粉酶溶液注入相应温度下的淀粉溶液中，摇匀保温适宜时间.加不同：不同处理（设置自变量）对照处理：相互对照 4.在3支试管中各滴入1-2滴碘-碘化钾溶液，摇匀。观察并记录实验现象。观察、检测或记录（检测因变量）探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响33试管
14、试管1 12 23 3淀粉溶液淀粉溶液2mL2mL2mL2mL2mL2mL温度温度3737沸水沸水冰块冰块淀粉酶溶液淀粉酶溶液1mL1mL1mL1mL1mL1mL碘液碘液滴滴滴滴滴滴结果现象结果现象不变蓝不变蓝蓝色蓝色蓝色蓝色探究温度对酶活性影响的实验记录表探究温度对酶活性影响的实验记录表探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响34温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响温度对酶促反应的影响有两个方面：温度对酶促反应的影响有两个方面：温度升高,反应物分子具有的能量增加，反应速度加快（如图中a)。a温度温度反反应应速速率率温度温度残残余余酶酶活活性性b 酶是蛋白质，酶分子本身会随温度的升高而发生
15、空间结构改变，导致热变性。温度升得越高，酶变性的速率越快，升到一定温度，酶将完全失去活性(如图中b)OO35温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响温度对酶促反应的影响有两个方面：温度对酶促反应的影响有两个方面：a温度温度反反应应速速率率温度温度残残余余酶酶活活性性bOO36温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响 曲线a与曲线b所表示的作用叠加在一起，就可以得到曲线c所表示的作用，表现出酶所催化的反应存在一个最适温度。在最适温度之前，酶的活性随温度的升高而升高；超过最适温度，酶的活性反而随着温度的升高而降低，直至失活。温度对酶促反应的影响有两个方面：温度对酶促反应的影响有两个方面：37 低温可以低温
16、可以抑制酶活性抑制酶活性，但不破坏酶，但不破坏酶的分子结构，当温度升高时，其活性可的分子结构，当温度升高时，其活性可以恢复（以恢复（可逆的）可逆的）高温会高温会破坏酶的空间结构破坏酶的空间结构，进而抑，进而抑制酶活性制酶活性,直至使酶失活（直至使酶失活（不可逆）不可逆）温度温度最适最适温度温度非对称非对称酶酶促促速速率率温度对酶促反应的影响温度对酶促反应的影响温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响38对酶活性的影响因素对酶活性的影响因素底物浓度对酶促反应的影响底物浓度对酶促反应的影响酶酶促促速速率率底物浓度底物浓度SS1.底物浓度较低时：反应速率与底物浓度成正相关；2.底物浓度高达一定程度时：反
17、应速率不再增加，达最大速度，即底物已饱和。酶量一定的情况下酶量一定的情况下其他条件适宜其他条件适宜39对酶活性的影响因素对酶活性的影响因素酶浓度对酶促反应的影响酶浓度对酶促反应的影响酶浓度酶浓度EE酶酶促促速速率率底物充足的情况下底物充足的情况下 在有足够底物而又不受其他因素影响的情况下，酶促反应速率与酶浓度成正比。其他条件适宜其他条件适宜 1.取3只试管，编号A、B、C，加入2mL淀粉溶液；另取3支试管，编号为A、B、C，分别加入1 mL新鲜的淀粉酶溶液。取材，分组，编号加相同：探究温度对酶活性的影响探究温度对酶活性的影响实验步骤：2.将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入冰块、温水（约37）和沸水保温适宜时间。
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